超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）.采用MIT法、Millicell小室、Annexin V-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍生生长因子--BB（PDGF-BB）对VSMC增殖、迁移和凋亡的影响,频率1 MHz、声强0.3 W/cm^2的连续波超声联合声学造影剂辐照VSMC后上述指标的变化.结果PDGF-BB对VSMC的凋亡无影响,但可促进VSMC增殖和迁移.超声联合造影剂辐照VSMC 30 s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖（P〈0.05）,同时细胞凋亡比例显著增高（P〈0.01）,辐照60 s可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC迁移（P〈0.05）,随着辐照时间延长,以上作用增强,辐照60 s时对VSMC增殖的抑制程度最强.结论低强度超声波辐照联合超声造影剂可抑制VSMC增殖、迁移,并促进细胞凋亡.     

血管平滑肌β-肾上腺能受体对细胞凋亡的影响

目的探讨刺激生理状态及过表达的血管平滑肌细胞 β2 肾上腺能受体 (VSMCβ2 AR)对细胞凋亡的影响。方法应用腺病毒介导的转基因技术过表达VSMCβ2 AR ,采用Hoechst 3 3 3 42染色和流式细胞仪分析生理状态下和 β2 AR过表达活化后细胞凋亡情况。结果应用异丙基肾上腺素刺激VSMCβ2 AR 2 4h后 ,流式细胞仪检测存活VSMC数量与对照组相比较并无明显减少 ,48h后较对照组明显减少 (P <0 0 1) ;过表达 β2 AR的VSMC应用异丙基肾上腺素刺激 2 4h后 ,流式细胞仪检测细胞存活率明显下降(P <0 0 1) ,Hoechst染色显示凋亡细胞率明显升高 (P <0 0 1)。结论刺激生理状态及过表达的VSMCβ2 AR具有促进凋亡的效应。     

脐血CD34+CD38-早期造血祖细胞的体外增殖和凋亡

为了从适龄产妇脐血中分离出CD34^ CD38^-细胞，在体外较长时间培养后观察分析CD34^ CD38^-细胞分裂增殖、凋亡以及干细胞因子对CD34^ CD38^-细胞增殖的影响，用流式细胞仪从10例健康产妇脐血中分选出CD34^ 和CD38^-标记的脐血原始细胞．在添加IL-3、IL-6、GM—CSF、EPO、IGF—1和SCF6种混合因子的干细胞培养基中培养6个月，观察细胞并绘制生长曲线，用单细胞凝胶电泳检测干细胞因子对CD34^ CD38^-细胞生长的影响和用流式细胞仪检测CD34’CD38细胞凋亡情况。结果表明：脐血CD34^ CD38^-细胞可在体外较长时间培养增殖，无异常或过度的细胞凋亡发生。结论：通过控制培养条件，脐血CD34^ CD38^-早期造血祖细胞可在体外较长时间培养增殖，以作为大量脐血原始细胞移植的细胞来源.     

姜黄素对大鼠肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响

摘要 目的：探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法：将体外培养的正常组大鼠肺成纤维细胞(NLF)和博来霉素诱导肺纤维化模型组大鼠肺成纤维细胞(MLF)分别与不同浓度的姜黄素孵育；观察细胞生长状态变化；MTT法检测吸光值，计算细胞抑制率；流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果: 姜黄素作用MLF6h、12h、24h后，各浓度组OD值较对照组显著降低（P<0.01），并呈时间－剂量效应关系。流式细胞分析显示，姜黄素处理组MLF凋亡率较对照组显著升高（P <0.01）,呈药物浓度依赖性。姜黄素不能抑制NLF增殖，对其凋亡无显著影响。结论：姜黄素在体外对MLF具抑制增殖，诱导凋亡作用；而对NLF无明显影响。提示姜黄素可以通过诱导肌成纤维细胞的凋亡而起到抗纤维化的作用。     

选择性COX-2抑制剂NS-398对人胃腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的通过COX-2抑制剂NS-398对胃癌培养细胞系SGC7901增殖及凋亡影响的研究证实非甾体类抗炎药（NSAID。）可在体外抑制胃癌细胞的生长。方法应用MTT法检测NS-398对胃癌细胞SGC7901细胞增殖的影响；应用流式细胞仪、透射电镜检测NS-398对胃癌细胞SGC7901细胞凋亡的影响。结果MTT结果显示NS-398对胃癌细胞均抑制作用，并随剂量的增加及作用时间延长，其抑制作用要明显增加；透射电镜观察发现未经NS-398作用的胃癌培养细胞的细胞核和细胞器亚微结构清晰，核模完整，而经不同浓度的舒林酸和尼美舒利作用后细胞呈现典型的凋亡形态学变化，并可见凋亡小体形成；流式细胞仪结果显示不同浓度的NS-398作用SGC7901细胞72h后，均可出现亚G1峰，呈剂量依赖关系诱导胃癌细胞凋亡，并呈浓度依赖性改变的细胞周期分布，一方面增高G0／G期细胞比例，另一方面降低S期和G2／M期细胞比例。结论NS-398可抑制胃癌SGC7901细胞的增殖；NS-398促进胃癌SGC7901细胞的凋亡；NS-398抑制胃癌的机制可能是通过抑制胃癌细胞COX-2的活性，从而抑制前列腺素E2的释放而抑制胃癌细胞的生长。     

STAT3反义寡核苷酸对HepG2肝癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的 探讨STAT3反义寡核苷酸对HepG2细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的诱导作用。方法： HepG2细胞体外培养，人工合成并硫代修饰STAT3 ASODN，通过脂质体转染进入HepG2细胞，倒置显微镜下观察细胞形态学变化、 MTT法检测细胞增殖抑制程度，原位末端标记（Tunel）法检测细胞凋亡指数（AI）， RT-PCR检测细胞中STAT3 mRNA 的表达水平，流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果： STAT3 ASODN各浓度组对HepG2细胞的增殖有明显的抑制作用，能明显诱导细胞凋亡。结论： STAT3 ASODN能够诱导HepG2细胞凋亡。     

人参多糖注射液体外诱导人白血病细胞株K562增殖抑制及分化

背景:既往研究表明,人参多糖既能促进正常血细胞生成,又能抑制白血病细胞的增殖,但这种双向调控的机制尚不清楚.目的:体外观察人参多糖注射液对人白血病细胞株 K562 增殖抑制及诱导分化的影响.方法:K562 细胞由重庆医科大学临床检验系提供,人参多糖注射液为山西普德药业有限公司生产.取对数生长期的 K562细胞,调整浓度为 7×108 L-1.对照组予以常规培养;人参多糖组分别加入 25,50,100,200,400,600,800 mg/L 的人参多糖注射液.MTT 比色法检测人参多糖注射液对 K562 细胞增殖情况的影响;血红蛋白测定及联苯胺、Wright's 染色检测 K562 细胞向红系细胞分化的特征;流式细胞仪测定细胞凋亡情况.结果与结论:人参多糖在体外对 K562 细胞的增殖有明显抑制作用,并能诱导 K562 细胞向红系细胞分化,表现为 K562 细胞的增殖受到抑制.K562 细胞形态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,胞浆丰富,核浆比例降低;人参多糖在体外对K562 细胞有诱导血红蛋白生成的作用,在 100-800 mg/L 范围内,呈浓度依赖性,且均在作用 48 h 时抑制率达高峰;细胞凋亡率增加.提示人参多糖注射液能抑制 K562 细胞增殖,诱导其凋亡,并使 K562 细胞向红系细胞方向分化.     

FTY720对体外培养MCF-7细胞增殖及凋亡影响的研究

目的探讨FTY720对体外培养MCF-7细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养MCF-7细胞,将其培养液中加入不同浓度的FTY720,继续培养48小时,MTT法检测MCF-7细胞的增殖情况;瑞士-姬姆萨染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测FTY720对MCF-7细胞的细胞周期、凋亡率的影响。结果当FTY720浓度为6 400 ng/ml时,体外培养MCF-7细胞的增殖受到明显抑制,抑制率为62.0%（P〈0.05）,而且抑制率呈浓度依赖性;镜下可见细胞出现凋亡的形态;流式细胞仪检测分析显示FTY720可将MCF-7细胞阻滞于G1期,并促进其发生凋亡,凋亡率呈浓度依赖性。结论在体外培养的MCF-7细胞培养液中加入一定浓度的FTY720,能明显抑制该细胞的增殖,调节该细胞周期并诱导其凋亡。     

NS-398联合硼替佐米对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的增殖抑制作用

目的:观察NS-398能否增强多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:NS-398与BOR联用后,用MTT法测定对体外培养的RPMI 8226细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响;ELISA法检测细胞的Caspase-3活性;Cox-2试剂盒定量检测各组细胞Cox-2的活性。结果:NS-398联合BOR对RPMI 8226细胞的增殖抑制率大于单用组(Q0.85);NS-398联合BOR使RPMI 8226细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率明显高于单用组(Q1.15);NS-398联合BOR组细胞的Caspase-3的活性高于单用组(Q1.15)。结论:NS-398具有协同增强BOR体外抗骨髓瘤RPMI 8226细胞的作用。     

IL-15对MDS患者CD34+细胞诱导增殖分化和抗凋亡作用

为了研究IL—15对体外培养的MDS CD34^＋细胞诱导增殖分化及凋亡的抑制作用，应用MACS免疫磁珠分离系统分离高富集度MDS CD34^＋细胞，建立以造血生长因子为基础的体外培养体系，用不同浓度的IL-15作用于MDS CD34^＋细胞，采用流式细胞术检测和免疫细胞化学染色等方法观察培养后的细胞表面抗原表达、细胞周期、凋亡指数及细胞形态的变化情况，并进行了定量分析。结果表明，MDS CD34^＋细胞经IL—15作用后，MDS CD34^＋细胞出现明显增殖和分化，细胞周期变异，增殖指数和细胞计数增加，形态学向成熟转化，实验组各表面抗原水平CD71、CD33和CD19均较对照组为高，细胞凋亡率则较对照组下降。结论IL—15对MDS CD34^＋细胞有一定的诱导增殖分化和抗凋亡作用，在MDS治疗方面可能有一定的应用前景。     

大蒜素对LM-8细胞Bcl-2及Bax表达的影响

背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响.目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系.设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验.单位:实验于2006-09/2007-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成.材料:实验所用C3H小鼠LM-8骨肉瘤细胞株购自解放军第四军医大学实验动物中心.大蒜素为武汉汇海公司产品,是从大蒜球茎中分离出的硫化物.Cell Counting Kit-8试剂购于上海同仁化学研究所,Bcl-2和Bax抗体及SP试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司.方法:以含体积分数为0.1新生牛血清的1640完全培养基,培养LM-8细胞,制作细胞爬片.SP免疫细胞组织化学技术检测细胞爬片中Bcl-2和Bax蛋白表达;倒置显微镜下观察5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度大蒜素作用前后LM-8细胞形态变化;将LM-8细胞调整至7.5×107L-1接种于96孔板,用1.0,5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度的大蒜素处理细胞,设立不加任何处理因素的对照组及不含细胞和药物的培养基空白组,孵育24,48,72 h后取出培养板,加入CCK-8测定吸光度值,计算LM-8细胞生长抑制率:以5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度大蒜素干预LM-8细胞24,48,72 h,消化离心收集细胞,以流式细胞仪分析细胞凋亡率的变化.主要观察指标:LM-8细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达;LM-8细胞形态及增殖、凋亡情况.结果:①Bcl-2和Bax蛋白表达:大蒜素可以降低Bcl-2表达,增强Bax表达,经15.0mg/L大蒜素作用72h,Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率及Bcl-2/Bax表达与对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.01).②LM-8细胞的形态:经不同质量浓度大蒜素干预后均出现明显凋亡表现.③LM-8细胞的增殖:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的增殖,当大蒜素浓度从1.0 mg/L增加到15.0 mg/L,LM-8细胞72 h时生长抑制率由(23.87±3.26)%增至(58.32±5.38)%,在72 h其药物半数抑制率浓度是11.09 mg/L.④LM-8细胞的凋亡:5.0,10.0和15.0 mg/L质量浓度的大蒜素作用72 h后可诱导LM-8细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P＜0.05).结论:①大蒜素可抑制LM-8细胞增殖,该效应与大蒜素的浓度和时间有关.②大蒜素可诱导LM-8细胞凋亡,作用呈浓度依赖性.③大蒜素抑制LM-8细胞增殖和诱导LM-8细胞凋亡的机制可能与下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达有关.     

吡罗昔康声动力效应对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 从细胞增殖和凋亡两方面观察吡罗昔康声动力效应对乳腺癌细胞MDA-MB-231的迟发抑制作用。方法 用MIT法检测吡罗昔康声动力作用后MDA-MB-231细胞的增殖能力,采用TUNEL法检测凋亡。结果吡罗昔康声动力效应和单纯超声作用均能明显降低MDA-MB-231细胞的增殖代谢活性而抑制其增殖,但是前者作用更为显著（P〈0．01）。TUNEL法染色显示吡罗昔康声动力组和单纯超声组均有数量不等的凋亡细胞,并以前者为著。结论吡罗昔康介导的声动力作用不仅能显著抑制MDA-MB-231细胞增殖,还能有效诱导其凋亡。     

珍珠液对体外培养人瘢痕成纤维细胞生长的抑制

背景:研究发现,珍珠液有促组织细胞再生、消除瘢痕等功效.目的:观察珍珠液对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖的影响.设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2008-09/12在广西医科大学医学实验中心完成.材料:瘢痕组织组织标本来自广西医科大学整形外科患者.珍珠液是珍珠的水解液,含有多种氨基酸、多肽、维生素、矿物质和天然酶等.购自北海国发生物有限公司.方法:参考Veelken方法进行成纤维细胞原代及传代培养,反复传代去除非成纤维细胞成分后,建立人皮肤瘢痕细胞系.取对数生长期的人皮肤瘢痕成纤维细胞3～5代,用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于96孔塑料培养板,密度为0.5×10~4/孔,每孔加入100μL的细胞悬液和100μL的DMEM培养基,常规培养24h后吸弃原培养液,实验分组:珍珠液组:加入已经配置的含珍珠液质量浓度为125.00,62.50,31.30,15.60,7.80,3.90,1.95,0.98mg/L的培养基200μL;对照组:每孔只加200μL的培养基.主要观察指标:MTT法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成纤维细胞凋亡情况.结果:珍珠液对成纤维细胞的半效抑制浓度IC_(50)为15mg/L,除0.98mg/L质量浓度外,其余质量浓度均能有效地抑制成纤维细胞的生长,且呈剂量依赖性抑制成纤维细胞的生长,珍珠液的浓度越高,对成纤维细胞的抑制率越大.剂量IC_(50)=15mg/L培养的成纤维细胞体积缩小、胞质少、密度变小,凋亡细胞多、呈棕黄色.对照组成纤维细胞体积大、胞质丰富、密度大.珍珠液作用后的细胞凋亡指数高于空白对照组(P＜0.01).结论:珍珠液能抑制体外培养皮肤瘢痕成纤维细胞的生长,并诱导其凋亡.     

环氧化酶2抑制剂对体外缺氧大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察体外培养心肌急性缺氧条件下环氧化酶-2(COX2)抑制剂与细胞凋亡间的关系.方法分离、培养Wistar大鼠心肌细胞.以第4～6代心肌细胞24份样本(每份1×105个细胞)随机分为正常对照组、单纯缺氧组、缺氧+COX-2抑制剂(NS-398,20 μmol/L)组及缺氧+阿司匹林(100 μg/L)组.缺氧前30 min加入干预药物或等量二甲亚砜.以蛋白质免疫印迹法检测心肌细胞中COX-1/2表达;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;放射免疫法(RIA)检测心肌细胞培养液中6-酮-前列腺素F1α(6-ketoPGF1α)、血栓素B2(TXB2)含量.结果各组心肌细胞中COX-1表达差异无显著性;COX2表达均较正常对照组增高,阿司匹林与NS-398均不抑制COX2表达.心肌细胞凋亡率由高到低依次为缺氧+NS-398组、缺氧+阿司匹林组、单纯缺氧组和正常对照组;缺氧+NS-398组与其他各组间比较差异均有显著性(P均<0.05).各组心肌细胞培养液内TXB2水平由低到高依次为正常对照组、缺氧+NS-398组、缺氧+阿司匹林组和单纯缺氧组;缺氧+NS-398组与单纯缺氧组比较差异有显著性(P<0.05);6-keto-PGF1α水平由低到高依次为正常对照组、缺氧+NS-398组、缺氧+阿司匹林组和单纯缺氧组;缺氧+NS-398组与单纯缺氧组比较差异有显著性(P<0.05);TXB2/6-keto-PGF1α比值差异无显著性.结论急性缺氧可直接诱导培养心肌细胞表达COX-2,而COX-1表达不增加,缺氧使培养液内COX-2作用产物TXB2、6keto-PGF1α水平升高,此效应无中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞参与.COX-2抑制剂NS-398可降低缺氧心肌培养液内TXB2、6-keto-PGF1α升高程度,但不改变TXB2/6keto-PGF1α比值.急性缺氧可直接诱导心肌细胞凋亡,NS398可显著增加缺氧培养心肌凋亡率,此效应不需要其他组织细胞参与.     

Pioglitazone induces apoptosis in human vascular smooth muscle cells from diabetic patients involving the transforming growth factor-beta/activin receptor-like kinase-4/5/7/Smad2 signaling pathway

Alterations in vascular wall remodeling are a typical complication in type 2 diabetes mellitus due to an imbalance between cell proliferation and apoptosis. In this context, we have previously shown that vascular smooth muscle cells (VSMC) from diabetic patients were resistant to induced apoptosis. Thiazolidinediones, such as pioglitazone, seem to exert direct antiatherosclerotic effects on type 2 diabetes. Here, we aimed to study whether pioglitazone was able to induce apoptosis in VSMC from diabetic patients (DP) and, if so, whether the transforming growth factor (TGF)-beta1/Smad-2 pathway was involved. We isolated human internal mammary artery VSMC from patients who had undergone coronary-artery bypass graft. Pioglitazone (100 microM) induced apoptosis in human VSMC from diabetic and nondiabetic patients (NDP), analyzed by DNA fragmentation and by degradation of Bcl-2, in high-glucose-containing medium (15 and 25 mM). This apoptotic effect was inhibited by the activin receptor-like kinase-4/5/7/Smad2 inhibitor 4-(5-benzo(1,3)dioxol-5-yl-4-pyridin-2-yl-1H-imidazol-2-yl)benzamide (SB-431542), denoting that the TGF-beta1/Smad-2 pathway was involved. Pioglitazone rapidly increased the extracellular TGF-beta1 levels and concomitantly induced phosphorylation of Smad2 in VSMC from DP and NDP. Thus, we demonstrated that pioglitazone induced apoptosis in human VSMC from DP, which are strongly resistant to the induced apoptosis. This effect of pioglitazone might contribute in the treatment of alterations of vascular remodeling in type 2 diabetes mellitus.     

c-myc在大黄素抑制HL-60细胞增殖及诱导凋亡中的作用

目的研究中药大黄素(emodin)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞的影响及探讨c—myc基因在其中的作用。方法应用MTT法绘制细胞生长曲线；细胞集落培养观察大黄素对HL-60细胞增殖的影响；DNA倍体分析、线粒体细胞凋亡检测法、末端缺失原位标记(TUNEL)法及DNA凝胶电泳分析细胞凋亡；RT—PCR及Western blot检测大黄素作用前后c—myc基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果大黄素能明显抑制HL-60细胞增殖，半数抑制浓度(IC50)约为20μmol／L；DNA片段化、亚G1峰(凋亡峰)的检出及线粒体细胞凋亡检测等证实大黄素能有效诱导HL-60细胞凋亡，细胞凋亡率与药物作用浓度呈正相关。大黄素与HL-60细胞作用后c—myc基因mRNA及蛋白的表达水平与作用时间呈负相关。结论大黄素能有效抑制HL-60细胞增殖，诱导其凋亡；c—myc基因可能参与了大黄素抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡的过程。     

NM-3对体外胃癌细胞株SGC-7901的作用和机制探讨

目的：研究新小分子血管生成抑制剂NM-3对体外培养的胃癌SGC79n1细胞的作用，并探讨NM-3对胃癌抑制作用的机理。方法：将体外培养的人胃癌细胞株SGC7901用NM-3、卡铂及生理盐水处理，观察细胞的生长规律。并在不同时间段以流式细胞仪检测细胞的凋亡率，分析细胞周期分布。结果：将药物作用后1h，2h，3h，6h，12h，24h，48h，72h的胃癌SGC7901细胞通过流式细胞仪检测胃癌细胞早期凋亡率及凋亡峰。发现NM-3组（1mol／L）在72h内与对照组比较细胞早期调亡率无显著差异（P2〉0．05）；经0．1mol／L卡铂处理的细胞组早期即可诱导发生明显的凋亡，并随着时间的延长调亡率增高，呈时间依赖性，与对照组相比较，有显著差异（P〈0．05）。对细胞周期分布的分析中，NM-3组（1mg／L）Sub-G1峰与对照组比较无显著差异（P〉0．05）。而卡铂能使细胞周期发生相对变化，随着药物作用时间的增加，Go／G1期细胞增多，而S期覆G2／M期细胞则相应减少。结论：NM-3对胃癌组织的生长抑制主要是通过作用于血管内皮细胞，减少肿瘤新生血管生成。而对体外培养的人胃癌细胞无直接诱导其凋亡的作用。     

胰岛素样生长因子Ⅰ抑制氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的体外试验

目的：胰岛素样生长因子Ⅰ作为重要的促细胞生长因子之一，其对内皮细胞凋亡影响的报道不多。实验拟验证和探讨胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用及可能机制。 方法：实验于2006—12／2007—07在华中科技大学同济医学院协和医院心血管疾病研究所完成。①实验材料及分组处理：取人新鲜脐带（产妇或家属签署知情同意书）分离培养人脐静脉内皮细胞，分为：胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）＋胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）组、正常对照组。分别在细胞培养24h后加入。②实验评估：采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活力；DAPI细胞核荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化及细胞凋亡率的测定；并进行内皮细胞caspase-3活性的检测。 结果：①氧化型低密度脂蛋白可明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖，胰岛素样生长因子Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白共同加入后，细胞增殖率明显上升（P〈0．05）。②氧化型低密度脂蛋白可诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡，而加入胰岛素样生长因子I刺激后细胞凋亡率降低（P〈0．05）。③caspase-3活性检测表明与对照组相比，氧化型低密度脂蛋白能明显上调caspase-3的表达，而胰岛素样生长因子Ⅰ＋氧化型低密度脂蛋白组caspase-3活性则降低（P〈0．05）。 结论：胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡具有抑制作用，可能与其下调caspase-3蛋白表达有关。     

肝细胞生长因子在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体作用下对原代肝星状细胞增殖及凋亡的影响

背景:活化的肝星状细胞是肝纤维化的关键因素,研究表明肝细胞生长因子能促进星状细胞凋亡,其具体机制可能与增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导星状细胞凋亡有关。目的:观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体作用下,肝细胞生长因子对原代肝星状细胞增殖、凋亡的影响并初步探讨其可能机制。方法:将SD大鼠原代肝星状细胞复苏、传代,细胞增殖明显时用于实验。实验分为4组:空白对照组为单纯肝星状细胞培养;肝细胞生长因子组:将100μg/L肝细胞生长因子作用于肝星状细胞;TRAIL组:将2mg/L的TRAIL作用于肝星状细胞;肝细胞生长因子+TRAIL组:将肝细胞生长因子预先刺激肝星状细胞24h,再加入2mg/LTRAIL。结果与结论:MTT检测显示肝细胞生长因子及TRAIL分别在50～200μg/L、0.5～1.5mg/L各浓度下对肝星状细胞增殖抑制率无影响,TRAIL在2mg/L作用下对肝星状细胞有抑制作用。流式细胞仪检测肝细胞生长因子+TRAIL组的中晚期凋亡率明显高于空白对照组及肝细胞生长因子组(P<0.05);肝细胞生长因子+TRAIL组DR5荧光强度明显高于其他3组(P<0.01)。提示在TRAIL作用下,肝细胞生长因子能促进肝星状细胞的凋亡、抑制其增殖。可能与肝细胞生长因子上调活化肝星状细胞表面DR5表达有关。