黄芪总皂苷对内质网应激诱导的心肌细胞肥大模型的保护作用

目的观察内质网应激(ERS)对心肌肥大的影响,探讨黄芪总皂苷对ERS诱导的心肌细胞肥大的保护作用。方法心肌细胞原代培养,实验分为对照组、衣霉素(TM)组、黄芪总皂苷联合TM(AST+TM)组。通过测定心肌细胞蛋白质合成速度、心肌细胞表面积观察心肌细胞肥大,通过内质网染色以及RT-PCR检测葡萄糖调节蛋白(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)mRNA的表达观察心肌细胞ERS反应。结果与对照组相比,TM组心肌细胞蛋白质合成速度提高、心肌细胞表面积增加,ERS分子GRP78和CHOP mRNA表达增加,均有显著性差异(P0.01),内质网形态改变与TM组相比,AST+TM组心肌细胞蛋白质合成速度降低、心肌细胞表面积减小,GRP78和CHOP mRNA表达降低,均有显著性差异(P0.01),内质网形态恢复,与对照组类似。结论 ERS诱导剂TM诱导心肌细胞显著肥大,同时伴随ERS反应,黄芪总皂苷可以通过减弱ERS反应而抑制TM诱导的心肌细胞肥大。     

磷酸肌酸钠对慢病毒介导Calumenin蛋白沉默阿霉素损伤心肌细胞内质网应激信号通路的作用

目的:探讨磷酸肌酸钠对网腔钙结合蛋白(Calumenin)沉默阿霉素损伤心肌细胞内质网应激信号通路作用。方法:培养乳鼠心肌细胞,构建稳定的慢病毒——Calumenin质粒,转染乳鼠培养心肌细胞,实验分为4组:对照组(正常细胞+3mg/L阿霉素)、模型组(慢病毒感染细胞+3mg/L阿霉素)、磷酸肌酸钠1组(正常细胞+阿霉素+磷酸肌酸钠)、磷酸肌酸钠2组(转染细胞+阿霉素+磷酸肌酸钠)。采用Western blotting技术检测各组心肌细胞Calumenin蛋白、内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子PERK、PATF-4PERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达。结果:1与对照组比较,模型组及磷酸肌酸钠2组心肌细胞Calumenin蛋白表达明显减少(P0.01)。2与对照组相比,模型组内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子PPERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达明显增多(P0.01)。3与模型组相比较,磷酸肌酸钠1组及磷酸肌酸钠2组内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子P-PERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达减少(P0.01)。结论:阿霉素损伤可能诱发ERS,并通过ERS凋亡信号通路PERK→P-PERK→eIF2a→ATF-4→CHOP/IRE1→CHOP引起心肌细胞凋亡;磷酸肌酸钠可抑制阿霉素损伤所诱导内质网应激介导的心肌细胞凋亡,这一作用机制可能是通过Calumenin蛋白抑制ERS及其凋亡信号通路PERK→P-PERK→eIF2a→ATF-4→CHOP/IRE1→CHOP实现的。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激及促凋亡信号因子作用

目的:研究黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94及促凋亡信号分子JNK、p-JNK、Caspase 12表达的影响。方法:实验分3组,对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞+柯萨奇B3病毒)、黄芪总黄酮组(正常细胞+柯萨奇B3病毒+黄芪总黄酮)。采用免疫组织化学方法检测培养乳鼠心肌细胞α-SMA蛋白,采用Western blotting技术检测各组心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94、p-JNK、JNK及Caspase 12表达。结果:1与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞GRP78、GRP94表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞GRP78、GRP94表达减少(P0.01)。与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达减少(P0.01)。各组心肌细胞JNK表达无差异(P0.05)。结论:柯萨奇B3病毒可引发心肌细胞内质网应激,并使促凋亡信号分子p-JNK、Caspase 12表达增多,引发心肌细胞凋亡;黄芪总黄酮抑制柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激,并抑制心肌细胞凋亡,该实验结果可能是其对病毒性心肌炎的作用机制之一。     

泛素E3连接酶TRIM10在心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用及机制

目的:探讨泛素E3连接酶TRIM10在心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤中的作用及机制。方法:培养原代的SD大鼠乳鼠心肌细胞,siRNA-TRIM10与Ad-TRIM10转染细胞48 h,再加入缺血缓冲液复制心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型(缺氧30 min,复氧24 h)。转染siRNA-TRIM10敲低其表达的实验分为四组:siRNA-Scramble组(转染空白对照siRNA)、siRNA-TRIM10组(转染siRNA-TRIM10)、H/R+si-Scramble组(转染siRNA-Scramble 48 h,进行H/R处理)和H/R+siRNA-TRIM10组(转染siRNA-TRIM10 48 h,进行H/R处理);转染Ad-TRIM10使其高表达分组同上(Ad-GFP作为对照)。DHE染色观察细胞氧化应激情况;TUNEL染色观察细胞凋亡情况;Western blot检测TRIM10、BAX、p-P38/P38MAPK、p-JNK/JNK及p-ERK/ERK蛋白的表达水平。结果:与Control组相比,H/R组心肌细胞中ROS的产生增加了5.8%、凋亡的发生增加了7.9%、p-JNK和p-P38MAPK蛋白的表达分别增加了21.8%和47.1%(n=5,均P<0.05),siRNA-TRIM10敲低其表达,减轻H/R处理引起的以上改变;过表达Ad-TRIM10进一步加重H/R处理引起的上述改变,与H/R组相比,过表达TRIM10+H/R组细胞ROS的产生增加了12.3%、凋亡的发生增加了15.6%、p-JNK和p-P38MAPK蛋白的表达分别增加了26.8%和25.7%(n=5,均P<0.05)。结论:E3连接酶TRIM10加重心肌细胞缺氧/复氧损伤,其机制可能通过p-JNK/p-P38MAPK途径介导。     

低血糖对急性心肌梗死后内质网应激介导心肌细胞凋亡的作用和机制研究

目的通过体内大鼠模型观察低血糖水平对内质网应激(ERS)感受蛋白及凋亡信号分子表达的影响。方法将Wister大鼠40只中随机选20只结扎左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型;另20只为假手术,再随机分为正常血糖假手术组(SN组)、正常血糖AMI组(MN组)、低血糖假手术组(SL组)、低血糖AMI组(ML组),每组10只。建立术前低血糖模型,术后24h处死取材,评估大鼠心肌细胞凋亡程度、检测心肌组织中葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白结合蛋白(GRP78/BIP)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和C/EBP同源蛋白(CHOP)及Caspase-12的表达情况。结果 ML组及MN组心肌细胞凋亡指数[(29.36±2.15)%、(20.27±2.80)%]明显高于SN组和SL组[(1.82±0.83)%、(1.97±0.96)%,P<0.05];MN组和ML组GRP78、PERK、CHOP及Caspase-12的表达明显高于SN组和SL组(P<0.01);MN组与ML组PERK表达比较,无统计学差异(P>0.05)。结论 AMI前低血糖水平激活了ERS诱导的细胞凋亡通路;内质网特异性标记蛋白表达与心肌细胞凋亡变化规律一致,ERS通路可能参与了大鼠AMI后心肌细胞凋亡的调控。     

内源性sestrin2参与抑制心肌梗死后内质网应激所诱导细胞凋亡

目的 探讨sestrin2在心梗（MI）后内质网应激中的变化及作用。 方法 结扎大鼠前降支制作MI模型建立MI组,仅开胸建立Sham组;应用衣霉素刺激新生大鼠心肌细胞建立细胞内质网应激模型（衣霉素组）应用磷酸盐缓冲溶液（PBS）为对照组。原位切口末端标记法（TUNEL）评估组织水平细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率。蛋白免疫印迹法检测葡萄糖调节蛋白（GRP）78、CCAAT-增强子结合蛋白（CHOP）、sestrin2表达水平。 结果 与Sham组相比,MI大鼠心脏组织中内质网应激激活,GRP 78及CHOP表达水平增加（均P < 0.01）,心肌细胞凋亡增加（P < 0.01）,伴随内源性sestrin2蛋白表达水平上调（P < 0.01）。与对照组相比,衣霉素刺激新生大鼠心肌细胞激活内质网应激,GRP 78及CHOP蛋白表达水平增加（P < 0.01,P < 0.05）,心肌细胞凋亡表型增加（P < 0.01）。在此基础上,转染sestrin2-siRNA抑制心肌细胞sestrin2表达后,CHOP蛋白表达上调（P < 0.05）,心肌细胞凋亡增加（P < 0.05）。 结论 内源性sestrin2参与抑制心肌缺血后内质网应激诱导心肌细胞凋亡。     

PDE5抑制剂对异丙肾上腺素诱导乳鼠心肌细胞肥大的作用

目的 探讨磷酸二酯酶5（PDE5）抑制剂对异丙肾上腺素（Iso）所致的乳鼠心肌细胞肥大的保护作用。 方法 分离大鼠乳鼠心肌细胞,分为对照（Con）组,Iso组及异丙肾上腺素+西地那非（Iso+Sil）组,通过检测各组细胞活力及乳酸脱氢酶（LDH）含量,确定Sil的后续实验浓度,通过RT-PCR检测心肌肥大指标心房钠尿肽(ANP)和β-肌球蛋白重链(β-MHC) mRNA含量、流式细胞计数检测凋亡情况及Western blot检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）水平。 结果 与Con组相比,Iso组细胞活力降低（P<0.01）,LDH的释放增加（P<0.05）。与Iso组相比,一定浓度Sil预处理可以提高细胞活力及减少LDH的释放（P<0.05）,在5 μmol/L Sil预处理时达到最大效应。与Con组相比,Iso组增加ANP和β-MHC mRNA的表达、上调凋亡比率以及增加GRP78和CHOP的蛋白水平。与Iso组相比,Sil预处理可以降低ANP和β-MHC mRNA的表达,下调凋亡比率以及抑制GRP78和CHOP的蛋白表达。 结论 PDE5抑制剂Sil可以有效抑制Iso诱导的乳鼠心肌细胞肥大,其机制可能与凋亡和内质网应激的下调有关。     

脂联素依赖p38-MAPK途径抑制衣霉素诱导的内质网应激致心肌细胞凋亡

目的通过原代培养SD大鼠的乳鼠心肌细胞建立衣霉素心肌细胞内质网应激损伤模型,观察脂联素对心肌细胞内质网应激致细胞凋亡的作用及其机制。方法采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对培养的心肌细胞进行鉴定。选用原代培养3～4天的心肌细胞,随机分为五组:对照组、1 mg/L衣霉素组、1 mg/L衣霉素+100 mg/L脂联素组、1 mg/L衣霉素+3μmol/LSB203580组及1 mg/L衣霉素+3μmol/L SB203580+100 mg/L脂联素组。实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化,通过流式细胞术检测心肌细胞凋亡,用qRT-PCR及免疫荧光法检测内质网应激指标GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,给予衣霉素后,细胞凋亡率显著增加,GRP78和CHOP的mR-NA及蛋白表达增加。脂联素预处理后给予衣霉素,可较大程度地逆转上述指标变化,细胞凋亡率显著下降,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达减少;而加用p38-MAPK抑制剂SB203580后脂联素的保护作用明显减弱,凋亡率显著增加,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达增高,但较单纯衣霉素处理组凋亡率低,GRP78和CHOP的mRNA及蛋白表达也减少。结论衣霉素可使GRP78和CHOP表达增强,启动内质网应激,导致心肌细胞凋亡,脂联素可以通过减轻内质网应激逆转衣霉素所致的心肌细胞凋亡作用,对心肌细胞有保护作用,且这种保护作用部分是通过p38-MAPK途径实现的。     

JNK通路在内质网应激预处理诱导脑缺血耐受中的作用

目的 探讨JNK通路在内质网应激预处理诱导海马CAI区神经元缺血耐受中的作用及其机制。方法将144只SD大鼠随机分为假手术（SH）组、缺血／再灌注（I／R）组、内质网应激预处理（IP））组、IP＋IR组、Curcu-min＋I／R（CU）组、Curcumin＋IP＋I／R（CP）组、Anisomyein＋IR（AN）组、Anisomycin＋IP＋VR（AP）组及溶剂对照＋I／R（VE）组。采用TUNEL法检测海马CA1区凋亡细胞,免疫组化法和Western-Blot法检测GRP78、p-JNK及c—Jun蛋白在海马CA1区的表达。结果SH组GRP78蛋白表达微弱,与其相比,I／R、CU、AN及VE组表达升高（P〈0．05）,IP、IP＋IR、cP、AP组表达明显升高（P〈0．01）;与IP组比较,IP＋IR、CP、AP组GRP78蛋白表达升高（P〈0．05）;与I／R组比较,IP＋I／R、cu及cP组海马CA1区凋亡锥体细胞数和p-JNK及c-Jun蛋白表达水平均降低（P均〈0．01）,降低程度为CP组〉IP组〉cu组,AN组CA1区凋亡锥体细胞数和p-JNK、c-jun蛋白表达水平升高（P均〈0．01）;Anisomycin可部分抵消内质网应激预处理的保护效应。结论JNK通路参与大鼠海马CA1区神经元缺血性凋亡,内质网应激预处理可通过抑制CA1区JNK磷酸化、减少c-Jun蛋白表达而保护海马细胞,内质网应激预处理与抑制JNK通路激活对脑缺血耐受有相似的保护作用。     

脂联素通过APPL1减轻缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞凋亡

目的:探讨APPL1在脂联素（adiponectin,ANP）拮抗SD乳鼠心肌细胞（neonatal cardiomyocytes）缺氧/复氧（H/R）损伤中的作用。方法: 分离SD乳鼠心肌细胞并培养。通过对培养的心肌细胞H/R损伤模拟缺血/再灌注（simulated ischemia reperfusion,SI/R）后,随机分为对照组、H/R组、H/R+APN组及H/R+APN+APPL1 RNAi组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的生存率,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡,Western blot检测APPL1蛋白的表达。结果: 与对照组相比,H/R组吸光度值明显降低（P<0.01）,凋亡指数(AI)显著上升（P<0.01）。与对照组和H/R组相比,H/R+APN组中APPL1的表达明显上升（P<0.05）。以RNAi抑制APPL1表达后,与H/R+APN组相比,H/R+APN+APPL1 RNAi组凋亡指数率(%)明显上升 ［(28.32±4.13)% vs.(9.78±2.16)%,P<0.01］。结论: APN可显著抑制H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡,促进心肌细胞存活,其拮抗作用与上调APPL1蛋白的表达相关。     

4,4′-二异硫氰基芪-2,2′-二磺酸对内质网应激诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨氯离子通道阻滞剂4,4′二异硫氰基芪2,2′-二磺酸(DIDS)对衣霉素诱导心肌细胞损伤以及内质网应激标记性分子糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白样同源蛋白(CHOP)的影响。方法取乳鼠心肌细胞培养后,应用衣霉素构建心肌细胞内质网应激模型,随机分为对照组、衣霉素组、衣霉素+DIDS组、DIDS组。应用100ng/ml衣霉素处理24、48、72、96 h;另用DIDS 25、50、75和100μmol/L处理72 h,噻唑蓝法检测心肌细胞存活率,Western blot法检测GRP 78和CHOP蛋白表达水平。结果与对照组比较,衣霉素组48、72和96 h心肌细胞存活率明显降低(P<0.05);与衣霉素组比较,DIDS 50、75和100μmol/L处理明显增加心肌细胞存活率(P<0.05)。与对照组比较,衣霉素组GRP78和CHOP蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与衣霉素组比较,衣霉素+DIDS组GRP78和CHOP表达水平明显下调(P<0.05)。结论 DIDS可以抑制衣霉素诱导的大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与拮抗GRP78和CHOP的表达,减轻内质网应激有关。     

The role of endoplasmic reticulum stress in angiotensinⅡinduced apoptosis in cultured neonatal rat cardiomyocytes

Background AngiotensinⅡ(AngⅡ) plays a critical role in the pathophysiology of cardiovascular diseases. Recently,studies have shown that Endoplasmic Reticulum (ER) stress was activated in failure hearts.This study was designed to examine whether ER stress participates in the pathologic process of AngⅡ-induced cardiomyocytes apoptosis. Methods Neonatal rat cardiomyocytes were incubated with concentrations of AngⅡ(0,1,10,100 nmol/L) for 24 hours.Confocal fluorescence microscopy with double staining of TUNEL and CHOP detected the percentage of apoptotic cells.Levels of GRP78,JNK,p-JNK,CHOP and caspase-12 were analyzed by western blot.Telmisartan(10- ~6mol/L) was used to test the effects of ATI receptor on AngⅡ- induced cell apoptosis,ER stress chaperones and signaling molecules.Results Treatment with AngⅡat 1,10, and 100 nmol/L for 24 hours stimulated GRP78,JNK,p-JNK and CHOP protein production,and increased apoptosis of myocytes.The protein expression and the number of apoptotic cells were depedent on AngⅡconcentration.About 60%of apoptotic cells were CHOP positive at 10 and 100nmol/L AngⅡtreatment,while no CHOP positive apoptotic cells were found at myocytes under physiological condition and 1 nmo/L AngⅡtreatment.Telmisartan decreased signaling molecules expression and abolished ER stress-mediated apoptosis induced by 100 nmol/L AngⅡ.Conclusions These results indicate that ER stress may be involved in the mechanisms of AngⅡ-induced cardiomyocytes apoptosis.JNK, caspase12 and CHOP all participate in the pathologic process.     

尾加压素Ⅱ在高糖诱导心肌细胞氧化应激、内质网应激中的作用及机制研究

目的:研究高糖刺激对心肌细胞中尾加压素Ⅱ及其受体表达的影响,并观察高糖刺激下尾加压素Ⅱ对心肌细胞氧化应激/内质网应激通路及其相关信号通路的影响.方法:本实验将原代培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞培养36 h后,随机分为低糖组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖)、高渗组(5 mmol/L葡萄糖...     

Factors associated with leisure-time physical activity among patients undergoing hemodialysis

Intermedin (IMD) is a novel member of the calcitonin/calcitonin gene-related peptide family. Endoplasmic reticulum stress (ERS) has been implicated in the pathology of renal ischemia/reperfusion (IRI). In the present study, we investigated whether IMD could reduce ERS damage after renal ischemia. The kidneys of SD rats were subjected to 45 min of warm ischemia followed by 24 h of reperfusion. The hypoxia/reoxygenation(H/R) model in NRK-52E cells consisted of hypoxia for 1 h and reoxygenation for 2 h. IMD was over-expressed in vivo and in vitro using the vector pcDNA3.1-IMD. The serum creatinine concentration and lactate dehydrogenase (LDH) activity in the plasma were determined. Histologic examinations of renal tissues were performed with PAS staining. Real-time PCR and Western blotting were used to determine the mRNA and protein levels, respectively. Additionally, ER staining was used to detect the ERS response. In the rat renal IRI model, we found that IMD gene transfer markedly improved renal function and pathology and decreased LDH activity and cell apoptosis compared with the kidneys that were transfected with the control plasmid. IMD significantly attenuated the ERS stress parameters compared with IRI group. Indeed, IMD down-regulated glucose-regulated protein 78 (GRP78), C/EBP homologous protein(CHOP), and caspase 12 protein and mRNA levels. Moreover, in the NRK-52E cell H/R model, IMD overexpression prevented the apoptosis induced by H/R. Furthermore, IMD ameliorated the ER structural changes and concomitantly decreased the levels of GRP78, CHOP and caspase-12. This study revealed that IMD protects against renal IRI by suppressing ERS and ERS-related apoptosis.     

高血压大鼠心肌内质网应激时GRP78和CHOP的表达及其与心肌细胞凋亡的关系

目的:探讨心肌组织内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)在高血压大鼠心肌中的表达及其与心肌细胞凋亡的关系。方法:将48只SD大鼠随机等分为两个组,一组采用腹主动脉缩窄术(TAC)建立高血压模型,称为TAC组;另一组只进行相应的假手术,称为Sham组。按术后饲养时间(3 d、7 d、14 d和28 d)的不同,TAC组又分为4个组,即TAC3d组、TAC7d组、TAC14d组和TAC28d组,每组6只(n=6);Sham组也又分为4个组,即Sham3d组、Sham7d组、Sham14d组和Sham28d组,每组6例(n=6)。用颈动脉插管法测定各组大鼠的平均动脉压(MAP);用Western blot法检测GRP78蛋白和CHOP蛋白表达的水平;用TUNNEL法检测心肌细胞的凋亡。结果:①TAC3d组、TAC7d组、TAC14d组和TAC28d组的MAP均显著高于相应的各Sham组(P0.05),且TAC各组的MAP随着术后时间的延长,血压值呈逐渐递增的趋势。②GRP78蛋白在TAC术后3 d即发现表达(0.20±0.02),明显高于Sham3d组(0.10±0.02)(P0.05);但明显低于其他各TAC组(P0.05)。随着术后时间的延长,TAC7d组GRP78蛋白的表达达到最高(0.94±0.03),其后各组呈递减趋势;但TAC7d组、TAC14d组和TAC28d组GRP78蛋白表达的水平均明显高于相应的各Sham组(P0.05)。③随着TAC术后时间的延长,心肌组织中CHOP蛋白的表达呈递増趋势;TAC7d组、TAC14d组和TAC28d组CHOP蛋白表达的水平,分别为(0.17±0.01)、(0.36±0.03)和(0.61±0.02),均明显高于相应的各Sham组(P0.05)。TAC3d组CHOP蛋白的表达与Sham3d组比较,无明显差异。④Sham3d组和TAC3d组中仅有极少数凋亡细胞;Sham7d组和TAC7d组可见较多的凋亡细胞,且随着时间的延长细胞凋亡率逐渐增加,TAC28d组的凋亡率达最高(30.23±0.17)%;TAC7d组、TAC14d组和TAC28d组细胞凋亡率显著高于相应的各Sham组(P0.05)。⑤相关性分析显示,从TAC7d组、14d组及28d组的MAP与心肌组织中GRP78蛋白的表达呈显著的负相关(r=-0.882,P0.01),与CHOP蛋白的表达呈显著正相关(r=0.933,P0.01);CHOP蛋白的表达与GRP78蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.980,P0.01),与心肌细胞的凋亡率呈显著的正相关(r=0.997,P0.01)。结论:高血压诱导心肌组织内质网应激反应在血压升高早期以GRP78的表达占优势,随着血压持续性升高可导致CHOP在心肌中超表达,参与心肌细胞凋亡的病理过程,并使心肌内质网应激稳态调节发生失衡。     

高血压大鼠血管平滑肌细胞GRP78和caspase-12表达的变化及依那普利的干预作用

目的:观察高血压大鼠动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）内质网应激（ERS）相关因子葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和半胱氨酸门冬氨酸特异性蛋白酶12（caspase-12）表达的变化,并探讨高血压时VSMCs中ERS的分子机制,以及依那普利（enalapril,Ena）对血管重构的影响。方法: 将40只健康雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术（sham）组、sham+Ena组,腹主动脉缩窄术（AAB）组及AAB＋Ena组,每组10只。4周后,通过颈动脉插管法测定大鼠血压和利用图像分析系统测量大鼠主动脉中层的厚度,并通过免疫组化染色法检测GRP78和caspase-12的表达。结果: ①AAB组大鼠的平均动脉压（MAP）显著高于sham组、sham+Ena组和AAB＋Ena组（P<0.05）。②AAB组大鼠血管平滑肌中层厚度显著大于sham组、sham+Ena组和AAB＋Ena组（P<0.05）。③AAB组大鼠GRP78和caspase-12的表达量明显高于sham组、sham+Ena组和AAB＋Ena组大鼠。结论: AAB所致的高血压可触发动脉血管平滑肌细胞过长过强的ERS 。Ena可能通过下调ERS的水平,逆转高血压所致VSMCs损伤的作用,对VSMCs具有保护作用。其作用机制可能与其降低caspase-12介导的ERS反应有关