快速微量肥达-外裴试验

传统的肥达和外裴试验 ,操作繁琐 ,试剂用量大 ,观察结果有一定困难 ,较易产生误差。本文介绍一种将菌液染色后进行的快速微量凝集试验。1　试剂配制　伤寒沙门菌Ｏ、Ｈ菌液 ,副伤寒沙门菌甲、乙、丙菌液 ,变形杆菌ＯＸ19、ＯＸ2 、ＯＸｋ 菌液 ,均由上海生物制品研究所提供 ,含量均为 7× 10 9/ｍｌ菌体 ,各取 1ｍｌ,加碳酸复红(1ｇ碱性复红于 95 %乙醇 10ｍｌ中研磨溶解 ,加 5 %碳酸溶液90ｍｌ) 0 0 5ｍｌ,混匀 ,静置 10ｍｉｎ后 ,各管分别加生理盐水 9ｍｌ,混匀后置 4℃备用。菌液浓度相当于 7× 10 8/ｍｌ。2　标本处理　取待测血清 0 …     

肥达试验在甲型副伤寒诊断中的价值

甲型副伤寒是由沙门菌属A群（S．paratyphiA）引起的急性传染病，其症状和体征缺乏特异性，细菌培养阳性率不高，且所需时间较长，早期诊断困难。由于感染者可产生相应的O和H（A）抗体，因此常用肥达试验对患者血清抗体进行检测，辅助诊断。但是肥达试验对于甲型副伤寒的诊断价值存有争议，且无一致的诊断标准，所以评价肥达试验在甲型副伤寒中的诊断价值具有非常重要的意义。     

凝聚胺在快速测定肥达试验中的应用

本研究将凝聚胺方法用于肥达试验 ,使其快速、敏感 ,适用于临床急诊病人的诊断。一、材料与方法1.标本来源 :来自我院门诊及住院病人的 3 9份血清标本 (其中 2份为甲型副伤寒、1份为乙型副伤寒 ) ,男 2 3份 ,女 16份 ,以上病人均经临床、血培养、便培养诊断证实。 2 0份正常血清标本来自本院职工体检。2 .试剂 :低离子介质溶液 :含葡萄糖、乙二胺四醋酸— 2钠及稳定剂。凝聚胺溶液 :含凝聚胺、氯化钠及稳定剂。复悬液 :含柠檬酸钠、葡萄糖及稳定剂。以上试验材料由太原维康诊断用品有限公司提供。伤寒、副伤寒及变形菌诊断菌液均由兰州生物…     

柱凝集法在直接抗人球蛋白试验中的应用

目的开展和运用一种新的直接抗人球蛋白试验(DAT)的方法.方法微柱凝集法(CAT)DAT阳性的临床21例标本用传统试管法(CTR)确证,对20例CAT法阴性的标本做对照试验;同时抗D血清进行倍比稀释用二种方法同步检测.结果CAT法DAT阳性的标本其CTT法有19例阳性,而20例CAT法阴性的标本其CTT法也全部阴性,两种方法的准确性没有显著性差异(x2=2,P＞0.05);CTT法测出1:512稀释的抗D而CAT法可以测出1:2048稀释的抗D.结论CAT法检测DAT是一种可靠的方法,完全可以代替传统试管法.     

快速乳胶凝集试验在检测外阴和阴道念珠菌感染的应用

目的　评价快速乳胶凝集试验诊断阴道念珠菌病的价值。方法　用乳胶凝集法对临床拟诊念珠菌感染的 119例妇女阴道分泌物进行检测 ,同时与阴道分泌物直接镜检法和培养法相比较。结果　凝集法对阴道念珠菌感染的检出率为 5 8.8% ,高于培养法 (5 6 .3% )和直接镜检法 (31.1% )。与培养法比较 ,快速凝集法的诊断敏感性为 89.6 % ,特异性为 80 .8%。结论　凝集法能快速诊断外阴阴道念珠菌病。虽成本略高于直接镜检法和培养法 ,但凝集法能缩短检测时间 ,且操作简便 ,可对念珠菌感染做初步诊断。     

快速乳胶凝集试验在检测外阴和阴道念珠菌感染的应用

目的评价快速乳胶凝集试验诊断阴道念珠菌病的价值.方法用乳胶凝集法对临床拟诊念珠菌感染的119例妇女阴道分泌物进行检测,同时与阴道分泌物直接镜检法和培养法相比较.结果凝集法对阴道念珠菌感染的检出率为58.8%,高于培养法(56.3%)和直接镜检法(31.1%). 与培养法比较,快速凝集法的诊断敏感性为89.6%,特异性为80.8%.结论凝集法能快速诊断外阴阴道念珠菌病.虽成本略高于直接镜检法和培养法,但凝集法能缩短检测时间,且操作简便,可对念珠菌感染做初步诊断.     

肥达试验及Tubex法在伤寒、甲型副伤寒诊断中的应用评估

目的 评估肥达试验、Tubex法在伤寒、甲型副伤寒诊断中的应用价值。方法 采集广西、新疆、云南等地区伤寒及甲型副伤寒暴发疫情中的确诊病例血清,运用肥达试验及Tubex-TF、Tubex-PA进行伤寒及甲型副伤寒血清抗体检测,分别计算这3 种血清学检测结果的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、约登指数和Kappa值等指标,对诊断结果进行评估。结果 以血培养为金标准,对23例血培养阳性的伤寒血清进行检测,Tubex-TF方法的灵敏度为82.61%,特异度为61.64%,阳性预测值为0.404,阴性预测值为0.918;Tubex-PA对伤寒病例的非特异性阳性检出率为91.30%。71例血培养阳性的甲型副伤寒检测结果显示,Tubex-PA方法的灵敏度为74.65%,特异度为16.00%,阳性预测值为0.716,阴性预测值为0.182;Tubex-TF对甲型副伤寒病例的非特异性检测阳性率为39.44%。Tubex-TF/PA联合对伤寒及甲型副伤寒病例的总检出率为80.21%。在不同病程中,血培养阳性的伤寒及甲型副伤寒病例血清进行肥达试验,阳性率均低于6.00%,明显低于Tubex法的检出率（2=75.165,P=0.000）。结论 疾病暴发流行时,除了肥达试验,Tubex-TF方法可用以辅助诊断伤寒,有利于该疾病早期发现、诊断及治疗,而对于甲型副伤寒的辅助诊断仍有待进一步研究。     

血凝筛选试验PT、APTT在妊娠产妇的临床应用

目的为探讨常规血凝筛选试验PT、APTF在妊娠产妇不同生理条件下的变化,凝血部分的改变会导致在妊娠期特别是中、晚期或在分娩前后发生某些出血性、血栓性疾病。方法应用磁感应原理全自动血凝仪对健康人群55倒、妊娠产妇52例以凝固法进行检测。结果临产孕妇PT明显缩短提示血液呈高凝状态倾向,可能与因子Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅹ等增加有关,APTT明显缩短可能与因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅻ等增加有关,二者是反映内源性和外源性两条途径凝血功能最常用的筛选指标。PT、APTF随着孕期的增加出现明显的缩短,提示正常中、晚期孕妇女患者血液中凝血因子处于一定程度的活化状态。结论在高凝状态下的妊娠产妇2项结果的缩短与健康对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。这样可早期发现凝血机制的改变,对于积极预防和治疗血栓前的状态保护母婴健康有临床意义。     

梅毒螺旋体血清学筛查和确诊试验的临床应用

目的探讨2种梅毒螺旋体血清学试验同时用于梅毒螺旋体感染的筛检和确诊的重要性和必要性。方法快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)及梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)。结果对我院6 528名输血前筛查及皮肤科患者的血清样本同时作RPR和TPPA检测,阳性者再进一步检测其滴度。RPR阳性率为1.29%,TPPA阳性率为1.90%;2种方法同时阳性率为1.15%。结论为早期确诊梅毒螺旋体感染并阻断其传播途经,对输血前筛查及疑似梅毒螺旋体感染患者应采用RPR和TPPA2种方法同时进行检测。     

梅毒螺旋体血清学筛查和确诊试验的临床应用

目的探讨2种梅毒螺旋体血清学试验同时用于梅毒螺旋体感染的筛检和确诊的重要性和必要性。方法快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）及梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）。结果对我院6 528名输血前筛查及皮肤科患者的血清样本同时作RPR和TPPA检测,阳性者再进一步检测其滴度。RPR阳性率为1.29%,TPPA阳性率为1.90%;2种方法同时阳性率为1.15%。结论为早期确诊梅毒螺旋体感染并阻断其传播途经,对输血前筛查及疑似梅毒螺旋体感染患者应采用RPR和TPPA2种方法同时进行检测。     

A蛋白与凝固酶凝集试验在金黄色葡萄球菌快速鉴定中的应用

目的探讨金黄色葡萄球菌快速检测的可能性。方法用凝固酶(CA)(试管法和玻片法)和葡萄球菌A蛋白(SPA)两种方法检测667株葡萄球菌。结果378株金黄色葡萄球菌中二者同时呈阳性的有303株,阳性率为80.2%,特异性、准确性均为100%;CA与SPA试验联合使用的阳性率之和高至98.9%,而其他289株葡萄球菌CA与SPA试验的阳性率之和仅为12.4%。结论CA与SPA试验联合运用对金黄色葡萄球菌的鉴定具有快速、准确、简便易行及特异性强等优点。     

肺炎支原体抗体分型检测和被动颗粒凝集检测结果比较

目的 研究酶联免疫法( ELISA)抗体分型检测与被动颗粒凝集法(凝集法)检测结果间的一致性,并探讨两种检测对肺炎支原体感染的诊断价值.方法 2010年11月至2011年5月间,从济宁医学院附属医院收集191例肺炎支原体感染疑似患者的血清.采用凝集法检测标本中肺炎支原体抗体的滴度水平,ELISA对肺炎支原体IgM、IgG、IgA抗体进行分型检测.Kappa检验评价两种检测结果的一致性,Kruskal-Wallis秩和检验分析各抗体哑型在凝集法滴度组间和患者年龄组间的分布差异.通过抗体分型分析各滴度组标本所处的病程,并结合临床诊断评价凝集法高滴度标本中两种方法检测结果的诊断价值.结果 191例患者中,两种方法对肺炎支原体感染的检测总符合率为84.3％,Kappa =0.642,P＜0.01.凝集法不同滴度组间IgM及IgA的检出率存在统计学差异(P＜0.05).另外,IgM在幼儿及青少年患者中检出率较高,而IgG及IgA在老年患者中检出率较高.抗体分型结果提示,凝集法阳性组中75例(58.1％o)为现症感染,其中高滴度组中27例(96.4％)为现症感染,与该组的临床诊断相符.结论 凝集法与ELISA法的一致性较好;ELISA法检测IgM、IgG、IgA亚型可提示现症感染和既往感染.     

真菌性角膜炎致病菌种的变迁及体外药物敏感试验研究

目的 回顾分析2000-2006年山东省真菌性角膜炎致病菌菌种的分布、变迁及部分常见致病菌时抗真菌药物的敏感性.方法 对真菌性角膜炎患者的溃疡组织刮片和角膜移植术中取下的病变角膜片标本进行真菌培养及菌种鉴定,分析致病菌的构成及其随年份的变化和山东省眼科研究所开展真菌体外药敏试验以来的试验结果 .结果 2000-2006年间,共有898例患者诊断为真菌性角膜炎,770例(85.7%)真菌培养阳性.其中首位的致病菌属为镰刀菌属(547例,71.0%),历年百分比分别为75.5%、72.8%、71.5%、75.2%、76%、68.8%和56.4%;曲霉菌属(84例,10.9%)是第2位的致病菌,历年所占百分比为15.1%、15.2%、13.1%、10.2%、10.4%、8.0%和6.9%;链格孢属(74例,9.6%)位居第3位,历年所占百分比分别为1.9%、3.3%、3.7%、6.6%、8.8%、12.0%和29.7%.镰刀菌属主要菌种为茄病镰刀菌(33.8%)、尖孢镰刀菌(28.2%)与串珠镰刀菌(27.4%);曲霉菌属主要菌种为黄曲霉(53.6%)与烟曲霉菌(39.3%).常见真菌对两性霉素B、特比萘芬、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶和氟康唑MIC值的几何均数分别为0.647、0.714、1.624、15.108和27.070 μg/ml.镰刀菌属5种抗真菌药物MIC的几何均数分别为0.899、0.893、3.077、37.124和21.687 μg/ml;曲霉菌属分别为0.794、0.591、0.416、23.973和7.127 μg/ml;链格孢属分别为0.409、0.479、0.433、11.655和7.104 μg/ml.结论 镰刀菌属、曲霉菌属和链格孢属是山东省真菌性角膜炎前3位的致病菌属.2000至2006年间,镰刀菌属始终居于真菌性角膜炎致病菌的首位;其次为曲霉菌属,比例呈下降趋势;链格孢属居于第3位,比例呈逐年升高趋势.镰刀菌属对两性霉素B和特比萘芬MIC值的几何均数低,对伊曲康唑、5-氟胞嘧啶和氟康唑MIC值的几何均数高.曲霉菌属和链格孢属对5种抗真菌药物MIC值的几何均数较镰刀菌都低.     

改良Hodge试验检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的性能评估

目的 评估改良Hodge试验在碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科细菌中检测碳青霉烯酶的效能.方法 收集2004-2008年我国16家教学医院的49株碳青霉烯类药物敏感性降低(亚胺培南、美罗培由或厄他培南的MIC≥2μg/ml)的肠杆菌科细菌;采用对倍琼脂稀释法测定其对亚胺培南、美罗培南和厄他培南的MIC;通过改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;利用加苯硼酸或苯唑西林的改良Hodge试验区分碳青霉烯酶或AmpCs/ESBLs导致的阳性结果 ;采用PCR检测包括NDM-1型碳青霉烯酶基因在内的多种β内酰胺酶基因,并对PCR阳性产物测序鉴定.结果 49株菌中,36株菌对亚胺培南不敏感(MIC>4μg/ml),31株菌对美罗培由不敏感(MIC>4μg/ml),47株菌对厄他培南不敏感(MIC>2μg/ml).49株临床分离菌中23株菌改良Hodge试验刚性,包括9株弱阳性和14株强阳性.经过对菌株进行β内酰胺酶基因PCR和测序,发现9株Hodge弱阳性菌株中2株携带blaKPC-2,7株不携带碳青霉烯酶基因,但携带blaampC/blaESBL;14株强阳性菌株中4株携带blaKPC-2,8株携带blaIMP-4,2株携带blaIMP-8;26株改良Hodge试验阴性菌株均未携带碳青霉烯酶基因.所有49株菌均未检测到blaNDM-1.以碳青霉烯酶基因检测为标准,则改良Hodge试验对检测碳青霉烯类药物敏感性降低的肠杆菌科菌中碳青霉烯酶的敏感度为100%,特异度为79%,阳性预测值为70%,阴性预测值为100%,准确性为86%.结论 改良Hodge试验具有很好的敏感性,但存在一些假阳性结果 .利用苯硼酸和苯唑西林可有效区分改良Hodge试验的假阳性和真阳性.     

8860名学生ABO血型分布及批量检测ABO血型错检原因分析

[目的]了解学生群体中的ABO血型分布情况,有利于临床医务人员及相关工作人员掌握血源概况,为血液血型贮备对策提供科学依据,并分析造成批量ABO血型错检的原因。[方法]运用玻片凝集法和试管离心法对8860名学生进行ABO血型鉴定,对可疑血液样本做盐水试管法的正反定型试验。[结果]血型分布为A型占27．75％,B型占31．65％,O型占29．65％,AB型占10．95％。[结论]8860名学生血型分布为B〉O〉A〉AB。当发现血型鉴定出现可疑时,首先应重复做试验一次,严格执行操作规程,细心观察结果,按步骤一步步排除错检的可能性。     

中性粒细胞VCS参数在呼吸系统细菌感染性疾病中的变化及临床应用

目的通过检测呼吸系统细菌感染患者的中性粒细胞参数VCS的变化,探讨其临床应用价值。方法利用全自动血细胞分析仪的细胞体积、高频电流传导、激光散射（VCS）技术,测定50例健康者（对照组）和60例确诊细菌感染患者（感染组）WBC计数、中性粒细胞百分比（percentageofneu-trophil,NE％）、中性粒细胞VCS参数及其各自标准差（standarddeviation,SD）。同时检测C反应蛋白（Creactionprotein,CRP）,并对检测结果进行统计学分析。结果感染组患者WBC、NE％、V、V-SD、C、CRP检测水平均高于对照组,且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。感染组2中WBC、NE％、V-SD、CRP检测水平均高于感染组1,且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。感染组患者C-SD、S、S-SD检测水平与对照组比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。根据受试者工作特征（receiveroperatingcharacteristic,ROC）曲线判断WBC、NE％、CRP、V及V-SD的cutoff值分别为8．4xlOg／L、70％、6．6mg／L、144和20．45。其中NE％＋CRP、WBC＋CRP＋V-SD、NE％＋CRP＋V-SD三种组合诊断细菌感染的灵敏度、特异性均高于80％。ROC曲线表明CRP、NE％诊断细菌感染效能优秀,曲线下面积（areaundercure,AUC）分别为0．89、0．87,V及V-SD一般,AUC^ROC分别为0．75、0．74,而WBC诊断效能最差,AUC^ROC为O．67。结论呼吸系统细菌感染患者的中性粒细胞体积参数V及V-SD变化较为灵敏,与WBC、NE％和CRP联合诊断时可明显提高灵敏度,同时WBC、NE％和CRP有较好特异性,可为临床判断呼吸系统细菌感染起到很好的提示作用。     

Effects of viral infection and microbial diversity on patients with sepsis: A retrospective study based on metagenomic next-generation sequencing

BACKGROUND: The study aims to investigate the performance of a metagenomic next-generationsequencing (NGS)-based diagnostic technique for the identifi cation of potential bacterial and viral infectionsand eff ects of concomitant viral infection on the survival rate of intensive care unit (ICU) sepsis patients.METHODS: A total of 74 ICU patients with sepsis who were admitted to our institution from February1, 2018 to June 30, 2019 were enrolled. Separate blood samples were collected from patients for bloodcultures and metagenomic NGS when the patients’ body temperature was higher than 38 °C. Patients’demographic data, including gender, age, ICU duration, ICU scores, and laboratory results, were recorded.The correlations between pathogen types and sepsis severity and survival rate were evaluated.RESULTS: NGS produced higher positive results (105 of 118;88.98%) than blood cultures(18 of 118;15.25%) over the whole study period. Concomitant viral infection correlated closelywith sepsis severity and had the negative effect on the survival of patients with sepsis. However,correlation analysis indicated that the bacterial variety did not correlate with the severity of sepsis.CONCLUSIONS: Concurrent viral load correlates closely with the severity of sepsis and thesurvival rate of the ICU sepsis patients. This suggests that prophylactic administration of antiviraldrugs combined with antibiotics may be benefi cial to ICU sepsis patients.     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

Infectious complications in neonatal transfusion: Narrative review and personal contribution

Neonates and prematures are among the most transfused categories of patients. Adverse reactions due to transfusions, such as transfusion-transmitted infections, can affect the rest of their lives. In this systematic review, we revised the literature concerning transfusion-transmitted infection in neonates. We reported case-reports and case-series previously published and we integrated these data with our experience at local neonatal intensive care unit. Moreover, we illustrated strategies for mitigating transfusion-transmitted infections, including donor selection and testing, pathogen inactivation technologies and combined approaches, as for Cytomegalovirus infection, integrating leukoreduction and identification of seronegative donors.     

广州地区下呼吸道感染常见病原菌的分布与耐药性

目的 :探讨广州地区下呼吸道感染常见病原菌分布与耐药情况。方法 :收集广州地区 13所医院下呼吸道感染患者痰标本分离的 1778株病原菌 ,按美国国家临床实验室标准委员会 (NCCLS)标准进行药敏试验。结果 :主要菌群有铜绿假单胞菌 (2 2 .7% )、克雷伯菌属 (15 .8% )、不动杆菌属 (12 .5 % )和肠杆菌属 (10 .5 % )等。甲氧西林耐药株分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的 75 .7%和 92 .9% ,未发现万古霉素耐药株。大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的发生率是 4 6 .8%和 37.0 % ,产ESBLs菌株对各种抗菌药物的耐药率明显高于不产ESBLs菌株。铜绿假单胞菌对头孢哌酮 舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟和亚胺培南的敏感率较高。结论 :广州地区下呼吸道感染主要病原菌是革兰阴性杆菌 ,其对常用抗菌药物耐药性较高 ,开展细菌耐药性监测十分重要。