Effect of high-fat diet on liver and placenta fatty infiltration in early onset preeclampsia-like mouse model

Background  Preeclampsia, especially early onset of preeclampsia (PE), is a common and serious disorder with high maternal and perinatal morbidity and mortality. Dietary factor is one of the most important factors which may affect the occurrence and development of the disease. The aim of this study is to investigate the effects of dietary factors on pathological changes of liver and placenta in preeclampsia-like mouse model by establishing the model at multiple stages of gestation.

Methods  Wild-type (WT) mice were injected subcutaneously with nitric oxide synthase (NOS) inhibitor L-arginine methyl ester (L-NAME, 50 mg×kg^–1×d^–1) to establish PE-like model (L-NAME group) at early-, mid-, and late- pregnant periods respectively; simultaneously, the control mice were injected with normal saline (NS group). All the groups were divided into subgroups, standard chow group (SC), and high-fat diet group (HF). ApoE^–/– pregnant mice served as a control group. Systolic blood pressure (SBP), urine protein, and histopathologic changes of placenta and liver in all groups were observed and statistically analyzed.

Results  In WT and apoE^–/– L-NAME subgroups, blood pressure and urine protein were significantly higher than those in all the gestational age matched NS groups (P <0.05). Compared to other groups, remarkable liver fatty infiltration and lipid storage in placenta were found in early- and mid-L-NAME subgroups in apoE^–/– mice (P <0.05), especially in the early- and mid-HF+L-NAME subgroups in apoE^–/– mice (P <0.05). More lipid storage droplets both in liver and placenta were found in ApoE^–/– mice than that of WT groups (P <0.05). Morphology histopathologic examination of placentas showed varying degrees of fibrinoid necrosis and villous interstitial edema in early- and mid-L-NAME both in HF and SC of apoE^–/– and WT subgroups compared to NS controls (P <0.05). But there was no significant difference between HF and SC subgroups (P >0.05), and no difference between apoE^–/–and WT groups (P >0.05).

Conclusions  Preeclampsia-like conditions could be induced by L-NAME in mice at different gestational stages. Both WT and apoE^–/– genotype mice with preeclampsia-like symptoms in early and mid stages of pregnancy presented lipid deposition in the placenta and hepatic fatty infiltration. To alter the environmental condition by feeding high-fat diet was harmful to the mother and the fetus. High-fat diet aggravated the impact of liver fatty infiltration at early and mid gestational stages especially in the apoE^–/– mouse model. These results further revealed the association between early-onset preeclampsia and the dysoxidation of fatty acids.

     

高脂饮食对早发子痫前期样改变孕鼠血脂和妊娠结局的影响

目的 探讨孕鼠早发子痫前期样改变时,高脂饮食对其血脂水平及妊娠结局的影响.方法 C57BL/6J野生型孕鼠皮下注射左硝基精氨酸甲酯建立早中晚不同时段发病的子痫前期样模型(L-NAME组),同时设立相应对照组皮下注射等量生理盐水(NS组).将以上各组孕鼠再分为高脂饲料亚组(HF,n=6)及标准饲料亚组(SC,n=6)饲喂.同法设立apoE-/-孕鼠作为各相应组的基因型对照.进行动物模型鉴定;于孕中、晚期进行标本采集.比较各组血脂水平和妊娠结局.结果 WT及apoE-/-早中期L-NAME组与相应NS组比较,血浆中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)游离脂肪酸(FFA)升高明显(P＜0.05),其中以早期L-NAME组升高尤为显著(P＜0.05);apoE-/-孕鼠(L-NAME 组及NS组)血浆中TG、TC含量明显高于WT各相应组(P＜0.05),而血中FFA含量差异不明显(P＞0.05);WT及apoE-/-HF亚组血脂水平比SC亚组有不同程度升高,其中以早期HF+L-NAME尤为明显(P＜0.05).WT及apoE-/-早、中期L-NAME组胎盘重量和胎仔重量明显低于相应NS组(P＜0.05),晚期L-NAME组胎盘重最和胎仔重量与相应NS组相比差异无统计学意义(P＞0.05);各apoE-/-组胎盘重量和胎仔重量比相应WT组低;WT及apoE-/-的HF亚组与相应SC亚组比较,胎盘重量和胎仔重量也有不同程度降低,以早期发病的HF+L-NAME组降低尤为明显(P＜0.05).活胎数及吸收胎数在apoE-/-及WT的L-NAME组与NS组间差异明显(P＜0.05),主要表现为早期L-NAME组活胎数降低,吸收胎数增加.结论 妊娠期受到不良因素影响越早,发生早发子痫前期样改变时对血脂及妊娠结局的影响越显著;饮食环境因素町以加重不良因素对血脂及妊娠结局的影响;apoE基因缺陷可引起更为不良的血脂水平变化及妊娠结局.     

重度子痫前期与长链脂肪酸氧化酶基因蛋白表达异常的相关性

目的 探讨重度子痫前期与参与长链脂肪酸氧化的长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)mRNA和蛋白表达异常的相关性.方法 通过体外无血清培养胎盘滋养细胞,然后分为4组,分别用正常妊娠孕妇(NP组)、早发型重度子痫前期(E-PE组)、晚发型重度子痫前期(L-PE组)、重度子痫前期伴发HELLP综合征(HEILP组)患者血清刺激胎盘滋养细胞.采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组LCHAD基因和蛋白的表达.结果 (1)LCHAD的mRNA表达变化:NP、E-PE、L-PE及HELLP组LCHAD mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、3.08±0.22、1.62±0.23、3.36±0.18.与NP组比较,E-PE、L-PE及HELLP组LCHAD的mRNA相对表达量均明显降低(P＜0.05);与L-PE组相比较,E-PE、HELLP组LCHAD的mRNA相对表达量也有明显降低(P＜0.05);而E-PE与HELLP组两组间LCHAD的mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).(2)LCHAD蛋白表达变化:NP、E-PE、L-PE及HELLP组LCHAD/β-肌动蛋白比率分别为4.94±0.02、2.93±0.13、4.14±0.06、2.80±0.09.与NP组比较,E-PE、L-PE及HELLP组LCHAD蛋白表达均明显降低(P＜0.05);E-PE、HELLP组LCHAD蛋白表达比L-PE组都有明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而E-PE与HELLP组两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 重度子痫前期对胎盘滋养细胞中LCHAD的基因蛋白表达异常存在一定的影响,其中以早发型重度子痫前期和HELLP综合征的影响更为明显.脂肪酸氧化与子痫前期发生发展的相互影响和作用机制值得深入探讨.

Abstract：

Objective To explore the correlation between severe preeclampsia and abnormal expression of long-chain 3-hyroxyacyl-CoA dehydrogenase (LCHAD). Methods Serum-free trophoblast cells cultured in vitro were divided into 4 groups under the stimulations of normal pregnancy serum ( NP group), early onset severe preeclampsia serum (E-PE group), late onset severe preeclampsia serum (L-PE group) and HELLP ( hemolysis, elevated liver enzymes & low platelets) syndrome serum ( HELLP group)respectively. The expressions of mRNA and protein of LCHAD in trophoblast cells were detected by real-time polymerase chain reaction (PCR) and Western blot. Result ( 1 ) Expression of LCHAD mRNA: the relative expressions of mRNA of LCHAD in NP, E-PE, L-PE and HELLP groups were 1.00 ±0.00, 3.08 ±0.22, 1.62 ± 0. 23 and 3.36 ± 0. 18 respectively. The relative expressions of LCHAD mRNA were significantly reduced in the E-PE, L-PE and HELLP groups versus the NP group ( P ＜ 0. 05 ). Compared with the L-PE group, the gene expressions of LCHAD significantly decreased in the E-PE and HELLP groups (P ＜0.05 ) while no significant difference was found between the E-PE and HELLP groups (P ＞ 0. 05 ).(2) Expression of LCHAD protein: the relative expressions of LCHAD protein were 4.94 ±0.02, 2.93 ±0. 13, 4. 14 ±0. 06 and 2.80 ±0.09 in the NP, E-PE, L-PE and HELLP groups respectively. The protein expressions of LCHAD were remarkably reduced in the E-PE, L-PE and HELLP groups versus the NP group (P ＜ 0.05 ). The expressions of LCHAD protein remarkably decreased in the E-PE and HELLP groups versus the L-PE group (P ＜0.05) while no significant difference was found between the E-PE and HELLP groups (P ＞ 0. 05 ). Conclusion Long chain fatty acid oxidation is involved in the pathogenesis and development of preeclampsia. The expressions of LCHAD gene and protein are remarkably affected by early onset severe preeclampsia and HELLP syndrome. The interacting mechanism and influence between fatty acid oxidation and the development of preeclampsia are worth further exploring.     

Long chain fatty acid oxidation defects in children: importance of detection and treatment options

Background  Mitochondrial β oxidation plays a major role in energy production. Long chain fatty acid oxidation defects include deficiency of the trifunctional protein (rare) or more commonly defects of the long chain 3-hydroxy acyl-CoA dehydrogenase enzyme (LCHAD). These long chain defects have variable presentations, they may present in the neonate or infant with sudden death, hepatopathy (Reyes disease), hypoketotic hypoglycaemia, rhabdomyolysis, myopathy, cardiomyopathy and with late complications such as peripheral neuropathy, pigmentary retinopathy, retinal degeneration and progressive visual loss. The correct diagnosis at presentation is not only life saving but also allows for the appropriate dietary and other intervention, which may have major effects on outcome. Aim  Three case reports of patients with long chain fatty acid oxidation defects who have shown significant benefits from treatment are reported. Conclusions  These paediatric presentations illustrate the clinical heterogeneity of long chain fatty acid oxidation defects and opportunities for effective management if correctly diagnosed.     

满药赤雹果水提取物镇痛作用与NO的关系

目的：探讨赤雹果水提取物（WEFTD）的镇痛作用机制。方法：采用小鼠浸尾法观察L-精氨酸（L-Arg）和左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）对WEFTD镇痛作用的影响,硝酸还原酶法测定血清和脑组织中-氧化氮（NO）的含量。结果：WEFTD2000mg/kg（生药6.2g/kg）组小鼠痛阈显著高于生理盐水（NS）对照组（P〈0.01）,L-Arg可部分拮抗WEFTD的镇痛作用（P〈0.01）;WEFTD2000mg/kg组小鼠血清和脑组织中NO的含量显著低于NS对照组（P〈0.01）,WEFTD＋L-Arg组NO含量高于WEFTD组（P〈0.01）。结论：WEFTD的镇痛作用机制与抑制过量NO的合成有关。     

脂肪酸氧化代谢异常、内皮细胞功能障碍及氧化应激在重度子痫前期发病中的相互作用

目的 探讨脂肪酸氧化代谢异常和内皮细胞功能障碍与氧化应激三者之间在重度子病前期发病机制中的相互作用.方法 采用免疫组织化学SP法,检测70例不同起病时间的重度子痫前期伴或不伴有肝损害患者的胎盘组织中长链L-3-羟酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)的蛋白表达,并与54例早、中、晚期正常妊娠绒毛和胎盘组织作比较.结果 正常妊娠和重度子痫前期胎盘组织均有LCHAD、TNF-α、VCAM-1和PPARγ的表达.LCHAD表达强度在发病孕周小于32周的重度子痫前期组与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中有肝损害患者的LCHAD表达强度降低更为明显[(8.2±2.5)积分A值及(17.3±4.5)积分A值].而发病孕周大于32孕周的重度子痫前期各组与对照组比较则无明显变化.不同发病孕周重度子痫前期组TNF-α表达强度较对照组均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);VCAM-1表达强度在发病为32～34孕周的重度子痈前期不伴肝功损害组以及发病为34孕周后的重度子痫前期组,较对照组均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).不同发病孕周的重度子痫前期组与对照组比较,PPARγ表达强度变化差异无统计学意义.发病孕周<32周和>32周的重度子痫前期患者,LCHAD、TNF-α、和VCAM-1、PPARγ4者之间无线性相关性.结论 脂肪酸氧化代谢异常可能与某些较早发生的重度子痫前期(发病孕周<32周)有一定关系,尤其是早发型伴有肝损害者,脂肪酸氧化代谢异常可能参与某些患者疾病的发生发展;LCHAD与TNF-α、VCAM-1、PPARγ之间可能存在着复杂的调节机制.     

不同月龄和血脂水平ApoE基因敲除小鼠体内类固醇激素合成急性调节蛋白的表达

 目的 检测不同月龄和不同血脂水平载脂蛋白E敲除小鼠体内类固醇激素合成急性调节蛋白（steroidogenic acute regulatory protein,StAR）的表达水平。方法 实验分别选取雄性和雌性1天龄新生鼠、1月龄、3月龄及5月龄载脂蛋白E敲除小鼠（apoE-/-）及对照C57BL/6J小鼠,每组6只,共16组。利用试剂盒检测不同年龄小鼠的血脂水平。利用实时定量RT-PCR及Western blot方法检测不同年龄和血脂水平下,小鼠肝脏中StAR基因和蛋白的表达。结果 相比同年龄同性别的正常对照小鼠,载脂蛋白E敲除小鼠血清中含较高水平的低密度脂蛋白（LDL）和较低水平的高密度脂蛋白（HDL）。在对照小鼠中,StAR基因和蛋白表达水平随月龄增加逐渐下降;但是在载脂蛋白E敲除小鼠体内,因为血脂水平的提高,StAR基因和蛋白表达水平呈现先增高后降低的趋势。结论 StAR通过调节脂质代谢,可作为一个有效调节动脉粥样硬化以及其他心血管疾病的调节因子。     

ACE2/Ang(1-7)对小鼠脂肪组织脂肪合成的影响

目的 探讨血管紧张素转化酶2（angiotensin-converting enzyme 2,ACE2）-血管紧张素（1-7）[angiotensin（1-7）,Ang（1-7）]对小鼠脂肪组织脂肪合成的影响。方法 选取雄性ACE2基因敲除模型小鼠及野生C57BL/6（wild-type,WT）对照小鼠,测体质量,计算体脂率,测定血清三酰甘油（triglycerides,TG）及总胆固醇（total cholesterol,TC）浓度,HE染色观察附睾脂肪细胞形态学变化,蛋白印记（Western blotting）法检测附睾脂肪组织脂肪合成因子乙酰辅酶A羧化酶α（acetyl-CoA carboxylase ɑ,ACCα）、脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）及脂肪型脂肪酸结合蛋白（adipocyte fatty acid binding protein,aP2）的表达。将雄性db/db小鼠采用数字表法随机分为3组,分别给予0.9%（质量分数）氯化钠注射液,Ang（1-7）,Ang（1-7）+A779[Ang（1-7）的拮抗剂]皮下泵入干预4周。测体质量,Western blotting法检测小鼠附睾脂肪组织脂肪合成因子蛋白的表达。结果 ACE2基因敲除小鼠体脂率及血TG浓度明显高于野生对照小鼠。Western blotting法检测结果表明ACE2基因敲除小鼠附睾脂肪组织脂肪合成因子ACCα及FAS蛋白表达明显高于野生对照组。应用Ang（1-7）干预2型糖尿病db/db小鼠显著抑制其附睾脂肪组织脂肪合成因子ACCα及FAS蛋白表达,而应用Ang（1-7）拮抗剂A779拮抗了这一作用。结论 ACE2/Ang（1-7）抑制白色脂肪合成,其机制可能是通过抑制脂肪合成相关因子的表达发挥作用。6     

七氟醚与氯胺酮合用对小鼠的镇痛催眠作用

目的观察七氟醚（svoflurance,Sev）与氯胺酮（ketamine,KT）合用对小鼠的镇痛、催眠作用。方法120只小鼠随机分为3大组（n=40）,每大组再随机分为4小组（n=10）：生理盐水组（NS组）、七氟醚组（Sev组）、氯胺酮组（KT组）、七氟醚和氯胺酮合用组（Sev＋KT组）。通过热板法和扭体法、催眠实验观察小鼠给药后的热板痛阈值（pain threshold in hot-plate test,HPPT）和扭体次数（writhing times,WT）、睡眠潜伏期和睡眠时间（sleeping time,ST）的变化。结果七氟醚与氯胺酮合用能增大HPPT,减少WT,缩短睡眠潜伏期,延长ST。结论七氟醚与氯胺酮合用对小鼠能产生协同镇痛及催眠作用。     

正常妊娠及老化胎盘组织中PCNA蛋白表达的研究

目的通过检测增殖蛋白PCNA在正常妊娠各期和老化胎盘中的表达,探讨其在胎盘发育过程中的功能。方法采取免疫组化法取妊娠各期胎盘组织共42例,检测PCNA蛋白的表达。结果（1）PCNA的表达主要定位在细胞滋养细胞,在合体滋养细胞中呈阴性表达。（2）PCNA在早、中、晚期胎盘组织阳性表达率无统计学意义（P〉0.05）,表达强度早、中期无显著差别;中、晚期有显著差异（P〈0.05）;早、晚期有极显著差异（P〈0.01）;老化组与正常妊娠晚期组胎盘中PCNA表达阳性率之间无显著差异（P〉0.05）,表达强度亦无显著差别（P〉0.05）。结论（1）PCNA在妊娠早期、中期表达强度高,说明滋养细胞处于高增殖状态。（2）PCNA随妊娠进展表达下调,提示与胎盘老化和分娩发动有关。     

吗啡预处理的晚期心肌保护作用及其与诱导型一氧化氮合酶的关系

目的　探讨吗啡预处理的晚期心肌保护作用以及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在此过程中的作用。方法　建立在体小鼠冠状动脉阻断的心肌缺血再灌注模型。吗啡预处理 2 4h后 ,小鼠心肌缺血 4 5min ,再灌注 12 0min。用氯化三苯四唑 ( 2 ,3,5 triphenyltetrazoliumchloride ,TTC)染色确定梗死心肌范围。心肌梗死范围以梗死心肌 (IS)占缺血区心肌 (AAR)的重量百分比表示。并观察选择性iNOS抑制剂 (S methylthioureasulfate ,SMT)和iNOS基因敲除对吗啡预处理心肌保护作用的影响。结果　缺血再灌注后野生对照组IS/AAR为 4 3%± 5 % ,2 4h前给予吗啡可以使IS/AAR显著降低至 2 2 %± 4 % (P <0 0 5 )。吗啡预处理后再给予SMT可以取消吗啡的心肌保护作用。吗啡预处理对iNOS基因敲除小鼠完全没有心肌保护作用。结论　吗啡预处理具有晚期心肌保护作用。iNOS介导了吗啡预处理的晚期心肌保护作用     

KLF9基因腺病毒载体的构建及其脂肪酸氧化功能

目的:构建Krüppel样转录因子9（KLF9）过表达的腺病毒，初步探讨KLF9在肝脏脂肪酸氧化中的功能。方法:根据分子克隆的原理，构建融合表达3×Flag的KLF9过表达的腺病毒，并在293A细胞中验证KLF9腺病毒感染效率。将融合表达3×Flag的KLF9过表达的腺病毒分别感染肝原代细胞、正常饮食小鼠以及高脂小鼠，通过Q-PCR检测过氧化物酶体增殖物活化受体-γ协同刺激因子PGC 1-α等脂肪酸氧化相关基因的表达情况。结果:Q-PCR以及 Western blot 结果证明融合表达3×Flag的KLF9过表达腺病毒载体包装成功，通过荧光显微镜观察到感染效率达90%以上。经Q-PCR检测，感染Ad-KLF9的肝原代细胞和肝脏组织中，PGC1-α等脂肪酸氧化相关基因表达明显高于对照组。结论:初步认定KLF9可促进脂肪酸氧化，改善高脂诱导的非酒精性脂肪肝。     

促黑素促进骨骼肌细胞脂肪酸氧化中cAMP的作用

目的： 探讨骨胳肌细胞中环磷酸腺苷（cAMP）对脂肪酸氧化的影响,阐明促黑素（α-MSH）对脂肪酸氧化影响的作用机制。方法：采用α-MSH、cAMP类似物Bt2cAMP、8-BrcAMP和cAMP拮抗剂分别处理体外培养的原代骨骼肌细胞(PMC)和C2C12成肌细胞,分为α-MSH组、cAMP类似物组、cAMP拮抗剂加α-MSH组,同时设正常对照组,利用（9,10-3H）棕榈酸生成3H2O的方法测定脂肪酸氧化。RT-PCR法测定PMC和C2C12成肌细胞黑皮质素受体（MCR）的表达。结果：α-MSH组和cAMP类似物组与对照组比较脂肪酸氧化显著增加（P<0.05）;cAMP拮抗剂RpcAMP预处理组细胞脂肪酸氧化率明显降低,与对照组比较差异无显著性（P>0.05）,与α-MSH组比较差异有显著性（P<0.05）。结论： α-MSH和cAMP类似物显著增加了脂肪酸氧化,α-MSH可能与MCR结合通过cAMP信号传导通路促进骨骼肌细胞的脂肪酸氧化。     

一氧化氮对高热惊厥大鼠海马血红素氧合酶/一氧化碳体系的影响

目的　研究一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω硝基L 精氨酸甲酯(L-NAME)对反复高热惊厥(FS)大鼠海马血红素氧合酶1(HO- 1)mRNA和蛋白表达及一氧化碳(CO)含量的影响,以探讨一氧化氮(NO)对HO/CO体系的调节作用。方法　采用热水浴诱导大鼠FS。将发育期大鼠随机分为3组:对照组,FS组和FS+L- NAME组。分光光度计间接测定血浆NO和CO含量;核酸原位杂交法检测海马神经元HO- 1mRNA表达;Western印迹方法检测海马神经元HO -1蛋白含量。结果　与对照组比较,反复FS后海马神经元HO -1mRNA表达明显增高,HO -1蛋白含量升高208% (P<0 .01),血浆CO含量增高94 .57% (P<0. 01)。用L NAME干预FS,血浆NO含量下降13 79% (P<0. 05),海马HO 1mRNA表达明显下降,HO .1蛋白表达下降30 .19% (P<0 .01),血浆CO含量下降16 14% (P<0. 05)。结论　反复FS时,外源性给予NOS抑制剂可降低NO含量,同时引起HO 1的基因表达及CO含量下降。     

脂蛋白脂肪酶基因敲除小鼠糖脂代谢与脂肪组织内质网应激研究

目的研究脂蛋白脂肪酶(LPL)基因敲除小鼠糖脂代谢特点及脂肪组织内质网应激情况。方法以LPL基因敲除杂合子小鼠(LPL+/-组,n=8)和野生型(WT)C57小鼠(对照组,n=8)作为实验对象,两组再分为16周龄组(n=4)和50周龄组(n=4)。测定血清三酰甘油(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平;腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)监测血糖变化,计算葡萄糖曲线下面积(AUCg)和稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),评价胰岛素敏感性及胰岛β细胞功能;采用Real-Time PCR技术检测皮下脂肪和内脏脂肪组织中内质网应激相关因子(Bip、ATF4、ATF6和CHOP)的表达。结果 50周龄LPL+/-组小鼠血清TG和FFA水平均显著高于50周龄对照组小鼠,血清FFA水平明显高于16周龄LPL+/-组小鼠(P<0.05)。IPGTT结果显示:50周龄LPL+/-组小鼠IPGTT30、60 min血糖及AUCg均显著高于50周龄对照组(P<0.05),且IPGTT15～120 min血糖和AUCg均显著高于16周龄LPL+/-组(P<0.05)。与16周龄LPL+/-组比较,50周龄LPL+/-组小鼠HOM...     

NO合酶抑制剂在多巴胺抑制小鼠胃肠推进运动中的作用

目的 研究一氧化氮（ＮＯ）合酶抑制剂Ｌ－ＮＧ－硝基粗氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）在多巴胺对小鼠胃肠运动影响中的作用。方法 将３２只小鼠随机分为３组;姐,静脉注生理盐水：Ａ组静脉注射多巴胺;Ｂ组静脉分别注射不同剂量的Ｌ－ＮＡＭＥ,１０ｍｉｎ后分别静脉注射多巴胺。采用含１２％活性炭和４％黄芪胶的炭末胶液灌胃,计算２０ｍｉｎ炭末胶液在小肠内推进距离占小肠全长的百分比,以此作为小肠推进速度的指标,同时测定灌胃     

EFFECTS OF NITRIC OXIDE ON REPERFUSION INJURY FOLLOWING PANCREATICODUODENAL TRANSPLANTATION IN RATS

NITRIC oxide(NO ) isa potentvasodilatofrormswhen L-arginine(L-Arg)isconvertedtoL-Citrul-lineby theactionofNO synthase(NOS ),and pla-ysa major roleinmicrocirculatorhyomeostasis.1 NO isalsoa diffusiblientercellulmaerssenger moleculethatdoes notrequirespecialmembrane carrier,sand a highlyreactivseub-stancewitha veryshorthalf-lifdeue toitschemicalinstabi-lityas a radicalspecies.2,3 Posttransplantatipoanncreatitisand graftthrombosisaretwo majorcomplicationosf pancreastransplantatiocnontribut…     

鞘内注射SAHA对M型瞬时受体电位通道2介导小鼠慢性炎性痛的影响

目的 探讨鞘内注射辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对M型瞬时受体电位通道2(TRPM2)介导小鼠慢性炎性痛的影响.方法 将雄性野生型(WT)小鼠和TRPM2-/-小鼠各32只,按随机对照原则分为8组:WT对照组(WT CON组)、WT溶媒组(WT DMSO组)、WT炎性痛组(WT CFA组)、WT炎性痛+SAHA组(WT SAHA组)、TRPM2-/-对照组(TRPM2-/-CON组)、TRPM2-溶媒组(TRPM2-/-DM-SO组)、TRPM2-/-炎性痛组(TRPM2-/-CFA组)、TR-PM2-/-炎性痛+SAHA组(TRPM2-/-SAHA组),每组8只.采用完全弗氏佐剂(CFA)40μl于小鼠左后肢足底皮下注射建立慢性炎性痛模型,WT和TRPM2-/-的SAHA组于造模后3～9d行为学测试后鞘内注射50 mg/kg的SAHA,WTCON组、WT CFA组、TRPM2-/-CON组、TRPM2-/-CFA组4组注射等量生理盐水.WT和TRPM2-/-的DMSO组鞘内注射与SAHA等体积的DMSO.分别测定小鼠的机械刺激伤害感受阈、辐射热刺激伤害感受阈及足爪的肿胀度.结果 TRPM2-/-小鼠在未造模前表现出正常的疼痛行为学反应,与WT小鼠差异无统计学意义.WT和TRPM2-/-小鼠鞘内注射DMSO,其疼痛行为学指标与未注射前差异无统计学意义.WTCFA组的机械刺激伤害感受阈值和热刺激伤害感受阈值均明显低于WT CON组(P ＜0.001),WT SAHA组在给予SAHA干预后,各种疼痛阈值显著升高,与WTCFA组比较差异有统计学意义(P ＜0.001);TRPM2-/-CFA组机械刺激伤害感受阈值和辐射热刺激伤害感受阈值均明显高于WT CFA组,与TRPM2-/-SAHA组比较差异无统计学意义.WT CFA组足爪肿胀度造模后明显升高,与WTCON组、WT SAHA组比较均差异有统计学意义(P＜0.001);TRPM2-/-CFA组足爪肿胀度明显低于WT CFA组(P ＜0.001),与TRPM2-/-SAHA比较差异无统计学意义.结论 TRPM2参与小鼠慢性炎性痛的发生发展,鞘内注射SAHA可能改善TRPM2介导的慢性炎性痛.     

肝硬化自发性腹膜炎患者血浆、腹水内毒素和一氧化氮检测及其意义

目的探讨肝硬化腹水患者血浆、腹水中内毒素（LPS）和一氧化氮（NO）水平及其与自发性细菌性腹膜炎（SBP）的关系。方法采用鲎试剂三肽显色基质偶氮法及硝酸还原酶法检测30例正常入的血浆、42例肝硬化腹水患者血浆、腹水LPS和NO水平。结果无论有无合并SBP，肝硬化患者的血浆LPS、NO水平均明显高于对照组（P〈0．01），而合并有SBP组的血浆及腹水内毒素和NO水平明显高于未合并SBP组（P〈0．01）。结论检测血浆及腹水中的LPS和NO水平有助于早期诊断SBP，对指导临床治疗以及判断疗效有一定作用。