乳腺癌中Survivin蛋白的表达及其与P53的关系

目的观察Survivin在正常乳腺组织、一般增生、不典型增生及乳腺癌组织中的表达情况,探讨其与突变型P53基因表达的相关性.方法用免疫组化法检测36例乳腺癌组织、30例乳腺增生组织及7例正常乳腺组织中的Survivin和P53的表达.结果在正常乳腺组织→一般增生→不典型增生→乳腺癌的发展过程中,Survivin及P53阳性表达率随乳腺组织增生程度的加重而升高,两者的表达与乳腺癌的组织类型、临床分期和淋巴结转移状况无显著相关.Survivin在P53阳性的乳腺癌组织中的表达率为100%,明显高于P53阴性组.结论Survivin蛋白的异常表达与乳腺癌的发生与发展密切相关,Survivin蛋白表达与P53基因突变显著相关,两者可能通过某种作用共同参与乳腺癌的发生与发展.     

乳腺癌患者循环肿瘤细胞阳性率与预后的关系

目的:探讨乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测阳性率与原发肿瘤临床病理特征及预后的关系。方法:前瞻性收集41例乳腺癌患者术前外周血,密度梯度离心进行CTC富集,甲苯胺蓝染色,CK联合上皮黏附分子免疫细胞化学法鉴定CTC。采用χ~2检验分析CTC阳性率与临床病理特征及预后的关系。结果:乳腺癌外周血CTC阳性率与分子分型、原发肿瘤T分期及TNM分期具有明显相关性(均P<0.05)。与年龄、激素受体、Ki67、Her-2表达、淋巴结、远处转移无显著相关性(均P>0.05)。平均随访75.9±2.59个月,CTC阳性组与CTC阴性组在远处转移及死亡发生率方面均无显著性差异(P=0.555)。结论:乳腺癌外周血CTC的检测具有显著临床意义。     

GLS1基因在乳腺癌中的表达及在新辅助化疗中的意义

目的：探讨GLS1基因在乳腺癌中的表达及在新辅助化疗中的意义。方法收集134例乳腺癌患者为研究对象,入组患者经过穿刺活检确诊乳腺癌后,按照随机对照原则平均分成两组,每组67例。观察组在乳腺癌改良根治术前使用多西他赛＋表柔比星＋环磷酰胺（ TEC ）方案,进行3～4周期的化疗后再进行择期手术。对照组在改良根治术前不进行TEC化疗,直接手术摘除病变乳腺。术后两组患者采用免疫组化法,对病变组织中GLS1蛋白免疫组化染色。结果 GLS1基因在134例患者正常组织和乳腺癌组织中表达,但在乳癌组织中表达明显升高,差异有统计学意义（ P＜0．05）;术前采用新辅助化疗后,癌组织中GLS1基因表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）。患者生存率与GLS1表达水平有关（P＜0．05）,表达水平越高生存率越低。结论GLS1基因在乳腺癌患者癌组织中高表达。在乳腺癌改良根治术前,使用辅助化疗可明显降低GLS1的表达水平;患者癌组织中GLS1基因表达水平与生存预后相关,GLS1基因在乳腺癌靶向治疗以及靶向治疗药物开发中可作为特异性的药物靶点之一。     

c-Myc基因在人非小细胞肺癌中的表达及基因沉默抑制H1299细胞效果的实验研究

目的:分析人非小细胞肺癌(non-small cell carcinoma,NSCLC)组织中c-Myc基因的表达,探讨沉默c-Myc基因在非小细胞肺癌基因治疗中的前景?方法:应用实时荧光定量PCR法检测84例非小细胞肺癌组织及其相应癌旁组织中c-Myc基因mRNA的表达情况?通过脂质体LipofactAMINE2000将c-Myc基因siRNA瞬时转染至非小细胞肺癌H1299癌株细胞中,顺铂(Cisplatin,cis)药物毒性实验验证c-Myc基因沉默对肿瘤细胞的抑制效果?应用RT-PCR检测H1299细胞中c-Myc基因RNA的表达,CCK-8法检测抑制细胞的效果?结果:非小细胞肺癌组织中c-Myc基因mRNA的表达水平高于相应的癌旁组织,差异有统计学意义(P < 0.05)?c-Myc siRNA瞬时转染后的H1299细胞中,c-Myc基因mRNA的表达水平显著下降(P < 0.05)?将c-Myc基因沉默和顺铂联合使用,还可以显著提高顺铂对H1299细胞增殖的抑制效果(P < 0.05)?结论:c-Myc基因在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,沉默c-Myc基因能显著提高顺铂抑制非小细胞肺癌H1299 细胞增殖的作用,c-Myc基因有可能成为NSCLC基因治疗的新靶点?     

基因PTEN表达与乳腺癌肿瘤血管生成的关系

目的:探讨PTEN在乳腺癌中表达及与肿瘤血管生成的关系. 方法:用免疫组化SP法检测53例乳腺癌和10例乳腺良性增生中PTEN,并测定微血管密度(MVD). 结果:PTEN在良性乳腺增生中高表达率为100%(10/10),在乳腺癌中高表达率为49.1%(26/53)(P<0.01).腋窝淋巴结转移阳性组的PTEN的低表达率为的表达63.3%(19/30),明显高于腋窝淋巴转移阴性组34.8%(8/23)(P<0.05).雌激素受体(ER)阴性组PTEN低表达率为72.0%(18/25),明显高于雌激素受体阳性组(P<0.05).PTEN的表达与MVD呈负相关(P<0.05). 结论:在乳腺癌中PTEN表达下调及丢失预示乳腺癌血管生成及淋巴结转移.     

Tiam1在乳腺癌中的表达及其意义

目的 探讨Tiam1在正常乳腺组织、乳腺癌组织及不同侵袭能力乳腺癌细胞系中的表达情况。方法应用免疫组化方法检测Tiam1在60例乳腺癌组织和34例正常乳腺组织中的表达。应用Western blot方法检测Tiam1在乳腺癌细胞系MDA—MA-231（高侵袭）和MCF-7（低侵袭）中的表达。结果Tiam1阳性率在正常乳腺组织（41％）中明显低于乳腺癌组织（71．7％,P〈0．01）,Tiaml在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的TMN分期、是否发生淋巴结转移以及病理分级密切相关（P〈0．05）而与肿瘤的大小无关。Tiam1总蛋白在乳腺癌高侵袭细胞系中的表达量高于低侵袭细胞系,差异具有显著性（P＜0．05）。结论Tiam1在乳腺癌中的表达与其转移侵袭相关,可能是判断预后的一个潜在指标。     

乳腺癌患者肿瘤循环DNA的定量分析

目的:检测乳腺癌患者肿瘤循环DNA的含量及其p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变. 方法:收集61例乳腺癌患者、33例乳腺良性病变患者和27例健康志愿者的血浆样本,抽提血浆循环DNA,以SYBR green I荧光染色法行DNA定量;利用半巢式甲基化特异性PCR技术,检测61例乳腺癌患者血浆循环DNA和相应癌组织p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变. 结果:乳腺癌患者、乳腺良性病变患者、健康自愿者肿瘤循环DNA浓度分别为(65.0±45.3), (19.0±9.5)和(13.0±7.3) μg/L,乳腺癌患者血浆循环DNA浓度显著高于乳腺良性病变患者和健康自愿者,差异有统计学意义(P＜0.05). 61例乳腺癌患者血浆循环DNA和相应癌组织p16基因5' CpG岛甲基化状态的改变检出率分别为44.3%和46.2%,两者检出率无统计学差别(P＞0.05). 结论:血浆肿瘤循环DNA的定量有可能成为一种新的恶性肿瘤标志物.     

RRM1、BRCA1表达与ⅢB/Ⅳ期肺鳞癌患者GP方案化疗疗效的相关性研究

目的:观察肿瘤组织核糖核酸调节亚单位1(RRM1)?乳腺癌易感基因1(BRCA1)表达与ⅢB/Ⅳ期肺鳞癌采用吉西他滨联合顺铂(GP)方案化疗疗效的相关性?方法:初治ⅢB/Ⅳ期肺鳞癌且体能状态(PS)评分0~2分?预计生存期≥3个月的患者入选本研究?入选患者均进行GP方案化疗,每3周为1个周期,每2个周期评价1次疗效,共4个周期,无效者更换二线化疗方案?免疫组化检测肿瘤组织中RRM1?BRCA1表达?根据RRM1?BRCA1表达高低分为A组(RRM1-/BRCA1-)?B组(RRM1+/BRCA1+)?C组(RRM1+/BRCA1-)?D组(RRM1-/BRCA1+)?评价疗效指标:客观反应率(RR)?总生存时间(OS)?肿瘤至进展时间(TTP)?结果:①入组78例ⅢB/Ⅳ期肺鳞癌患者,RRM1?BRCA1表达阳性率分别为47.4%(37/78)?51.3%(40/78),RRM1?BRCA1不同表达的患者临床特征比较差异无统计学意义; ②78例患者A组22例,B组21例,C组19例,D组16例?化疗前4组间的临床特征比较差异无统计学意义?4组患者RR分别为59.1%?38.1%?42.1%?43.8%;OS分别为(617.4 ± 19.6)?(299.2 ± 20.5)?(336.6 ± 22.7)?(324.7 ± 24.2)d;TTP分别为(274.9 ± 21.8)?(138.8 ± 18.0)?(172.3 ± 17.3)?(167.3 ± 19.8)d?其中A组的RR?OS及TTP均优于其他3组,差异有统计学意义(P值分别为0.039?0.000和0.000)?结论:RRM1?BRCA1可作为GP方案疗效的预测分子;RRM1?BRCA1低表达的肺鳞癌患者,可能是GP化疗方案的优势人群?     

乳腺癌细胞中核糖核酸酶抑制因子基因表达研究

采用反转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）法，对乳腺癌细胞中核糖核酸酶抑制因子（ＲＩ）ｍＲＮＡ含量进行检测。结果显示乳腺癌细胞中ＲＩｍＲＮＡ含量明显低于正常乳腺细胞中的含量，揭示乳腺癌细胞中ＲＩ基因表达水平低下，可能导致ＲＩ合成不足，对肿瘤细胞生长的抑制作用下降。     

雌、孕激素受体在晚期局部乳腺癌中的表达及与患者预后相关性研究

目的:分析雌、孕激素受体(ER、PR)在局部晚期乳腺癌中的表达及与患者预后相关性。方法:收集晚期乳腺癌患者96例,均经镜下取癌组织进行活检;另随机抽取46例患者进行癌旁组织采集,采用免疫组织化SP法检测两组ER、PR,并分析其表达水平与乳腺癌疾病的预后的关系,采用单因素和多因素Logistic回归分析ER、PR表达水平对晚期乳腺癌患者预后相关危险因素。结果:①癌组织中ER(-)与PR(-)例数均明显少于癌旁组织,癌组织中ER(+)、ER(++)、ER(+++)、PR(+)例数均明显高于癌旁组织(P<0.05)。②ER(+)者第1年存活率为47.91%,明显低于ER(-)58.33%,PR(+)者2年存活率为36.45%,明显低于PR(-)51.04%,差异具有统计学意义(P<0.05)。③非条件单因素Logistic回归分析结果显示,年龄、肿瘤直径、ER与PR表达水平是影响晚期乳腺癌患者预后死亡单因素(P<0.05)。④经非条件多因素Logistic回归模型分析结果显示,肿瘤直径≥2、ER(+)、PR(+)是影响患者预后死亡的独立危险因素(P<0.001)。结论:ER、PR在局部晚期乳腺癌患者癌组织中表达水平较癌旁组织高,ER、PR表达水平与肿瘤直径是影响局部晚期乳腺癌患者预后的危险因素,ER、PR表达阳性者病死率较高。     

乳腺浸润性导管癌耐药基因蛋白表达与化疗方案的相关性研究

目的：了解乳腺浸润性导管癌对不同化疗方案的敏感性及与耐药基因蛋白表达的关系。方法：用免疫组化法检测同一乳腺癌病例新辅助化疗前后耐药基因蛋白谷胱甘肽-S转移酶（GST-π）、拓扑异构酶Ⅱ（ToPoⅡ）、热休克蛋白（HSP）和P-糖蛋白（P—gp）的表达情况,并与3种化疗方案,即环磷酰胺＋阿霉素＋5-氟尿嘧啶（CAF）、环磷酰胺＋氨甲喋呤＋5-氟尿嘧啶（CMF）、紫杉醇＋阿霉素（TA）方案作相关性分析。结果：CAF方案对乳腺浸润性导管癌耐药表型影响最大,该组28例中11例GST-π由阴性转为阳性表达,7例化疗后ToPoⅡ表达转阴,化疗前后差异显著（P〈0．05）：CMF方案31例中,GST-π5例由阴性转为阳性表达,5例化疗后ToPoⅡ表达转阴;TA方案对乳腺癌耐药表型影响最小,但该方案24例有8例经化疗后P-gp由阳性转为阴性表达。结论：乳腺浸润性导管癌耐药基因表达受不同化疗方案的影响。     

DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达

［摘 要］目的：探究 DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法：利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1( + )质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒。实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Western blotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况。结果：成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒。PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组（P<0.05）,DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多（P<0.05）,DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多（P<0.05）。免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100%（37/37）;在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9%（7/37）,两者比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润。     

鼻咽癌变过程中基因表达的cDNA阵列研究

目的 :比较研究鼻咽癌变过程中不同阶段鼻咽上皮组织基因表达谱的差异 ,观察鼻咽癌发生中多个基因的作用 ,寻找与鼻咽癌变相关的基因。方法 :用二亚硝基哌嗪 (N ,N’Dinitrosopiperazine ,DNP)诱导大鼠鼻咽癌 ,获取癌变过程中单纯增生、异型增生和癌组织 ,提取总RNA后逆转录标记成cDNA探针 ,与 5 88个基因的AtlasTM RatcDNAExpressionArray杂交 ,灰度扫描杂交信号及统计分析差异。结果 :在鼻咽癌组织中 ,PDGFB ,M6 P IGFR2 ,ErbB3EGF等瘤基因抑瘤基因、CCNE ,CCND3等细胞周期调节基因以及NF κB ,JNK转录因子和细胞信号转导等基因表达升高。鼻咽异型增生组织表达升高的基因较癌组织少 ,有prothymosin alpha,Cu ZnSOD1 ,MAPK1 等基因表达升高 ,但较鼻咽单纯性增生组织高表达基因多 ;鼻咽上皮组织单纯性增生仅有个别基因表达升高 ,大部分基因表达与正常鼻咽组织基因表达无明显差异。结论 :多个基因的表达变化在鼻咽癌变过程中起作用 ,随癌变进程基因逐步高表达     

netrin-1蛋白在胃癌组织中的表达与临床病理及预后的关系

目的 探讨胃癌netrin-1蛋白的表达与胃癌患者临床病理和预后的关系.方法 应用组织芯片和免疫组化技术,分析胃癌和癌旁组织中netrin-l蛋白和Ki67的表达,对其表达进行相关分析并探讨其与临床病理特征的关系.采用Kaplan-Meier限乘法计算生存率.建立Cox回归模型,评价netrin-1蛋白作为胃癌患者...     

实时RT-PCR检测人端粒酶逆转录酶mRNA用于乳腺癌鉴别诊断及与c-Myc基因的相关性

目的 探讨定量检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在乳腺癌鉴别诊断中的价值，并观察原癌基因c-Myc与hTERTmRNA表达的关系。方法 收集癌旁正常乳腺组织、乳腺普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌病例，采用实时荧光定量RT-PCR技术（Real-timeRT-PCR）定量检测hTERT和e-Myc基因的转录水平。结果 以NhTERT=10为临界值，所有正常组织和良性病变NhTERT值均小于临界值，而hTERT基因转录升高的导管原位癌及浸润性导管癌其NkTERT值均大于此临界值。显示hTERT和e-Myc基因转录水平呈正相关（y=0．7395，P〈0．01）。结论 实时荧光定量PCR技术检测hTERT基因表达具有高敏感性和特异性。能为常规病理学诊断提供客观的参考指标。从而提高乳腺不典型导管增生与导管原位癌鉴别诊断的准确性。原癌基因e-Myc转录水平上调可能与乳腺癌hTERT基因转录激活有关。     

ERCCl、BRCAl在维族、汉族非小细胞肺癌患者中的表达分析

目的：研究探讨维吾尔族和汉族非小细胞肺癌组织中DNA修复家族成员核苷酸切除修复交叉互补组1（excision repair cross complementation groupl,ERCCl）及乳腺癌易感基因（breast cancer susceptibility genel,BRCAl）的表达及其对化疗疗效的预测价值。方法：收集2009年1月-2012年6月经病理证实的初治晚期NSCLC标本200例．其中维吾尔族患者和汉族患者分别为94例和106例,采用免覆组化方法检测ERCCl、BRCAl的表达情况。分析二者表达的特点和相关性。结果：维吾尔族NSCLC组织中ERCCl表达阳性率为31．9％,汉族NSCLC组织中ERCCl表达阳性率为30．2％,两组ERCCl的表达在差异无统计学意义（χ^2=0．069,P〉0．05）;维吾尔族NSCLC组织中BRCAl表达阳性率为80．9％,汉族NSCLC组织中BRCAl表达阳性率为59．4％,两组BRCAl的表达差异有统计学意义（χ^2=10．781,P〈0．05）：在维吾尔族或汉族NSCLC组织中,ERCCl和BRCAl表达差异有统计学意义（χ^2=5．726,P〈0．05;χ^2=6．726,P〈0．05）,且表达均存在显著负相关（r=-0．247,P〈0．05;rs=-0．252,P〈0．05）。结论：维吾尔族与汉族NSCLC组织中BRCAl表达存在差异,且ERCCl和BRCAl表达存在负在关。ERCCl和BRCAI可为临床上维吾尔民族非小细胞肺癌患者个体化治疗及判断预后提供参考。     

氨肽酶N在乳腺癌中的表达及与MMP-2、MMP-9 的相关性研究

目的 研究氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)在乳腺癌中的表达及临床意义,并观察其与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的关系.方法 收集河北省人民医院病理科2011年7月至2012年9月乳腺癌石蜡标本60例,癌旁正常乳腺组织石蜡标本20例,及患者的临床病理资料.采用免疫组织化学SP法检测APN在80例标本中的表达,并分析APN表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系.检测MMP-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达,及与APN表达的相关性.结果 APN在乳腺癌中的阳性表达率36.7％ (22/60)明显高于癌旁正常乳腺组织0％(0/20)(x2=10.115,P=0.001).APN在乳腺癌中的表达与肿瘤病理类型有关(P =0.035),多表达于浸润性导管癌;与患者绝经状况、肿瘤大小、临床分期、组织学分级、淋巴结转移状态、ER、PR、Her-2等无关(P＞0.05).乳腺癌组织APN的表达与MMP-2、MMP-9的表达无相关性(P＞0.05).结论 APN在乳腺癌中的表达高于正常乳腺组织,但APN在乳腺癌中侵袭转移的机制有待进一步深入研究.     

HER2蛋白表达与乳腺癌转移和预后关系的研究

目的:探讨HER2基因表达与乳腺癌转移和预后的关系。方法:应用免疫组织化学方法,检测110例乳腺癌组织中HER2蛋白表达,结合随访资料分析。结果:在乳腺癌组织中,HER2蛋白阳性表达率为54.54%(60/110)。HER2蛋白阳性表达的乳腺癌转移率高(P<0.01),分化程度差和患者大于5年生存率低(P<0.01)。结论:HER2蛋白表达与乳腺癌转移和患者生存期密切相关,检测HER2蛋白表达可作为判断乳腺癌预后的参考指标。