Fas在多囊肝病中的表达及其意义

目的:观察Fas诱导的细胞凋亡在多囊肝病发病中的意义。方法:对23例多囊肝病患者囊壁肝组织和周围正常肝组织分别采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)、免疫组织化学方法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察标本细胞凋亡、Fas在组织中的定位及其mRNA的表达并进行相关分析。结果:TUNEL显示囊肿壁肝细胞中细胞凋亡指数(AI)明显高于正常组织(P<0.01)。Fas及FasmRNA在囊肿壁肝细胞中的表达明显高于周围正常组织(P<0.01)。相关分析表明,囊肿壁肝细胞中AI和Fas蛋白表达存在非常显著正相关(P<0.01)。结论:在多囊肝病的发生发展中,Fas诱发的细胞凋亡在破坏肝脏结构及微循环中可能起重要作用。     

肝癌的细胞凋亡及其紫杉醇的诱导作用研究

目的研究肝癌发生过程中原位细胞凋亡活动以及紫杉醇对肝癌细胞系BEL-7404诱导细胞凋亡的作用。方法用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测了肝细胞癌的细胞凋亡,用紫杉醇处理培养细胞BEL-7404、显微镜下进行观察并且进行琼脂糖电泳。结果癌旁组织的原位凋亡细胞增多,紫杉醇处理肝癌细胞可以诱导细胞产生典型的细胞凋亡形态学变化。DNA发生断裂,琼脂糖电泳产生梯形条带。结论在体内肿瘤细胞凋亡降低,细胞分裂可能加快,肿瘤发生。在癌旁组织中细胞凋亡增多,在体外紫杉醇可以诱导肝癌细胞系BEL-7404凋亡。     

肝细胞癌和肝硬变中bcl—2蛋白表达与细胞凋亡的关

研究肝细胞癌和肝硬变中ｂｃｌ－２蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法，应用原位脱氧核糖酸末端转移酶标记法和Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测２８例肝硬变和３５例肝细胞癌组织中凋亡细胞的分布、密度及ｂｃｌ－２蛋白的表达。     

食管癌相关基因4在肝细胞肝癌中的表达和功能

目的了解人食管癌相关基因4（ ECRG4）在人肝细胞肝癌组织和肝癌细胞系中的表达情况,探讨ECRG4对肝癌细胞增殖、凋亡以及迁移能力的影响。方法提取24例配对肝细胞肝癌组织和癌旁肝组织的总RNA以及正常肝细胞系QSG7701和肝癌细胞系HepG2的总RNA和总蛋白,分别利用即时荧光定量PCR（ RT-qPCR）和Western blot法检测ECRG4的表达;构建ECRG4的真核表达质粒ECRG4-pcDNA3.1,转染肝癌细胞系HepG2,进行体外的细胞增殖、凋亡以及迁移实验。结果与癌旁肝组织相比,在肝细胞肝癌组织中ECRG4 mRNA表达下调或缺失（98.5％,23／24,P＜0.01）;和正常肝细胞系QSG7701相比,ECRG4 mRNA在肝癌细胞系HepG2中的表达明显下调（ P＜0.05）并且其蛋白表达水平也明显降低。转染ECRG4表达质粒后HepG2细胞的增殖和迁移能力明显低于对照组（P＜0.05）,细胞凋亡率明显高于对照组（P＜0.05）。结论 ECRG4在肝细胞肝癌中表达下调,在体外肝癌细胞系中过表达ECRG4可抑制细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡,ECRG4可能是肝细胞肝癌潜在的抑癌基因,有望为肝细胞肝癌分子靶向治疗提供新策略。     

细胞凋亡与乙型肝炎病毒感染相关肝病

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染人体可引起从急性肝炎到肝细胞癌的一系列临床表现，细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是由基因控制的细胞自主性死亡过程，是ＨＢＶ感染相关性肝病中重要的调节因子。本从乙型肝炎、肝细胞癌等方面就细胞凋亡在ＨＢＶ感染所致肝炎、肝癌发病机理中的作用作一简要综述。     

肝细胞癌和肝硬变中bcl-2蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的：研究肝细胞癌和肝硬变中ｂｃｌ－２蛋白表达与细胞凋亡的关系。方法：应用原位脱氧核糖核酸末端转移酶标记法和Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测２８例肝硬变和３５例肝细胞癌组织中凋亡细胞的分布、密度及ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：肝细胞癌组织中凋亡细胞密度显著低于肝硬变，且随其恶性程度的增高呈逐渐降低趋势；凋亡细胞在肝硬变中多分布于假小叶周边区域。ｂｃｌ－２蛋白在肝细胞癌组织中的表达强度明显高于肝硬变，但表达的阳性率差异不明显。结论：ｂｃｌ－２通过其表达产物调控肝硬变和肝细胞癌中的细胞凋亡，在肝细胞癌发生中起重要作用，但ｂｃｌ－２蛋白并非细胞凋亡的唯一调控因素     

TdT缺口末端标记法检测大鼠石蜡切片内凋亡细胞

用末端转移酶介导的切口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），检测了大鼠不同器官内的凋亡细胞。结果显示，凋亡细胞在光镜下多以核圆形、深染为特征，呈散在分布。有的凋亡细胞裂解成一个或多个凋亡小体。凋亡细胞数量因器官而异，在细胞增生活跃和细胞更替速度快的器官如小肠、大肠和淋巴结内，凋亡细胞较多，相对稳定的肝、胰等器官亡细胞较少。凋亡细胞通常被巨噬细胞或邻近细胞吞噬。该法的优点在于保存组织结构的同时，在原位到凋亡细胞     

细胞凋亡与肝细胞损伤

细胞凋亡是一种主动的细胞死亡，具有重要的生理、病理意义。转化生长因子β、肿瘤坏死因子α、脂多糖、各种化学物质等因素在诱导肝细胞凋亡中有重要作用，细胞凋亡在病毒性肝炎、肝脏免疫性疾病、胆源性疾病、肝脏缺血再灌注损伤等肝脏疾病中作用及病理机制的研究已取得进展。     

Caspase—3与肝细胞癌的细胞凋亡

Caspase 3是哺乳动物细胞凋亡的关键蛋白酶 ,亦参与了肝细胞癌的细胞凋亡的病理过程。免疫组化分析肝细胞癌中Caspase 3表达强度明显减弱 ,认为在肝细胞癌的发生过程中 ,Caspase 3的活性通过多种途径受到抑制。研究Caspase 3与影响肝细胞癌细胞凋亡各因素之间的关系 ,有助于寻找和开辟肿瘤治疗的新途径。     

大鼠免疫性肝损伤中细胞凋亡和铁的作用

目的：研究细胞凋亡和低铁处理在实验性免疫性大鼠肝损伤中的作用，进一步阐明肝细胞损伤的机制。 方法： 通过放血或去铁胺(DFO)处理复制低铁动物模型; 采用卡介苗加脂多糖（BCG+LPS）诱导法复制免疫性肝损伤模型; 检测血清铁（SI）、转铁蛋白（TRF）、总蛋白（TP）含量及天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性，肝组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、肝组织中铁（HIC）含量、细胞凋亡调节蛋白 bal-2基因和Bax基因表达的变化，计算细胞凋亡指数（AI）和Bax与Bcl-2（Bax/Bcl-2）比值。 结果： 结果表明：（1）在免疫性肝损伤中，调控细胞凋亡基因中的Bax表达量显著增大，而Bcl-2表达量并无显著改变，因而Bax/Bcl-2比值和AI均增大，细胞凋亡增强，同时伴有AST活性增加、MDA含量增高。（2）用静脉放血或注射DFO复制低铁的动物模型。这种铁缺失大鼠的Bax和Bcl-2的表达量均显著高于空白对照，Bax/Bcl-2比值和AI亦显著增大。但该比值和AI的增大与免疫性肝损伤组比较，前者显著低于后者。这表示铁缺失的动物虽然肝细胞的细胞凋亡也增强，但程度上较免疫性肝损伤要低的多。（3）免疫性肝损伤加放血或注射DFO，虽然Bcl-2和Bax表达量均明显升高，但Bax/Bcl-2比值和AI均显著低于单纯免疫性肝损伤组，与空白对照组比较，已无显著差别。这提示铁通过对Bcl-2和Bax表达量的调节，在免疫性肝损伤的细胞凋亡发生中起重要作用。低铁大鼠发生免疫性肝损伤后，MDA含量均低于单纯免疫性肝损伤组，而SOD活性则高于免疫性肝损伤组，提示铁在免疫性肝损伤中的自由基代谢失控发生过程中也起了一定的作用。 结论： 在免疫性肝损伤时，细胞凋亡过程增强,易化肝细胞的损伤；铁在免疫性肝损伤的细胞凋亡发生中起重要作用。     

倍受人们重视的“细胞凋亡”的研究

倍受人们重视的“细胞凋亡”的研究刘士廉，郑德先中国协和医科大学北京１００００５本文是一篇简要的论述，其目的是举些例子简单地说明为什么细胞凋亡近几年受到人们如此大的重视。１９７２年，Ｋｅｒｒ等在肝细胞研究中观察到了一种与细胞环死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）不同...     

62例胰腺癌组织中细胞凋亡的特征

目的研究拟阐明凋亡与胰腺癌分型、分期、分化程度、术后生存期的关系。方法62例胰腺癌标本取自1999年1月至2002年1月中国医科大学第二临床学院普外科及辽宁省人民医院普外科，术后病理证实。22例正常胰腺组织为上述医院的解剖标本。TUNEL法检测正常胰腺组织、胰腺癌组织内的凋亡细胞。结果在22例正常胰腺组织中细胞凋亡率为4／22，程度为（＋）；在62例胰腺癌组织中细胞凋亡阳性率为72．6％（45／62），程度为（＋）～（＋＋＋）。凋亡阳性率在胰腺癌组织分型、分期之间无统计学意义；高分化胰腺癌凋亡阳性率高于低分化胰腺癌（P〈0．05），中分化胰腺癌凋亡阳性率高于低分化胰腺癌（P〈0．01）；高、中分化胰腺癌之间差异无统计学意义；在中、高分化胰腺癌中，细胞凋亡程度（＋＋）～（＋＋＋）与（-）～（＋）的病例术后生存时间比较，前者显著长于后者（P〈0．05）。结论凋亡主要影响胰腺癌的发展、转移及预后；细胞凋亡在一定程度上阻止胰腺癌进展，最终延长胰腺癌患者生存时间。因此采用不同方法诱导胰腺癌组织中细胞凋亡可能为胰腺癌综合治疗提供新思路。     

慢性乙型肝炎肝组织FasL的免疫组化研究

目的通过研究程序性细胞死亡相关分子ＦａｓＬ在肝组织的表达情况，探讨慢性乙肝发病机制。方法以免疫组化方法检测６８例慢性乙肝活检组织。结果ＦａｓＬ主要表达在浸润的单个核细胞浆、肝细胞浆，其表达程度随组织炎症坏死程度加重而增加。结论ＣＴＬ通过Ｆａｓ机制导致感染的肝细胞凋亡是慢性乙型肝炎发病及炎症活动的重要机制之一。ＦａｓＬ阳性肝细胞可能发挥细胞毒效应，淋巴细胞凋亡的“顺序”和“转式”作用机制有可能存在于慢性肝炎的肝细胞。     

乙型肝炎病毒X基因在肝细胞凋亡中的作用

HBV基因组中的x基因能整合至肝细胞基因组，编码产生的HBx蛋白表现出复杂多样的生物学活性。近年来随着对HBX基因结构与功能的深入研究，发现HBx能够对肝细胞的凋亡起双向调控作用，对肝细胞肝癌（HCC）的发生发展具有重要意义。一方面，HBX能抑制肝细胞凋亡，使细胞过度增生，这对HCC的发展起着重要的作用，另一方面，HBx还具有诱导或促进肝细胞凋亡的作用，该作用在HBV相关疾病中的具体作用还不甚清楚。HBVx基因可能在肝细胞凋亡方面发挥着不同的作用，对揭示HCC发病机制有着重要意义。     

肝细胞生长因子拮抗放线菌素D诱导的肝细胞凋亡及机制探讨

目的： 探讨肝细胞生长因子（HGF）对放线菌素D (ActD)诱导HL7702肝细胞凋亡的拮抗作用及可能机制。 方法： 本实验采用HL7702正常人肝细胞株，MTT法检测ActD对肝细胞存活力的影响；Hoechst33342进行凋亡形态学染色；DNA凝胶电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡数量；Western blotting方法检测细胞总Akt及磷酸化Akt蛋白的表达。 结果： ActD可以诱导HL7702肝细胞凋亡，其浓度在0.25-8 mg/L范围内呈现剂量效应关系；PI3K特异性抑制剂wortmannin能够增强ActD诱导的肝细胞凋亡作用；肝细胞生长因子(HGF)对ActD诱导的肝细胞凋亡有拮抗作用，在一定剂量范围内呈现剂量效应关系；并且HGF能够激活PI3K/Akt信号转导途径；进一步用wortmannin阻断PI3K/Akt信号途径后，HGF的拮抗凋亡作用被抑制。 结论： 一定剂量的ActD可以诱导肝细胞凋亡；wortmannin能够增强ActD诱导肝细胞凋亡的作用；HGF对ActD诱导的这种细胞凋亡有明显的拮抗作用，并且HGF的抗凋亡作用与其激活细胞内PI3K/Akt信号转导通路有关。     

抗人DR5单克隆抗体对人肝细胞系HL7702的凋亡作用

目的:探讨抗人DR5单克隆抗体(mDRA6)对人肝细胞系HL7702致凋亡的作用。方法:流式细胞术检测HL7702细胞表面DR5的表达。在荧光显微镜下观察mDRA6对HL7702细胞形态变化的影响;MTT法检测mDRA6的细胞毒性作用;AnnexinVFITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:mDRA6导致HL7702细胞呈现典型细胞凋亡的形态特征;MTT法检测显示在40mg/L浓度下可杀伤39%的细胞;经流式细胞术检测显示,3mg/L的mDRA6作用HL7702细胞6h导致25.5%的细胞发生凋亡。结论:mDRA6能够诱导人肝细胞系HL7702凋亡,mDRA6具有诱导细胞凋亡的活性。     

良性前列腺增生组织中基质细胞的增殖和凋亡

目的：探讨良性前列腺基质增生组织中细胞增殖及凋亡状态的改变。方法：采用双抗体免疫组化方法，对6例良性前列腺增生和4例正常前列腺组织标本中平滑肌细胞的增殖状态进行研究；采用免疫组化和TUNEL相结合的方法，在连续的组织切片上观察基质细胞凋亡状态的变化。结果：在增生的前列腺组织中，处于增殖状态的平滑肌细胞比例远远高于正常前列腺组织，处于凋亡状态的基质细胞比例低于正常前列腺组织。结论：良性前列腺增生组织中，平滑肌细胞的增殖增加和基质细胞的凋亡减少同时发生。     

细胞凋亡与乙型肝炎病毒感染相关肝病

乙型肝炎病毒(HBV)感染人体可引起从急性肝炎到肝细胞癌的一系列临床表现.细胞凋亡(apoptosis)是由基因控制的细胞自主性死亡过程,是HBV感染相关性肝病中重要的调节因子.本文从乙型肝炎、肝细胞癌等方面就细胞凋亡在HBV感染所致肝炎、肝癌发病机理中的作用作一简要综述.     

长春新碱诱导的自噬性细胞凋亡对线粒体膜电位的影响

目的：了解长春新碱（VCR）诱导的自噬性细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（△Ψm）改变有关及其可能的机制。材料与方法：以正常人的肝细胞系为体外模型，应用碘化丙啶（PI）／Rhodamine123(Rh123)双重染色检测△Ψm，通过亚GI期细胞和透射电镜鉴定细胞凋亡。结果与结论：VCR可明显诱导线粒体△Ψm下降，也可以诱导L－02细胞自噬性凋亡。线粒体△Ψm下降可能是VCR诱导自噬性细胞凋亡的关键环节。     

TUNEL复合染色显示肝内细胞凋亡

已知肝内除肝细胞可以发生凋亡外 ,增生的小胆管上皮细胞、肝非实质细胞如星状细胞、枯否细胞等均可发生细胞凋亡。它们对维持肝内细胞间的平衡 ,胶原纤维的沉积与降解均发挥着重要的作用[1] 。为了研究肝病组织中各种细胞凋亡的发生发展及形态学改变 ,我们应用较为灵敏的ＴＵＮＥＬ法在石蜡切片中原位检测细胞凋亡。由于肝窦中细胞成分较多 ,为了同时鉴别发生凋亡细胞的类别 ,在ＴＵＮＥＬ法基础上附加显示相应细胞的特异免疫组织化学或辅以特殊染色 ,并以 2种ＴＵＮＥＬ试剂盒与免疫组织化学做对应的染色 ,选择具最佳显示效果的方法。一、…