四种产地全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE法分离研究

目的:探索四种产地野生全蝎粉中可溶性蛋白质SDS-PAGE法所获得电泳图谱条带的一致性,并确定其大致分子量。方法:采用55%乙醇提取、75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉可溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉可溶性蛋白质的相对分子量。结果:山东平邑、山东龙口、山东长清、山东沂源四种产地全蝎粉的水溶性蛋白饱和溶液中的蛋白含量分别为4.006,2.894,3.795,4.649 mg/mL;四种产地全蝎粉可溶性蛋白质通过SDS-PAGE法均获得了7条较清晰的电泳谱带,对应的相对分子量分别为42.563,33.938,27.060,22.354,19.402,3.422,1.929 KDa。结论:这7条全蝎可溶性蛋白质的特征谱带可用于中药全蝎粉的真伪鉴别。     

不同产地冬虫夏草腺苷含量的测定

目的 :评价不同产地冬虫夏草的药材内在质量。方法 :以腺苷含量作为评价冬虫夏草内在质量的主要指标 ,以高效液相法测定来源于 13个产地的优质冬虫夏草的腺苷含量。结果 :13个产地冬虫夏草的腺苷含量为0.1425～0.396 6mg·g^-1,其中藏草腺苷含量高于川草 ;在川草中 ,炉草腺苷含量高于滇草 ,灌草最低。结论 :产地不同 ,冬虫夏草的腺苷含量不同。在商品虫草两大类型 (道地品牌 )中 ,藏草优于川草 ,川草中又以炉草为胜。     

青海冬虫夏草资源初探

本文对青海省冬虫夏草资源作了初步介绍，为进一步开发利用，提供依据。     

双向电泳技术筛选鉴定冬虫夏草中指标性蛋白质研究

对名贵中药材冬虫夏草及其伪品建立稳定可靠的双向电泳鉴定方法。正品冬虫夏草中共同表达的蛋白质斑点为88个,伪品稳定差异表达的蛋白质斑点为21个,提示可作为下一步冬虫夏草鉴定的指标性组分。进一步质谱分析与NCBI数据库比对表明:6种蛋白仅来自于菌数据库,9种蛋白仅来自于昆虫数据库,12种蛋白仅来自于全库,3种蛋白昆虫和菌的数据库均能检索,1种蛋白仅来自于菌数据库和全库,提示下一步可进行冬虫夏草指标性蛋白质功能研究,为冬虫夏草有效成分研究奠定基础。     

HPLC测定不同产地冬虫夏草中氨基酸的含量

目的:建立一种快速测定冬虫夏草中氨基酸含量的HPLC方法,同时测定了不同产地的冬虫夏草中氨基酸含量。方法:采用柱前邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯联合在线自动衍生、二元梯度洗脱(流动相A:40mmol/L NaH2PO4·H2O,pH7.8;流动相B:乙腈-甲醇-水=4.5/4.5/1,v/v)、反相C18短柱分离(色谱柱:Zorbax Eclipse AAA C18柱,75mm×4.6mm,3.5μm)、二极管阵列检测器(检测波长:338nm;参考波长:390nm)和荧光检测器(激发波长:340nm;发射波长:450nm)联合检测,内标法定量。结果:各氨基酸含量在4.5～1000μmol/L范围内线性关系良好(相关系数为0.9914～0.9997),除蛋氨酸(部分氧化降解)为85.12%外,其他各氨基酸的加标回收率为95.10%～103.29%,相对标准偏差为2.03%～5.12%(n=5)。结论:本方法适合于冬虫夏草氨基酸含量的测定。对分别采自青海省果洛州和玉树州、四川甘孜州、贵州铜仁市和西藏那曲县等5个地区的冬虫夏草中氨基酸含量进行了测定,氨基酸总量分别为21.10%、16.87%、20.86%、20.94%和20.28%,同时对各种不同类型氨基酸占氨基酸总量的比例进行了分析。     

甘肃不同产地冬虫夏草品质特征研究

目的:了解甘肃产冬虫夏草的品质特征。方法:以甘肃(天祝、积石山、玛曲、尕海和夏河)和青海(同仁)产冬虫夏草为研究对象,采用高效液相色谱仪(HPLC)和比色法测定其主要有效成分含量。结果:甘肃产冬虫夏草个体较小[(0.1044±0.005)~(0.1904±0.009)g/株]。各产地冬虫夏草腺苷和甘露醇含量差异不明显,分别为(0.320±0.088)~(0.613±0.076)mg/g和(1.66±0.09)~(2.23±0.07)mg/g;嘌呤含量差异显著,积石山和玛曲的含量较高;虫草多糖含量最高的是天祝和积石山的样品,同仁最低;麦角甾醇含量以同仁产的最高,但与天祝和夏河产冬虫夏草的差异不明显。结论:甘肃各产地冬虫夏草个体较小,主要有效成分含量与青海产虫草差异不大,具有较高的品质。     

不同产地冬虫夏草清除羟自由基作用的研究

目的：研究和比较来自不同产地的冬虫夏草对羟自由基的清除作用。方法：采用邻二氮菲-Fe^2 氧化法检测来自不同产地冬虫夏草水提液对H^2O^2／Fe^2 体系产生的羟自由基的清除作用。结果：来自西藏那曲地区、云南滇西北地区和四川川西北地区的冬虫夏草均对Fenton反应产生的羟自由基有显著或极显著的清除作用，且来自不同微生态环境的样品之间的清除作用差异比来自不同主产区样品之间的清除作用差异更明显。结论：冬虫夏草水提液有明显地清除羟自由基的作用，且微生态环境对该作用有较大的影响。     

不同产地冬虫夏草清除羟自由基作用的研究

目的 比较不同产地冬虫夏草对羟自由基的清除作用。方法 采用邻二氮菲-Fe^2 氧化法检测不同产地冬虫夏草水提液对H2O2／Fe^2 体系产生的羟自由基的清除作用。结果 来自西藏那吐地区、云南滇西北地区和四川川西北地区的冬虫夏草均对Fenton反应产生的羟自由基有显著或极显著的清除作用，且来自不同微生态环境的样品之间的清除作用差异比来自不同主产区样品之间的清除作用差异更明显。结论 冬虫夏草水提液有明显地清除羟自由基的作用，且微生态环境对该作用有较大的影响。     

不同产地冬虫夏草甘露醇含量比较

目的：为弄清产区多元化对虫草药性品质的影响，对来自不同产地虫草的甘露醇含量进行初步的分析比较。方法：对不同产地虫草样本的甘露醇含量进行直接比较和相互变异率分析。结果：大宗药材川草、藏草、滇草以及泸草、灌草之间甘露醇含量的相互变异率为0.012—0．32，而各大宗药材内来自不同微生态环境的虫草样本之间甘露醇含量的相互变异率为0．037—1.36。结论：虫草甘露醇含量受物种多样性和微生态环境的影响，超过了大的地域气候的影响。     

冬虫夏草化学成分研究进展

冬虫夏草是我国的名贵中药材,是冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫的子座及幼虫尸体的复合体.含有氨基酸、核苷、多糖、甾醇及甘露醇等多种活性成分,另外还含有脂肪酸、挥发油以及无机元素等多种成分.对近年来国内外关于冬虫夏草化学成分的研究进行综述.     

冬虫夏草用药部位描述的商榷

对国家药典所载冬虫夏草用药部位的描述进行商榷。建议描述为:冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.侵染了蝙蝠蛾科昆虫幼虫而形成的成熟菌体及幼虫尸体的干燥复合体,对冬虫夏草的基原描述提出新的观点,为其描述的准确性提供新的参考。     

冬虫夏草与其混淆品的性状及显微鉴别研究

目的:提供一种既简单又方便的方法,来区分正品冬虫夏草及其混淆品.方法:采用性状鉴别法,观察虫草类的虫体及子座,以及粉末显微鉴别法.结果:性状鉴别方面,冬虫夏草的正品及混淆品可通过子座的有无或形状,菌膜、虫体气门的排列方式和虫体颜色等特征区分.显微鉴别方面,则可从虫体体壁细胞的表面纹理,及背、足部短刚毛的有无、长短、形状和排列方式等各方面鉴别其品种.结论:该方法简单易行,可用于鉴别冬虫夏草的正品及混淆品.     

人工冬虫夏草联合糖皮质激素对大鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨人工冬虫夏草(虫草菌液)联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法:50只SD大鼠,随机分为5组:正常对照组、模型组、虫草菌液组、强的松组、虫草菌液联合强的松组(联合组).采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给药灌胃治疗,正常组和模型组给予生理盐水.第28天处死动物,肺组织标本行HE染色及MASSON染色进行病理形态学观察、Ashcroft纤维化评分,碱水解法检测肺组织HYP含量,免疫组化检测肺组织CTGF蛋白表达,酶联免疫法检测肺泡灌洗液上清TGF-β1含量.结果:与模型组相比,虫草菌液、强的松组能够降低肺组织纤维化评分,减少肺组织胶原沉积、HYP含量,下调肺组织CTGF蛋白表达,降低BLAF中TGF-的含量;联合组分别与虫草菌液组、强的松组比较,能够进一步减少肺纤维化评分、胶原面积、HYP含量,进一步下调CTGF蛋白、TGF-蛋白表达.结论:虫草菌液、强的松对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化有治疗作用,且虫草菌液联合强的松能产生协同治疗效果.     

Modulatory effects of the acid polysaccharide fraction from one of anamorph of Cordyceps sinensis on Ana-1 cells

Ethnopharmacological relevance

Cordyceps sinensis has been used as a precious herbal medicine for thousands of years in China. Its polysaccharide fraction has been confirmed possessing immunomodulatory function and we have reported the acid polysaccharide fraction (APSF), from an anamorph of C. sinensis, has stimulating activity on macrophages. The mechanism still needs to be further elucidated.

Materials and methods

In order to investigate the effects of APSF on macrophage's phenotypes, Ana-1 mouse macrophages were polarized to M2 phenotype by culturing the cells with culture supernatant of H22 cells. M2 phenotype was determined by measuring the expression of TNF-α and checking cell surface markers mannose receptor (MR) and scavenger receptor (SR). After cultured with H22 supernatant for 72 h, the TNF-α level of Ana-1 cells was decreased while the SR and MR expressions were up-regulated, suggesting that Ana-1 cells were polarized towards M2 macrophages. Then the effects of APSF on M2 macrophages were investigated by measuring mRNA levels of TNF-α, inducible nitric oxide synthase (iNOS), IL-12 and IL-10. Nuclear NF-κB was detected by Western blotting.

Results

APSF treatment increased the expressions of TNF-α, IL-12 and iNOS, and reduced the expression of IL-10 of Ana-1 cells. Besides, the expressions of SR and MR were down-regulated by APSF. And the result of Western blotting showed NF-κB level was decreased in M2 macrophages and up-regulated after APSF treatment.

Conclusions

APSF may convert M2 macrophages to M1 phenotype by activating NF-κB pathway.     

蛹虫草化学成分及药理作用研究进展

蛹虫草是一种能寄生在多种鳞翅目昆虫蛹及幼虫上的虫草菌,在免疫调节、抗肿瘤、抗病毒和抗感染等方面有很强的活性,值得深入研究和开发.该文分别从蛹虫草的有效成分及药理作用综述最新研究进展.     

当归饮片趁鲜切制的可行性探讨

目的:探讨当归饮片趁鲜切制代替传统切制方法的可行性。方法:采用化学手段,建立多指标定量、定性评价的方法,评价不同方法切制的当归饮片质量。结果:趁鲜切制的饮片其主要药效成分藁本内酯的含量均低于传统的二次软化切制方法制备的饮片,2种方法切制饮片的指纹图谱相似度基本在90%以上。结论:以趁鲜切制法代替传统切制方法似乎有些不妥,2种方法切制的饮片临床效果是否有差别,仍需进一步研究。     

Comparisons on enhancing the immunity of fresh and dry Cordyceps militaris in vivo and in vitro

Ethnopharmacological relevance

The immunomodulatory capacities of fresh Cordyceps militaris (FCM) and dry Cordyceps militaris (DCM) were compared.

Materials and methods

In vivo immunomodulatory assay, different doses of FCM and DCM were orally administrated over a period of 15 days in a cyclophosphamide (CY) induced immunosuppression mice; in vitro testing, the spleen cells were extracted from healthy mice and treaded with CY, then cultured with different dose of FCM or DCM; the contents of Cordyceps militaris polysaccharide (CMP), cordycepin, adenosine, total polyphenol (TP) and total flavonoids (TF) in FCM and DCM were measured.

Results

Our studys indicated that, FCM was significantly stronger than DCM on increasing the spleen and thymus indexes, spleen lymphocyte activity, macrophage function, and promoting the levels of IL-2, IFN-γ in vivo and in vitro. The contents of immunomodulatory CMP and TF in FCM were markedly higher than in DCM.

Conclusion

All these results suggested that FCM was superior to DCM on enhancing immunity.     

国产沉香中的倍半萜类和单萜类化学成分

目的:研究国产沉香的化学成分.方法:通过多种色谱手段,对国产沉香的石油醚及乙醇提取物进行化学成分分离,采用现代波谱技术对化合物的结构进行鉴定.结果:从国产沉香中分离得到9个化合物,分别鉴定为3,3,7-trimethyltri-cycloundecan-8-one(1),longifolene(2),norlongilactone(3),caryophyllenol-Ⅱ(4),humulene diepoxide A(5),kobusone(6),(一)-bornyl ferulate (7),(24R)-24-ethylecholesta-4,22-dien-3-one (8),(24R)-24-3-ono-4-en-sitosterone (9).结论:化合物2～9均为首次从国产沉香中分离得到的化合物.化合物1～6为倍半萜类化合物,化合物7为单萜衍生物,化合物8,9为甾类衍生物.     

白木香叶化学成分的研究

目的:研究白木香叶的化学成分。方法:应用溶剂法和色谱法分离纯化化合物,利用谱学技术鉴定化合物结构。结果:分离得到33个化合物,本文鉴定12个化合物的结构,分别为5-羟基-7,4’-二甲氧基黄酮(1)、金合欢素(2)、木犀草素(3)、芫花素(4)、芫花苷(5)、腺苷(6)、芫花素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、高次衣草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、次黄嘌呤(9)、尿嘧啶(10)、8-C-β-D-半乳糖基异牡荆素(11)、4-(1,2,3-三羟基丙基)-2,6-二甲氧基苯-1-O-β-D-葡萄糖苷(12)。结论:除化合物1,3,4外,化合物2,5～12均为首次从白木香叶中分离得到。     

白木香叶脂溶性化学成分研究

目的:研究白木香叶脂溶性化学成分.方法:应用溶剂法和色谱法分离纯化化合物,利用谱学技术鉴定化合物结构.结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、二十六烷酸(2)、隐丹参酮(cryptotanshinone,3)、2α-羟基熊果烷(2α-hydroxyursane,4)、二氢丹参酮I(dihydrotanshinone I,5)、丹参酮I(tanshinone I,6)、丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,7)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxyursolic acid,8)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,9)、对羟基苯酚(hydroquinone,10)和胡萝卜苷(11).结论:除化合物9外,其他化合物均为首次从白木香叶中分离得到.