Determination of Galanthamine hydrobromide in the dog plasma by UPLC - MS/MS

目的 采用超高效液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中氢溴酸加兰他敏(GH)的含量.方法 采用BEH C18色谱柱( 50 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵(含0.1％甲酸)(40∶60),流速0.1 mL·min-1,柱温40℃,进样量3μL.GH及内标盐酸克仑特罗的监测离子分别为:m/z 288.23→198.06,m/z 277.08→202.93.结果 GH的线性范围为2.38～609.60μg·L-1(r=0.998,n=5),在人血浆基质中,高、中、低浓度(4.76、38.10、304.80 μg·L-1)的日内、日间RSD均小于15％,方法的平均回收率为102.3％;血浆基质对测定无干扰.结论 所建方法处理简单、快速、灵敏、特异性高,定量准确,适用于血浆中GH的测定.     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中双氯芬酸钠的浓度

目的建立测定人血浆中双氯芬酸钠浓度的超高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法采用蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱为Waters C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-体积分数为0.06%的甲酸溶液(体积比为40∶60),流速为0.7 m L·min-1,正离子模式多反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 296.03→249.98(双氯芬酸钠),m/z 358.10→138.92(吲哚美辛,内标物)。结果血浆中双氯芬酸钠线性为10³ 000μg·L-1(r=0.998 0),定量下限为10μg·L-1,提取回收率在95.1%3 000μg·L-1(r=0.998 0),定量下限为10μg·L-1,提取回收率在95.1%¹01.3%,日内、日间精密度RSD均小于10%。结论该方法可用于双氯芬酸钠的药物动力学研究。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定人血浆中莫沙必利的浓度

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定人血浆样本中莫沙必利的浓度。方法血浆样本经固相小柱萃取处理后,以甲醇-0.5%甲酸溶液(70:30)为流动相,采用Agilent TC-C18(4.6 mm×150mm,5μm)色谱柱进行分离,流速为0.5 m L·min-1,柱温25℃;采用ESI正离子模式检测,离子监测方式为MRM,用于定量分析的离子反应分别为m/z 422.1→m/z 198(莫沙必利)和m/z 466.1→m/z 184(西沙必利)。结果莫沙必利在0.512~125μg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 3),定量下限为0.512μg·L-1,日内及日间RSD均<10%,莫沙必利的提取回收率和基质效应分别在95.8%~101.6%和101.6%~113.0%。结论本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,样本检测时间为3 min,适用于血浆样本中莫沙必利的浓度测定及其药物代谢动力学研究。     

电喷雾离子阱二级质谱法测定人血浆中利培酮浓度

目的 建立电喷雾离子阱二级质谱法(LC-ESI-MS/MS)测定人血浆中利培酮浓度.方法 色谱柱DiamonsilTM C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈(1%甲酸):0.02mol·L-1醋酸铵=(60:40,V:V),流速:0.8 mL·min-1;柱温:25℃;进样体积:10μL;质谱条件为电喷雾离子源,检测方式为正离子多离子反应监测(MRM),用于定量分析的离子为利培酮m/z411→191,内标替米沙坦m/z516→497,生物样本采用醋酸乙酯:二氯甲烷(4:1)液液萃取处理.结果 利培酮血药浓度线性范围为0.5～50 μg·L-1,线性方程为C=2.38F-0.24,r=0.999(n=7),最低检测浓度为0.1μg·L-1,高中低三个浓度的提取回收率分别为71.70%,64.58%,64.93%,日内、日间RSD均小于15%.结论 本法灵敏、准确、快速,可用于临床常规血药浓度测定和药动学研究.     

超快速液相色谱-质谱/质谱联用法测定人血浆中兰索拉唑的浓度

目的 建立测定人血浆中兰索拉唑(抗胃及十二指肠溃疡药)含量的超快速液相色谱-质谱/质谱联用法(UFLC-MS/MS).方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以乙腈-0.1%甲酸(27:73)洗脱,用Ultimate XB-CN(5μm,2.1mm×150mm)色谱柱,通过电喷雾离子化三重四级杆串联质谱,经多反应监测模式检测,m/z370.4→m/z252.2(兰索拉唑),m/z 237.2→m/z 194.3(卡马西平,内标).结果 兰索拉唑在5.01～5007.90μg·L-1内线性关系良好(γ=0.998 5),最低定量浓度为5.01μg·L-1.方法 回收率(n=5)分别为90.21%,89.71%,92.27%,日内和日间精密度均<9%.结论 该法操作简单,灵敏,准确,重现性好,适用于该药的临床药代动力学研究.     

固相萃取LC-MS/MS法测定人血浆中头孢呋辛的浓度

目的建立人血浆中头孢呋辛浓度的LC-MS/MS检测方法。方法以头孢拉定为内标,血浆样品酸化后用固相小柱萃取处理;分析柱为Thermo Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-20mmol·L-1甲酸铵水溶液(65:35);流速为0.2 m L·min-1,柱温30℃;使用电喷雾离子源(ESI),负离子多反应监测(MRM)方式进行检测。结果头孢呋辛监测离子为m/z 423.1→m/z 207.1,内标头孢拉定监测离子为m/z 348.2→m/z 235.2,样品分析时间为3 min,血浆中内源性物质对测定无干扰,头孢呋辛线性范围为0.1024~20.00μg·m L-1(r2=0.998 8),定量下限为0.102 4μg·m L-1。批内、批间精密度(RSD)均<8.5%,头孢呋辛与内标的平均回收率分别为104.4%和95.5%,平均基质效应为95.8%和93.9%,且均不存在浓度依赖性。结论该方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于血浆样品的高通量分析。     

LC-MS/MS方法同时检测人血浆中异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺的浓度

目的:建立同时检测人血浆中3种抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇和吡嗪酰胺浓度的LC-MS/MS方法,用于肺结核患者及临床试验中三药血药浓度的测定。方法:以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白等处理后检测。采用AgilentZORBAX SB-Aq色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为分析柱,ZORBAX SB-Aq柱(2.1 mm×12.5 mm,5μm)为保护柱,以乙腈-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(8:92,v/v)为流动相,使用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行检测,异烟肼m/z 138.2→121.0,乙胺丁醇m/z 205.2→116.1,吡嗪酰胺m/z 124.1→81.1,对乙酰氨基酚m/z152.0→110.0。分析时间为5 min。结果:血浆中内源性物质对测定无干扰,异烟肼线性范围为0.1～6.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,乙胺丁醇线性范围为0.1～5.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为0.1μg.mL-1,吡嗪酰胺线性范围为1.0～50.0μg.mL-1,定量下限(LLOQ)为1.0μg.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10%,准确率为90.4%～108.7%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于临床血浆样品的高通量分析。     

LC-MS/MS法测定犬血浆中华法林钠的浓度及其应用

目的建立LC-MS/MS联用的方法测定犬血浆中华法林钠的浓度并进行药动学研究。方法以卤米松作为内标,犬血浆经甲醇蛋白沉淀处理后稀释进样。色谱柱为Venusil XBP苯基柱(100 mm×2.1 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(含2 mmol·L-1醋酸铵)-甲醇(含0.1%甲酸)(25∶75),流速0.3 m L·min-1;进样体积5μL。采用电喷雾离子源,负离子方式多反应监测(MRM)扫描分析。检测离子通道分别为m/z 307.1→161.3(华法林钠)和m/z 489.5→413.1(卤米松)。结果华法林钠的线性范围为5~1 500μg·L-1(r=0.997 8),批内和批间精密度RSD均<8%,高、中、低浓度的方法回收率为103.33%~107.29%。结论本方法操作简捷,灵敏度高,专属性好,适用于华法林钠的药动学研究。     

氟代同系物内标在LC-MS/MS法测定人血浆中苯烯莫德浓度的应用

目的:降低基质效应,建立测定人血浆中苯烯莫德的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法。方法:以氟代苯烯莫德为内标,血浆样品用四硼酸钠碱化后,用甲基叔丁基醚(MEBE)萃取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行LC-MS/MS分析。色谱条件:采用Ultra C18(50 mm×2.1 mm,5.0μm)色谱柱,以乙腈-0.2 mmol·L-1甲酸铵为流动相,流速300μL·min-1,柱温20℃;质谱条件:电喷雾离子化源(ESI),负离子模式多重反应选择离子检测(MRM),用于定量的离子对分别为苯烯莫德m/z 253.1→210.9和内标氟代苯烯莫德m/z 270.9→229.2。结果:人血浆中苯烯莫德的线性范围为0.1~10 ng·m L-1(r>0.99),定量下限为0.1 ng·m L-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%;相对误差为-1.03%~0.01%;提取回收率大于85%;稳定性良好,血浆基质对苯烯莫德测定无干扰。结论:该方法适用于人血浆中苯烯莫德浓度的测定。氟代同系物内标能部分取代稳定同位素内标,应用在生物样品的检测中。     

LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度。方法以卡马西平-d2作为内标,血浆经甲醇直接蛋白沉淀后进样分析,色谱柱为CAPCELL PAK C18(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1 mmol·L-1乙酸铵水溶液(含0.02%乙酸)(70∶30),流速0.3 m L·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析。卡马西平和内标卡马西平-d2的离子对分别为m/z 237.1→194.1和m/z 239.1→196.1。结果卡马西平在质量浓度3.077 9~1 231.2μg·L-1内线性良好(r=0.999 3,n=10);批内和批间精密度良好(RSD均<7.0%);提取回收率为98.94%~108.84%,RSD<15%;基质效应为92.76%~98.54%,RSD<5%。结论本方法灵敏度、重复性以及专属性均较好,样品处理简便易行,可用于卡马西平的血药浓度测定及药动学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸的浓度。方法:血浆样品用甲基叔丁基醚提取,离心后取上清液氮气吹干,流动相复溶后进行UPLC-MS/MS测定。色谱柱:BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.01 mol.L-1醋酸铵(72∶28);流速:0.15 mL.min-1;柱温:40℃,进样量:8μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419→199,437→303,405→199。结果:血浆样品中辛伐他汀、辛伐他汀羟基酸线性范围分别为0.241～61.76 ng.mL-1(r=0.999,n=5)和0.344～88.16 ng.mL-1(r=0.997,n=5),日内、日间精密度(RSD)均小于15%,方法的平均回收率分别为100.6%和106.0%,血浆基质对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀羟基酸测定无干扰。结论:建立的UPLC-MS/MS法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为辛伐他汀制剂的临床药代动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

UPLC-MS/MS法测定犬血浆中的盐酸右哌甲酯

目的建立犬血浆中盐酸右哌甲酯的UPLC-MS/MS检测方法。方法用甲基叔丁基醚提取犬血浆,离心后取上清液用氮气吹干,用甲醇-水(80∶20)溶解后进行质谱分析。采用BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸(80∶20),流速0.1 mL·min-1,柱温45℃,进样量5μL。电喷雾离子化(ESI),正离子模式多重反应选择离子检测(MRM),盐酸右哌甲酯及卡马西平内标的检测离子对分别为m/z 234.33→84.56和237.35→194.31。结果盐酸右哌甲酯的线性范围为0.1～50 ng·mL-1(r=0.994,n=5),在犬血浆基质中,高、中、低浓度的日内、日间RSD均小于15%,方法的回收率为89%～103%,血浆基质对测定无干扰。结论所用方法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,为盐酸右哌甲酯制剂的临床药物动力学研究提供了简便、准确的分析测定方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中替诺福韦的浓度

目的:建立大鼠血浆中替诺福韦浓度的测定方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。取6只大鼠单次灌胃给予富马酸替诺福韦酯100mg.kg-1,检测给药45min后血浆中药物浓度,以恩替卡韦为内标,选用阳离子固相萃取柱除去血浆中的蛋白质。色谱柱为AcquitybenUPLC-C18,流动相为0.2%甲酸水溶液(含40mmo.lL-1醋酸铵)-乙腈=97:3,流速为0.25mL.min-1,柱温为40℃,电喷雾正离子(ESI+)源,监测离子对分别为质荷比(m/z)287.9→175.7(替诺福韦)和m/z277.9→151.7(恩替卡韦)。结果:替诺福韦检测浓度的线性范围为10～800ng.mL-1(r=0.9992),最低检测限为10ng.mL-1,回收率为(100.22±9.47)%～(102.76±4.99)%,日间、日内RSD均小于9.4%;给药45min后血浆样品中替诺福韦的平均浓度为819.2ng.mL-1。结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于血浆中替诺福韦的浓度测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度

目的:建立灵敏的超高效液相色谱-质谱联用法测定比格犬血浆中的阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的浓度。方法:选用Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,分别以0.5%甲酸/5 mmol.L-1醋酸铵-乙腈和2 mmol.L-1醋酸铵-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样品采用乙酸乙酯提取后进样,通过电喷雾电离源,以多重反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 178.9→136.9(阿司匹林)、m/z 136.9→64.9(水杨酸)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定阿司匹林和水杨酸;m/z 249.6→58.9(单硝酸异山梨酯)和m/z 293.7→250.0(内标,双氯酚酸钠)测定单硝酸异山梨酯。结果:阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的线性范围分别为2.0～2000.0,20.0～16000.0,9.6～9557.0 ng.mL-1;定量下限分别可达2.0,20.0,9.6 ng.mL-1;日内、日间精密度(RSD)均小于15%。结论:本方法灵敏度较高,血浆用量少,适用于比格犬血浆样品中阿司匹林、水杨酸和单硝酸异山梨酯的测定和药物动力学研究。     

在线固相萃取-液质联用法定量分析生物基质中丁香醛及其在大鼠体内药代动力学研究中的应用

目的建立测定SD大鼠血浆中丁香醛的在线固相萃取-液质联用法(on-line SPE LC-MS/MS)。方法采用乙腈沉淀蛋白后,取上清经on-line SPE系统进行血浆样品预处理,选用香兰素为内标,以LC-MS/MS法测定大鼠血浆中丁香醛的含量。色谱柱为GRACE Alltima HP C18(50 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(60∶40,V∶V),流速为0.4 ml·min-1。电喷雾离子化(ESI)方式,采用多反应监测,检测离子为正离子,分别选择m/z 182.3→m/z123.1和m/z 153.1→m/z 93.0作为丁香醛和内标物香兰素的检测离子对。结果丁香醛在10.0～2 000μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。方法的准确度(相对误差,RE)范围为-8.5%～5.9%;日内精密度(相对标准偏差,RSD)<16.3%,日间精密度RSD<13.8%。SD大鼠灌胃给予丁香醛(17.5 mg.kg-1和70 mg.kg-1)后,主要药动学参数:T12分别为41.9 min和54.0 min、Cmax分别为361.0μg·L-1和944.0μg·L-1、Tmax分别为10.0 min和27.5 min、CL分别为848.1 ml·min-1.kg-1和683.9 ml·min-1·kg-1。结论建立的基质中丁香醛的测定方法快速、准确、特异性好,适用于丁香醛在SD大鼠体内的药代动力学研究。     

LC-MS／MS法测定健康人体中氢溴酸加兰他敏的浓度及其制剂的生物等效性研究

目的：建立专属灵敏的LC-MS／MS法测定健康人体血浆中氢溴酸加兰他敏，并进行药动学及生物等效性研究。方法：对20名健康受试者采用随机双交叉试验设计，分别单剂量口服氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂10mg，采用LC-MS／MS法测定受试者血浆中氢溴酸加兰他敏浓度，用DAS2．0软件计算相关药动学参数，评价两制剂的生物等效性。血浆样品经液-液萃取后，以甲醇-醋酸盐缓冲液（50：50）为流动相，LichrospherC6心柱（250mm×4．6mm，5μm）分离；样品经电喷雾离子源正离子化后，通过三重四极杆串联质谱仪，在多反应监测模式下对加兰他敏（m／z287．9→m/z 212．9）和内标盐酸克伦特罗（m／z277→m／z 202．7）的浓度进行测定。结果：氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂的主要药动学参数为：cmax分别为（66．19±16．7）和（59．29±16．9）μg/L，Tmax分别为（0．59±0．28）和（0．81±0．56）h；t/2分别为（7．11±0．91）和（7．04±0．84）h，平均驻留时间分别为（9．80±1．35）和（9．87±1．18）h，AUC0-36分别为（453．47±132．77）和（445．62±87．79）μg·h／L，AUC0-∞分别为（469．05±140．30）和（460．49±92．20）μg·h／L，V/F分别为（180．10±77．71）和（201．10±74．95）L，CL／F分别为（23．99±6．20）和（24．21±5．13）L／h。以AUC0-36计算，受试制剂的相对生物利用度为（101．5±19．1）％。结论：本试验测得氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂主要药动学参数与国内外文献报道基本一致。数据分析结果表明，两制剂生物等效。本试验方法专属性好，灵敏度高，快速简便。     

盐酸坦洛新缓释胶囊在犬体内的药动学

目的建立犬血浆中坦洛新浓度的测定方法,并应用于盐酸坦洛新缓释胶囊中坦洛新犬体内的药动学研究。方法液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定犬血浆中的坦洛新浓度。坦洛新血浆样品经乙酸乙酯萃取,Agilent ZORBAX SB-C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离,阿立哌唑为内标,流动相A为体积分数为0.1%的甲酸水溶液,B为乙腈,线性梯度洗脱,电喷雾电离源(ESI),以多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)方式进行正离子检测,用于分析的定量离子分别为m/z409→m/z228(坦洛新),m/z 447.5→m/z 284.8(内标:阿立哌唑)。结果犬血浆中坦洛新的线性为0.1～20.0μg.L-1,定量下限为0.1μg.L-1,日内和日间精密度(RSD)均小于13.59%,准确度(relative error,RE)为-2.54%～4.27%。结论本方法适用于盐酸坦洛新缓释胶囊在犬体内的药动学研究。     

液相色谱串联质谱法测定人血浆中文拉法辛及其代谢物的浓度

目的建立测定血浆中文拉法辛及其代谢物O-去甲基文拉法辛的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法。方法血浆样品中加入内标(氘6-文拉法辛和氘6-O-去甲基文拉法辛),直接沉淀法处理样品。色谱柱为CAPCELL PAK C18 MGⅢ分析柱(100 mm×2.0 mm,5μm),流动相为含0.3%甲酸的水溶液-含0.3%甲酸的乙腈溶液(78∶22,V/V),流速为0.3 mL.min-1。正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 278→58(文拉法辛)、m/z 264→58(O-去甲基文拉法辛)、m/z 284→58(氘6-文拉法辛)、m/z 270→58(氘6-O-去甲基文拉法辛)。结果文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的线性范围均为2～1 000μg.L-1,定量下限均为2μg.L-1,提取回收率在90.14%～97.33%,批内、批间RSD均小于8%。结论本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于人血浆内文拉法辛和O-去甲基文拉法辛的含量测定研究。