姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马PI3K及p-PI3K表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠磷酯酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)和磷酸化磷酯酰肌醇-3激酶(phosphorylated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K)表达的影响.方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组(10 mg· kg-1·d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1·d-1),对照组为同月龄同背景的非转基因小鼠.连续灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法检测小鼠海马中PI3K和p-PI3K的蛋白表达.结果:免疫组化染色模型组小鼠大脑海马CA1区PI3K和p-PI3K阳性细胞均较对照组明显减少(P＜0.05);与模型组相比,各干预组PI3K及p-PI3K阳性细胞均有不同程度的增加,而以罗格列酮组与姜黄素中剂量组阳性细胞恢复最为显著(P＜0.01).Western blot检测结果与免疫组化结果基本一致.结论:姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马中已减少的PI3K和p-PI3K蛋白有所恢复,提示姜黄素可能通过调节PI3K途径的胰岛素信号转导通路发挥抗AD作用.     

姜黄素对AD双转基因小鼠的Aβ产生神经保护作用的影响

目的:观察姜黄素对3月龄APPswe/PS1d E9双转基因小鼠干预6个月脑内Aβ40,Aβ42和Aβ42寡聚体-ADDLs的变化,探讨姜黄素的神经保护作用。方法:将APPswe/PS1d E9双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组(10 mg·kg-1·d-1)和姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1·d-1),正常对照组采用的是同月龄同背景的C57/BL6J小鼠,于3月龄开始连续灌胃6个月,运用免疫组织化学方法和Western blot方法观察小鼠海马CA1区Aβ40,Aβ42和ADDLs的阳性细胞及分布和蛋白表达的变化。结果:免疫组织化学和Western blot方法均观察到模型组小鼠海马CA1区Aβ40,Aβ42和ADDLs阳性细胞数和蛋白表达均较对照组增加(P<0.01)。与模型组相比,免疫组化结果罗格列酮组与模型组相比均降低(P<0.05),Western blot见显著减低(P<0.01);姜黄素高剂量组Aβ40,Aβ42和ADDLs阳性细胞数和蛋白表达均减少,中剂量组显著减少(P<0.01),低剂量组Aβ40和Aβ42蛋白表达也减少。结论:姜黄素连续干预6个月仍可以显著减少APPswe/PS1d E9双转基因小鼠脑内海马Aβ40,Aβ42和ADDLs的表达,姜黄素是否可以通过下调Aβ40,Aβ42和ADDLs的表达,影响Aβ级联反应,从而发挥神经保护,还需要更深入的研究。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马IRS-1和p-IRS-1表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响.方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照罗格列酮组(10mg.kg-1·d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,l00mg.kg-1·d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠.灌胃3个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR方法进行检测.结果:IRS-1和p-IRS-1免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较对照组明显增加(P＜0.01),p-IRS-1明显减少(P＜0.01);与模型组相比,姜黄素各干预组可减少IRS-1阳性细胞数(P＜0.05或P＜0.01),并升高p-IRS-1阳性细胞数(P＜0.05或P＜0.01).Westem blot检测海马IRS-I和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组织化学检测结果一致.RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组织化学和Western blot结果相反.结论:姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并增加IRS-1 mR-NA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗AD作用.     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠突触 相关蛋白表达的影响

目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic densityprotein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shank1表达的影响。方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10 mg.kg-1.d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg.kg-1.d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠。灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05)。PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复。Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05)。结论:姜黄素增加APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基因小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力。     

还脑益聪方提取物对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织Aβ、APP及相关分泌酶表达的影响

目的 观察由补肾益气、活血解毒中药组成的还脑益聪方提取物对β-淀粉样前体蛋白(APP)转基因造成的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响,并初步探讨其作用机制.方法 将3月龄AD模型小鼠随机分为模型组、还脑益聪方提取物大、小剂量组(2.8,1.4 g·kg-1)和盐酸多奈哌齐组(0.65×10-3g·kg-1),每组15只;同月龄相同遗传背景的C57BL/6J小鼠15只作为正常对照组.所试药物稀释相同体积灌胃给药,对照组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续灌胃6个月.采用免疫组织化学法结合彩色图像分析法观察各组小鼠脑组织APP、Aβ、β位点剪切酶(BACE)和早老蛋白1(PS-1)的表达;采用刚果红染色观察各组小鼠脑组织淀粉样沉积的变化.结果 与正常对照组相比,模型组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著增多(P<0.01),刚果红染色示橘红色染色增多;与模型组相比,还脑益聪方组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著减少(P<0.05或P<0.01).橘红色染色较少.结论 还脑益聪方提取物可通过减少脑组织的APP含量及抑制β-和γ-分泌酶,从而减少AD模型小鼠脑组织Aβ的生成及淀粉样沉积的形成,这也是其改善AD模型小鼠学习记忆能力的机制之一.     

清心开窍方对老年痴呆小鼠脑自由基代谢及海马CA1区神经细胞形态的影响

目的:探讨清心开窍方对老年痴呆模型小鼠脑内自由基代谢及海马CA1区神经细胞形态学的影响。方法:将150只小鼠随机分为五组,即空白对照组、模型组、模型 中药大剂量组(14.82 g·kg-1)、模型 中药小剂量组(7.41 g·kg-1)、模型 脑复康对照组(0.42 g·kg-1)。除空白对照组外,其余各组均每日灌服AlCl3造摸(200 mg·kg-1),用药各组自造模第7 d起,每日上午给予AlCl3灌胃,下午给予相应的药物,每日1次,连续8周,9周后评定疗效。测小鼠学习记忆功能和脑内自由基代谢指标(SOD、MDA、LF)及对海马CA1区神经细胞形态学观察。结果:中药各组能明显减少海马神经细胞的破坏,提高SOD活性,降低MDA及LF含量(P<0.01),学习记忆能力明显改善。结论:清心开窍方能改善AD小鼠学习记忆的能力,对海马神经细胞具有保护作用,提高痴呆小鼠的抗氧化能力,降低氧自由基对机体的损伤,而对AD具有很好治疗作用。     

参术胶囊对脾虚胃癌小鼠ERK信号通路中AP-1和IL-2的影响

目的:研究参术胶囊对脾虚胃癌小鼠细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路中转录激活蛋白-1(AP-1)和白细胞介素-2(IL-2)的影响,以探讨参术胶囊阻断脾虚胃癌发生的机制.方法:随机取17只SPF小鼠作为空白组正常喂养,其余小鼠均首日给予山西白醋15 mL·kg-1·d-1灌胃,次日给予10 mL·kg-1·d-1灌胃,连续9d,第10天给予N-亚硝基二乙胺(DENA)按2.8 mg· kg-1·d-1灌胃,连续110 d,建立脾虚胃癌小鼠模型.将模型动物随机分为模型组、胃复春片718 mg·kg-1·d-1剂量组、参术胶囊440,220,110 mg·kg-1 ·d-1剂量组,试验组从111 d起灌胃给药,连续30 d.实验结束后,观察各组小鼠一般情况的变化;HE染色观察参术胶囊是否阻断脾虚胃癌的发生;用免疫组化法研究参术胶囊对诱导脾虚胃癌模型ERK1/2,AP-1,IL-2等指标的影响.结果:参术胶囊作用脾虚胃癌小鼠模型30 d后,能改善诱发型脾虚胃癌小鼠模型一般状态,其病理表现较模型组明显减轻,免疫组化结果显示胃复春片组和参术胶囊440,220 mg·kg-1 ·d-1剂量组均能明显增强模型动物ERK1/2,AP-1,IL-2的表达(P ＜0.05,P ＜0.01),参术胶囊110 mg·kg-1·d-1剂量组能明显增强模型动物ERK1/2的表达(P＜0.01),而对AP-1,IL-2的表达无明显改善.结论:参术胶囊可通过ERK信号通路阻断脾虚胃癌发生.     

肾病1号口服液对实验性急性肾功能衰竭大鼠肾功能的影响

目的 观察肾病1号口服液对急性肾功能衰竭大鼠肾功能的影响.方法 SD大鼠50只随机分为正常组(正常大鼠,生理盐水1.5ml/d灌胃)、模型组(模型大鼠,生理盐水1.5ml/d灌胃)、地塞米松组(模型大鼠,地塞米松0.1mg·kg-1·d-1灌胃)、肾病1号组(模型大鼠,肾病1号口服液10ml·kg-1·d-1及20ml·kg-1·d-1灌胃).结果 肾病1号口服液可使急性肾功能衰竭大鼠血清尿索氮、肌酐降低,尿量增加.结论 肾病1号口服液对急性肾功能衰竭有治疗作用.     

紫杉醇脂质体联合中药姜黄素对小鼠转移性肺癌的影响

目的:观察紫杉醇脂质体联合中药姜黄素腹腔注射或雾化吸入对小鼠转移性肺癌的影响。方法:小鼠于皮下接种瘤细胞悬液复制肿瘤模型。造模后第7、10、13、16、19、22 d,模型组雾化吸入生理盐水;紫杉醇腹腔注射组及雾化组分别腹腔注射或雾化吸入5 mg·kg-1紫杉醇脂质体;紫杉醇腹腔注射+姜黄素灌胃组及紫杉醇雾化+姜黄素雾化吸入组腹腔注射及雾化吸入5 mg·kg-1紫杉醇脂质体,隔天灌胃及雾化吸入50 mg·kg-1姜黄素溶液;环磷酰胺组腹腔注射60 mg·kg-1环磷酰胺;5d为1个周期,干预22 d。造模后第30 d处死小鼠,剖取完整瘤块,计算抑瘤率。结果:联合用药组大鼠瘤重明显低于单用紫杉醇组(P0.05),且抑瘤率均高于单用紫杉醇组的抑瘤率;但紫杉醇腹腔注射联合姜黄素灌胃组小鼠死亡较多,雾化吸入组小鼠未见死亡。结论:紫杉醇联合姜黄素雾化吸入具有较好的抑制肿瘤作用,且可以维持肿瘤小鼠治疗期间存活率,具有抗肿瘤治疗的潜力。     

桂枝汤苯丙烯类化合物对APP转基因AD小鼠学习记忆障碍的影响

目的:探讨桂枝汤苯丙烯类化合物(PCGZT)对APP转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠模型记忆障碍影响及其部分作用机制。方法:按体重随机将3月龄APP695V717转基因小鼠随机分为模型组,阿司匹林组(20 mg·kg-1·d-1),脑复康组(600 mg·kg-1·d-1),石杉碱甲组(0.3 mg·kg-1·d-1)和PCGZT大、中、小剂量(64.4,32.2,16.1 mg·kg-1·d-1)组,每组10只;另取C57BL/6J小鼠10只作为空白组。各组小鼠每天给药1次,约10月龄时,进行Morris水迷宫实验和跳台实验,测定小鼠脑组织丙二醛(MDA)含量,血清中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9含量。结果:与模型组比较,PCGZT可以减少APP转基因AD小鼠跳台反应时间,降低错误期总时间和错误次数,提高安全期总时间(P0.05);PCGZT小剂量组提高APP转基因AD小鼠在Morris迷宫实验中站台象限路程比率(P0.01)和站台象限时间比率(P0.05)。同时,PCGZT可以降低AD小鼠脑MDA含量(P0.05)和血清中MMP-9含量(P0.05),对MMP-2含量无影响。结论:PCGZT能够明显改善APP转基因AD小鼠学习记忆障碍,其作用机制可能涉及多个药物靶点。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区AKT及p-AKT表达的影响

目的: 观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠丝/苏氨酸激酶(serine-threonine kinase, AKT,又称PKB)和磷酸化的丝/苏氨酸激酶(phosphorylated serine-threonine kinase, 即p-AKT)表达的影响. 方法: 将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为5组,分别为模型组、罗格列酮组(10 mg·kg^-1·d^-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg^-1·d^-1),选取同月龄同背景的非转基因小鼠为对照组.连续灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法检测小鼠海马CA1区中AKT和p-AKT的蛋白表达. 结果: 免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区AKT和p-AKT阳性细胞均较对照组明显减少(P<0.05,P<0.01),与模型组相比,罗格列酮组与姜黄素高、中剂量组AKT和p-AKT阳性细胞均有明显恢复(P<0.05,P<0.01),其中姜黄素中剂量组p-AKT阳性细胞数增加最为显著(P<0.01).Western blot检测结果与免疫组化结果基本一致. 结论: 姜黄素可以使AD模型APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区中减少的AKT和p-AKT细胞有所恢复,提示姜黄素可能通过调节AKT及其磷酸化过程,从而进一步调节PI3K/AKT途径的胰岛素信号转导通路发挥抗AD作用.     

URWell对吗啡依赖小鼠戒断反应和NO/NOS系统的影响

目的:研究中药URWell对吗啡依赖小鼠催促戒断症状及其一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)系统的影响,初探其作用机制。方法:取昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组,模型组,阳性对照组(可乐定,0.4 mg.kg-1.d-1,ig),URWell组(以生药计剂量分别为20,10,5 g.kg-1.d-1,ig)。除正常对照组外,各组以剂量递增法连续皮下注射吗啡,建立吗啡依赖模型,于建模第5天开始各组分别给予相应的药物,连续给药6 d。各组于建模第8天,予以纳络酮(4 mg.kg-1,ip)催促戒断,观察小鼠2 h内的戒断症状和体重变化。用硝酸还原酶法测定各组小鼠大脑组织匀浆的NO含量与NOS活性。结果:与模型组比较,URWell组(20,10 g.kg-1.d-1)小鼠在第8,9天跳跃反应明显降低(P<0.05),可乐定组和URWell组(20,10 g.kg-1.d-1)小鼠戒断后体重降低明显减少(P<0.05),可乐定组和URWell组(20g.kg-1.d-1)小鼠大脑NO含量及NOS活性下降(P<0.05)。结论:URWell能抑制吗啡依赖小鼠催促戒断症状,其作用机制可能与URWell影响大脑的NO/NOS系统有关。     

补肾化痰益智法对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响

目的: 观察补肾化痰益智法对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响并探讨其可能机制。方法: 随机将APP/PS1双转基因小鼠分为模型组、西药多奈哌齐组(6.5×10^-4g·kg^-1·d^-1)、补肾化痰益智方高、低剂量组(15.6,7.8 g·kg^-1·d^-1), 每组10只。空白组为10只同月龄相同遗传背景C57BL/6J小鼠。从3月龄开始对小鼠分别实施灌胃治疗, 每日1次。空白组、模型组均给予等容积的生理盐水灌胃。连续灌胃3个月后,进行跳台实验及穿梭箱实验评定各组小鼠的学习记忆能力;采用比色法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果: 跳台实验结果显示,与模型组比较, 各组小鼠的潜伏期明显延长和出错次数明显减少(P < 0.01);穿梭箱实验结果显示,与模型组比较,各组小鼠的主动回避次数明显增加(P < 0.01,P < 0.05),主动回避潜伏期、被动回避潜伏期明显缩短(P < 0.01);西药组和补肾化痰益智方高、低剂量组小鼠脑组织中SOD活性较模型组显著升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01)。结论: 补肾化痰益智方对APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆具有一定的改善作用,且可能与其抗氧化作用有关。     

补肾化痰益智方对APPV717I小鼠学习记忆能力和海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响

目的:观察补肾化痰益智方(BSHT)对APPV717I转基因小鼠干预效果,揭示其可能作用机制。方法:将3月龄APPV717I转基因小鼠120只分为2批,每批60只,每批又随机分为5组,分别为多奈哌齐(0.000 92 g·kg~(-1)·d~(-1))组,补肾化痰益智方低、中、高剂量组(5.2,10.4,20.8 g·kg~(-1)·d~(-1)),模型组(APP),每组12只(雌雄各半);同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠24只作为正常组,灌胃给药,模型组及正常组予等容积双蒸水灌胃,每日1次。第1批小鼠给药8个月,第2批给药4个月,最后同时以Morris水迷宫进行行为学检测,分别以酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫印迹法测定(Western blot)海马神经元Tau蛋白磷酸化(p-Ser 199/202,Tau-1)的表达水平。结果:行为学实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠的潜伏期有所延长(P0.05,P0.01);各治疗组与模型组比潜伏期明显缩短(P0.05)。ELISA和Western blot实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠海马神经元的Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度显著升高(P0.01);各治疗组Ser199/202磷酸化位点磷酸化水平较模型组比明显缩短(P0.05,P0.01)。结论:补肾化痰益智方可以改善Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度,防止神经原纤维缠结(NFT)的形成,从而改善APPV717I转基因小鼠早期的学习记忆能力。     

舒肝解郁胶囊对老年痴呆小鼠学习记忆能力的改善作用

目的:观察舒肝解郁胶囊(Shugan Jieyu capsule,SGJY)对老年痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠学习记忆能力的影响。方法:72只KM小鼠随机分为6组,即正常组、模型组、石杉碱甲组(0.07 mg·kg-1)及SGJY高、中、低剂量组(480,240,120 mg·kg-1)。各组每天均灌胃给药一次,给药体积为20 m L·kg-1,连续14 d。末次给药1 h后除正常组外均ip3 mg·kg-1氢溴酸东莨菪碱,20 min后进行水迷宫测试,收集血清及全脑并测定其血清及脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平。另取10只人鼠淀粉样前蛋白(APPswe)阴性转基因小鼠为正常组,50只APPswe阳性转基因小鼠随机分为5组,分组及剂量同前,连续灌胃给药30 d,末次给药1 h后进行跳台潜伏期与水迷宫测试(逃避潜伏期及游泳路径)。结果:与正常组比较,两种模型组小鼠逃避潜伏期及游泳路径均显著高于正常组(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,SGJY高、中、低剂量组均可不同程度地降低跳台实验逃离电击潜伏期及Morris水迷宫实验到达安全平台的潜伏期及总路程,尤其以高、中剂量组最为显著(P<0.01),且呈明显量效关系。同时3个剂量组均能显著改善脑组织中的MDA及T-AOC水平(P<0.01)。结论:舒肝解郁胶囊可显著改善老年痴呆小鼠学习记忆能力。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对酒精性肝病小鼠肝脏Tf和TfR1表达的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对酒精性肝病(ALD)小鼠肝脏转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体1(TfR1)表达的影响。方法:6～8周龄雄性无特定病原体(SPF)级C57/BL6小鼠随机分为正常组和模型组,模型组小鼠每日予乙醇灌胃,并于造模第9周随机分为模型组,EGCG 10,20,30 mg·kg-1组。给药4周后处死小鼠,观察各组小鼠肝脏病理变化,并测定肝功能、肝肝铁含量,采用蛋白免疫印迹法检测肝组织Tf,TfR1的表达。结果:模型组小鼠与正常对照组相比血清谷丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平显著升高(P<0.01),肝组织病理表现肝细胞呈中度脂肪变性,肝铁含量及肝脏Tf,TfR1表达显著升高(P<0.01)。EGCG治疗组显著降低血清ALT,AST水平(P<0.01),肝组织病理变化可见显著改善,肝铁含量及肝脏Tf,TfR1表达显著降低(P<0.01)。结论:EGCG可以降低ALD小鼠肝脏Tf,TfR1的表达水平,抑制肝铁摄取,从而发挥其对酒精性肝病的保护作用。     

儿童环孢素给药剂量的年龄差异

 目的了解儿童患者环孢素(CsA)血药浓度个体差异的发生规律,为儿童合理用药服务。方法采集2002.7～2006.8间在浙江大学医学院附属儿童医院进行环孢素血药浓度监测的样本,筛选出74例供分析用,其中男35例,女39例,年龄2月～15.8岁;研究各个年龄段儿童平均给药剂量的差异。结果各个年龄段儿童的平均给药剂量具有显著差异(P=0.000)。以2.1～3岁患儿平均给药剂量最大(12.85mg·kg^-1·d^-1),其次为3.1～6岁(7.26mg·kg^-1·d^-1),1.1～2岁(6.98mg·kg^-1·d^-1),6.1～8(5.69mg·kg^-1·d^-1),8.1～12岁(5.44mg·kg^-1·d^-1),12.1～16岁(5.36mg·kg^-1·d^-1),0～1岁(5.04mg·kg^-1·d^-1)。结论在临床上考虑不同年龄儿童的个体发育特征,对于增加首剂量给药的有效性非常重要。