黄芪水溶性黄酮对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究

目的研究黄芪水溶性黄酮（AF）对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法采用“拒染法”体外抑瘤实验,计拒染活细胞数;“MTT法”测定脾淋巴细胞的增殖能力;“溶血分光光度法（QHS）”检测抗体形成细胞;“微量溶血酶标仪测定法”测定血清溶血素含量。结果AF能够抑制瘤重：促进ConA诱导的荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;增强荷瘤小鼠的抗体生成细胞功能,提高血清溶血素含量。结论AF具有促进和调节荷瘤小鼠免疫功能的作用。     

扶正中药复方对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠免疫器官和肠黏膜CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋的影响

目的：研究扶正中药复方对环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠肠黏膜CD3^＋、CD4‘及CD8^＋的影响。方法：小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、香菇多糖片对照组及扶正中药复方大、中、小剂量组，混悬液灌胃给药，免疫组化法测定肠黏膜中的T淋巴细胞（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋）表达水平。结果：模型对照组小鼠肠黏膜中的T淋巴细胞（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋）水平出现低表达，与正常对照组比较，差别有统计学意义（P〈0．01）；中药复方可以显著提高环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠模型肠黏膜固有层中CD3^＋、CD4^＋及CD8^＋细胞数量，与模型对照组相比，差别有统计学意义（P〈0．01）。结论：环磷酰胺造成的免疫功能低下不仅抑制全身免疫系统，而且对肠黏膜免疫功能有较强的抑制作用，中药复方通过恢复或者增强环磷酰胺所致免疫功能低下模型小鼠肠黏膜免疫功能。     

复芪止汗颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：探讨复芪止汗颗粒对小鼠非特异性免疫和特异性免疫的调节作用。方法：取正常昆明种小鼠40只,雌雄各半,随机分为4组,正常对照组、环磷酰胺模型组、黄芪颗粒组和复芪止汗颗粒组,每组10只。腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型。测定胸腺、脾脏质量并计算出小鼠胸腺指数、脾指数;腹腔巨噬细胞吞噬中性红法检测单核-巨噬细胞的吞噬功能;血清溶血素法测定体液免疫功能;脾淋巴细胞增殖实验法测定细胞免疫功能;乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞杀伤活性;流式细胞法检测T淋巴细胞亚群的数量。结果：复芪止汗颗粒可显著提高被环磷酰胺抑制的小鼠胸腺指数和脾脏指数;使巨噬细胞吞噬功能明显增加;使血清溶血素水平增高;并能拮抗环磷酰胺对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、杀伤活性、T细胞亚群数量产生的免疫抑制作用。结论：复芪止汗颗粒能增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能。     

冬虫夏草和中国拟青霉对小鼠脾细胞T细胞亚型和NK细胞活性的影响

经流氏细胞仪分析,冬虫夏草和中国拟青霉水提液可显增加ConA刺激 的小鼠脾细胞L3T4^ 和Lyt2^ T细胞的增殖,增加脾细胞L3T4^ 和Lyt2^＋T细胞的数,L3T4^ /Lyt2^ T 比值降低。用MTT还原法观察,二均可增加小鼠脾细胞NK细胞的活性。此外,冬虫夏草和中国拟青霉均可增加脾重、吞噬细胞数及吞噬细胞百分率。     

大黄虫合剂对免疫低下及正常小鼠T细胞亚群水平的影响

目的：探讨大黄虫合剂对免疫功能的调节作用。方法：选取昆明种小鼠100只,随机分为非免疫抑制组（正常小鼠）和免疫抑制组,每组各50只。正常小鼠两次随机分为正常对照组、中药对照组（六味地黄组）、西药对照组（卡介苗多糖组）及大黄虫合剂大、小剂量组;免疫抑制组腹腔注射环磷酰胺复制疫低下小鼠,然后分为模型对照组、环＋中药对照组、环＋西药对照组及环＋大黄虫合剂大、小剂量组。各组药物干预后处死小鼠摘取脾脏,用免疫组化的方法检测T细胞亚群含量。结果：大黄虫合剂能显著提高正常小鼠和免疫功能低下小鼠CD4^＋、CD8^＋的百分率及CD4^＋/CD8^＋比值（P〈0.05）。结论：大黄虫合剂能够通过增强小鼠T淋巴细胞的免疫水平,显著提高机体的免疫功能。     

大黄(庶虫)虫合剂对小鼠T细胞亚群影响的实验研究

目的：通过检测大黄[庶虫]虫合剂对实验性免疫低下小鼠及正常小鼠脾脏T细胞亚群的影响,探讨该合剂对免疫功能的调节作用。方法：选取昆明种小鼠100只,雌雄各半,其中50只腹腔注射环磷酰胺1.6mg/0.2mL/只,每天给药1次,连续3天,造成免疫低下小鼠,然后随机分为模型组、中药对照组（六味地黄组）、西药对照组（卡介菌多糖组）、小剂量组、大剂量组;其余50只随机分为正常空白对照组（即生理盐水组）、中药对照组、西药对照组、小剂量组、大剂量组。上述各组连续用药3天后,处死小鼠摘取脾脏,用免疫组化的方法检测T细胞亚群含量。结果：大黄[庶虫]虫合剂能显著提高正常小鼠和免疫功能低下小鼠CD4^＋、CD8^＋的百分率及CD4^＋/CD8^＋比值（统计学处理P〈0.05）。结论：大黄[庶虫]虫合剂可通过增强小鼠T淋巴细胞的免疫水平,有效地提高机体的免疫功能。     

复方内鲁帕尔汤剂免疫抗炎及解热作用的实验研究

目的：观察复方内鲁帕尔汤剂（CWPN）对免疫功能、发热、炎症的影响。方法：测定血清溶血素生成，MTT法测T、B淋巴细胞的增殖，^3H-TdR法测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，用伤寒菌苗造成家兔体温上升研究降温作用，用小鼠腹腔毛细血管通透性法研究对炎症的影响。结果：CWPN（4．0，8．0g／kg）能够明显增强小鼠血清溶血素生成（P〈0．05），CWPN（0．01—10mg／L）能够促进小鼠体外B淋巴细胞增殖，对T淋巴细胞无明显影响，能够增强小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬功能，能降低伤寒菌苗引起的家兔体温上升，CWPN（4．0，8．0g／kg）能够抑制小鼠腹腔毛细血管炎性渗出。结论：CWPN能够增强体液免疫和非特异性免疫功能，有较好的抗炎、解热功效。     

病心胶囊对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠T细胞亚群影响的实验研究

目的：观察病心胶囊对柯萨奇B3（CoxB3）病毒性心肌炎小鼠T细胞亚群的影响。方法：将210只小鼠随机分为6组，正常对照组32只，模型对照组42只，黄芪对照组34只，病心胶囊高剂量组34只，病心胶囊中剂量组34只，病心胶囊低剂量组34只。复制小鼠CoxB，病毒性心肌炎模型，以黄芪注射液为对照，检测T细胞亚群Thy1，2^＋、L3T4^＋、Lyt-2^＋含量，比较L3T4^＋／Lyt-2^＋值。结果：对小鼠Thy1，2^＋的影响，病心胶囊高、中、低剂量组和黄芪对照组Thy1，2^＋含量与模型对照组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。对小鼠L3T4^＋影响的比较，病心胶囊高、中、低剂量组均能拮抗这种改变（P〈0．01，P〈0．05）。而黄芪对照组则无明显的拮抗作用（P〉0．05）。对小鼠Lyt-2^＋含量影响的比较，病心胶囊高、中、低剂量组均能拮抗这种改变（P〈0．01），而黄芪对照组则不明显（P〉0．05）。对小鼠L3T4^＋／Lyt-2^＋影响的比较，病心胶囊高、中、低剂量组均能拮抗这种改变（P〈0．01），而黄芪对照组则此作用不明显（P〉0．05）。结论：病心胶囊可通过调节细胞免疫的紊乱状态而对病毒性心肌炎发挥治疗作用，黄芪注射液此作用则不明显。     

戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝脏损伤的保护作用

目的：观察免疫损伤模型组与实验组小鼠外周血中T细胞亚群的变化情况，探讨黄芪注射液对小鼠肝脏损伤的保护作用。方法实验组小鼠每天腹腔注射黄芪注射液400μl，正常组与模型组小鼠每天给予等剂量的生理盐水。第7天在给药1小时后，模型组与实验组小鼠分别经尾静脉注射刀豆蛋白，正常组小鼠则给予等剂量的生理盐水。8小时后检测各组动物外周血中CD4^＋T、CD8^＋T细胞以及CD4^＋／CD25^＋T细胞所占比例，检测血浆转氨酶水平，制备肝脏病理标本，进行HE染色。结果尾静脉注射8小时后，实验组小鼠外周血的CD4^＋所占T细胞比例较模型组有所升高（P〈0．05），但仍低于正常组水平（P〉0．05）：而CD8^＋T细胞的比例则无明显变化（P〉0．05）。实验组ALT、AST水平明显低于模型组（P〈0．05）。实验组汇管区淋巴细胞浸润明显减少。结论黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝损伤有确切的保护作用。     

补益中药有效活性成分的免疫药理研究及应用

几种补益中药(枸杞子、淫羊藿、黄芪和女贞子)的多糖成分具有免疫增强和调节作用,这种作用以提高T淋巴细胞功能为主。主要包括:(1)对有丝分裂剂诱导的T细胞增殖反应更敏感;(2)提高细胞免疫功能的作用部位在胸腺;(3)对于免疫功能低下的老龄鼠和荷瘤鼠均有明显增强T淋巴细胞活性作用。补益中药的多糖成分可能是它们具有“扶正固本”和调节免疫功能的主要物质基础。     

膜荚黄芪茎叶总黄酮对小鼠细胞免疫功能的影响

研究黄芪茎叶总黄酮的免疫调节作用。方法：用单克隆抗体检测实验小鼠药物处理前后Ｔ细胞总数及亚群变化；用核素标记法测定ＬＡＫ细胞活性的变化。结果：ＦＭＡ能促进ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖，增加Ｔ细胞总数并调整Ｔ细胞亚群紊乱；提高ｒＩＬ－２所诱导的ＬＡＫ细胞活性。结论ＦＡＭ对免疫功能低下小鼠具有免疫刺激和免疫调整作用，为临床应用提供了实验依据。     

野生仙人掌多糖对小鼠特异性免疫功能的调节作用

目的:观察野生仙人掌多糖(ODPs)对小鼠特异性(体液及细胞)免疫功能的调节作用。方法:采用环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型,检测ODPs对血清溶血素IgMI、gG含量、脾淋巴细胞增殖反应和外周血T淋巴细胞亚群比例的影响;检测分离纯化的ODPs主要组分ODP-I对体外培养的淋巴细胞增殖作用。结果:ODPs能显著增强免疫抑制小鼠血清溶血素IgMI、gG的生成;显著增强免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞的增殖能力,且均使之恢复至正常水平;显著降低免疫抑制小鼠CD4+T细胞亚群比例,从而显著降低CD4+/CD8+T细胞比值,使之接近正常水平,且均有剂量关系。ODP-I可极显著促进小鼠脾淋巴细胞自然增殖,协同有丝分裂原ConA或LPS诱导T、B淋巴细胞的增殖。结论:ODPs对免疫抑制小鼠特异性免疫功能具有调节作用,对体外淋巴细胞具有增殖作用,是一种良好的免疫调节剂。     

中药狼疮静颗粒对狼疮性BXSB小鼠脾脏CD4+T、CD19+B细胞凋亡的影响

目的：研究中药狼疮静颗粒对BXSB狼疮性小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理。方法：运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡。结果：雄性BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡加速,中药狼疮静颗粒可明显抑制BXSB小鼠脾脏CD4^+T、CD19^+B细胞凋亡率。结论：中药狼疮静颗粒通过抑制T、B淋巴细胞过度凋亡,可能阻抑了过量核酸抗原释放,从而抑制了B细胞的异常增生活化,使自身抗体产生减少而达到治疗系统性红斑狼疮目的。     

氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响

 目的　研究氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响。方法　采用流式细胞术分析T细胞活化和增殖情况,ELISA法检测细胞因子分泌量,TransAM^TMELISA法测定活化T细胞核因子 (NFAT)的活化状态。结果　氟伐他汀能抑制T细胞表面CD69的表达,显著抑制T细胞增殖,对CD25的表达无影响。能抑制NFAT的活化,显著降低IL-2的产生,对IFN-γ和IL-10的分泌几无影响,但明显诱导IL-4的分泌。结论　氟伐他汀具有免疫抑制作用。     

Macrophages, rather than T and B cells are principal immunostimulatory target cells of Lycium barbarum L. polysaccharide LBPF4-OL

Aim of the study

Lycium barbarum L. is a renowned Yin strengthening agent in traditional Chinese medicine. Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex is well-known for its immunoregulatory and antitumor effects. LBPF4-OL is the glycan part of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex fraction 4 (LBPF4). LBPF4-OL's active contribution in LBPF4 is still blank. In the study, we enrich the polysaccharide part of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex, and investigate its immunostimulatory effects on mouse spleen cells, T cells, B cells and macrophages.

Materials and methods

Balb/C mice were used in vitro and in vivo studies. In in vitro study, lymphocyte proliferations were analyzed with ³H-TdR incorporation method. Miltenyi MicroBeads were used in the purification of lymphocytes. Activation of T and B cells was analyzed by flow cytometry. In order to obtain the peritoneal macrophages, mice were injected i.p. with 1 mL of sodium thioglycollate 3 days prior to killing. Spleen cells were stimulated with LBPF4-OL and cytokine concentrations in the supernatants were determined by multiplex bead analysis. In in vivo study, mice were injected i.p. with 1 mL of normal saline or 100 μg/mL LBPF4-OL daily for 6 days. Peritoneal macrophage functions were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry assay.

Results

Spleen cells and lymphocyte proliferation assay indicated that LBPF4-OL markedly induced the spleen cell proliferation, but could not induce proliferation of purified T and B lymphocytes. Further research revealed that B cell proliferation took place in the presence of activated macrophages or LPS. Multiplex bead analysis showed that LBPF4-OL can obviously induce IL-6, IL-8, IL-10 and TNF-α production of the spleen cells in a concentration-dependent manner. Flow cytometric analysis showed that LBPF4-OL (i.p.) prompts CD86 and MHC-II molecules expression on macrophages. ELISA assay showed that LBPF4-OL can greatly strengthen macrophage releasing of TNF-α and IL-1β.

Conclusion

These results suggested that glycan LBPF4-OL plays an important role in the immunopharmacological activity of Lycium barbarum L. polysaccharide-protein complex, and primary mouse macrophages, rather than T and B cells, are the principal target cells of it.     

灵芝水提取物对人免疫细胞及IL-6的调节作用

目的：观察灵芝水提取物对人免疫细胞及细胞因子的调节作用。方法：灵芝水提取物（ＧＬ－Ｗ）作用于人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）,用ＭＴＴ法及流式细胞仪技术检测。结果：１．ＧＬ－Ｗ以经植物凝集素（ＰＨＡ）活化的和未经ＰＨＡ活化的人ＰＢＬ均有促增殖效应,其中经ＰＨＡ活化的增殖反应显著（Ｐ〈０．０５）,细胞周期检测发现其主要促进细胞进入Ｓ期,表明ＧＬ－Ｗ可促进人ＰＢＬ的ＤＮＡ合成。２．选择最大促进增殖效诮浓度的     

叶绿素铜钠促进再障小鼠骨髓MSC对T细胞的干预作用

目的:探讨叶绿素铜钠促进免疫介导再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)小鼠骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cells,MSC)对T淋巴细胞的干预作用。方法:建立免疫介导AA小鼠模型,随机分为正常对照组(N)、AA模型组(M)、环孢菌素组(Cs)、叶绿素铜钠小剂量组(X)、叶绿素铜钠中剂量组(Z)、叶绿素铜钠高剂量组(G)6组,每组6只,15日后处死,观察各组的骨髓病理,骨髓进行MSC培养,第3代MSC诱导成骨细胞,观察光镜下第2代MSC(F2MSC)、成骨细胞的形态学变化,MSC调节植物血凝素(PHA)对T淋巴细胞转化实验,ELISA检测MSC的转化生长因子(TGF-β1)。结果:N、Cs、X、Z、G组的骨髓增生均比M组活跃。各组F2MSC细胞呈长梭形,第3代MSC可被诱导为成骨细胞。N、X、Z、G组的CD2+5FOXP3+明显大于M组(P0.05)。N、Cs、Z组的TGF-β1显著大于M组(P0.05)。结论:叶绿素铜钠能促进AA小鼠MSC对T淋巴细胞的干预作用。     

通络散结汤对2型糖尿病大鼠调节性T细胞及炎症因子的影响

目的:探讨通络散结汤对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型调节性T细胞及炎症因子的影响。方法:以链脲佐菌素诱导SD大鼠复制2型糖尿病模型,并将造模成功的30只大鼠随机分为三组,即模型组(M组)、通络散结汤高剂量(10 g/kg)组(S组),通络散结汤低剂量(5 g/kg)组(T组),每组10只,同时以10只未造模大鼠为正常对照组(N组)。造模后,通络散结汤各剂量组分别予相应剂量药物灌胃,M组和N组予等体积的生理盐水灌胃; 末次给药后12 h,采集各组大鼠腹主动脉血液,检测血清中空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)等炎症因子及CD₄⁺、CD₈⁺等T淋巴细胞表达水平,同时取大鼠脾脏组织,采用Western blotting法检测CD₄⁺、CD₈⁺等T淋巴细胞蛋白表达水平。结果:与M组比较,N组大鼠血清中FBG、TC、TG等水平显著升高,TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子水平显著升高,CD₄⁺T淋巴细胞表达显著升高,CD₈⁺T淋巴细胞表达显著降低,CD₄⁺/CD₈⁺比值显著提升,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05); 与N组比较,S、T组大鼠血清中FBG、TC、TG等水平均显著降低,TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子水平均显著降低,CD₄⁺T淋巴细胞表达均显著降低,CD₈⁺T淋巴细胞表达显著升高,CD₄⁺/CD₈⁺比值显著降低,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论:通络散结汤对对高脂饲料联合链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠具有治疗作用,其作用机制可能与调控炎症因子及T细胞水平有关。