曲前列环素通过下调Erk磷酸化水平抑制血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

目的: 探讨曲前列环素(Trep)对血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PAMSCs)增殖的影响及其潜在的机制。方法: 体外培养大鼠PASMCs,实验分2阶段进行。第1阶段将细胞分为4组：对照组、PD98059(Erk磷酸化抑制剂)组、PDGF组和PDGF+ PD98059组;第2阶段也分为4组：对照组、Trep组、PDGF组和PDGF+Trep组。PD98059组用50 μmol·L-1 PD98059处理,Trep组用5 μmol·L-1 Trep处理,PDGF组均用20 μg·L-1 PDGF处理, PDGF+PD98059组用50 μmol·L-1 PD98059+20 μg·L-1 PDGF共处理,PDGF+Trep组用5 μmol·L-1 Trep和20 μg·L-1 PDGF共处理。24 h后光镜下观察细胞形态;MTT法测定PAMSCs增殖活性;蛋白质印迹法测定各组细胞内增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、p-Erk1/2及t-Erk1/2蛋白的相对表达量,并计算p-Erk/t-Erk比值。结果： 第1阶段：PDGF组细胞密度、细胞增殖活性、PCNA表达量及p-Erk/t-Erk比值均明显高于对照组(P均<0.05);PDGF+ PD98059组细胞增殖活性、PCNA表达量及p-Erk/t-Erk比值明显低于PDGF组(P均<0.05)。第2阶段：PDGF组细胞密度、细胞增殖活性、细胞内PCNA表达量及p-Erk/t-Erk比值明显高于高于对照组;PDGF+Trep组细胞密度、细胞增殖活性、PCNA表达量及p-Erk/t-Erk比值明显低于PDGF组(P<0.05)。结论： 曲前列环素通过可抑制血小板衍生生长因子诱导的大鼠PASMCs增殖,与下调Erk1/2磷酸化水平有关。     

Sildenafil potentiates the proliferative effect of porcine pulmonary artery smooth muscle cells induced by serotonin in vitro

Background  Sildenafil is one of the selective phosphodiesterase 5 inhibitors that has been proven by many investigators to suppress growth factor stimulated (e.g. platelet-derived growth factor (PDGF) or epidermal growth factor (EGF)) proliferation and hypertrophy of pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs) via cGMP/cGKIα pathway. Serotonin promotes cell cycle progression leading to cell mitogenesis and plays a key role in the pathogenesis of pulmonary artery hypertension. The role of sildenafil in proliferation of PASMCs induced by serotonin has not been investigated so far. In this study we explored the underlying mechanism of the effect of sildenafil on serotonin induced proliferation of porcine PASMCs.

Methods  PASMCs were cells from primary cultures by the explant method from the pulmonary artery of swine and cells at passage 3–5 were used in this study. MTT colorimetric assay and flow cytometry analysis were used to evaluate the cell proliferation and alterations in cell cycle progression respectively. Western blotting analysis was applied to determine the expression of phosphorylated extracellular signal-regulated kinase (ERK), proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and mitogen activated protein kinase (MAPK) phosphatase-1 (MKP-1).

Results  Serotonin (10 μmol/L) induced the upregulation of phosphorylation of ERK1/ERK2 and PCNA, an increase in the percentage of cells in S phase and subsequent cell proliferation. Pretreatment with 1 μmol/L sildenafil potentiated the phosphorylation of ERK1/ERK2, an increase in the percentage of cells in S phase and cell proliferation, compared with serotonin stimulation alone (P <0.05). Furthermore, 30-minute pretreatment with 10 μmol/L U0126, specific antagonist for ERK kinase (MEK) prevented the increase in phosphorylation of ERK1/ERK2 and abolished cell cycle progression and the proliferation of PASMCs induced by sildenafil.

Conclusion  This study shows that sildenafil potentiated the proliferative effect of serotonin on PASMCs via phosphorylation of ERK1/ERK2.

     

Astragaloside Ⅳ inhibited hypoxia-enhanced proliferation and migration of human pulmonary arterial smooth muscle cells through modulating Wnt/β-catenin signaling pathway

Objective This study aims to determine the effects of astragaloside Ⅳ (AS-Ⅳ) treatment on the viability, proliferation and migration of hypoxia-stimulated human pulmonary arterial smooth muscle cells (PASMCs), and to explore the underlying molecular mechanisms. Methods The mRNA and protein expression levels of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were determined qRT-PCR and Western blot assays, respectively. Cell viability and cell proliferation were determined by CCK-8 and 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) cell proliferation assays, respectively. The cell migration was determined by Transwell migration assay. Results Hypoxia stimulation up-regulated the mRNA and protein expression of PCNA in PASMCs (P<0.05); hypoxia stimulation significantly promoted PASMC viability and proliferation (P<0.05), and also increased the migration of PASMCs (P<0.05). AS - Ⅳ concentration-dependently down-regulated the mRNA expression and protein expression of PCNA (P<0.05), inhibited the viability, proliferation and migration of PASMCs under hypoxia (P<0.05). Hypoxia stimulation activated the Wnt/β-catenin signaling in PASMCs; while AS-Ⅳ concentration-dependently repressed the Wnt/βcatenin signaling in the hypoxia-stimulated PASMCs (P<0.05). Moreover, the treatment of XAV393, a Wnt/β - catenin inhibitor, attenuated the hypoxia-induced increase in the viability, proliferation and migration of PASMCs (P<0.05). The treatment of LiCl, a Wnt/β - catenin activator, restored the mRNA and protein expression levels of PCNA in the hypoxia-stimulated PASMCs with AS-Ⅳ treatment (P<0.05). The inhibitory effects of AS-Ⅳ treatment on the viability, proliferation and migration of PASMCs under hypoxia was attenuated by LiCl treatment (P<0.05). Conclusion Our results indicate that AS-Ⅳ reversed hypoxia-induced proliferation and migration of human pulmonary artery smooth muscle cells, which may be by regulating the Wnt/β-catenin signaling pathway. © 2022 China Tropical Medicine. All rights reserved.     

RG50864对PDGF诱导的PASMC DNA含量及增殖细胞核抗原表达的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）ＤＮＡ含量及增殖细胞核抗原表达的影响。方法：应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果：与对照组相比,ＲＧ５０８６４处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数（Ｐ＜０．００１）,增加ＰＡＳＭＣ生长周期中的Ｇ０／Ｇ１期的ＤＮＡ百分含量,抑制Ｓ期及Ｇ２Ｍ期ＤＮＡ百分含量（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．００１）。结论：ＲＧ５０８６４可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达,抑制ＰＡＳＭＣ周期Ｓ期及Ｇ２Ｍ期ＤＮＡ百分含量,阻止ＰＡＳＭＣ周期由Ｇ０／Ｇ１向ＤＮＡ合成的Ｓ期及Ｇ２Ｍ期转化。     

衰老和缺氧对培养大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨衰老及缺氧对体外培养的肺动脉平滑肌(PASMCs)增殖的影响。方法将细胞分为年轻常氧组、老年常氧组、年轻缺氧组、老年缺氧组,应用MTT比色法、3H-TdR掺入法、流式细胞术、免疫组化方法检查细胞的增殖情况。结果同年轻组比较,老年组PASMCs的生长曲线明显抬高,3H-TdR掺入明显增加,进入有丝分裂期的细胞比例明显增加,总蛋白量减少,增殖细胞核抗原(PCNA)增加;同常氧组比较,缺氧组PASMCs的生长曲线明显抬高,3H-TdR掺入先受抑制,后明显增加,进入有丝分裂期的细胞比例明显增加,总蛋白量减少,PCNA增加。结论衰老和缺氧部能直接刺激平滑肌细胞的增殖,衰老的平滑肌细胞受缺氧刺激增殖最为明显。     

肺动脉平滑肌细胞增殖的分子信号机制研究进展

肺动脉高压是一种常见的临床综合征,以肺动脉压力升高为特征,其病理机制主要包括肺动脉血管收缩、原位血栓形成及
肺血管重塑。肺动脉平滑肌细胞是构成肺动脉血管重塑的主要病理基础。因此,探讨肺动脉平滑肌细胞增殖的分子机制并进
行相关干预研究,是治疗肺动脉高压的关键策略。本文综述了与肺动脉平滑肌细胞增殖有关的主要分子信号通路。
     

ERK信号转导通路与PDGF-B对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)和ERK受体阻断剂在PDGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖中的作用。方法健康SD大鼠90只,随机分为5组(正常对照组、单纯损伤组、AG组、PD组、AG+PD组),建立大鼠主动脉球囊损伤模型,利用相应的受体阻断剂Tyrphosin-AG1295和PD98059分别或联合阻断PDGF和ERK受体,于术后7、14及21 d 3个时相点取主动脉进行HE染色,观察PDGF和ERK受体阻滞剂对新生内膜增生的影响;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测PDGF-B mRNA和ERK1 mRNA在血管中的表达变化;免疫组化技术检测血管平滑肌细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;观察各组中PDGF和ERK受体对PCNA表达的影响。结果单纯损伤组及各干预组PDGF-B mRNA在各时相点的表达差异无统计学意义(P>0.05);单纯损伤组血管平滑肌细胞PCNA的表达明显增强,各干预组与单纯损伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但各干预组间PCNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDGF和ERK受体阻断剂能降低大鼠动脉平滑肌细胞增殖,ERK信号转导通路可能参与了PDGF诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖。     

衰老和缺氧对培养大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨衰老及缺氧对体外培养的肺动脉平滑肌(PASMCs)增殖的影响。方法 将细胞分为年轻常氧组、老年常氧组、年轻缺氧组、老年缺氧组。应用MTT比色法、^3H-TdR掺入法、流式细胞术、免疫组化方法检查细胞的增殖情况。结果 同年轻组比较，老年组PASMCs的生长曲线明显抬高，^3H-TdR掺入明显增加，进入有丝分裂期的细胞比例明显增加，总蛋白量减少，增殖细胞核抗原(PCNA)增加；同常氧组比较，缺氧组PASMCs的生长曲线明显抬高。^3H-TdR掺入先受抑制，后明显增加，进入有丝分裂期的细胞比例明显增加，总蛋白量减少，PCNA增加。结论 衰老和缺氧部能直接刺激平滑肌细胞的增殖．衰老的平滑肌细胞受缺氧刺激增殖最为明显。     

醛糖还原酶抑制剂影响PDGF-BB促系膜细胞增殖作用的机制研究

目的探讨醛糖还原酶抑制剂（ARI）影响血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）促体外培养大鼠系膜细胞（MsC）增殖作用的机制。方法用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,对比PDGF-BB刺激MsC生长速度与MAPK3条信号通路（ERK、JNK及p38）抑制剂及PI3K信号通路抑制剂对PDGF促MsC增殖作用的影响。用半定量RT-PCR检测醛糖还原酶抑制剂（ARI）对MsC合成内源性PDGF-B链的影响。蛋白印迹法观察ARI对PDGF引起的信号通路磷酸化的影响。结果（1）ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SP600125及PI3K抑制剂LY294002能明显抑制PDGF对MsC的促增殖作用（P〈0.05）,而p38抑制剂SB203580不能抑制PDGF的促MsC增殖作用;（2）ARI在转录水平对MsC合成内源性PDGF-B链没有明显影响。（3）PDGF刺激MsC后引起ERK、JNK及PI3K/Akt信号通路的磷酸化,而ARI仅能抑制JNK及PI3K/Akt两条信号通路的磷酸化（P〈0.05）,对ERK信号通路的磷酸化没有明显影响。结论ARI部分抑制PDGF促MsC增殖作用可能与其影响JNK和PI3K/Akt信号通路活化有关。     

RG50864对血小板衍生生长因子诱导的肺动脉平滑肌细胞DNA含量及增殖细胞核抗原表达的影响

为研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４ 对血小板衍生生长因子 （ＰＤＧＦ） 诱导的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ） ＤＮＡ 含量及增殖细胞核抗原表达的影响, 应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞, 用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４ 对ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣＤＮＡ百分含量及增殖细胞核抗原的变化。结果表明： 与对照组相比, ＲＧ５０８６４ 处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达的荧光强度及荧光指数 （Ｐ＜ ０．０１）, 增加ＰＡＳＭＣ生长周期中的Ｇ０／Ｇ１ 期的ＤＮＡ百分含量, 抑制Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期的ＤＮＡ 百分含量 （Ｐ＜ ０．０１）。ＲＧ５０８６４ 可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的ＰＡＳＭＣ增殖细胞核抗原表达,抑制ＰＡＳＭＣ周期Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期ＤＮＡ 百分含量,阻止ＰＡＳＭＣ周期由Ｇ０／Ｇ１ 期向ＤＮＡ合成的Ｓ期及Ｇ２Ｍ 期转化     

法舒地尔对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的:观察法舒地尔对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,探讨其作用机制.方法:用0.1%的Ⅰ型胶原酶消化分离HUVECs,加入内皮细胞完全培养基中培养,采用胰蛋白酶进行消化传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态并进行免疫组织化学鉴定.将HUVECs随机分为对照组(内皮细胞培养基培养)、LPS组(内皮细胞培养基+0.1 μg/mL LPS)和法舒地尔组(内皮细胞培养基+0.1 μg/mL LPS+3.275 μg/mL法舒地尔),Western blot法检测RhoA、ROCK2、p-ERM蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测RhoA、ROCK2和p-ERM mRNA表达量.结果:原代培养的内皮细胞在接种后24 h后完全贴壁生长,第3天融合呈铺路石样镶嵌排列,免疫组织化学检测可见第Ⅷ因子相关抗原阳性反应,证实为内皮细胞.LPS组RhoA、ROCK2和p-ERM蛋白及基因表达水平均显著高于对照组(P<0.01);而法舒地尔组ROCK2和p-ERM蛋白及基因表达均低于LPS组(P<0.05~P<0.01),但2组RhoA蛋白和基因表达水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论:Rho/ROCK/ERM通路在LPS诱导的HUVECs细胞骨架改变中起重要作用,法舒地尔可拮抗LPS诱导的骨架蛋白重排等HUVECs损伤,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路活化有关.     

辛伐他汀调控RhoA对血管平滑肌细胞增殖与迁移及纤溶活性的影响

目的:探讨不同浓度辛伐他汀调控小G蛋白RhoA及下游激酶ROCK信号对人主动脉血管平滑肌细胞(HAVSMCs)增殖和迁移,以及组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响及作用机制。方法:应用不同浓度Simvastatin(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)处理HAVSMCs,CCK-8法和"划痕实验"分别检查细胞增殖和迁移能力,RT-qPCR检测RhoA mRNA及下游ROCK mRNA表达,应用RT-qPCR和ELISA检测纤溶活性相关t-PA/PAI-1mRNA及蛋白活性变化。结果:辛伐他汀呈浓度依赖性显著抑制HUASMCs的增殖和迁移能力。辛伐他汀能够显著抑制RhoA/ROCK信号途径,诱导PAI-1 mRNA表达下调从而抑制蛋白分泌表达,同时上调t-PA mRNA表达从而增加蛋白分泌表达,以10μmol/L辛伐他汀组处理24 h效果最为显著。结论:辛伐他汀呈浓度时间依赖性抑制RhoA/ROCK信号途径,并且上调t PA以及下调PAI-1基因转录及蛋白表达,从而促进纤溶,抑制细胞增殖和迁移。     

PDGF在低氧内皮细胞条件培养基促猪肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

为了探索低氧条件下猪肺动脉内皮细胞 (PAEC)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖调控关系 ,应用MTT比色法 ,DNA荧光测定法观察了外源性 PDGF促 PASMC增殖作用 ,以及 Suram in抑制 PDGF促增殖作用的效应 ,并在此基础上研究了猪肺动脉内皮细胞条件培养基 (HECCM)中 PDGF促 PASMC增殖的作用。结果表明 ,HECCM促 PASMC增殖作用的效应可被 Suramin部分抑制 ,由此证明 ,PDGF是低氧刺激 PAEC产生的一种促 PASMC增殖的重要因子。     

缓激肽对PDGF诱导的肾小球系膜细胞增殖的影响

[目的]探讨缓激肽（bradykinin,BK）对血小板源生长因子（PDGF）诱导的系膜细胞增殖的影响及与ERK信号途径相关性。[方法]BK预孵系膜细胞,采用PDGF-BB刺激系膜细胞,应用MTT法测细胞增殖,ELISA法测Ⅳ型胶原,应用Western法检测ERK蛋白表达,并应用BK受体特异性阻断剂HOE-140进一步研究BK对ERK通路的作用。[结果]（1）BK抑制PDGF所致的系膜细胞增殖,与单用PDGF-BB组比较差异有非常显著性意义（P〈0.05）。（2）BK抑制PDGF-BB所致系膜细胞Ⅳ型胶原分泌,与单用PDGF-BB组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。（3）BK抑制PDGF-BB所致的系膜细胞ERK1/2磷酸化表达,与单用PDGF-BB组比较差异有显著性意义（P〈0.01）,HOE-140能阻断BK对于PDGF-BB/ERK1/2途径磷酸化的抑制作用。[结论]BK抑制PDGF诱导的系膜细胞增殖及细胞外基质分泌,该作用可能是通过抑制PDGF诱导的ERK1/2途径激活实现。     

The Effect of Erigeron Breviscapus on Proliferation of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells in Hypoxic Porcines

Erigeron breviscapus can relax microarteries,improve microcirculation,increase tissue bloodstream,enhance heart function and decrease bloodviscosity.Presently,good curative effects on is-chemia has been achieved,but few studies have beenconducted on the treatment of hypoxic pulmonaryhypertension( HPH) .In this study,MTT and ex-pression of PCNA was used to examine the prolifera-tion of PASMC and investigate the mechanism of ef-fectof EB on HPH.1　 MATERIALSAND METHODS1 .1　 Cult…     

异钩藤碱抑制PDGF-BB诱导肺动脉平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 探讨异钩藤碱对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法 建立PDGF-BB诱导的PASMCs增殖模型,通过MTT比色法和台盼蓝拒染法检测异钩藤碱对PASMCs增殖的影响及细胞毒性,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达及血小板源性生长因子受体β(PDGF-Rβ)信号通路蛋白表达及磷酸化的影响。结果 与正常对照相比,加入PDGF-BB(20 ng/mL)培养24 h,可促进PASMCs增殖约2.5倍;异钩藤碱剂量依赖性地抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖;异钩藤碱(25 μmol/L)明显抑制PDGF-BB诱导的S期细胞比例升高;Western blotting结果显示,异钩藤碱可抑制PDGF-BB诱导的cyclin D1、CDK6的表达和p27^kip1的降解,下调PDGF-Rβ及其下游信号分子AKT、糖原合成激酶(GSK)3β的磷酸化。结论 异钩藤碱通过将细胞周期阻滞于G₀/G₁期来抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增殖,其机制可能为通过抑制PDGF-Rβ及其下游信号通路的磷酸化、进而调节细胞周期相关蛋白的合成和降解来实现。     

法舒地尔阻断ROCK1触发C2C12成肌细胞呼吸功能异常介导的肌肉萎缩

目的 明确法舒地尔(fasudil)能否阻断Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)激活导致的C2C12成肌细胞呼吸功能异常介导的肌肉萎缩.方法 体外培养C2C12成肌细胞,给予2％的马血清诱导分化为成熟肌小管细胞.然后根据给予不同处理将其分成4组:Ad-GFP组,仅感染GFP腺病毒载体;Ad-RCCK1组,感染ROCK1腺病毒载体诱导细胞过表达ROCK1;Ad-GFPF组,感染GFP腺病毒载体,并给予10μmol/L法舒地尔刺激;Ad-ROCK1F组,感染ROCK1腺病毒载体诱导细胞过表达ROCK1,并给予10 μmol/L法舒地尔刺激.通过Seahorse能量代谢分析仪评估不同刺激条件下C2C12成肌细胞的细胞耗氧率(OCR)及胞外酸化率(ECAR),以明确ROCK1过表达和法舒地尔刺激对C2C12成肌细胞呼吸功能的影响.采用MitoTracker(R)红色荧光探针测定线粒体裂变情况.用蛋白质印迹法检测ROCK1、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)及其磷酸化蛋白p-Drp1、肌肉萎缩相关蛋白E3泛素连接酶肌肉环指蛋白1(MuRF1)和肌肉萎缩F-box(MAFbx,又称Atrogin1)的表达.结果 Seahorse分析结果显示,与AdGFP组比较,Ad-ROCK1组C2C12成肌细胞OCR及ECAR明显增加,细胞的基础呼吸、最大呼吸及偶联ATP产生所需的呼吸增加,差异均有统计学意义(P＜o.01);MitoTracker(R)荧光探针结果显示Ad-ROCK1组细胞线粒体裂变增加,线粒体大小频数分布左移.Ad-ROCK1F组C2C12成肌细胞OCR和ECAR较Ad-ROCK1组明显减少(P＜0.05),基础呼吸和最大呼吸也降低(P＜0.05).Ad-ROCK1F组p-Drp1/Drp1比例、ROCK1、MuRF1和Atrogin1的表达均较Ad-ROCK1组减少(P＜0.05).结论 法舒地尔作为ROCK1的抑制剂,可阻断体外培养C2C12成肌细胞ROCK1过表达导致的细胞呼吸异常,并减少线粒体动力相关蛋白的活性和肌肉萎缩相关蛋白的表达.     

RG50864对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究酪氨酸蛋白激酶抑制荆RG50864对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法：用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞，采用细胞计数法、MTT比色法及Giemsa染色法对PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞进行分析。结果：与对照组相比，RG50864处理组能在24h、48h、72h显著抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖，且呈剂量依赖性。结论：RG50864可显著抑制PDGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖。     

Calcineurin/NFAT信号通路上调5型磷酸二酯酶的表达及介导内皮素-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨Calcineurin/NFAT 信号通路是否介导内皮素-1（ET-1）诱导的5 型磷酸二酯酶（PDE5）的表达及肺动脉平滑肌
细胞（PASMCs）的增殖;同时验证Calcineurin 抑制剂环孢素A及PDE5 抑制剂西地那非能否抑制ET-1 刺激的PASMCs增殖。
方法以ET-1 刺激PASMCs 增殖,分别于ET-1 刺激前给予环孢素A 或西地那非抑制Calcineurin 或PDE5 的活性。采用
Calcineurin活性检测试剂盒检测其活性,免疫印迹法检测PDE5的表达,酶联免疫吸附法检测cGMP的含量,3H-TdR渗入法检
测PASMCs 的增殖。结果ET-1 可激活原代培养的PASMCs 中Calcineurin 的活性,上调PDE5 表达,降低cGMP 的水平。
Calcineurin特异性抑制剂环孢素A可阻断ET-1的上述作用;抑制PDE5的活性可逆转ET-1导致的cGMP含量减少。而环孢素
A及西地那非可分别抑制ET-1 刺激的PASMCs增殖。结论ET-1 可通过激活Calcineurin/NFAT 信号通路介导ET-1 诱发的
PDE5 表达,进而降低cGMP 含量,引起PASMCs 增殖;而抑制Calcineurin 或PDE5 可提高cGMP 水平,抑制ET-1 诱导的
PASMCs增殖。
     

丹参酮Ⅱ-A硫酸钠对低氧诱导肺血管平滑肌细胞增殖的影响

应用免疫细胞化学、流式细胞术和核酸原位杂交技术观测丹参酮Ⅱ-A硫酸钠(DS201)对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响.结果发现DS201能明显地阻抑PASMC由G0/G1期进入S期(P<0.05);使PASMC增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及PDGF-A和B链mRNA的表达均显著降低(P<0.01).提示DS201可能通过下调PDGFmRNA基因表达而有效抑制HECCM诱导的PASMC增殖.