单香菇多糖注射液对妊娠滋养细胞肿瘤化疗疗效和免疫功能的影响

目的 研究单香菇多糖注射液与化疗合用对妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)的疗效和免疫指标的影响.方法 随机将36例GTN分成两组,分别为化疗组(A)和化疗+单香菇多糖组(B)各18例,观察化疗疗效,毒副反应和外周血T4/T8细胞比值和NK细胞活性的变化.结果 两组临床特征,化疗疗效和T4/T8比值差异无显著性(P＞0.05),但B组治疗后NK细胞活性增高显著高于A组(P＜0.01),未观察到严重的毒副作用.结论 单香菇多糖注射液静脉注射1 mg,2次/周,可提高化疗期间GTN的NK细胞活性,无严重毒副作用,其可作为GTN的生物反应调节剂,安全应用于临床治疗.     

肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞对大鼠卵巢上皮癌免疫治疗的体内研究

目的：研究树突状细胞（dendritic cells,DC）与肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞（tumor-associated antigen／dendritic cells,TAA／DC）对荷瘤大鼠的免疫治疗效果。方法：建立大鼠卵巢癌皮下移植瘤模型;于成瘤后2周分别用PBS、DC或TAA／DC进行免疫治疗,比较治疗效果。结果：TAA／DC抑制肿瘤细胞的增殖与转移,对荷瘤大鼠治疗后8周,局部肿瘤无明显增长,P=0．355,无转移灶出现;TAA／DC可明显改善大鼠免疫状况,对荷瘤大鼠治疗后3周,使已经下降的CD8^＋ T细胞百分比又明显上升,P=0．000;TAA／DC对荷瘤大鼠单次免疫治疗的效果具有时限性,在对荷瘤大鼠治疗后8周,CD8^＋ T细胞百分比再次出现明显下降,P=0．000。结论：TAA／DC可改善荷瘤大鼠的细胞免疫状态,抑制肿瘤细胞的增殖与转移。     

HIFU治疗后肿瘤抗原对树突状细胞的活化及其抗肿瘤效应

目的：探讨HIFU治疗小鼠H22抑制性肝癌后产生的肿瘤抗原对机体抗肿瘤免疫功能增强的机制。方法：正常小鼠骨髓中提取骨髓细胞,在rmIL-4、rmGM-CSF奈件下培养7d,制备小鼠骨髓树突状细胞,用HIFU治疗小鼠移植性肝癌后产生的肿瘤抗原活化树突状细胞,再用活化后的树突状细胞激活T淋巴细胞为细胞毒性T细胞,用MTT法检测CTL在体外特异性杀伤肿瘤靶细胞的能力。结果：B16肿瘤HSP70-肽复合物组和H22肿瘤HSP70-肽复合物组的脾淋巴细胞的增殖率均高于阴性对照组、H22肿瘤粗提物组和HIFU后H22肿瘤粗提物组,P〈0．001;但两组之间差异无统计学意义,P〉0．05。H22肿瘤HSP70-肽复合物组CTL对H22肿瘤细胞的杀伤率为70．0％,明显高于阴性对照组、H22肿瘤粗提物组和HIFU后H22肿瘤粗提物组（P〈0．001）,但对非靶细胞B16肿瘤的杀伤率与上述各组的差异无统计学意义;B16肿瘤HSP70-肽复合物组CTL对B16肿瘤细胞的杀伤率为78．5％,对H22细胞的杀伤率为21．4％,表明CTL对肿瘤细胞的杀伤作用具有特异性。结论：HIFU治疗后坏死肿瘤组织中的HSP70-肽复合物作为肿瘤疫苗,通过活化DC和刺激T淋巴细胞增殖为CTL,发挥特异性抗肿瘤免疫功能。     

树突状细胞对免疫活性细胞抑癌效应的非限制性增强作用

目的研究抗原负载的树突状细胞(dendritic cell,DC)对免疫活性细胞抑癌的增强作用。方法在建立PC体外扩增的基础上,将抗原负载的DC作用于单个核细胞及高聚金葡素活化的单个核细胞,观察其对人肺癌GLC-82和A549细胞的体外和裸鼠体内抑癌效应。结果抗原负载的DC能显著增强单个核细胞及高聚金葡素活化的单个核细胞对GLC-82和A549细胞的抑制作用。当效靶化为10∶1时,抗原负载的DC-单个核细胞对GIC-82及A549细胞抑制率分别为100%和94.2%;而对照组分别为16%和8%。该作用不受主要组织相容性复合物基因(major histocompatibility com-plex,MHC)限制。结论抗原负载的DC对免疫活性细胞的抑癌作用有MHC非限制性增强效果。     

树突状细胞瘤苗的制备与临床应用进展

树突状细胞瘤苗可诱导荷瘤动物的保护性抗肿瘤免疫应答反应 ,这一发现使肿瘤治疗领域倍受鼓舞。就肿瘤免疫治疗中树突状细胞瘤苗的基础研究与临床应用进展予以综述。     

Bcap37完全细胞抗原冲击树突状细胞诱导特异性抗乳腺癌免疫实验研究

目的　研究 Bcap37完全细胞抗原冲击树突状细胞 (DC)能否诱导特异性抗肿瘤免疫 ,探索乳腺癌的免疫治疗方法。方法　从人外周血分离单核细胞 ,用 GM- CSF和 IL - 4诱导出 DC,反复冻融制备 Bcap37完全细胞抗原 ,将此抗原冲击的 DC与 T细胞共培养 ,以 7天后分离的 T细胞为效应细胞 ,与肿瘤细胞混合培养 ,MTT法测定对肿瘤细胞的抑制作用。结果　单核细胞经细胞因子诱导 8天 ,形态、表型及功能鉴定为成熟 DC;完全细胞抗原冲击 DC诱导的 T细胞对肿瘤细胞具有明显的抑制作用。结论　 Bcap37完全细胞抗原冲击 DC可有效诱导特异性抗肿瘤免疫     

荷CEA-rV的DC诱导的CIK对CEA阳性原代肿瘤细胞的特异杀伤作用

目的：探讨携带CEA重组基因痘苗病毒（CEA-rV）抗原的树突状细胞（DC）诱导的杀伤细胞（CIK）对CEA阳性原代肿瘤细胞的特异性杀伤作用。方法：用脐血制备脐血单个核细胞（UBMC）、DC、CIK、DC＋CIK、CEArV＋DC＋CIK和CEA-rV＋DC＋UNBC细胞。取新鲜切除的食管癌组织和肺癌组织，制备原代培养的CEA阳性肿瘤细胞作为靶细胞。用MTT法测5组效应细胞对两种靶细胞的杀伤活性。结果：1）用CEA兔抗人单克隆抗体鉴定证实两种原代培养靶细胞系CEA阳性细胞。2）流式细胞仪测定DC的分子表型，证实为DC。3）流式细胞仪测定CIK的CD3^＋CD56^＋双阳性细胞达75．4％。4）DC＋CIK和CIK相比，对两种CEA阳性肿瘤细胞的杀伤率差异无统计学意义，P〉0．05。5）CE-rV4-DC＋CIK对两种CEA阳性肿瘤细胞的杀伤率（78．80％）明显高于DC＋CIK（52．94％），P％0．05。结论：CEA—rV＋DC能明显提高CIK细胞对原代培养的CEA阳性肿瘤细胞的杀伤活性，而单纯DC不能提高CIK的杀伤活性，说明CEA—rV在提高CIK对CEA阳性肿瘤细胞的特异杀伤作用中起重要作用。     

奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株（Eca-109）抑制作用机制的研究

目的研究奈达铂（NDP）联合顺铂（DDP）对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50（NDP）＋1/2IC50（DDP）对Eca-109细胞的抑制率分别为（41.9±4.1）%、（47.4±2.9）%和（52.5±0.9）%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因（蛋白）表达显著降低,而Bax基因（蛋白）表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。     

AFP与HBsAg混合多肽负载树突状细胞治疗HBV阳性肝癌的研究

目的：以AFP和HBsAg为双靶标,以树突状细胞（DCs）为抗原载体与佐剂,探讨其激发特异性（CTL）反应的能力及其在HBV阳性肝癌（HCC）患者应用的可行性。方法：采集20例HLA—A201＋HBV＋AFP＋HCC患者外周血,分离单核细胞（Mo）和外周淋巴细胞（PBLs）,将Mo诱导为成熟DCs（mDC）;人工合成AFP和HBsAg多肽,负载mDC后体外致敏,检测其体外杀伤活性;同时于患者皮内注射负载AFP和HBsAg混合多肽的DCs,监测接种前后患者外周血中细胞因子和特异性CTL水平变化,并进行DTH试验,治疗后跟踪检测患者AFP水平和乙肝两对半水平的变化。结果l患者外周PBLs经DCs致敏后,对负载AFP和HBsAg多肽的T2靶细胞杀伤率明显增高,P〈0．05。接种负载AFP和HBsAg多肽的DCs后,血清中IL-2、IL-12、IFN-γ水平较治疗前显著升高,P〈0．05,TNF-a和IL-10水平较治疗前均差异不大,P〉0．05;DTH试验阳性率为41．7％（5／12）,患者外周血中特异性CTLs比例明显上升的有4例（4／12）。治疗后有4例患者AFP水平下降,9例HBeAg阳性的患者中有3例HBeAg下降,2例患者出现血清学应答。结论：负载AFP和HBsAg多肽的Dcs体内、体外均具有激发特异性cTLs反应能力,可诱导Thl型细胞因子的分泌,有望成为一种HCC治疗的新方法。     

DC-CIK联合化疗治疗晚期胃癌的近期疗效

目的 观察树突状细胞(dendritic cell,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cell,CIK)联合化疗治疗晚期胃癌的近期疗效.方法 分析68例经病理学确诊为晚期胃癌患者的临床资料,其中观察组34例,采用自体DC-CIK联合XELOX方案(卡培他滨+奥沙利铂)化疗;对照组34例,单独采用XELOX方案化疗,疗程为2周期.治疗结束后对两组的近期疗效、不良反应、免疫功能进行评价.结果 观察组客观缓解率为52.9％,对照组为41.2％,差异无统计学意义(P＞0.05);观察组疾病控制率为79.4％,高于对照组(52.9％),差异有统计学意义(P＜0.05).观察组骨髓抑制、胃肠反应、神经毒性、手足综合征不良反应发生率均低于对照组(均P＜0.05).观察组T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)升高,CD4+/CD8+比值上升,与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).对照组CD3+、NK治疗后较治疗前明显下降,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 DC-CIK联合XELOX方案治疗晚期胃癌可以提高近期疗效,增强患者免疫功能,减轻化疗不良反应,值得临床推广.     

高剂量表阿霉素治疗进展期和晚期乳腺癌

目的评价高剂量表阿霉素（ＨＤ－ＥＰＩ）合并环磷酰胺（ＣＴＸ）、氟脲嘧啶（５－Ｆｕ）治疗进展期和晚期乳腺癌的安全性和有效性。方法对３２例可评价的Ⅲ、Ⅳ期乳腺癌患者静脉给予ＣＴＸ６００ｍｇ／ｍ２、ＥＰＩ９０ｍｇ／ｍ２～１１０ｍｇ／ｍ２、５－Ｆｕ９００ｍｇ／ｍ２,每２１天重复。并与３０例非同期低剂量组比较（ＥＰＩ为５０ｍｇ／ｍ２）。结果高剂量组的总有效率为７１．９％,完全缓解率为１２．５％,明显高于低剂量组（５６．７％和６．７％）;初治的有效率（８０．０％）略高于复治者（６８．２％）。全组中位缓解期７．４个月,中位生存期１２．５个月。白细胞减少为主要的毒副反应,发生率为８９．５％（６８／７６）,Ⅲ、Ⅳ度分别为２７．６％和１８．４％;胃肠道毒性为轻、中度,未见明显的心肝肾毒性。结论ＨＤ－ＥＰＩ＋ＣＴＸ＋５－Ｆｕ方案治疗晚期乳腺癌安全有效,可在临床进一步试用