淋巴细胞增生反应、IL2产生和IL2受体表达三者相关性的初步研究

<正> 检测T淋巴细胞功能最常用的方法是有丝分裂原刺激细胞DNA合成的细胞增殖试验。近年来已开始研究细胞合成分泌白细胞介素 2(IL 2)和细胞膜表达IL 2受体的功能。细胞产生 IL 2、表达IL 2受体以及DNA合成三者之间的关系如何?引起了注意。作者从以下四个方面:①不同剂量刀豆蛋白A(Con A)刺激小鼠脾细胞;②Con A刺激胸腺细胞;③中药冬虫夏草刺激小鼠脾细胞;以及④中药雷公藤对 Con A诱生脾细胞免疫反应的抑制作用,初步探讨三种反应之间的关系。     

原花青素A-1调节ConA刺激小鼠脾细胞分泌Th1/Th2细胞因子的影响

目的研究从碎米花杜鹃叶中分离得到的化合物原花青素A-1(proanthocyanidin A-1,简称PAA-1)对Con A刺激的小鼠脾细胞细胞因子分泌水平的调节作用,确定其免疫增强的作用机制。方法采用双抗夹心ELISA法,通过不同浓度PAA-1协同Con A体外刺激,检测其对小鼠脾细胞分泌的各种细胞因子分泌量的影响。结果 1)PAA-1各浓度在体外能增加Con A刺激的脾细胞分泌的辅助性T细胞亚群(Th1)细胞因子(IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α)的分泌量;2)PAA-1对Con A刺激的脾细胞分泌的抑制Th2细胞因子(IL-4、IL-10)的分泌量起抑制作用。结论 PAA-1是通过增加Con A刺激的小鼠脾细胞Th1细胞因子的分泌量,来发挥免疫增强作用,并使Th1/Th2的平衡向Th1方向移动,这对许多的Th2占优势的免疫紊乱性疾病的治疗具有重要的意义,为其开发为新型免疫增强剂提供试验依据。     

TMB-8对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响

目的: 研究胞内钙离子释放阻断剂8- (N,N-二乙胺) 辛基-3,4,5-三甲氧基苯甲酸酯（TMB-8）对刀豆蛋白A（Con A）介导的小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响。方法: 以Con A作为T细胞活化、增殖的刺激剂，以不同浓度的TMB-8及与环孢菌素A（CsA）联合作用于该系统，用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子的表达；以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）染色流式细胞术，分析TMB-8在Con A刺激下小鼠淋巴细胞的增殖相关指数（PI）；以碘化丙啶染色分析细胞周期的分布情况。结果: Con A作用6 h后，CD69+ T细胞的比率为（74.88±1.88）%，TMB-8在终浓度10、20、40 μmol/L下均抑制Con A介导的T细胞CD69表达（P<0.01），其中，40 μmol/L的TMB-8为（52.55±1.54）%, 达到最高抑制率。培养48 h和72 h，Con A刺激下的PI值分别为1.24±0.01和2.05±0.07，TMB-8从5 μmol/L起均抑制Con A介导的淋巴细胞增殖（P<0.01），以40 μmol/L的效果最为显著，PI值分别为1.01±0.01和1.10±0.01；10 μmol/L的TMB-8与25 μg/L的环孢菌素A（CsA）具有明显的协同抑制作用（P<0.01）。细胞周期分析显示，培养48 h的TMB-8从10 μmol/L起即显著抑制S期（P<0.01）。结论: TMB-8可明显抑制Con A介导下的T细胞早期活化及增殖，并具T细胞周期的S期阻滞作用。     

HBV转基因小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞免疫抑制功能的研究

目的通过对HBV转基因小鼠CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量和免疫抑制功能的研究,探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙肝免疫耐受中的作用。方法用流式细胞术对12只HBV转基因小鼠和12只正常小鼠外周血CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞的频率进行检测;磁珠分选小鼠脾CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞,分为HBsAg刺激组和ConA刺激组体外单独和共培养,ELISA方法检测诱生的细胞因子IL-2。结果与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠外周血CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量差异无统计学意义（P〉0.05）。HBsAg刺激组,CD4＋CD25-T细胞单独或共培养,HBV转基因小鼠CD4＋CD25-T细胞诱生IL-2水平显著低于正常小鼠（P〈0.01）;ConA刺激组,HBV转基因小鼠CD4＋CD25-T细胞诱生IL-2水平与正常小鼠相比则差异无统计学意义（P〉0.05）;两组小鼠CD4＋CD25-T细胞单独培养时诱生IL-2水平均显著高于共培养（P〈0.01）。结论与正常小鼠比较,HBV转基因小鼠CD4＋、CD4＋CD25＋调节性T细胞数量和免疫抑制功能差异无统计学意义,但T细胞水平对乙肝病毒存在特异性免疫耐受。CD4＋CD25＋调节性T细胞可抑制CD4＋、CD8＋T细胞。     

银杏内酯B对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖与凋亡的影响

目的银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本文研究GB对小鼠T淋巴细胞活化、增殖及凋亡3大体外行为的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法分离小鼠淋巴细胞,培养前以不同浓度的GB预孵;以刀豆蛋白A(Con A)诱导细胞的活化与增殖,以荧光抗体双色标记(anti-CD3 mAb-PE/anti-CD69 mAb-FITC、anti-CD3 mAb-PE/anti-CD25 mAb-FITC)结合流式细胞术分别检测T淋巴细胞早、中期活化标志--表面抗原CD69与CD25的表达,以活体荧光染料CFDA-SE标记结合流式细胞术检测细胞增殖并用MTT法佐证;以地塞米松(Dex)诱导细胞的凋亡,以荧光染料双色标记[DiOC6(3)/PI]结合流式细胞术区别凋亡、死亡与活细胞群。结果 Con A刺激后6 h和24 h,T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分别大量表达,Con A刺激后48 h活化的T细胞增殖至第4代,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在Con A刺激前对细胞进行4 h预孵处理可以显著下调T细胞表面抗原CD69、CD25的表达并能有效抑制细胞增殖。Dex诱导后12 h细胞凋亡和死亡群显著增大,而经同样的GB预孵处理可以在一定程度上抑制细胞的凋亡进程,对细胞凋亡显示出一定的保护作用。结论 GB能有效抑制小鼠T淋巴细胞的活化与增殖,并且对细胞凋亡起到一定的保护作用,凭借GB对T细胞此3大行为出色的调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。     

亚急性衰老小鼠脾脏T细胞CD137表达的研究

目的：探讨CD137分子在衰老小鼠脾脏T细胞表面表达的规律。方法：通过注射D－半乳糖建立亚急性衰老小鼠模型。分离衰老模型组小鼠及正常对照组小鼠的脾脏T细胞，经Con A刺激后进行培养，采用流式细胞术检查Con A刺激后不同培养时间的T细胞上CD137的表达，并进行比较。结果：小鼠脾脏T细胞经过Con A刺激后，正常对照组小鼠T细胞上CD137分子的表达高峰出现于刺激后第6天，平均表达率为48．5％，之后迅速下降。1个月和2个月衰老模型组小鼠T细胞上CD137分子在表达高峰的表达率平均分别为39．1％和32．8％，均显著低于正常对照组小鼠（P＜0．01），其中1个月模型组小鼠T细胞上CD137分子表达高峰的出现时间及下降规律与正常对照组小鼠相同；而2个月衰老模型组小鼠T细胞上CD137分子的表达高峰出现于刺激后第4天，第9天缓慢下降至与正常对照组相同时间的水平。结论：亚急性衰老小鼠T细胞上CD137分子的表达低于正常水平。至衰老过程的后期，T细胞上CD137分子的表达高峰提前出现，表达水平达到峰值后下降速度较正常小鼠缓慢，提示CD137分子在机体抗衰老过程中，具有调节T细胞功能的作用。     

过表达IL-17RLM的人脐带间充质干细胞对TNBS诱导的结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节作用

目的:研究过表达白细胞介素17受体样分子的人脐带间充质干细胞(IL-17RLM-hUCMSCs)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节作用,为炎症性肠病的干细胞治疗提供优化的种子细胞。方法:体外分离培养hUCMSCs,利用慢病毒载体向干细胞内转入IL-17RLM基因,构建IL-17RLM-hUCMSCs。采用TNBS诱导小鼠实验性结肠炎模型,无菌取炎症小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液,在刀豆蛋白A(Con A)刺激下将淋巴细胞分别与不同浓度的IL-17RLM-hUCMSCs及hUCMSCs共培养,72 h后以淋巴细胞+Con A为阳性对照,CCK8法及CFSE标记法检测淋巴细胞的增殖情况;同时用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、Th17及Treg)比例的改变。结果:hUCMSCs及IL-17RLM-hUCMSCs均对ConA刺激下的淋巴细胞增殖有抑制作用(P0.05);当MSCs/淋巴细胞为1∶1~1∶10时,MSCs对淋巴细胞增殖的抑制作用呈现浓度依赖性。在有效浓度范围内,IL-17RLM-hUCMSCs较h UCMSCs抑制作用更强(P0.05)。hUCMSCs及IL-17RLM-h UCMSCs均能够下调结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞的Th1和Th17细胞亚群比例,上调Treg细胞亚群比例,但IL-17RLM-h UCMSCs对Th17细胞亚群的抑制作用更显著(P0.05)。结论:IL-17RLM-hUCMSCs呈浓度依赖性地抑制TNBS诱导的结肠炎小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且该作用优于h UCMSCs。同时,IL-17RLM-hUCMSCs可调节T细胞亚群的免疫平衡,且抑制Th17细胞亚群作用强于hUCMSCs。     

S-O_2-1菌苗诱生干扰素的研究 Ⅱ小鼠脾脏细胞体外诱生

本文表明S-O_2-1菌苗具有较强的诱导小鼠脾细胞产生干扰素的能力。将事先用菌苗免疫的C57BL/6小鼠脾细胞体外培养时,即使不加菌苗也能产生较高滴度的干扰素活性,该活性在免疫后4天制备的脾细胞培养中开始出现,免疫后7天则达高峰(7.47±0.31 log_2U/ml),以后逐渐下降。若培养时添加菌苗,干扰素高峰出现稍晚些,于免疫后10天达高峰,但滴度明显上升(9.10±0.26 log_2U/ml)。另外,C57BL/6正常小鼠的脾细胞(5×10~6细胞/ml)添加菌苗(0.1亿菌/ml)体外培养12小时后可开始测出干扰活性,培养48小时后活性达高峰(8.23±0.30log_2U/ml)。该干扰素具有小鼠Ⅱ-型干扰素相同的特性。我们在实验中还发现,将S-O_2-1菌苗与刀豆素A(Con A)合用诱生的干扰素滴度明显高于两者单独使用时诱生滴度的累加值。     

c-Jun氨基末端激酶在小鼠T细胞增殖中的作用

目的研究c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)在小鼠T细胞增殖中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析JNK的一种新的特异性抑制剂SP600125在不同剂量、不同时间对T细胞增殖的影响,并应用CellQuest软件分析增殖细胞各代所占比例和增殖指数(PI)及抑制指数(HI)。采用碘化丙锭染色分析不同剂量SP600125对Con A或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激的小鼠T细胞周期变化的作用。结果随着SP600125浓度从1.0μmol/L逐渐增至16.0μmol/L,Con A对T细胞的促增殖作用逐渐减弱,以8.0～16.0μmol/L的抑制作用最为明显,呈剂最依赖关系(r=0.98,P<0.01);选择最佳剂量8.0μmol/L,SP600125对T细胞增殖的抑制作用随时间从24h递增至96b而逐渐增强;进一步发现SP600125能使PDB加Ion刺激的小鼠T细胞停滞于G_0/G_1期,阻止其进入S期和G_2/M期,且阻止作用随上述浓度的增加而增强,呈明显剂量依赖关系(S期:r=-0.98,P<0.01;G_2/M期:r=-0.88,P<0.05);SP600125也呈剂量依赖性地使Con A诱导的T细胞停滞于G_0/G_1期,阻止其进入S期(r=-0.90,P<0.05)。结论JNK信号通路的活化在小鼠T细胞增殖中可能起着重要作用。     

双歧杆菌表面分子对LPS在小鼠体内调节胸腺细胞凋亡？…

目的 研究双歧杆菌表面分子细胞壁肽聚糖（ＷＰＧ）、脂磷壁酸（ＬＴＡ）对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节。方法 用ＤＮＡ凝胶电泳、ＴＵＮＥＬ法检测ＷＰＧ、ＬＴＡ对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的影响,并分别用生物活性和Ｇｒｉｅｓｓ反应测定ＷＰＧ、ＬＴＡ、ＬＰＳ体外诱生ＴＮＦ－α、ＮＯ２的含量。结果 ＷＰＧ,ＬＴＡ可显著抑制ＬＰＳ体内诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡。ＷＰＧ、ＬＴＡ单独刺激巨噬细胞时所诱生     

雪胆素乙对小鼠淋巴细胞体外活化及增殖的影响

目的分析雪胆素乙(Cucurbitacin IIb,CuIIb)对丝裂原刺激的小鼠淋巴细胞体外活化、增殖及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法以WST法检测CuIIb对刀豆蛋白A(Con A)刺激的淋巴细胞增殖的作用,利用流式细胞术分析小鼠淋巴细胞活化抗原CD69和CD25以及促炎因子肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。结果 CuIIb能明显抑制Con A刺激引起的淋巴细胞的增殖作用,并呈现剂量依赖性;经CuIIb处理后,T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达受到明显抑制;同时,CuIIb以剂量依赖方式抑制Con A诱导的促炎因子TNF-α和IL-6在CD3+T细胞中的表达。结论 CuIIb对小鼠淋巴细胞的活化、增殖均具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应。     

红景天苷对小鼠原代T淋巴细胞体外行为的影响

目的:分析红景天苷(Sal)对小鼠原代T淋巴细胞体外行为的影响。方法:无菌分离并培养BALB/c近交系小鼠淋巴结细胞,MTT比色法检测并分析Sal对小鼠T淋巴细胞活力的影响;荧光染料标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术(FCM)检测刀豆蛋白A(Con A)诱导作用下Sal对T淋巴细胞活化抗原CD69表达水平的影响。羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色分析T淋巴细胞体外增殖情况。2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)荧光染色检测小鼠T淋巴细胞胞内活性氧簇(ROS)生成。Di OC6(3)染色检测Sal对T淋巴细胞胞内线粒体活性的影响以及地塞米松(DEX)诱导作用下Sal对T淋巴细胞线粒体膜电位的影响。制备小鼠胸腺T淋巴细胞悬液,FCM检测DEX诱导作用下胸腺T淋巴细胞的凋亡率。结果:终浓度为80、160和320μmol/L的Sal均能提高T淋巴细胞活化抗原CD69的表达水平(P0.05)。Sal能促进Con A诱导72 h条件下T淋巴细胞体外增殖(P0.01),且能减少T淋巴细胞胞内ROS生成量(P0.05),对T淋巴细胞线粒体膜电位有保护作用(P0.01)。Sal能明显降低DEX诱导条件下的胸腺T淋巴细胞凋亡率(P0.01)。结论:Sal能够促进T淋巴细胞的体外活化和增殖,减少T淋巴细胞内ROS的产生,维持细胞内线粒体膜电位稳定性,抑制DEX诱导条件下胸腺T淋巴细胞的凋亡。     

试管内诱生抗体的研究——Ⅱ.对实验条件的进一步探讨

本文对体外诱生溶血空斑形成细胞(PFC)的实验条件进行了进一步研究,包括筛选新生小牛血清、挑选绵羊红细胞(SRBC)的供羊;和诱生抗体反应的最适SRBC剂量,以及选择适合于本实验的小鼠品系。结果证明不同批的小牛血清支持PFC反应的能力及不同个体的SRBC诱生PFC反应的能力存在着差异;每毫升脾细胞培养物中加入50微升1％SRBC悬液及用615小鼠作为脾脏细胞的供体较为合适。还对贮存不同时间的SRBC和用SRBC吸收过的小牛血清进行了比较。通过选用合适的条件,能够获得稳定的实验结果和诱生出较高的PFC反应。文内分析和讨论了可能引起实验失败的原因。     

微小RNA-7敲减对小鼠脾脏中T淋巴细胞体外功能的影响

观察微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(Knock down,KD)对小鼠脾脏T淋巴细胞体外功能的影响并探讨其意义。常规分离野生型(wild type,WT)小鼠脾脏T淋巴细胞,经CD3和CD28抗体刺激后,Real-time PCR检测不同时间点(0h;24h;48h)细胞中miR-7的表达变化;进一步用Con A、CD3和CD28抗体刺激miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞,CCK8检测细胞增殖率;Real-time PCR检测miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10表达的变化;FACS检测CD4+T和CD8+T细胞的数量变化及CD4+T细胞膜分子CD44、CD62L和IL-4、IFN-γ的表达变化。结果显示,WT小鼠脾脏T淋巴细胞活化后,miR-7的表达水平显著上调(P0.05);与WT小鼠相比,在Con A、CD3和CD28抗体作用下miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显增加(P0.05);miR-7KD小鼠脾脏T淋巴细胞IL-12、IL-4、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平均明显上调(P0.05),而IL-10表达显著下调(P0.05);FACS检测结果显示CD4+T细胞比例明显上调(P0.05),而CD8+T细胞的比例变化不显著(P0.05);CD4+T细胞膜分子CD62L水平显著下降,CD69及IL-4、IFN-γ的表达水平均显著上调(P0.05)。结果表明,miR-7敲减以后可显著影响小鼠脾脏T淋巴细胞的功能,本实验为后续深入探讨其在T淋巴细胞功能调控中的作用提供实验依据。     

gp96-肽复合物免疫小鼠脾淋巴细胞CD8+细胞内的Ca2+浓度变化

目的： 检测gp96-肽复合物免疫小鼠脾淋巴细胞特定亚群CD8+细胞内的钙离子浓度变化，从而进一步探讨gp96-肽复合物疫苗的免疫效应和机制。 方法： 以gp96-肽复合物免疫小鼠的脾淋巴细胞作为研究对象，用quantum-red标记的抗膜表面抗原CD8+进行膜表面染色的同时，进行Fluo-3/AM负载及细胞内Ca2+浓度的检测，以双色流式细胞术检测特定亚群淋巴细胞内的Ca2+浓度的变化，钙离子载体A23187、MnCl2和Con A作为小鼠脾淋巴细胞CD8+细胞［Ca2+］i的刺激因素。 结果： 经gp96-肽复合物免疫小鼠脾淋巴细胞CD8+细胞［Ca2+］i有一定水平的上调。与对照组相比，A23187和Con A可显著提高gp96-肽复合物免疫小鼠脾淋巴细胞CD8+细胞［Ca2+］i的水平。 结论： ［Ca2+］i浓度的上升可能与gp96-肽复合物促进淋巴细胞CD8+T淋巴细胞的活化及增殖有关。     

人甲胎蛋白对荷H-22肝癌小鼠免疫功能的影响

作者通过体外实验观察人甲胎蛋白(AFP)对荷H-22肝癌小鼠免疫功能的影响.结果表明,人AFP抑制单向混合淋巴细胞反应和白介素6的生成,并促进抑制性T细胞的诱生.     

山奈酚对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响

目的:研究山奈酚(KA)对小鼠T细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨.方法:分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)进行刺激,以不同终浓度的KA与T细胞共培养.流式细胞术结合双色荧光抗体染色,检测T细胞早期活化抗原CD69的表达;MTT法检测KA对T细胞增殖的影响;用碘化丙锭(PI)染色分析T细胞的细胞周期.结果:终浓度为10、20和40 μmol/L的KA可以显著抑制ConA刺激的T细胞CD69的表达,由ConA组的(39.11±1.17)%,分别降低为(30.64±0.23)%、(27.95±0.04)%和(5.63±0.37)%(P<0.05);MTT法结果显示,KA对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性;PI染色结果显示,随着KA浓度的增加,均能明显阻止淋巴细胞进入S期和G2/M期.结论:KA可显著抑制ConA刺激下的小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖;它能抑制T淋巴细胞进入细胞分裂期.     

双歧杆菌表面分子对LPS在小鼠体内调节胸腺细胞凋亡的观察

目的研究双歧杆菌表面分子细胞壁肽聚糖（ＷＰＧ）、脂磷壁酸（ＬＴＡ）对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节。方法用ＤＮＡ凝胶电泳、ＴＵＮＥＬ法检测ＷＰＧ、ＬＴＡ对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的影响,并分别用生物活性法和Ｇｒｉｅｓｓ反应测定ＷＰＧ、ＬＴＡ、ＬＰＳ体外诱生ＴＮＦ－α、ＮＯ２－的含量。结果ＷＰＧ、ＬＴＡ可显著抑制ＬＰＳ体内诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡。ＷＰＧ、ＬＴＡ单独刺激巨噬细胞时所诱生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量显著低于ＬＰＳ刺激时所产生的这两种活性介质的量,而ＷＰＧ、ＬＴＡ与ＬＰＳ共同应用时可显著降低ＬＰＳ诱导巨噬细胞产生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量;诱生型一氧化氮合成酶抑制剂Ｓ－甲基异硫脲硫酸盐体外可抑制巨噬细胞产生的ＮＯ的量,在体内可部分抑制ＬＰＳ诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡。结论ＷＰＧ、ＬＴＡ与ＬＰＳ共同应用时,可抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞产生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量,从而下调ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞的凋亡     

人胃癌细胞系和成纤维细胞的COn A受体分布的变异

本文采用 Con A-过氧化物酶光镜和电镜细胞化学方法观察了体外培养的人胃癌细胞(MGC80-3)和成纤维细胞质膜的 Con A 受体分布特点,未经固定的 MGC80-3细胞,Con A 受体复合物呈斑块样不规则分布,而成纤维细胞呈均匀弥散分布。本文还观察了细胞不同的周期时相和生长状态,以及不同的外界因素影响下 Con A 受体复合物的分布变异特点,并对 Con A 受体复合物在胃癌细胞质膜上不规则分布的原因进行了讨论。     

芹菜素对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的抑制作用

研究芹菜素(apigenin,AP)对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,探讨其作用机制,以及将其开发为免疫抑制药物的可能。无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L和200μmol/L)的芹菜素预孵育4 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导T细胞活化和增殖,并用MTT法检测该药物浓度对T细胞的毒性作用。荧光标记抗体双染色结合流式细胞术,检测各浓度AP对ConA诱导的小鼠T细胞表达早期、中期和晚期活化抗原CD69、CD25和CD71的影响;以二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(carboxyfluoresceindiacetate-succinim-idyl ester,CFDA-SE)染色结合流式细胞术,检测各浓度AP对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,并应用ModFit软件分析其增殖指数(proliferation index,PI)。结果显示,25~200μmol/L AP对ConA诱导的T细胞CD69、CD25的表达有显著抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖关系;25μmol/L和50μmol/L的AP抑制CD71的表达,但高浓度(大于100μmol/L)才有显著抑制作用(P<0.01)。各浓度AP对ConA诱导的T细胞增殖均有显著抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖关系。表明在一定浓度范围内,AP可显著抑制ConA诱导的小鼠T细胞体外活化及增殖,有望通过进一步研究将其开发成免疫抑制药物。