乳腺癌细胞凋亡与HIF-1α的相关性研究

目的：探讨乳腺癌组织中HIF-1α、P53蛋白的表达及与凋亡的关系。方法：采用免疫组化S-P法检测58例乳腺癌中HIF-1α、P53、MDM2蛋白的表达,用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法（TU-NEI法）检测凋亡。结果：乳腺癌组织中HIF-1α、P53、MDM2蛋白阳性率分别为46.6%,61.1%和27.6%。癌组织HIF-1α阳性表达组的凋亡指数（AI）显著高于HIF-la阴性组（P〈0.01）;P53阴性组AI显著高于P53阳性组（P〈0.05）。HIF-la阳性P53阴性表达组AI显著高于HIF-1α阴性P53阳性组（P〈0.01）,HIF-1α与P53表达呈显著负相关（r=-0.33,P〈0.01）。MDM2阳性表达组AI显著低于其阴性组（P〈0.01）。MDM2阳性HIF-1α阴性组AI显著低于MDM2阴性HIF-1α阳性组（P〈0.05）,MDM2与HIF-1α负相关（r=-0.26,P〈0.05）。结论：HIF-1α可诱导乳腺癌肿瘤细胞凋亡,其机制可能与P53和MDM2有关,作为肿瘤早期新标志。     

低氧状态下血管内皮细胞HIF-1α表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨低氧对人脐静脉内皮细胞ECV304凋亡及低氧诱导因子-1α表达的影响及意义。方法人脐静脉内皮ECV304细胞分为低氧处理组和对照组,处理后MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡;应用荧光实时定量PCR(QPCR)和Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和HIF-1α的mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,低氧处理能明显抑制细胞的增殖,且抑制作用随着低氧处理时间的延长而增强(P<0.05);低氧处理细胞后凋亡率明显增加,且呈时间依赖性(P<0.05);QPCR和Western blot结果显示,低氧处理组细胞Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05),Bcl-2则明显下降(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低,且呈时间依赖性(P<0.05)。低氧呈时间依赖性上调HIF-1α的mRNA和蛋白水平(P<0.05)。结论低氧能促进人脐静脉内皮细胞ECV304细胞凋亡,其机制可能与HIF-1α表达上调及Bcl-2的表达降低、Caspase-3和Bax的表达升高有关。     

大鼠脑出血蛋白激酶C与细胞凋亡关系的实验研究

目的：研究大鼠脑出血后血肿周围蛋白激酶C（Protein kinase C,PKC）及神经细胞凋亡的表达及其多黏菌素B（polymyxin B PMB）对上述表达的影响。方法：将100只SD大鼠随机分为四组：假手术组、脑出血组、小剂量多黏菌素B干预组（0.4mg/kg.d）、大剂量多黏菌素B干预组（0.8mg/kg.d）,立体定位仪定位注射自体不凝血制造大鼠脑出血模型,分别为术后6h、12h、24h、72h、120h处死,免疫组织化学法检测血肿周围区PKC、TUNEL阳性细胞（凋亡细胞）数的表达、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）含量、NO（一氧化氮）含量以及大小剂量PMB对其干预后的影响。结果：假手术组PKC少量表达,偶见凋亡细胞;脑出血组自6h起PKC、凋亡细胞及TNF-α、NO含量大量增加,72h达高峰,PKC在120h基本降至假手术组,但凋亡细胞TNF-α、NO含量仍处于较高水平,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;大小剂量多黏菌素B干预组均有明显抑制PKC、凋亡细胞、TNF-α含量的表达,有统计学意义（P〈0.01）;但PMB剂量的大小无明显差异性（P〉0.05）。结论：脑出血后血肿周围存在大量PKC表达上调、神经细胞凋亡、TNF-α、NO含量增加,PMB能够明显抑制PKC激活,TNF-α、NO释放,减少血肿周围细胞凋亡,起到神经元保护作用。     

大鼠脑出血蛋白激酶C与细胞凋亡关系的实验研究

目的研究大鼠脑出血后血肿周围蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）及神经细胞凋亡的表达及其多粘菌素B（polymyxin B,PMB）对上述表达的影响。方法将100只SD大鼠随机分为四组：假手术组、脑出血组、小剂量多粘菌素B干预组[0.4mg/（kg.d）]、大剂量多粘菌素B干预组[0.8mg/（kg.d）],立体定位仪定位注射自体不凝血制造大鼠脑出血模型,分别为术后6、12、24、72、120h处死,免疫组织化学法检测血肿周围区PKC、TUNEL阳性细胞（凋亡细胞）数的表达、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）含量、NO（一氧化氮）含量以及大小剂量PMB对其干预后的影响。结果假手术组PKC少量表达,偶见凋亡细胞;脑出血组自6h起PKC、凋亡细胞及TNF-α、NO含量大量增加,72h达高峰,PKC在120h基本降至假手术组,但凋亡细胞TNF-α、NO含量仍处于较高水平,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;大小剂量多粘菌素B干预组均明显抑制PKC、凋亡细胞、TNF-α含量的表达,有统计学意义（P〈0.01）;但PMB剂量的大小差异无统计学意义（P〉0.05）。结论脑出血后血肿周围存在大量PKC表达上调、神经细胞凋亡、TNF-α、NO含量增加,PMB能够明显抑制PKC激活,TNF-α、NO释放,减少血肿周围细胞凋亡,起到神经元保护作用。     

HIF-1α、Survivin与乳腺癌

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是细胞缺氧适应与应答调节的关键因子,在机体生理及病理过程中起关键作用。HIF-1α对肿瘤生物学特性改变的调控成为近年来肿瘤研究的热点之一。生存素Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,参与调控细胞的增殖和凋亡。在人类多种恶性肿瘤中,Survivin高表达并提示预后不良。本文HIF-1α和Survivin与乳腺癌的关系研究进展加以综述。     

HIF-1α与胃癌关系的研究进展

缺氧诱导因子1（hypoxia—inducible factor-1．HIF-1）是1992年Semenza等在Hep3B细胞中发现的．并于1995年克隆成功。HIF-1a为其调节亚基和活性亚基,是近年来肿瘤研究的热点之一．但国内外对其在胃癌中的研究尚不多见。     

β1整合素与卵巢癌细胞凋亡关系的实验研究

目的 研究β1整合素及纤维黏连蛋白在人卵巢癌HO-8910细胞增殖、凋亡中的作用及其意义.方法 以培养在包被纤雏黏连蛋白底物上的人卵巢癌HO-8910细胞为靶细胞,用不同浓度抗β1整合素单克隆抗体阻断β1整合素与纤维黏连蛋白的相互作用.用MTT法测定细胞增殖抑制率;吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率.结果 抗β1整合素单克隆抗体能抑制人卵巢癌HO-8910细胞的增殖,并有明显的时间和剂量依赖性(P＜0.05).荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术检测结果显示实验组S期上升,细胞凋亡率上升.结论 抗β1整合素单克隆抗体可抑制卵巢癌细胞的增殖,β1整合素抗体与卵巢癌细胞凋亡密切相关,阻断β1整合素与其特意配体纤维黏连蛋白的相互作用可诱导卵巢癌细胞凋亡.     

肺癌细胞凋亡与β1整合素关系的实验研究

目的：研究β1整合素及纤维粘连蛋白与人肺癌细胞凋亡之间的关系。方法：体外无血清培养条件下，以培养在包被纤维粘连蛋白底物上的人肺腺癌SPC-A-1细胞为靶细胞，用不同浓度抗β1整合素单克隆抗体阻断β1整合素与纤维粘连蛋白相互作用，采用噻唑蓝比色法检测细胞存活情况，计算肿瘤细胞存活率；以TUNEL和流式细胞术检测细胞凋亡情况，并计算凋亡指数。结果：抗β1整合素单克隆抗体对SPC-A-1细胞凋亡有明显的促进作用，对细胞存活有抑制作用，在一定范围内，呈时间、剂量依赖性。结论：肺癌细胞凋亡与β1整合素有密切关系，β1整合素与其特异配体纤维粘连蛋白的相互作用能促进细胞生存，当二者作用被阻断导致肺癌细胞凋亡。     

脑出血大鼠细胞凋亡与缺氧诱导因子HIF-1α的相关性及促红细胞生成素对其影响

目的：研究脑出血大鼠细胞凋亡与缺氧诱导因子HIF-1α的相关性以及重组人促红细胞生成素（rhEPO）对脑出血后脑水肿及缺氧诱导因子的影响.方法：采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量,应用TUNEL法测凋亡细胞.结果：出血后,HIF-1α蛋白阳性表达率随时间进行性增加,并于出血后72h达到高峰且维持到第7日,此后HIF-1α蛋白表达阳性率逐渐下降,脑出血后不同时间阳性率比较具有显著性差异（P〈0.01）;脑出血后3d内,脑组织含水量进行性增加,此后逐渐下降,脑出血EPO干预组较脑出血组及对照组各时间点脑组织含水量降低,HIF-1α蛋白阳性率减少.结论：缺血半暗带区脑组织中HIF-1α与细胞凋亡和脑水肿表达具有相关性.rhEPO能显著降低脑出血后脑组织含水量,减少HIF-1α表达,对脑出血后脑组织有良好的保护作用.     

BMP4、HIF-1α在上皮性卵巢癌中的相关性研究*

目的：检测上皮性卵巢肿瘤组织中及体外不同缺氧浓度下卵巢癌细胞株SKOV-3细胞中骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein4, BMP4)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)的表达,分析探讨BMP4、HIF-1α在上皮性卵巢癌转移、侵袭中的作用及与卵巢上皮癌预后的关系。方法：回顾性分析2014年1月—2017年12月在南通市第一人民医院诊治且资料完整的卵巢癌患者82例。采用免疫组织化学方法检测卵巢肿瘤组织BMP4、HIF-1α的表达。利用二氯化钴(CoCl2)构建缺氧模型,按实验要求培养SKOV-3细胞,置于0、50、100、150、200 µmol/L含CoCl2的DMEM培养基中培养。其中将用0 µmol/L CoCl2培养基的细胞设为常氧对照组,其余均为缺氧组。培养8 h,提取蛋白,用Western Blot检测,定量分析不同缺氧浓度下卵巢癌细胞株SKOV-3中BMP4、HIF-1α的表达情况。结果：BMP4、HIF-1α在正常卵巢中不表达,其阳性表达率随卵巢肿瘤恶性程度、临床分期、病理分级升高依次递增。体外不同缺氧状态下,随着CoCl2浓度的增高,卵巢癌细胞株SKOV-3中HIF-1α、BMP4的蛋白水平表达均逐渐增强(均P<0.05)。结论：BMP4、HIF-1α的表达与卵巢肿瘤发生发展、浸润转移密切相关,缺氧微环境可促进上皮性卵巢癌侵袭和转移。     

HIF-1α在宫颈癌细胞不同缺氧时间的表达情况及其与血管生成和细胞凋亡的关系

氧是机体新陈代谢和维持生存的必要因素,在某些生理或病理生理条件下,整体或局部缺氧能引起机体出现一系列适应性反应,如红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelium growth factor, VEGF)合成分泌增加,糖酵解途径酶的合成等。这些反应同缺氧诱导细胞产生的一种蛋白质—缺氧诱导因子-1 (hypoxia2inducible actor-1,HIF-1)有关,它可调节一系列基因的转录和表达,以维持机体的正常代谢和功能。     

HIF-1α表达与宫颈癌的关系探讨

目的 :探讨宫颈癌组织中HIF-1α的表达与宫颈癌之间的关系。方法 :采用免疫组化法检测177例分期为pT1b的宫颈癌患者宫颈组织(观察组)及100例正常宫颈组织(对照组)中HIF-1α的表达。结果 :宫颈癌患者宫颈组织中HIF-1α的阳性率表达高达79.7%,对照组宫颈组织中HIF-1α的阳性率表达为0。提示HIF-1α可作为宫颈癌早期筛查和诊断的一个重要参考标准。结论 :在宫颈癌早期存在着HIF-1α的高表达,因此,HIF-1α可作为宫颈癌早期筛查和诊断的一个重要参考标准。     

HIF-1α与胶质瘤血管生成的关系

研究表明许多肿瘤组织内都有显著的缺氧区域，处于缺氧状态的肿瘤细胞仍能不断增殖、浸润。肿瘤在适应缺氧时，主要有两种生长方式：（1）肿瘤血管生成，肿瘤生长超过儿立方毫米，就必须生成血管，而血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF）在肿瘤血管形成调控方面起着重要作用。（2）Warburg效应，即肿瘤在缺氧甚至有氧状态下增加糖酵解酶活性而加速糖酵解来获取能量。     

HIF-1α与胃肠道肿瘤的关系研究进展

缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导细胞缺氧反应的关键性转录因子,使细胞产生一系列的反应,以适应缺氧微环境。胃肠道肿瘤的缺氧微环境及HIF-1α的表达与肿瘤的发生发展、浸润转移、治疗及预后方面关系密切,已成为胃肠道肿瘤研究的热点。     

β1-整合素与乳腺癌细胞凋亡关系的实验研究

目的探讨乳腺癌细胞凋亡与β1-整合素作用的关系.方法人乳腺癌细胞SK-BR-3在培养中以不同浓度的抗β1-整合素单克隆抗体的作用下,观察其对TNF-α诱导的凋亡并计算凋亡率.结果加入凋亡诱导剂后,凋亡细胞由正常生长的2.85±0.41增加到25.62±1.41(P＜0.01);而加入抗β1-整合素单克隆抗体的实验组凋亡细胞数明显减少,且随加入抗体浓度的增加而再度减少.结论TNF-α对SK-BR-3人乳腺癌细胞凋亡的诱导作用可能是由β1-整合素参与的介导作用实现的,且存在着一种在一定范围内的量、效依赖关系.     

HIF-1α表达与宫颈癌生物学行为关系的研究

目的探讨缺氧诱导因子-1α在宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组化方法，回顾性研究109例宫颈癌中HIF-1α的表达，并与10例正常官颈组织、16例宫颈上皮内瘤变作同步时比。结果正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈原位癌、宫颈浸润癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为0％、12.5％、43．5％、81．4％。宫颈原位癌和宫颈浸润癌组织中HIF-1α表达显著高于正常宫颈和官颈上皮内瘤变（P〈0．01）。在不同组织学分级（即高、中、低分化）的官颈浸润癌组织中，HIF-1α的阳性表达率逐渐增高，与组织学分化程度呈负相关（r=-0．769，P〈0.01）；临床分期Ⅲ期宫颈癌中HIF-1α的表达明显高于Ⅰ期，Ⅳ期明显高于Ⅱ期（P〈0．01）；但不同病理类型宫颈癌组织中HIF-1α的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论HIF-1α是宫颈癌形成的早期事件，其水平升高可能导致肿瘤向恶性表型发展，HIF-1α有可能成为新的早期筛查和判断官颈癌生物学行为的诊断指标。     

食管鳞癌中HIF-1α的表达与凋亡的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和凋亡抑制因子（bcl-2）在食管鳞癌中的表达及二者之间的相关性。方法采用SP免疫组织化学染色法检测60例食管鳞癌组织和10例正常食管黏膜中HIF-1α蛋白和bcl-2蛋白的表达情况。结果HIF-1α在正常食管黏膜不表达，食管鳞癌中的阳性表达率为61．7％，HIF-1α蛋白的阳性表达率随食管癌体积增大、组织分化程度降低而增高（P〈0．05），有淋巴结转移者的阳性表达率（78．3％）显著高于无淋巴结转移者（51．4％），（P〈0．05）；HIF-1α蛋白与bcl-2蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论HIF-1α蛋白的高表达可能促进了食管鳞癌癌细胞的增殖和组织分化程度的降低，并参与了淋巴结转移：它还可能通过调节凋亡抑制因子bcl-2的水平而发挥抗凋亡作用。     

AQP1在非小细胞肺癌中的表达及其与HIF-1α、VEGF表达的关系

目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)在非小细胞肺癌中的表达和意义,以及与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系. 方法 应用免疫组织化学方法 检测78例非小细胞肺癌组织中AQP1的表达,分析其表达与临床病理特征、预后以及与HIF-1α、VEGF表达的关联性. 结果 78例非小细胞肺癌中,腺癌、腺鳞癌和大细胞癌的AQP1阳性表达率分别为57.5%(23/40),33.3%(1/3)和20.0%(1/5),鳞癌无阳性表达.阳性物质呈均质细颗粒状定位于胞质和(或)胞膜,亦见细胞核着色,瘤体边缘与正常组织交界处表达增多.肺腺癌中AQP1的表达与N分期、复发/转移和生存时间存在关联性(P＜0.01或P＜0.05),与HIF-1α、VEGF的表达亦存在关联性(均P＜0.01). 结论 非小细胞肺癌中存在AQP1的表达,与HIF-1α和VEGF之间可能存在协同作用,促进肺腺癌的侵袭和转移.