鼻咽癌细胞株γ射线照射后端粒酶活性及各组表？…

目的 探讨γ射线照射鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１后,端粒酶活性改变情况以及与端粒酶各组分基因表达的关系。方法 ＨＮＥ１在γ射线照射前和照射后不同时间,利用ＲＴＰＣＲ方法检测端粒酶亚单位人端粒酶ＲＮＡ（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ＲＮＡ,ｈＴＲ）、人端粒酶相关蛋白（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ１,ＴＰ１）和人端粒酶逆转录酶（ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔ     

HNE1细胞株光动力学治疗前后形态学的动态变化

目的 探讨体外光动力学治疗（ＰＤＴ）引起鼻咽癌（ＮＰＣ）细胞死亡的作用机制。方法对鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１体外光动力学治疗前后形态学变化进行动态观察。结果 对照组ＨＮＥ１细胞培养３ｈ,６ｈ,１２ｈ,２４ｈ和４８ｈ后细胞形态与正常培养组ＨＮＥ１细包开始变形皱缩,细胞界限模糊,细胞透光度和立体感较差,治疗２４～４８ｈ后细胞发生凋亡。结论 体外光动力学治疗对ＨＮＥ１具有明显的杀伤效应并ＨＮＥ１细胞凋亡。ＰＤ     

鼻咽癌病人端粒酶表达的研究

目的：研究端粒酶（ＴＬＭＡ）在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达。方法：采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ法探讨１８例ＮＰＣ，２例放疗后ＮＰＣ，４例癌旁组织及４例慢性鼻咽炎鼻咽部活检组织中ＴＬＭＡ表达。结果：１８例ＮＰＣ ＴＬＭＡ阳性率为８８．９％。４例癌旁组织阳性率为７５．０％，慢性鼻咽炎全部为阴性。１例复发性ＮＰＣ为阳性，１例疗后未复发为阴性。ＴＬＭＡ表达与ＮＰＣ分期、颈淋巴结转移似无明显关系。结论：ＴＬ     

鼻咽癌细胞端粒酶的检测

目的：端粒酶是一种逆转录ＲＮＡ酶，与肿瘤的发生、发展和预后有关，本文探讨端粒酶与鼻咽癌的关系。方法：利用ＴＲＡＰ法对端粒酶的检测方法作了探讨，并检测了鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１、鼻咽癌活检组织和正常鼻咽粘膜组织端粒酶的活性。结果：鼻咽癌细胞株ＨＮＥ１和鼻咽癌活检组织端粒酶为阳性，正常鼻咽粘膜组织为阴性。结论：端粒酶在鼻咽癌细胞株和活检组织中酶活性高，端粒酶的检测可为鼻咽癌的诊断、治疗、预后提供参考。     

维甲酸抑制鼻咽癌端粒酶和hTR表达及诱导凋亡的研究

目的:探讨维甲酸(RA)诱导鼻咽癌端粒酶及hTR表达下降和凋亡改变。方法:10-5mol/L维甲酸处理HNE1细胞后,采用TRAP PCR ELISA、逆转录巢式PCR、凋亡指数及透射电镜检测端粒酶、hTR表达及凋亡改变。结果:加入维甲酸6 d后,HN E1细胞形态不规则,细胞悬浮,细胞数减少,端粒酶及hTR表达受抑制,间接定量显示端粒酶活性(0.68±0.14)U只及对照组(1.16±0.46)U的1/2,凋亡指数及细胞明显高于对照组(P<0.05)。结论:维甲酸能明显抑制鼻咽癌细胞中端粒酶及hTR表达,并诱导该类肿瘤细胞增殖受阻及发生凋亡改变。     

放疗诱导鼻咽癌细胞株CNE1热休克蛋白高表达

目的鼻咽癌是一种以放射治疗为主的头颈肿瘤,但部分鼻咽癌对放疗耐受。为了解鼻咽癌放疗耐受机制,本实验拟初步探讨人高分化鼻咽癌细胞株CNE1放疗后的蛋白质改变。方法利用固相pH梯度二维凝胶电泳,建立CNE1放疗前后总蛋白质2DE图谱,利用MALDI TOF MS及数据库搜索初步分析和鉴定部分放疗前后差异蛋白质点。结果高分子量酸性蛋白质在CNE1放疗后20min高表达,其中大多为热休克蛋白质HSPs(heatshockproteins,HSPs)。结论放射能诱导CNE1的热休克蛋白高表达,它们可能与鼻咽癌放疗耐受有关。     

益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞株HNE1凋亡诱导活力的研究

目的 从益气解毒颗粒对体外培养的人鼻咽癌细胞株HNE1的细胞凋亡诱导活力角度探讨该方的抑癌机制.方法 采用流式细胞术和免疫细胞化学法比较观察益气解毒颗粒原方及其拆方药物血清对体外培养的HNE1细胞凋亡诱导活力差异.结果 益气解毒颗粒原方15%药物血清对HNE1的细胞凋亡诱导效应最为明显,48小时显示细胞凋亡指数13.69±0.26,且具有时间和药物浓度双重依赖性的特点,而在增强p53表达效应上,则以原方和益气组最为明显.结论益气解毒颗粒诱导鼻咽癌细胞凋亡主要是通过其益气组的功效而得以发挥,其机制之一可能是通过对p53的表达上调而实现的.     

人鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株CNE-1/Taxol的建立及其机制初探

目的建立耐紫杉醇的人鼻咽癌细胞株,并对其生物学特性及耐药机制进行初步探讨。方法采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法,建立耐紫杉醇鼻咽癌细胞株。检测两种细胞的形态差异、生长曲线及倍增时间;用集落形成实验检测它们对紫杉醇、顺铂和长春新碱化疗药的敏感性;使用RT-PCR比较两种细胞β-微管蛋白Ⅲ,鸟苷酸结合蛋白1的表达差异。结果成功建立了耐药指数为8.43的CNE-1/Taxol耐药细胞株,其增殖速度减慢,倍增期延长,体积变小,且对长春新碱低度耐药,耐药指数为1.33;但与亲本细胞株比较,其对顺铂的敏感性明显增加(P<0.01);β-微管蛋白Ⅲ和鸟苷酸结合蛋白1的表达在耐药细胞株中均升高,并与耐药指数呈正相关(p<0.05)。结论CNE-1/Taxol是一株对紫杉醇耐药的细胞株,是研究紫杉醇耐药机制的重要实验模型;CNE-1/Taxol逆向增加了对顺铂的敏感性;β-微管蛋白Ⅲ和鸟苷酸结合蛋白1表达增强可能是鼻咽癌细胞产生获得性耐药的主要机制之一。     

HNP1基因转染对裸鼠鼻咽癌移植瘤生长影响的实验研究

目的:观察人α-防御紊HNP1基因对人鼻咽癌细胞株HNE-1生长的影响,探讨其在裸鼠鼻咽癌移植瘤生长中的作用.方法:HNP1基因通过脂质体介导转染人鼻咽癌HNE1细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察对HNE-1细胞的细胞毒性作用,将筛选的含pcDNA3.1( )-HNP1质粒的HNE-1细胞和空pcDNA3.1( )质粒的HNE-1细胞以及单纯的HNE-1细胞培养、收集后分别注射于8周龄雌性BALB/c裸鼠的右侧腹壁皮下,观察肿瘤生长速度,免疫组织化学检测α-防御素1在肿瘤组织中的表达.结果:HNP1基因转入鼻咽癌HNE-1细胞后能成功地表达有活性的α-防御素1,MTT实验证实有细胞毒作用,转染HNP1基因组裸鼠较对照组肿瘤生长速度慢,体积小.结论:通过转基因方法能表达有活性的α-防御素1并能抑制裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长.     

PCNA在中耳鳞癌中的表达及意义

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)表达与中耳癌发生、发展的关系.方法应用免疫组化技术对中耳鳞癌、中耳炎性组织和正常鼓膜中的PCNA表达进行检测.结果①PCNA在中耳鳞癌中的表达显著高于异型增生(P＜0.01);②单纯炎性肉芽和正常鼓膜PCNA表达阴性;③PCNA表达指数与中耳癌分化程度负相关.癌组织分化越差,PCNA指数越高,相差有显著意义(P＜0.05);④PCNA指数与中耳癌临床分期无关.结论PCNA高表达与中耳癌发生及生物学行为不良相关.     

血清EB病毒特异性DNA酶抗体的检测

目的建立一种新的鼻咽癌(NPC)血清学诊断方法.方法以纯化的EBV-DNase为抗原,采用WesternBlot法对NPC、头颈部其它肿瘤(OT)及健康成人(HA)血清中的EBV-DNase抗体进行检测.与同时进行的EBVCA～IgA抗体检测比较.结果①用West-ernBlot法检测NPC组、OT组、HA组血清中EBV-DNase抗体阳性率分别为83.71%,0.00%,000%,NPC组抗体阳性率与其它两组差异显著(均为P＜0.01),后两组之间无显著差异(P＞0.05).而同时检测的EBVCA-IgA阳性率分别为85.98%,9.38%,7.50%.两种方法阳性率比较,在NPC组无差异(P＞0.05),而在其它两组的差异显著(P＜0.05);②以病检结果为"金标准”,EBV-DNase抗体WesternBlot法检测的特异性明显高于EBVCA-IgA检测(P＜0.01),而两者的灵敏度相当(P＞0.05).结论①NPC血清中存在高滴度的EBV-DNase抗体;②用WesternBlot法检测血清中的EBV-DNase抗体,具有较高的灵敏度及特异性,可以减少NPC的漏诊和误诊,不失为一种NPC血清学诊断方法.     

喉癌部分喉切除术

目的探讨喉癌部分喉切除术的方法.方法总结59例喉癌部分喉切除经验.其中喉裂开声带切除2例;垂直喉部分切除38例;水平喉部分切除10例;次全喉切除加同侧颈廓清术2例;水平喉部分切除加同侧颈廓清7例.结果本组病例的3年生存率为83.8%,5年生存率为68.2%;59例中56例顺利拔管;全部病人术后发音清晰,吞咽正常.结论声门癌与声门上癌(T1～T2)病人行部分喉切除是更佳选择.     

鼻咽癌病人放疗前后血中超氧化物歧化酶含量的改变

目的观察鼻咽癌患者放疗前后血中超氧化物歧化酶(SOD)水平变化.方法鼻咽癌患者46例,正常对照组32例,检测其血液中放疗前后SOD含量改变.结果放疗前鼻咽癌患者SOD水平(76.21NU/ml±28.28NU/ml)明显低于对照组(101.03NU/ml±37.39NU/ml),放疗后有明显提高(101.86NU/ml±31.50NU/ml).放疗前鼻咽癌Ⅱ期SOD水平(88.5NU/ml±32.36NU/ml)高于Ⅲ期(70.34NU/ml±29.73NU/ml)及Ⅳ期(75.9NU/ml±20.98NU/ml).放疗后SOD水平CR(肿瘤完全缓解)组(103.21NU/ml±30.85NU/ml)稍高于PR(肿瘤部分缓解)组(97.23NU/ml±29.89NU/ml).结论鼻咽癌患者血SOD含量与癌瘤负荷及临床分期呈负性相关.     

庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮细胞凋亡和再生

目的 研究豚鼠前庭毛细胞庆大霉素损伤后前庭感觉上皮细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法 成年豚鼠肌肉注射庆大霉素１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ连续１４ｄ,停用庆大在霉素后１ｄ和１０ｄ。腹腔注射Ｂｒｄｕ ３００ｍｇ／ｋｇ ６ｈ后处死实验动物,免疫组化显色壶腹嵴可见Ｂｒｄｕ标记细胞,同时应用ＴＵＮＥＬ技术原位显示凋亡细胞,观察应用庆大霉素后１ｄ和１０ｄ壶腹嵴毛细胞损伤区域细胞凋亡和细胞增殖状况,结果 损伤后１ｄ,     

端粒酶抑制因子PinX1基因在鼻咽癌细胞中的表达及作用效应分析

目的 探讨PinX 1基因在鼻咽癌细胞中的表达及其作用效应分析.方法 构建包含全长人PinX 1基因序列的质粒载体pEGFP-C 3-PinX 1及Pinx 1的小干扰RNA,PinX1-FAMsiRNA.脂质体法转染人鼻咽癌5～8F细胞,采用RT-PCR检测PinX 1基因和端粒酶催化亚单位( hTERT) mRNA...     

苯乙酸对胶质瘤细胞增殖周期的抑制

目的观察诱导分化剂苯乙酸对胶质瘤细胞C6增殖抑制作用及对细胞周期的影响.方法细胞计数及[3H]-TdR掺人法检测苯乙酸对C6细胞的增殖抑制作用.FCM检测苯乙酸对C6细胞周期的影响.结果C6细胞增殖与苯乙酸剂量及应用时间呈负相关,苯乙酸2.5,5.0mmol/L组用药第5d,对C6细胞的增殖抑制率为74.7%,95.0%;第ld,3d上述两组用药组G0/G1期比例分别为45.1%,56.2%和31.3%,31.4%.对照组为56.3%.58.2%.结论苯乙酸对C6细胞存在剂量和时间依赖性抑制,使细胞周期抑制于G1期.     

Jab1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨Jab1在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及其与LSCC临床病理和预后的关系。方法: 采用免疫组化SP法检测23例正常喉黏膜(NLT)和72例LSCC组织中Jab1的表达。结果: 在54.17%的LSCC中Jab1呈现过表达,并且与临床分期和淋巴结转移呈显著正相关,与患者的总生存率呈负相关(P<0.05)。结论: Jab1可能通过调节p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展, Jab1可以作为LSCC的一个预后指标。