罕见B(A)血型的分子遗传学研究

目的以核苷酸序列分析鉴定出血型血清学分型困难标本的ABO血型基因型。方法对常规血清学方法难以做ABO血型准确定型的3例被捡血样,采用PCR方法扩增其ABO等位基因的第6、7外显子,PCR产物采用直接测序和克隆测序的方法,以确定其基因型。结果 3例被检血样的血型血清学结果相似:红细胞与抗-A弱凝集,与抗-B强凝集,不与抗-A1凝集,其血清中存在抗-A,初步定型为AWB;经直接测序和克隆测序发现:3例被检血样都含有O等位基因,且它们的B等位基因在第7外显子都存在700CG突变,证实其为B(A)02等位基因。结论核苷酸序列分析证实这3例血清学表现为AWB亚型个体均为B(A)表现型,基因型均为罕见的B(A)02/O型。     

罕见B(A)血型的鉴定

目的观察2例罕见B(A)血型的血清学特征并研究其分子机制。方法用血型血清学鉴定2例献血者标本ABO血型,用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)基因分型和直接测序确定其基因型。结果 2例献血者血型血清学检测结果均表现为B(A)亚型的特点。标本1基因分型为BO2,测序结果为第7外显子B基因发生640AG突变,符合B(A)04/O02的基因型特点;标本2基因分型为BO1,测序结果为第7外显子B基因发生700CG突变,符合B(A)02/O01的基因型特点。结论2例标本均为B(A)表现型,基因型分别为B(A)04/O02和B(A)02/O01。     

B(A)02/O02亚型的血清学及分子遗传学研究——附报告1例

目的鉴定罕见的B(A)02/O02亚型,选择合适血液进行配血。方法应用血型血清学鉴定表型,利用分子生物学对血液标本第6、7外显子进行基因测序,并做家系调查。结果先证者和其父亲标本血清学鉴定疑似B(A),H物质较正常B型明显增强,血清中产生不规则抗-A;经基因测序后,2例标本的第6外显子有O02等位基因,其B等位基因的第7外显子发生700CG突变。结论经血清学和分子生物学检测后,2例标本均证实为B(A)02/O02,为先证者选择O型洗涤红细胞和AB浆输血治疗。     

罕见B(A)血型的血清学及基因检测研究

本研究旨在通过血清学和分子生物学方法研究1例ABO血型系统中罕见B(A)型,并分析造成多次检测结果不一致的原因。采用血型血清学方法鉴定ABO血型血清型,同时采用PCR测序方法检测其基因型。结果表明,该献血者血清学结果正反定型结果不符,正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O01型,存在nt640A>G点突变,导致214位甲硫氨酸被缬氨酸置换。结论:对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可用分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

一例罕见B(A)血型的基因鉴定

目的对1例血清学血型鉴定困难的患者进行基因鉴定,分析引起血型鉴定困难的原因及突变基因。方法采用微柱凝胶法和试管法进行血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(PCR)扩增结合测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者ABO基因第6、7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点。结果患者血清学血型鉴定正反结果不一致,其红细胞与单克隆抗A抗体反应呈弱阳性(++),与单克隆抗B及抗H抗体反应均为强阳性(++++);其血清与A1型红细胞呈现弱凝集,但不凝集B和O型红细胞;患者直接及间接抗球蛋白试验均为阴性、血清抗体筛查为阴性。经测序发现,患者ABO基因存在多个变异,其第6外显子区存在261del和c.297AG二处杂合变异,第7外显子区存在c.526CG、c.640AG、c.646TA、c.657CT、c.681GA、c.703GA、c.771CT、c.796CT、c.803GC、c.829GA、c.930GA共11处杂合变异,以A101等位基因为标准序列进行比较,对照Blood Group Antigen Gene Mutation Database进行ABO等位基因突变分析,判断患者血型为B(A)04/O06血型。结论患者的B变异的基因型及弱AB的表型是引起血型鉴定正反不一致的主要原因,DNA基因分型有助于解决疑难样本的血型鉴定。     

罕见B(A)04血型家系遗传规律调查

目的 探究罕见B（A）04血型家系遗传特性.方法 采用血型血清学和PCR-RFLP方法对2个B（A）血型家系成员的血型和基因型进行鉴定.结果 家系1的先证者及其他8名家系成员均为B（A）04血型;家系2的先证者及其母亲和姐姐均为B（A）04血型.测序结果均为B等位基因发生nt640 A＞G单碱基突变.结论 导致214位甲硫氨酸被缬氨酸置换是2个家系B（A）04血型的分子遗传学基础.B（A）04血型为常染色体共显性遗传.     

B(A)血型鉴定及临床输血策略探讨——附1例B(A)02/O01血型报道

目的探讨降低B(A)亚型漏检率及其临床紧急输血流程。方法对1例急诊手术患者,采用血清学方法进行血型鉴定,根据鉴定结果初步确认为ABO亚型,后采用2种方法进行交叉配血。运用PCR(聚合酶链式反应)对该患者的ABO血型基因扩增并测序,明确基因型。结果该患者血型血清学结果显示正反定型不符,正定型为A弱B强,血清中存在较弱的抗-A1,H抗原较B细胞明显增强;术中输注B型洗涤红细胞4U、AB型血浆600mL,无输血不良反应。患者ABO基因测序结果与A101标准序列比对,符合(A)02/O01基因型。结论 B(A)血型的血清学特征不明显,血清学检测必须严格遵守标准化操作流程,降低漏检率。本研究对B(A)患者制定了紧急输血流程,保证临床用血。同时其明确鉴定需进一步结合分子生物学检测,ABO基因测序联合单克隆测序可以有效明确其分型,必要时可选择二代测序的方法。     

B(A)血型分子机制研究及其家系分析

目的 研究罕见B(A)血型的血清学特性和分子机制,为B(A)血型的临床输血提供理论基础.方法 利用单克隆抗体检测1例先证者、家系成员及献血者红细胞ABO血型抗原,用标准A、B、O红细胞检测其血清中的ABO抗体.采用盐水法、凝聚胺法和抗球蛋白法进行先证者与献血者交叉配合试验.采用PCR技术扩增ABO基因的第6、7外显子序列,对先证者、家系成员、献血者标本的ABO基因外显子6、7和侧翼内含子序列进行测序分析,并对先证者标本进行单倍体序列分析.结果 先证者及其2位家系成员红细胞上有A、B抗原,同时血清中存在抗A_1抗体,血清学表型为A_2B.直接测序分析发现先证者标本第6、7外显子存在261G/del、297A/G、526C/G、657C/T、700C/G、703A/G、796A/C、803G/C、930A/G杂合,可推断为B(A)_(02)/O_(01)基因型杂合子;家系中其母亲基因型为B(A)_(02)/B_(101),外祖母为B(A)_(02)/O_(01).先证者单倍体序列分析得到2个等位基因B(A)_(02)和O_(01);与B_(101)序列相比,B(A)_(02)位第700位C>G,导致1个氨基酸改变:第234位脯氨酸变成丙氨酸.既往血清学特性为A_2B的2个献血者,1个基因型为B(A)_(02)/O_(01),另1个基因型是A_(208)/B_(101).B(A)血型先证者与这2名献血者进行交叉配血试验均相合,临床输注后无不良反应.结论 α-1,3-半乳糖基转移酶等位基因(B等位基因)700C>G突变可导致形成B(A)血型,其血清学特性显示为A_2B表型.B(A)血型临床输血相配合的供者可选择A_2B表型的献血者.     

稀有B(A)02亚型标本的血型基因鉴定

目的 对1例ABO定型正反不符[血清学初定为B(A)]的标本进行PCR分型和测序分析,拟阐明其血清学的分子机制.方法 采用试管法进行血清学鉴定;用PCR-SSP方法对标本ABO基因亚型进行初筛,并测序分析标本ABO基因的第6和第7外显子.结果 血清学表现为AxB,且H抗原明显增强,反定与A1细胞和A2细胞皆有反应,初定为B(A)型;PCR-SSP分型定为B(A)02型.测序表明:标本的第6外显子存在261delG突变;第7外显子在B101序列的基础上,出现了B(A)02型700C/G的典型突变.结论 该标本的基因型为B(A)02型与O01型杂合.     

罕见B(A)血型的鉴定及临床安全输血的研究

目的鉴定2例B(A)血型及临床安全输血的研究。方法对2例血型进行血型血清学和分子生物学方法进行验证。结果结合ABO基因直接和克隆测序相互验证,排除碱基假突变,与B101等位基因序列相比,均为nt640AG,其余碱基序列完全一致,但2者各有l条单倍型序列是正常的O01等位基因(nt261G缺失),符合B(A)04/O01的基因型。但是二者血型血清学结果略有区别。结论 B(A)血型是1种非常罕见的ABO亚型,鉴于B(A)亚型的特殊性,在临床定型和配血中,需要血站血型室工作者引起高度的重视,因此对B(A)血型进行家系调查,动员家属,同型互助输血,另外在国内建立罕见亚型档案库,对于有条件的罕见亚型者还可考虑自体冷藏及红细胞冰冻长期保存贮血,更有必要努力的方向是通过新一代高通量测序的方法更深入研究血型的基因多态性。从而建立适合我国人群特征的B(A)血型的安全输血策略,提高临床用血的安全。     

罕见B(A)亚型新生儿溶血病及血型鉴定

目的对罕见B(A)亚型新生儿溶血病进行血清学分析,并探讨该类血型的鉴定策略。方法对1例新生儿溶血病标本应用血型血清学方法进行新生儿溶血病相关检测,对发现的B(A)亚型应用血型血清学、家系调查、分子生物学等方法进行鉴定。结果本例为罕见B(A)亚型新生儿溶血病,并仅与抗原性相对较弱的A抗原相关。家系调查发现3例B(A)亚型,基因分型及序列测定证实为B(A)07型。结论罕见B(A)亚型新生儿溶血病具有重要临床意义,其血型鉴定过程需要采用多种方法。     

B(A)血型研究进展

正自1900年人类第一个红细胞血型系统—ABO血型发现以来,ABO血型一直被视为最重要的血型系统之一,在临床输血、移植医学、法医学及新生儿溶血病中均发挥至关重要的作用。随着检测技术的不断提高,越来越多的ABO亚型陆续被发现,至2014年8月,已经提交血型基因突变数据库(BGMUT)的ABO等位基因有344个~([1])。其中B(A)血型是一种非常罕见的ABO亚型,1993年Yamamoto~([2])等首次发现1种能够编码正常糖基转     

B(A)血型等位基因分型研究

目的了解血清学定型为B(A)血型标本的分子基础。方法采用PCR-SSP方法检测以血清学方法定型为B(A)血型的4名献血者和8例送检患者标本的ABO基因型;对于有O等位基因的杂合子标本,使用特异性引物分别扩增O和B等位基因的7号外显子编码序列,并做测序分析。结果 12例采用血清学方法定为B(A)血型标本的ABO基因型分别为B/B型1例(8.33%),B/O1型4例(33.33%),B/O2型7例(58.33%);序列分析显示:B(A)02等位基因为5例(41.67%),B(A)04等位基因为7例(58.33%)。结论 B(A)04和B(A)02等位基因可能是我国北方汉族人群B(A)血型中主要的遗传类型。     

血型基因分析鉴定罕见的B(A)04亚型1例

B(A)型是ABO血型的变异型,在我国人群中的比例极低,常因血清学正反定型不符而难以最终确定。借助于血型基因分析技术,能较好地解决这个问题。本研究通过基因分型及分子测序的方法检测1份临床术前备血的疑难标本,确认其为B(A)04型,报道如下。     

B(A)血型表型与基因型研究

目的了解河北地区中国人群中B(A)血型的分布特点及其表型与基因型的关联性。方法采用血型血清学方法对ABO正反定型不符标本进行检测;采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)及第6、7外显子基因测序方法进行基因分型,并对表型和基因型的关联性进行分析,并做家系调查。结果经测序确定为B(A)血型的有34例(22例B(A)血型个体,12例家系成员),包括两种B(A)等位基因,分别为B(A)02和B(A)04。22例B(A)血型个体中B(A)02有17(77.3%)例,B(A)04有5(22.7%)例。这两种等位基因所对应的表型包括B(A),AxB,A_2B和ABx。结论在河北地区中国人群中,此次主要检测出B(A)血型的两种基因型B(A)02和B(A)04,以B(A)02常见,基因型所对应的表型具有多样性。家系调查证实了B(A)血型的顺式遗传特性。     

国产单克隆血型试剂漏检B(A)血型分析

目的 分析国产单克隆血型试剂漏检B(A)血型原因,提出应对措施.方法 用多个厂家单克隆及人源试剂做ABO正反定型和吸收放散等血型血清学等试验,鉴定B(A)血型,查找国产单克隆血型试剂漏检B(A)血型的原因.结果 某些国产单克隆血型试剂漏检B(A)血型.结论 提高血型血清学知识和国产单克隆血型试剂质量,加强单克隆血型试剂的进货检验,采用多个厂家的单克隆抗体试剂,多措并举,可减少B(A)血型漏检,确保临床输血安全.     

1例罕见的B(A)亚型患者的血型鉴定和配血

<正>ABO正反定型不符时常给血型鉴定和配血工作带来困难[1],造成正反定型不符的原因之一是ABO系统的亚型[2,3]。我们在临床配血的工作中结合血清学和分子生物学技术发现1例罕见的B(A)亚型患者,现报道如下。     

ABO变异型A102Bw33血型基因亚型遗传学鉴定

目的:对1例血清学检测为ABw亚型的样本进行了分子生物学研究及鉴定。方法:在标准血型血清学方法鉴定的基础上,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP),ABO基因第6、7外显子PC R产物直接测序及克隆测序等方法进行ABO亚型基因分型和单倍型分析。结果:先证者红细胞含有A和B抗原,同时血清中含有抗-B抗体。PCR-SSP结果显示,样本基因型为A1B。直接测序分析发现,297A/G、467C/T、526C/G、657C/T、703A/G、803G/C和9306/A 7个位点杂合。克隆测序得到2个等位基因A102和Bw33。Bw33基因序列与B101基因比对仅第796位碱基为AC突变,796C是A基因的特性。结论:796碱基AC突变导致产生Bw33的表型,其血清中产生抗-B抗体。     

2例B(A)血型的鉴定

目的 对2例标本B(A)血型进行鉴定.方法 运用血型血清学、PCR-序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)基因定型和ABO基因第6及第7外显子直接测序的方法,对2例标本的B(A)血型和B(A)型等位基因进行检测.结果 2例标本血清学定型分别为A2B和AxB,PCR-SSP法初筛均为B/O基因型,DNA序列分析测定标本1基因型为B(A)02/O02型,标本2基因型为B(A) 02/O01型.结论 采用DNA序列分析法才能准确测定华北地区汉族人群中B(A)血型,PCR-SSP法可能引起差错.