酞菁光敏杀伤瘤细胞机理的再探讨

酞菁光敏杀伤瘤细胞机理的再探讨余宏宇，沙继红，陈发普，杨勇骥本组采用氯化铈（ＣｅＣｌ３）细胞化学电镜技术对光敏活性较好的二磺化铝酞菁（ＡｌＳ２ＰＣ）、三磺化铝酞菁（ＡｌＳ３ＰＣ）和二磺化锌酞菁（ＺｎＳ２ＰＣ）光敏杀伤体内外瘤细胞的机理进行了再研究。体...     

酞菁锌介导的光动力学疗法对骨髓净化的实验研究

目的 研究酞菁锌光敏剂(ZnPcS2P2)介导的光动力学疗法(PDT)对模拟慢性粒细胞白血病缓解骨髓的净化作用。方法 采用荧光分光光度法检测K562细胞及正常细胞内的光敏剂含量。锥虫蓝拒染法、MTT比色法、克隆形成实验检测不同浓度ZnPcS2P2介导的PDT对K562细胞增殖能力的影响。正常混合集落形成细胞(CFU-Mix)、粒一单核系造血祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFu-E)等集落形成实验检测ZnPcS2P2 PDT对正常造血祖细胞的影响。巢式PCR方法检测酞菁锌介导的：PDT作用前后混有不同比例K562细胞的骨髓细胞的bcr-abl mRNA表达。结果 (1)与ZnPcS2P2共孵育5h,K562细胞与骨髓正常单个核细胞(MNC)内的ZnPcS2P2含量分别为10．1、2．2(ng／5x10^5细胞),二者比值达到最高值。(2)0．25μg／ml ZnPcS2P2孵育5h后,用670nm激光以53mW／cm^2的功率密度、2．1J／cm^2的能量密度照射对K562细胞集落形成的抑制率为91．1％,而对正常CFU-Mix、CFU-GM、CFU-E等集落形成的抑制率分别为18．0％、18．6％、17．8％。(3)0．25μg／ml ZnPcS2P2介导的PDT可完全杀灭按1：100至1：1000比例混入骨髓正常MNC中的K562细胞。结论 ZnPcS2P2介导的PDT能选择性杀伤K562细胞,有希望成为新的高效而简便的慢性粒细胞白血病骨髓净化手段。     

癌光啉和PhotofrinⅡ对人体肿瘤细胞系光敏杀伤作用的比较

本文报道癌光啉(代号PsD-007)和photofrin Ⅱ对人体肿瘤细胞系杀伤效应的比较。结果表明,在相同浓度和相同光照剂量处理细胞时,PsD-007对人体肝癌细胞系SMMC-7721和人体胃癌细胞系NGCC-8310的光敏杀伤效应至少相当于或略优于Photofrin Ⅱ。实验提示,一定浓度的PsD-007和Photofrin Ⅱ作用细胞时,光敏杀伤效应随光辐照剂量的增加而增强;在一定光照剂量处理细胞时,一定浓度范围内,光敏杀伤效应随光敏剂浓度的增加而增强。     

几种磺化铝酞菁光毒副作用的研究

几种磺化铝酞菁光毒副作用的研究余宏宇，陈发普，宝建中，张路，陈勇，龚志锦，郑建明衡量某种光敏剂是否有应用前景，除了其光动力学效应杀伤肿瘤细胞的效果必须满意外，其光毒副作用的轻重也是受到重视的问题之一，本研究分别以ＳＭＭＣ－７７２１培养细胞为体外细胞实...     

光动力作用对人结肠癌细胞转录因子激活蛋白-4表达的影响

目的观察不同浓度光敏剂酞菁锌对结肠癌细胞株SW480的生长抑制作用及其对转录因子激活蛋白-4(AP-4)表达的影响。方法应用CCK-8方法评估光动力作用后SW480细胞的存活率,通过流式细胞技术、RT-PCR技术、Western blot技术检测光敏剂酞菁锌光动力作用后对SW480细胞凋亡和AP-4基因表达等生物学行为的影响。结果酞菁锌光动力治疗对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和光照剂量依赖性;流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;SW480细胞的凋亡率随酞菁锌浓度增加逐步上升。2.0μg/mL酞菁锌光动力作用SW480细胞48 h后其AP-4 mRNA水平下降了81%,培养液上清液AP-4蛋白浓度下降了75.6%(P<0.01)。结论应用光敏剂酞菁锌光动力作用能有效抑制SW-480细胞AP-4的表达,进而抑制细胞的生长、增殖及诱导细胞的凋亡,为结肠癌治疗提供了新的思路和手段。     

酞菁锌光敏剂对Bel-7402细胞的抑制作用

目的 研究光激发酞菁锌配合物对Bel-7402细胞的抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT法)测定光激发酞菁锌对Bel-7402细胞的抑制作用.结果 酞菁锌配合物能明显抑制Bel-7402细胞.结论 酞菁锌是一种很有潜力的抗癌光敏剂.     

四种单一磺化度的铝酞菁光动力学效应杀伤小鼠S_（180）肉瘤的研究

四种单一磺化度的铝酞菁光动力学效应杀伤小鼠Ｓ_（１８０）肉瘤的研究余宏宇，赵克开，张鹭，陈勇，宝建中，蔡建明，龚志锦，陈晓东衡量某种光敏剂是否有应用前景，除了必须考虑其光毒副作用的轻重外，更主要需要考虑的是它对一定厚度的肿瘤是否具有有效的光动力学杀伤?..     

光动力疗法对乳腺癌细胞株MDA-MB-231的体外实验研究

目的观察光动力疗法(PDT)对乳腺癌细胞株MDA-MB-231的杀伤效果,选择最佳作用参数(光敏剂浓度和光照强度);探讨PDT的作用机制,为PDT在乳腺癌的动物荷瘤模型和临床运用提供理论依据。方法实验分为空白对照组、单纯激光组、单纯光敏剂组和实验组(照光 光敏剂)。对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行HpD-PDT实验,应用MTT法检测其光密度值OD492,观察不同实验条件下对人乳腺癌细胞在体外的抑制作用,并绘制其抑制曲线和观察其形态学变化。结果HpD-PDT组(HpD2μg/ml,5J/cm2)于治疗后24h明显抑制体外培养的人乳腺癌细胞,而空白对照组、单纯使用光敏剂组(HpD2μg/ml)及单纯激光照射组(5J/cm2)对细胞增殖均无明显影响。HpD-PDT后12h,透射电镜可见:实验组细胞内出现大量的核碎裂、核融解、核消失等坏死征象。结论HpD-PDT可明显抑制体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的生长,光动力疗法为乳腺癌新的治疗手段提供了理论及实验依据。     

光敏剂癌光啉对小鼠骨肉瘤LM-8细胞体外光动力作用的实验研究

目的 观察光敏剂癌光啉(PSD-007)对小鼠骨肉瘤LM-8细胞的体外光动力效应.方法 将不同浓度的光敏剂PSD-007(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)与小鼠骨肉瘤细胞株LM-8共同孵育4 h,再以630 nm波长的激光为光源,采用不同激光能量照射LM-8细胞(激光波长为630 nm,光照能量分别为1.5、3.0、6.0、9.0 J/cm2),与空白对照组(不加光敏剂且不接受激光照射)、暗毒性组(加光敏剂但不接受激光照射)、激光组(不加光敏剂但接受激光照射)比较,24 h后采用溴化四氮唑蓝(MTT)法测定其光密度值(D540)值,计算抑制率,并于光学显微镜下观察光动力疗法(PDT)后24 h细胞形态的变化.结果 单独照光或光敏剂孵育均无杀伤效应,光敏剂浓度及激光能量是影响杀伤效应的重要因素.PSD-007浓度为4.0μg/mL、光照能量为6.0 J/cm2时,对LM-8细胞有明显的光动力杀伤效果,抑制率为73.8%.光学显微镜下可见细胞形态发生明显的变化,呈坏死或凋亡样改变.结论 在体外,PSD-007对小鼠骨肉瘤LM-8细胞具有明显的光动力杀伤作用.PDT是很有前景的治疗骨肉瘤的新方法.     

光动力疗法对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231体外杀伤作用的实验观察

目的:探讨光动力疗法(PDT)对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的杀伤效应.方法:以人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为研究对象,以血卟啉衍生物(HpD)为光敏剂,以630 nm波长激光为光源,采用连续照射的方式,将不同浓度HpD处理的MDA-MB-231细胞,照射不同剂量的激光后,用MTT法测定其OD492值,并绘制MDA-MB-231 PDT后的生长曲线,用光镜、电镜观察PDT后不同时间细胞的形态变化.结果:HpD浓度为0.5 mg/L时基本无杀伤作用;在相同的激光照射剂量下,2 mg/L HpD即有较好的杀伤作用,再增大HpD浓度对细胞的杀伤效应增加不明显;在相同的HpD浓度下,激光剂量为5 J/cm2时OD492值降低达平台.光镜、电镜下细胞形态也发生了明显的变化.结论:PDT对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231有明确的杀伤效应,HpD浓度2 mg/L、激光剂量5 J/cm2是本实验PDT的最佳作用参数.     

光动力诱导人子宫内膜癌细胞凋亡的研究

目的 研究光动力对人子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 1、不同浓度光敏剂对肿瘤细胞杀伤的差异,实验分组:(1)空白对照组 (2)单纯激光照射组 (3)光敏剂+激光照射组2、不同能量的激光对子宫内膜癌细胞杀伤的差异;激光能量10J/cm2、20J/cm2、30J/cm2、40J/cm2.3、免疫组化法电镜分析子宫内膜癌细胞的超微结构改变.4、MTT比色分析.结果 MTT比色法检测显示,光敏剂无浓度依赖性,不随浓度的增加而作用增强.本实验选择光敏剂(HPD)浓度为1mg/ml(P?0.05).免疫组化法检测结果显示:光敏剂+激光照射组作用子宫内膜癌细胞细胞24h后细胞凋亡率明显增加,与其它二组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 光敏剂对子宫内膜癌细胞无浓度依赖性选择性,光动力对子宫内膜癌细胞的影响随着波长、功率和时间而变化的,成正比关系.本实验选择最适波长630nm,输出能量10J/cm2,时间7S,光敏剂+激光照射组较其它二组子宫内膜癌细胞调亡率明显增加.     

酞菁光敏剂在光动力疗法治疗癌症中的运用

本文主要围绕一种治疗癌症的新型方法——光动力疗法(简称PDT)来展开,主要介绍了PDT的发展史、基本治疗过程、需要具备的三个要素,以及最关键要素即光敏剂药物的研究历程,尤其是酞菁光敏剂的研究开发现状。     

B1143对人口腔上皮癌细胞株KB细胞的抑制作用

花青染料(Cyanine dyes)自1856年首次被合成以来,由于其光稳定性差,很少作为常规染料使用.由于它对500～800 nm的光有强吸收,因而一直作为光敏剂,主要应用于胶片工业,并于20世纪80年代被用于信息记录.关于花青染料生物活性的研究,只有S.Zigman等人报道能够抑制鱼受精卵的分裂和生长 [1] .但有关将花青染料用于恶性肿瘤治疗方面的报道尚不多见.Anhydro-3-sulphopropyl-3′-sulphoethyl-5,5′-diphenyl-9-ethyl-oxacarbocyanine hydroxide (B1143)是花青染料中的一种,在我们的前期工作中,发现B1143 在化学体系中,具有产生超氧阴离子的特性 [2] .本实验采用光动力学治疗(PDT)的研究手段,测定了B1143对KB细胞的杀伤作用,据此探讨其作为PDT中光敏剂的可能性.     

10-羟基喜树碱联合热疗对肝癌协同杀伤作用的研究

目的: 研究10-羟基喜树碱(HCPT)联合热疗对肝癌细胞有无协同杀伤作用,为临床应用提供实验依据。方法: 人肝癌细胞株SMMC-7721进行细胞培养、传代,实验分成四组:(1)单纯热疗组;(2)单纯HCPT组;(3)热疗与HCPT联合组;(4)对照组,各组分别进行实验,用MTT法测定各组对细胞的杀伤作用。结果: 单纯热疗显示温度43℃、44.5℃(各30 min)对SMMC-7721细胞有明显的杀伤作用(P<0.01),而40℃、41.5℃(各30 min)对细胞杀伤作用不明显(P>0.05)。HCPT对肝癌SMMC-7721细胞有明显杀伤作用(P<0.01),呈时间依赖性和浓度依赖性(P<0.01)。HCPT联合热疗对细胞的杀伤作用明显强于单纯的HCP T或热疗的作用(P<0.01)。结论: HCPT联合热疗对肝癌细胞的杀伤有明显的协同作用。     

二氧化钛光照对人癌细胞光敏作用的研究

利用光敏剂治疗癌症,是近年发展起来的行之有效的一种新方法,其特点是利用光敏剂光照后产生一系列化学反应,并能消灭癌细胞。然而,目前能利用的治癌光敏剂尚较少,绝大多数都是采用血叶啉衍生物(HPD),其光照后对癌细胞有较强的杀伤作用,但是其不宜制得。而二氧化钛(TiO_2)来源广泛,性质稳定,我们通过其对Hela及SMMC-7721细胞的抑制作用,对其光敏作用进行了研究。     

PDT光敏剂的最新资料

光动力学疗法系利用光敏剂的光动力学反应产生的细胞毒素杀死癌细胞的一种治疗手段,具有常规治疗不具备的优点即对癌细胞光化学杀伤的选择性,而对正常组织无损伤或仅有轻微的毒性,对复发性、耐药性癌同样具有杀伤效应。PDT的疗效和进展信赖于新型光敏剂的研制。     

叶下珠对人肝癌细胞影响的研究

为研究叶下珠对人肝癌细胞SMMC7721的影响,采用噻唑蓝(MTT)还原法和氚标胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法观察叶下珠提取物对人肝癌细胞SMMC7721细胞活性及DNA合成的影响。结果发现,经叶下珠提取物处理后,SMMC7721活力明显减弱,~3H-TdR掺入率明显降低,DNA合成抑制率与药物剂量呈线性关系。结论:叶下珠具有杀伤人肝癌细胞SMMC7721和抑制其增殖作用。     

磺化铝酞青光动力学效应杀伤在体肿瘤的研究

本实验选用磺化铝酞菁(AlSPC,自制)和癌光啉(PsD-007),对荷S_(180)肉瘤昆明小鼠进行了如下工作:①AlSPC在荷瘤小鼠体内的药物动力学分布;②AlSPC光动力学疗法(AlSPC-PDT)和PsD-007光动力学疗法(PsD-007-PDT)治疗S_(180)肉瘤所致的病理学改变(大体、光镜、透射电镜);③AlSPC-PDT和PsD-007-PDT对S_(180)肉瘤的杀伤深度;④AlSPC-PDT和PsD-007-PDT对肿瘤生长曲线和动物生存期的影响;⑤AlSPC-     

低浓度的丝裂霉素对结肠癌光动力增效作用研究

目的用低浓度的丝裂霉素改变大肠癌细胞周期来达到增强其光动力学疗法,探讨增效作用中对癌细胞杀伤作用规律。方法在结肠癌细胞培养的基础上,加入低浓度的丝裂霉素,光动力学疗法后采用荧光光度法和MTT法对癌细胞内光敏剂含量和细胞存活率进行检测,用SPLM软件统计包进行数据处理。结果低浓度的丝裂霉素可使癌细胞内光敏剂显著增加,随时间延长细胞内光敏含量增加明星;细胞内光敏剂含量与激光照射后细胞存活率呈显著负相关,即细胞内光敏剂含量多,PDT后细胞存活率低;光动力学疗法后癌细胞存活率曲线明显左移,在4、8、16h细胞存活率显著降低;癌细胞与光敏剂作用8～16h激光照射可达到最佳的光动力杀伤效果。结论我们设计单独低浓度的丝裂霉素对结肠癌细胞无杀伤作用,但可通过增加癌细胞内光敏剂含量来达到增效作用,8～16h为最佳给药时间,杀伤作用有明显的规律性。     

ALA诱导结肠癌细胞内PPIX产生和光动力学疗法杀伤效应研究

目的 观察δ氨基酮戊酸(δ-aminolaevulinic acid,ALA)诱导人结肠癌细胞SW480 内产生内源性卟啉IX(protoporphyrin IX,PPIX)规律以及与光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤作用的关系.方法 在SW480结肠癌细胞培养的基础上,采用激光共聚焦显微镜分析ALA诱导SW480结肠癌细胞内产生PPIX的变化规律;用MTT法检测细胞存活率,研究杀伤作用规律.结果 加入ALA后SW480细胞产生PPIX的量随时间延长,PPIX量逐渐增加,加药后8h达最高峰,24h后恢复到正常细胞水平.PPIX荧光主要产生在细胞浆内,细胞核内较少.PDT 24h后细胞存活率开始明显降低,PDT杀伤作用与癌细胞内PPIX量呈负相关.结论 ALA诱导SW480细胞产生PPIX的量在加药后8h达最高峰,24h后恢复到正常细胞水平,PPIX荧光主要分布在细胞浆内.PDT杀伤作用与癌细胞内光敏剂明显相关.