延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A2基因MspI多态性位点研究

[目的 ]了解中国朝鲜族人群的Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点的存在和等位基因频率 ,并与其它地区人群进行比较 .[方法 ]按酚 氯抽提法提取人类基因组DNA ,采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性方法对Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性位点进行检测 .[结果 ]12 0名个体中 ,无酶切位点的纯合个体为 89例 ,P-P-基因型频率为 74 2 % ;有酶切位点的杂合个体为 2 2例 ,P+ P-基因型频率为 18 3% ;有酶切位点的纯合个体为 9例 ,P+ P+ 基因型频率为 7 5 % ;2 4 0个等位基因中MspI酶切位点基因P+ 的频率为 16 7% .[结论 ]延边朝鲜族人群Ⅰ型胶原蛋白A 2基因存在多态性 ,Ⅰ型胶原蛋白A 2基因MspI多态性分布与其它地区人群的分布有所不同 ,可以作为朝鲜族的一个遗传标记 .     

北京地区汉族妇女雌激素受体基因PvuⅡ多态性与骨密度的关系

目的　探讨北京地区汉族妇女雌激素受体 (ER)基因PvuⅡ多态性与骨密度 (BMD)的关系。方法　采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)法 ,检测 179例北京地区汉族妇女ER基因PvuⅡ多态性。采用双能X线吸收仪 (DEAE)测量腰椎、近端股骨及前臂骨密度 ,并分析其相关性。结果　北京地区汉族妇女ER基因 pp、Pp、PP基因型频率分别为 0 .35 2、0 .4 6 4和 0 .184 ,绝经前与绝经后妇女无显著性差异 ,绝经后妇女腰椎骨密度为 0 .836± 0 .180 g/cm2 ,明显低于未绝经妇女的 1.0 38± 0 .14 0 g/cm2 ,绝经后妇女骨质疏松发病率为 5 4 .3%。结论　ER基因PvuⅡ基因型频率分布有种族差异。ER基因PvuⅡ基因型与骨密度无明显相关性。     

低密度脂蛋白受体基因AvaⅡ多态性与心肌梗死的关系研究

目的 :探讨动脉粥样硬化致心肌梗死 ( AMI)与低密度脂蛋白受体基因( LDL- R) Ava 多态性的关系。方法 :用聚合酶链反应 ( PCR)技术检测 1 1 3例健康人和 81例 AMI患者的 LDL - R基因 Ava 多态性及血脂的含量。结果 :LDL- R基因 Ava 等位基因频率健康人 A+ 为 0 .2 30 ;AMI组 A+ 为 0 .32 7。 AMI组与对照组比较 LDL- R基因 Ava 多态性 A+ 型等位基因频率明显增高 ( P<0 .0 5 ) ;血清 TC、L DL- C、TG及 L P( a)水平亦明显增高 ( P<0 .0 1 )。结论 :Ava 多态性的 A+ 型等位基因可能与 AMI密切相关。     

正常人LDL受体基因PvuⅡ多态性与血脂水平的关系探讨

用限制性内切酶PvuⅡ研究了115名血脂正常者低密度脂蛋白(LDL)受体基因的多态性。结果显示存在P_1和P_2两种等位基因,构成P_1P_1、P_1P_2和P_2P_2三种基因型。其间的血清胆固醇(TC)水平存在明显差异,提示LDL受体座位的多态性可能与正常人群中TC水平的差异有关。与国外资料比较,我国的P_1等位基因相对频率较高,而P_2则较低,表明LDL受体基因的多态性存在地区和民族差异。     

脂蛋白脂酶基因Hind Ⅲ和Pvu Ⅱ多态性与子痫前期相关性研究

目的:运用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法研究脂蛋白脂酶(LPL)基因Hind Ⅲ和Pvu Ⅱ酶切位点多态性.从遗传学角度探讨其在子痫前期(PE)发生发展中的作用,并筛选易感基因,为PE的预防和治疗提供科学依据.方法:实验组按照乐杰主编<妇产科学>第6版标准,选取42例诊断子痫前期的患者,对照组选取50例年龄、孕周与实验组相近的正常孕妇.采用PCR-RFLP的方法,检测LPL基因Pvu Ⅱ和Hind Ⅲ酶切位点的多态性.结果:实验组LPL基因H+H+基因型33例(0.85),H+H-与H-H-基因型共6例(0.15),未出结果3例;对照组LPL基因H+H+基因型30例(0.60),H+H-与H-H-基因型共20例(0.40).实验组等位基因H+71例(0.91),H-7例(0.09);对照组等位基因H+72例(0.72),H-28例(0.28).基因型及等位基因分布频率组间比较,均P<0.05(基因型P=0.011,等位基因P=0.002),差异有统计学意义.LPL基因Pvu Ⅱ酶切位点基因型(P+P+,P+P-,P-P-)及等位基因(P+,P-)分布频率在两组之间无明显差异(基因型P=0.627,等位基因P=0.941).结论:LPL基因Hind Ⅲ酶切位点多态性与PE的发生存在一定相关性,携带H+等位基因的孕妇可能更易发展成为PE.Pvu Ⅱ酶切位点的基因多态性及等位基因P+与PE的发生无明显关联.     

广西壮、汉族绝经后妇女维生素D受体基因多态性的研究

目的　探讨维生素D受体 (vitaminDreceptor,VDR)基因多态性 ,以获得在广西壮、汉族妇女VDR受体基因频率分布数据。方法　用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 (polymerasechainreaction ristrictionfragmentlengthpolymorphism ,PCR RFLP)方法检测壮、汉族绝经后妇女各 80例的VDR基因型。结果　壮、汉族绝经后妇女BB、Bb和bb基因型频率分别为 0 0 6 5比 0 0 5 4、0 739比 0 6 6和 0 1 96比 0 2 86 (P >0 0 5 ) ;壮、汉族绝经后妇女B和b等位基因频率分别为 0 4 31比 0 381和 0 5 6 9比0 6 1 9(P >0 0 5 )。结论　广西壮、汉族绝经后妇女VDR基因多态性无显著性差异。     

一个新的低密度脂蛋白受体基因突变位点

本研究对 1例临床诊断为家族性高胆固醇血症 (ＦＨ)的患者进行了研究。为了明确诊断 ,我们应用了聚合酶链反应 单链构象多态性分析法 (ＰＣＲ ＳＳＣＰ)结合ＤＮＡ序列测定从基因水平对患者ＬＤＬ Ｒ基因和载脂蛋白Ｂ基因突变位点进行了检测。现报道如下。一、对象与方法1 研究对象 :先证者 ,女 ,33岁 ,汉族。原籍北京。自出生时便发现臀部有一绿豆大小皮下结节 ,增长缓慢。以后身体其他部位渐长出多个皮下结节 ,累及手、腕、肘、膝、跟腱等处皮肤 ,呈对称性分布。检查发现血胆固醇偏高 ,遂长期服用他汀类药物降血脂治疗 ,症状得到初步控制…     

雌激素受体2基因多态性与绝经后女性骨密度的相关性研究

目的探讨雌激素受体2(estrogen receptor beta,ESR2)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与绝经后女性的骨密度(bone mineral density,BMD)是否相关。方法使用双能X线骨密度仪测量重庆市140例绝经后女性第2～4腰椎(L2～L4)及左股骨颈BMD值。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析ESR2基因第5外显子T1057G和G1082A及第8外显子G1730A SNPs。结果在全部受试者中,ESR2基因第5外显子1057T位点仅检测到VV1种基因型;G1082A基因型RR、Rr及rr频率分别为81.43%、17.14%及1.43%;G1730A基因型AA及Aa频率分别为87.86%及12.14%,aa基因型缺失;G1082A和G1730A SNPs的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。校正年龄、体质量、绝经年限等BMD影响因素后,G1082A SNP与L2和L4BMD显著相关(P<0.05),而与L3及股骨颈BMD无明显关联(P>0.05);G1730ASN...     

载脂蛋白AI-CⅡ基因区域DNA多态频率的研究

本文以apoAI cDNA片段(1.0kb)为探针,对50名正常血脂的汉族个体的apoAICⅢ基因区域DNA多态频率和特征进行了研究。结果表明,apoAI Msp—Ⅰ多态频率具有种族差异,可作为一种有用的遗传标记,进一步研究其与高脂血症,动脉粥样硬化等疾病的连锁关系,可为这些疾病的早期诊断和预防提供理论依据。     

PCR-RFLP方法检测锰超氧化物歧化酶基因V(16)A多态性的实验条件研究

目的：确定PCR-RFLP技术检测锰超氧化物歧化酶基因（MnSOD）V（16）A多态性的最适实验条件．方法：对影响MnSOD基因PCR反应以及用限制性内切酶BsawI切割主要因素进行了系统研究．结果：最适退火温度为55℃；最适引物浓度为0．25μmol／L；最适Mg^2＋浓度为1．5mmol／L；最适dNTP浓度为0．20mmol／L；以0．6U为最适Taq酶量．酶切体系为15止体系中加8pL产物用2U的酶消化，为后续研究奠定了实验基础．     

β3肾上素能受体基因错义突变与单纯性肥胖症无关

目的: 人体β3肾上素能受体(β3AR)基因与热能产生和脂肪分解有关,此基因的错义突变可导致β3AR活性降低. 我们调查了β3AR基因的多态性与单纯性肥胖症的关系,以阐述单纯性肥胖症发生的分子生物学机制. 方法: PCR-RFLP方法检测T→C突变,生化方法检测血清甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白浓度. 结果: 正常人群中,Trp 64 Arg变异频率与单纯肥胖症患者无明显差异(P>0.05). 两组均未检出Trp 64 Arg变异纯合子. T等位基因的频率分别为89.3%,86.8%;C等位基因的频率分别为10.7%,13.2%,两组之间无明显差异(P>0.05). 单纯性肥胖症血清甘油三脂和低密度脂蛋白浓度明显高于对照组(P<0.05),而高密度脂蛋白和胆固醇浓度无明显差异(P>0.05). 结论: β3AR基因错义突变与单纯性肥胖症发生无关.     

PCR-RFLP方法检测CCR5基因启动子区59029G/A多态性的实验研究

目的：确定PCR-RFLP技术检测CCR5基因启动子区59029G／A多态性的最适实验条件．方法：对主要影响因素设系列浓度梯度分别进行PCR后观察电泳结果。结果：最适变性温度为94℃；最适退火温度为60℃；最适引物浓度为0．4μmol／L；最适Mg^2＋浓度为1．5mmol／L；最适dNTP浓度为0．20mmol／L；以1．0U为最适Taq酶量．结论：酶切体系为20μL体系中加5μL产物用4U的酶消化，为后续研究奠定了实验基础．     

人脂蛋白脂酶的基因多态性分析

为分析人脂蛋白脂酶基因多态性，采用两对引物进行聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｎａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增脂蛋白脂酶（ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｌｉｐａｓｅ，ＬｐＬ）基因内含子６区和８区的ＰＶＵⅡ（１８９ｂｐ）和ＨｉｎｄⅢ（７１５ｂｐ）位点特异性片段，分别用限制性内切酶ＰＶＵⅡ和ＨｉｎｄⅢ酶解上述的ＰＣＲ产物，琼脂糖凝胶电泳后分离上述的酶解片段进行多态性分析，结果１０１名正常健康人ＬｐＬ     

低密度脂蛋白受体基因AVa Ⅱ多态性与动脉粥样硬化性脑梗死关系研究

目的：探讨低密度脂蛋白受体（LDL－R）基因AVa Ⅱ多态性与动脉粥样硬化性脑梗死（ACI）的关系。方法：用聚合酶链反应（PCR）技术检测113例沈阳籍汉族健康人和56例ACI病人的LDL－R基因AVa Ⅱ多态性及血脂、脂蛋白的含量。结果：LDL－R基因AVa Ⅱ A^ 等位基因频率健康人为0．230，ACI病人为0．125；A^-基因与ACI的相对风险率（RR）为2．1（P＜0．05）。ACI组中的A^-A^-亚组病人血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）、脂蛋白（a)[LP(a)]明显高于对照组；载脂蛋白（apo) A I则低于对照组（P＜0．05）。／A^-A^-基因型与血清TG、TC、LDL－C、LP（a)升高显著相关联，RR依次为3．39、6．08、6．01、5．78（P均＜0．01）。结论：LDL－R基因多态性影响血脂、脂蛋白的代谢，与ACI的发生发展密切相关；A^-基因可能是ACI发生的遗传易患因素之一。     

延边农村地区朝鲜族居民代谢综合征易感性与脂联素基因多态性的相关性

[目的]探讨延边农村地区朝鲜族人群脂联素基因外显子4个位点基因SNPs与代谢综合征(MS)易感性的关系.[方法]在延边农村地区筛选出197例MS病例组及147例同性别及年龄的非MS对照组.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测脂联素基因SNP+45,SNP+276,SNP-11 377,SNP-11 391的基因型.[结果]MS组脂联素基因SNP+45TT,TG,GG基因型的分布频率分别为50.3%,43.1%,6.6%,非MS对照组分别为51.0%,41.5%,7.5%(P>0.05).MS组和非MS对照组T,G等位基因频率均为71.8%和28.2%(P>0.05).MS组脂联素基因SNP+276位点GG,TG及TT基因型的频率分布分别为65.5%,26.5%,7.6%,非MS对照组分别为48.3%,42.9%,8.8%(P<0.01).MS组T,G等位基因频率分别为21.1%,78.9%,非MS对照组分别为30.3%,69.7%(P<0.01).MS组脂联素基因SNP-11 377位点CC,CG,GG基因型的频率分布分别为62.4%,31.5%,6.1%,非MS对照组分别为44.2%,49.0%,6.8%(P<0.01).MS组C,G等位基因频率分别为78.2%,21.8%,非MS对照组分别为68.7%,31.3%(P<0.01).MS组脂联素基因SNP-11 391位点AA,GA,GG基因型的频率分布分别为8.1%,28.9%,62.9%,非MS对照组分别为9.5%,44.9%,45.6%(P<0.01).MS组A,G等位基因频率分别为32.0%,68.0%,非MS对照组分别为22.6%,77.4%(P<0.01).[结论]延边农村地区朝鲜族人群存在脂联素基因+45位点、+276位点、-11 377位点、-11391位点单核苷酸多态性,而且4个位点基因型的MS易感性不同.     

中国人群中HIV-1辅助受体CCR5基因新突变位点及CCR5-894C缺失基因多态性分析

目的：研究中国人群HIV-1辅助受体CCR5基因编码区新的单核苷酸多态性（SNP）位点;分析CCR5-894C缺失等位基因在中国普通人群和HIV-1高危人群中的分布特点和相关意义。方法：针对CCR5编码区用2对引物进行PCR扩增,设计测序引物对45例汉族人样本进行PCR产物直接测序,用DNAstar分析测序结果,寻找SNP位点。采用错配PCR-RFLP法对中国汉族、蒙族、藏族普通人群,性传播疾病和静脉吸毒高危人群及HIV-1携带者,共627份样品进行了CCR5-894C缺失等位基因分型。结果：在45例汉族人CCR5基因编码区共发现6个SNP位点,4个（184A→G、503G→T、668G→A、99G→T）引起氨基酸改变,两个无义突变;此外还发现1个单碱基缺失（894C缺失）,引起移码突变和提前终止。其中184A→G、503G→T、999G→T三个中国汉族人所特有的SNP位点为首次发现,它们的等位基因频率分别为1.11％,21.1%和10.0％;其中503G→T分布明显不符合Hardy-Weinberg平衡。汉、藏、蒙等民族的普通人群CCR5-894C缺失等位基因频率为1.11％,0.53%和0.在汉族HIV-1性传播、静脉吸毒传播的高危人群中,HIV-1阳性个体和阴性个体间CCR5-89C缺失等位基因频率差异无显著意义,与汉族普通人群比较差异也无显著意义。结论：中国人CCR5基因的SNP位点有自己的特点,共发现4个引起氨基酸改变的SNP位点（其中3个为首次发现）,1个引起移码突变的单碱基缺失。汉族人群中存在CCR5-894C缺失突变,但突变频率很低。这些SNP和缺失突变对于HIV-1感染和艾滋病病程的影响值得进一步研究。     

昆明地区汉族维生素D受体基因多态性与2型糖尿病的相关性

［摘要］ 目的　探讨昆明地区汉族人群维生素D受体基因多态性与2型糖尿病的相关性．方法　选取昆明地区汉族2型糖尿病患者（DM组）90例及健康对照（NC组）36例．运用PCR-FRLP技术测定维生素D受体ApaI基因多态性,比较各组基因型及等位基因频率及不同基因型间相关临床资料．结果　（1）2型糖尿病组与正常组间维生素D受体Apal基因存在多态性,2型糖尿病组中C/A基因型分布频率明显高于正常对照组（χ2＝53.432,P＜0.001）;（2）2型糖尿病组的年龄、FPG、LDL-C高于正常对照组,25-OHD3、Ca低于正常对照组（P＜0.05）;糖尿病组A/A基因型Scr显著高于其他组别,差异有统计学意义（P＜0.05）;3组基因型间UA均存在统计学差异（P＜0.05）,且C/A基因型最高;（3）二分类Logistic回归分析结果提示ApaI C/A基因型（OR＝1.36, 95%CI: 0.54-1.71）、年龄（OR＝1.09,95% CI: 1.03-1.18 ）为2型糖尿病的危险因素,而25-OHD3 （OR＝0.84,95%CI:0.73～0.93）可能是T2DM的发生的保护因素．结论　（1）昆明地中VDR ApaI位点 C/A基因型与T2DM的发生存在相关性;（3）25-OHD3是T2DM的发生的保护因素,增龄是2型糖尿病的危险因素．     

LRRK2基因多态性与散发性阿尔茨海默病相关性的研究

目的：探讨LRRK2基因多态性同散发性阿尔茨海默病（SAD）的相关性。方法采集216例中国东南部福建地区汉族SAD患者和433例健康者的周围血液标本并提取DNA ,应用聚合酶链反应（PCR）-限制性酶切方法（RFLP）进行LRRK2基因R1628P和G2385R多态位点的基因型检测,变异者进行直接测序验证。结果R1628P检测中,SAD组C等位基因频率显著低于对照组（0．5％ vs 2．1％,χ2＝4．959,P＜0．05）;SAD组GC基因型频率也显著低于对照组（0．9％ vs 4．2％,χ2＝5．037,P＜0．05）。Logistic回归分析校正年龄、性别等因素的影响后,发现携带R1628P多态者比未携带者AD发病风险降低88％（OR：0．217,95％ CI：0．050～0．945,P＜0．05）。G2385R检测中,SAD组A等位基因频率及GA基因型频率分别同对照组比较,差别无统计学意义（A等位基因：2．1％ vs 1．4％,χ2＝0．881,P＞0．05;GA基因型：4．2％ vs 2．8％,χ2＝0．896,P＞0．05）。结论 LRRK2基因R1628P多态可能是SAD发病中的一个保护性因子,而G2385R多态同SAD发病没有相关性。