即时定量PCR法和等位基因特异性寡核苷酸PCR法检测肺腺癌EGFR基因第21号外显子L858R突变的对比性研究

自从Lynch等[1]和Paez等[2]发现肺癌细胞中上皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶编码区基因突变以来,研究证明具有EGFR基因第19号外显子(de1746-A750)缺失突变或第21号外显子L858R错义突变的肺癌患者使用酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼进行分子靶向治疗的有效率高达80%以上,而对于缺乏EGFR突变的患者采用上述治疗则基本无效[3].     

即时定量PCR法和等位基因特异性寡核苷酸PCR法检测肺腺癌EGFR基因第21号外显子L858R突变的对比性研究

自从Lynch等[1]和Paez等[2]发现肺癌细胞中上皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶编码区基因突变以来,研究证明具有EGFR基因第19号外显子(de1746-A750)缺失突变或第21号外显子L858R错义突变的肺癌患者使用酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼进行分子靶向治疗的有效率高达80%以上,而对于缺乏EGFR突变的患者采用上述治疗则基本无效[3].     

EGFR靶向药物治疗非小细胞肺癌的研究进展

在世界范围内,肺癌是死亡率最高的恶性肿瘤,其中以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)为主.近年来,随着人表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变体的发现,以吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)对于携带有EGFR敏感突变的NSCLC具有良好的疗效.然而,耐药问题的出现增加了临床治疗的难度,针对非小细胞肺癌的EGFR靶向治疗,目前仍有很多问题亟待解决.本文现就EGFR靶向治疗的现状与发展进行综述.     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测的经验总结分析

肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害严重的恶性肿瘤之一。研究表明，表皮生长因子受体(EGFR)在43％～89％的非小细胞肺癌(NSCLC)中表达上调，它在肿瘤的形成以及介导瘤细胞的生物学行为上发挥着重要的作用，是目前NSCLC治疗的重要靶点之一[1]。吉非替尼等治疗肺癌的靶向药物，为EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，可通过对肿瘤细胞EGFR的特异性结合阻断细胞信号通路，抑制肿瘤细胞增殖并促其凋亡[2]。     

非小细胞肺癌个体化治疗的靶向分子检测

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的个体化治疗是目前肿瘤研究领域的热点之一.以EGFR体系突变活化和ALK重排为分子学特征的NSCLC对酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors, TKIs)如吉非替尼(gefitinib)、埃洛替尼(erlotinib)以及可卓替尼(crizotinib)有良好的反应性,而EGFR突变和ALK重排也成为筛选TKIs治疗对象和预测治疗反应性的最有价值指标.近年来,欧洲、北美和亚洲地区先后公布EGFR突变检测的共识,我国也于2011年达成了EGFR突变检测的专家共识[1-4].     

盐酸厄洛替尼片的临床应用概况

<正>肺癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤,其中80%的肺癌是非小细胞肺癌(non-small cell lung caner,NSCLC),手术治疗只适用于少数患者且术后复发甚至死亡的比率高达60%,虽然化疗、放疗技术在不断提高,但NSCLC患者的预后很差~([1-2])。厄洛替尼(erlotinib)是小分子酪氨酸激酶抑制剂,可直接作用于表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR),通过抑制EGFR,切断细胞内的酪氨酸激酶磷酸化进程,进而达到抗肿瘤作用~([3])。临床主要用于治疗晚期非小细胞肺癌。本文就近年来厄洛替尼的临床应     

吉非替尼上调NKG2D配体表达增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性北大核心CSCD

目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼对人肺腺癌A549细胞NKG2D配体表达及NK细胞杀伤活性的影响及其分子机制。方法:MTT法测定吉非替尼对A549细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测吉非替尼、EGFR下游分子LY294002(PI3-K抑制剂)、SB203580(MAPK抑制剂)、STAT21(STAT3抑制剂)、Rottlerin(PKC抑制剂)作用A549细胞24小时后A549细胞NKG2D配体的表达。乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,NK细胞对吉非替尼作用前、后A549细胞的杀伤活性。结果:吉非替尼上调A549细胞MICB、ULBP1表达,增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性,EGFR下游分子MAPK、STAT3抑制剂不影响A549细胞NKG2D配体的表达,PI3-K抑制剂下调A549细胞MICA表达,PKC抑制剂上调ULBP1表达。结论:吉非替尼上调NKG2D配体表达增强A549细胞对NK细胞杀伤的敏感性。     

中国人非小细胞肺癌EGFR和K-RAS基因突变情况的研究

目的研究中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因和K-RAS基因突变情况。方法通过PCR扩增和基因测序的方法检测了101例中国人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLCs)EGFR第18、19和21外显子及K-RAS密码子12、13的突变情况,并观察分析了其突变与肺癌临床特征及吉非替尼(gefitinib,商品名:易瑞沙/Iressa)药物治疗肺癌的疗效间的关系。结果共检测到26例EGFR突变(25.7%),3例K-RAS突变(2.9%),并发现腺癌患者、非吸烟患者和女性患者EGFR突变率较高(分别为44.2%、65.7%和48.3%)。10例服用吉非替尼有效的患者9例伴有EGFR突变。结论中国人肺癌的EGFR突变率高于西方人,吉非替尼疗效与EGFR突变有关。     

吉非替尼抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的:观察吉非替尼对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的抑制作用。方法:将40只SPF级雌性BALB/c小鼠分为4组:对照组(气管滴入生理盐水)、单纯口服吉非替尼组(吉非替尼灌胃200 mg/kg)、纤维化组(气管滴入博莱霉素3 mg/kg)、纤维化吉非替尼干预组(气管滴入博莱霉素+吉非替尼灌胃20 mg/kg)。实验第14 d杀鼠取肺,左肺石蜡切片行HE染色与Masson染色,免疫组化检测总表皮生长因子受体(EGFR)及磷酸化EG-FR;取右肺检测羟脯氨酸含量。结果:纤维化吉非替尼干预组肺病理损伤较纤维化组减轻,气道上皮下胶原沉积及肺羟脯氨酸含量减少(P0.05),气道上皮及肺间质细胞磷酸化EGFR表达评分下降(P0.05)。单纯口服吉非替尼组小鼠气道上皮下未见明显胶原沉积,肺羟脯氨酸含量及磷酸化EGFR表达评分与对照组相比无显著差异(P0.05)。结论:吉非替尼灌胃能显著抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,大剂量(200 mg/kg)吉非替尼灌胃未引起明显肺纤维化。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体及其靶向治疗研究进展

非小细胞肺癌是目前全球最常见的恶性肿瘤之一,尽管手术治疗和化学治疗技术不断发展,但非小细胞肺癌患者生存率却没有明显改变。表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种受体型酪氨酸激酶,在非小细胞肺癌中有过表达,且与非小细胞肺癌的发生、发展、侵袭等方面密切相关,是最有前途的特异性肿瘤靶向治疗分子之一。此外,在非小细胞肺癌中常检测到EGFR基因突变,尤其是在女性、非吸烟者、肺腺癌和亚洲人种中,这与非小细胞肺癌患者对吉非替尼治疗的敏感性密切相关。     

人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞系PC-9/ER的建立及其特性

目的：构建厄洛替尼耐药人肺腺癌细胞模型PC-9/ER,观察单用人表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼或联合胰岛素样生长因子受体1(insulin-like growth factor receptor 1,IGF1R)酪氨酸激酶抑制剂苦鬼臼毒(picropodophyllotoxin,PPP)作用于该细胞后,该细胞对厄洛替尼耐药性的影响,并探讨耐药相关机制。方法：选择人肺腺癌细胞株PC-9,采用逐步递增厄洛替尼浓度的方法体外诱导构建耐药株PC-9/ER。CCK-8法检测耐药指数;细胞计数法绘制PC-9和PC-9/ER的生长曲线,并计算出两细胞系的倍增时间;流式细胞术检测两细胞系的细胞周期;Western Blot法检测p-EGFR及p-IGF1R的表达水平,并进一步检测厄洛替尼及PPP单独或联合作用于PC-9/ER后,各组Akt,ERK,p-Akt及p-ERK的表达水平。结果：PC-9/ER细胞株的耐药指数是72.3。细胞生长曲线显示,PC-9/ER细胞生长较亲代细胞慢,PC-9与PC-9/ER细胞的倍增时间分别为32.9及36.9 h (P=0.003)。与PC-9相比,PC-9/ER细胞的G1期细胞增多(P=0.001),而S期细胞则明显下降(P=0.015)。Western Blot结果表明,PC-9/ER细胞中p-IGF1R表达比亲代细胞明显增多(P=0.016),而p-EGFR无明显变化(P=0.152)。在亲代及耐药细胞系,厄洛替尼联合PPP组均较其他组更能显著的抑制细胞增殖(P<0.05);且Western Blot法表明联合用药组EGFR下游磷酸化的Akt、ERK的表达水平明显减少。结论：成功构建了人肺腺癌厄洛替尼耐药细胞株PC-9/ER,IGF1R通路可能与肺腺癌EGFR-TKI获得性耐药有关。     

厄罗替尼联合塞来昔布阻断EGFR和COX-2抑制肺癌A549细胞增殖

目的探讨厄罗替尼联合塞来昔布对肺腺癌A549细胞系凋亡、表皮生长因子受体(EGFR)和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法厄罗替尼、塞来昔布单独或联合干预细胞48 h后,倒置相差显微镜观察细胞形态;四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞抑制率;Hoechst33258法和TUNEL法检测细胞凋亡和流式细胞术检测细胞周期;免疫荧光检测EGFR和COX-2蛋白表达。结果厄罗替尼联合塞来昔布组相比单药组A549细胞明显出现大量颗粒和空泡,细胞变圆开始脱落;二者联合作用时抑制作用更强(P<0.05),厄罗替尼与塞来昔布均能诱导细胞凋亡,联合作用后细胞凋亡率更高(P<0.05),并使细胞发生明显的G1期阻滞(P<0.05),进一步下调了EGFR和COX-2蛋白的表达(P<0.05)。结论厄罗替尼与塞来昔布联合应用可协同介导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期及阻滞EGFR和COX-2信号途径。     

解读2011年IASLC/ATS/ERS肺腺癌国际多学科分类

自20世纪60年代以来,世界卫生组织(WHO)先后出版了1967、1981、1999和2004年肺癌组织学分类.前三次都是纯粹的形态学分类,2004年分类引入一些分子遗传学和临床资料,但对肺腺癌的组织学分型仍未形成一个普遍接受的诊断标准[1].自21世纪来,肺腺癌研究领域取得了巨大的进展,以EGFR基因突变为治疗靶点的小分子酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)如吉非替尼和埃罗替尼的使用,能明显改善肺腺癌患者的预后.检测EGFR基因突变也逐渐成为预测TKIs疗效和患者预后的常规手段.     

NSCLC患者多途径标本检测EGFR基因突变研究进展

表皮生长因子受体(EGFR)属受体酪氨酸激酶家族,调控细胞的增殖、分化、血管生成及凋亡,其信号通路与恶性肿瘤的增殖、侵袭及转移关系紧密。非小细胞肺癌(NSCLC)中发现EGFR酪氨酸激酶区常发生各种突变,这些突变和酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的疗效密切相关。因此,EGFR基因突变的检测是靶向药物EGFR-TKIs治疗有效的一个重要因素及预测指标。本文就NSCLC患者EGFR基因突变不同标本来源,如原发灶肿瘤组织、转移淋巴结组织、外周血、胸腔积液标本检测,做一介绍。     

表皮生长因子受体检测方法

表皮生长因子受体(EGFR)是一种受体型酪氨酸激酶,在多种肿瘤中都有过表达,并与肿瘤的发生、浸润、转移、预后及患者生存期密切相关.多种方法可用于检测组织、血液、细胞中EGFR蛋白表达及其酪氨酸激酶活性,EGFR的检测将有助于肿瘤的靶向治疗.     

非小细胞肺癌EGFR基因第19外显子突变的特征分析

吉非替尼(gefitinib)是针对肺癌表皮生长因子受体(epiddermal growth factor receptor,EGFR)设计的肿瘤靶向药物,已使众多的非小细胞肺癌(NSCLC)患者获益,但其疗效与EGFR基因突变相关[1-3].通过EGFR基因第19外显子可筛选gefitinib药物的最适合患者进行个体化治疗,提高疗效,减少盲目用药.我们检测了62例NSCLC患者的EGFR基因第19外显子突变,并分析突变DNA特征及氨基酸变化规律.     

三组HER-2双色探针不同杂交时间下检测乳腺癌临床样本

正人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)基因编码一种跨膜酪氨酸激酶受体,通过细胞间信号传导调节细胞生长、分化和增殖[1-3]。目前曲妥珠单抗(Trastuzumab)、拉帕替尼(Lapatinib)靶向治疗HER-2阳性的乳腺癌患者,因此正确快速检测、评定HER-2表达和基因扩增状态对乳腺癌临床治疗和预后判断至关重要。传     

阿帕替尼治疗胃癌及其他肿瘤的研究现状

转移性胃癌是一类生存期很短的致死性恶性肿瘤,目前有许多针对晚期胃癌靶向治疗的研究,但结果并不理想,仅仅有少数靶向药物可以改善胃癌预后,如曲妥珠单抗和雷莫芦单抗。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGF)与肿瘤发生发展密切相关,晚期胃癌患者中VEGF水平呈高表达,因此靶向VEGF被认为是胃癌治疗的新方向。在与血管生成相关的靶向药物中,阿帕替尼是一种靶向血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factors receptor, VEGFR2)的口服小分子受体酪氨酸激酶抑制剂,其口服生物利用度好并对胃癌有效。最新研究结果显示阿帕替尼作为三线方案可以改善胃癌患者生存结局,因此阿帕替尼很可能成为晚期胃癌治疗的关键药物。本文对阿帕替尼抗肿瘤机制、药代动力学、有效性及安全性、相关临床试验及最新研究进展简以综述。     

如何及早知道谁可受益于肿瘤目标疗法

据美国BIOCOMPARE科技新闻网(2007/11/27)报道,Cetuximab,商标名Erbitux,是一种上皮生长因子受体(epidermalgrowth factor receptor,EGFR)的阻断剂。研究显示,67%的大肠癌细胞膜上的表皮细胞生长因子接受器(EGFR)呈阳性。EGFR本身是位于细胞膜表面的一种蛋白质,属于酪氨酸激酶(     

以EGFR及其突变体为靶的肿瘤治疗

表皮生长因子受体 (EGFR)在许多肿瘤细胞中扩增、缺失和 /或突变。迄今为止 ,已发现三种不同的EGFR胞外区缺失突变体 ,即EGFRⅥ ,EGFRⅦ及EGFRⅧ型。EGFR及其突变体借助于信号传导使细胞生长失控和恶性化。因此 ,以其为靶的肿瘤治疗引起人们关注 ,并取得了一些令人瞩目的进展。如针对EGFR的特异性抗体、通过反义核苷酸阻断EGFRmRNA翻译、用酪氨酸激酶抑制子阻断EGFR酪氨酸激酶的活性 ,有效地阻断了癌变的演进。