树突状细胞亚群比例对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病的影响

目的 探讨树突状细胞(Dendridc cell，DC)亚群比例对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。方法用主要组织相容性抗原(MHc)完全不合的近交系小鼠建立小鼠allo-BMT的模型，随机分为三组，分别在移植前、后和不对供鼠使用重组小鼠粒系集落刺激因子rmG-CSF，移植后均采用环孢素A(CsA) 甲氨蝶呤(MTX)方案预防aGVHD，观察三组小鼠移植前后外周血中DC亚群的比例及变化以及aGVHD的情况。结果 移植前后使用rhG-CSF均可以使DC亚群发生改变。使DC2的比例增加，移植前使用更明显；处理组移植小鼠aGVHD严重程度明显比不使用rmG-CSF组弱。移植前使用aGVHD表现最轻。结论 移植前后使用rmG-CSF可以使小鼠DC亚群比例发生改变，使DC2比例增高，并可使减轻移植小鼠aGVHD的症状。     

异种骨髓移植中移植物抗宿主病的实验研究

目的 :探讨克服异种骨髓移植间强烈的移植物抗宿主病的方法。方法 :实验分两步 :第一步 ,SD大鼠亚致死剂量 5 .5Gy全身照射后 ,4h内经尾静脉输入正常BALB/c小鼠骨髓细胞 8× 10 7。 2d后予腹腔注射Cy15 0mg/kg。诱导形成嵌合体大鼠 ,使其对BALB/c小鼠产生特异性免疫耐受。第二步 ,BALB/c小鼠接受致死剂量 9.0Gy全身照射 ,随机三分组。照射后 4h内经尾静脉注射骨髓进行移植。A组输注正常SD大鼠的骨髓细胞 4× 10 7;B组输注正常SD大鼠的骨髓细胞 4× 10 7和脾细胞 2× 10 7;C组输注嵌合体SD大鼠的骨髓细胞 4× 10 7和脾细胞 2× 10 7;比较GVHD发生情况。结果 :A组有 2只小鼠死于感染和放射损伤 ,所有对象均未观察到明显GVHD表现。B组平均存活时间为 (9.0± 1.3)d ,且死前均出现不同程度的典型GVHD表现 ,如皮毛脏乱、消瘦、弓背体位、腹泻 ,甚至血便等 ;肝实质内有灶性淋巴细胞及多形细胞浸润 ,并可见局灶性坏死 ;肠绒毛部分或大部分脱落 ,粘膜坏死、有大量炎性细胞浸润 ,符合GVHD病理改变。而C组除 2只小鼠分别于 18d、31d死亡外 ,余均存活超过 6 0d ,与B组有显著差异 ,且死亡率最低。结论 :有受者嵌合体的供者 ,在进行异种骨髓移植后有助于克服异种移植物抗宿主病。     

非亲缘异基因骨髓移植后并发急性移植物抗宿主病的诊治

移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)是异基因造血干细胞移植的主要障碍。我院近１年完成的１０例非亲缘异基因骨髓移植中 ,１例发生超急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ) ,经抢救好转 ,现报道如下。１．供受体情况 :患者女性 ,１２岁 ,山东省临沂市学生。７年前发现血白细胞数增高 ,２年前血白细胞数升至１３０×１０９／Ｌ,当地骨髓涂片检查确诊为慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ)慢性期 ,予羟基脲治疗。移植前血象 :白细胞数７．５×１０９／Ｌ,血红蛋白量１０９ｇ／Ｌ,血小板数２９６×１０９／Ｌ;骨髓象 :有核细胞增多 ,粒系增生明显活跃 ,以中幼粒以下阶…     

非清髓性骨髓移植对移植物抗宿主病的影响

目的探讨非清髓性预处理方案对大鼠异基因骨髓移植模型移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法Wistar大鼠为供鼠,SD大鼠为受鼠,受鼠分两组,分别予以不同的预处理方案,A组受鼠自移植前4～1 d,腹腔注射氟达拉宾(1 mg/kg),移植前4 h接受2Gy的全身照射;B组受鼠仅在移植当天分别接受6 Gy的全身照射.各实验组受鼠均在移植当天经尾静脉输注供鼠骨髓细胞3.8×107;对照组大鼠输注等量的生理盐水,观察各组大鼠GVHD反应.结果移植前接受氟达拉宾和2 Gy全身照射预处理的大鼠生存期较长,且 GVHD 临床和病理评分也较低.结论非清髓性骨髓移植预处理方案可有效预防GVHD,拓宽临床进行异基因骨髓移植的适用范围.     

大鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

目的建立较稳定的异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病动物模型,为异基因骨髓移植后的急性移植物抗宿主病(aGVHD)的相关研究提供实验参照。方法以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A、B、C、D、E 5组,移植当天所有受鼠均接受8.5 GY的全身照射(TBI),于照射后4~6 h内,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞(2×108个/kg),C、D、E组分别回输供鼠骨髓细胞(2×108个/kg) 不同比例的脾细胞。观察各组大鼠生存期、外周白细胞计数、及有无aGVHD的临床及病理表现。结果A组大鼠于15d内全部死亡,外周血白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B、C、D、E组大鼠外周血白细胞计数均有明显恢复,B组大鼠8只存活超过50 d,C、D、E组大鼠均于50 d观察期内死亡,并有aGVHD的临床表现及病理表现,但C组大鼠aGVHD的程度较轻且时间不集中,其中D、E组大鼠可于相对集中的时间内观察到典型aGVHD临床及病理。结论TBI预处理的方式是可行的,单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的aGVHD,骨髓细胞与脾细胞1∶1及1∶1.5混合组均可作为异基因骨髓移植后理想的aGVHD动物模型。     

非清髓单倍体相合骨髓移植后自然杀伤细胞参与急性移植物抗宿主病的免疫病理学研究

目的研究自然杀伤（natural killer,NK）细胞在非清髓单倍体相合骨髓移植中参与急性移植物抗宿主病（acute graft vs host disease,aGVHD）过程的免疫病理。方法本实验建立了以C57BL／6小鼠为供鼠、CB6F1小鼠为受鼠的急性移植物抗宿主病模型。观察小鼠发生aGVHD的症状体征,流式细胞术检测小鼠移植后嵌合率及NK细胞活化受体NKp46表达强度,免疫荧光染色观察aGVHD靶器官部位NK细胞分布。结果移植鼠aGVHD发生率80％,移植＋15d达到完全嵌合,移植＋25d左右小鼠出现体质量减轻、耸毛、弓背等典型aGVHD症状。发生aGVHD小鼠外周血NK细胞NKp46表达强度低于未发生aGVHD小鼠,受鼠肝汇管区有供鼠源NK细胞浸润。结论在非清髓单倍体相合骨髓移植中NK细胞参与了肝处移植物抗宿主病的病理反应,NK细胞活化受体NKp46表达强弱与aGVHD的发生相关,NKp46表达强度可能为aGVHD诊断提供依据。     

异基因骨髓移植后的移植物抗宿主病(附5例报告)

本文报告了5例异基因骨髓移植后的移植物抗宿主病(GVHD)。急性于移值后10～38天发病,慢性于移植后105～160天发病。主要表现为各种皮损、肝功损害及腹泻等。并结合文献对GVHD的防治等问题进行了讨论。     

异种骨髓移植后1例慢性移植物抗宿主病动物模型的观察

目的 探讨异种造血嵌合体模型中慢性移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）发生的特点及机制。方法 本研究对40余只异种造血嵌合体模型中出现的一只慢性GVHD实验兔行血常规、肝功、骨髓涂片检查，对其肝、肺、小肠、皮肤等脏器行常规病理、胶原纤维染色等检查，并同时用PCR测其外周血中供体细胞嵌合情况。结果 该实验兔外周全血细胞减少，PCR检查未发现供体细胞，骨髓轻度增生不良；病理结果显示其病变仍以皮肤为重但均较同种GVHD轻，其病变侵犯部位与同种GVHD无明显区别。结论 异种骨髓移植的慢性GVHD出现时间晚，较罕见，临床表现不如同种慢性GVHD典型，病变较同种GVHD轻；其病变侵犯器官与同种GVHD无明显区别。     

异基因造血干细胞移植后中枢神经系统病变的移植物抗宿主病一例

异基因造血干细胞移植后神经系统并发症的原因很多,包括中枢神经系统感染、代谢异常、药物毒性、脑血管事件、EB病毒相关的淋巴增殖性疾病、血液病中枢神经系统复发等。移植物抗宿主病（graftversushostdisease,GVHD）是异基因造血干细胞移植的主要并发症之一。以中枢神经系统受累为主要表现的GVHD国内很少报道。     

输血相关的移植物抗宿主病研究进展

骨髓移植中的移植物抗宿主病 (GVHD)已引起医学界的足够重视并进行了深入的研究 ,移植后输血也进行常规照射。其实输入含免疫活性淋巴细胞的血液成分而引起的输血相关性移植物抗宿主病 (TA- GVHD)表现更重 ,漏诊、误诊率高 ,治疗效果也差。因此 ,探讨 TA- GVHD发病机制、诊治及预防措施就显得尤为重要。1　历史及发病率　　早在 195 5年 ,日本学者就报道手术后输血发生红皮症的病例。随着对 GVHD的认识 ,发现此类病症与移植后GVHD的表现有所不同 ,主要是骨髓功能衰竭和全血细胞减少 ,而且治疗效果和预后都很差 ,于 1970年正式命名…     

非清髓性骨髓移植对移植物抗宿主病的影响

目的 探讨非清髓性预处理方案对大鼠异基因骨髓移值模型移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法 Wistar大鼠为供鼠,SD大鼠为受鼠,受鼠分两组,分别予以不同的预处理方案,A组受鼠自移植前4-1d,腹腔注射氟达拉宾(1mg/kg),移植前4h接受2Gy的全身照射;B组受鼠仅在移植当天分别接受6Gy的全身照射。各实验组受鼠均在移植当天经尾静脉输注供鼠骨髓细胞3.8×107;对照组大鼠输注等量的生理盐水,观察各组大鼠GVHD反应。结果 移植前接受氟达拉宾和2Gy全身照射预处理的大鼠生存期较长,且GVHD临床和病理评分也较低。结论 非清髓性骨髓移植预处理方案可有效预防GVHD,拓宽临床进行异基因骨髓移植的适用范围。     

小鼠同种异基因骨髓移植aGVHD动物模型的建立

目的：建立一个德定可靠的异基因骨髓移植（allogeneic bone marrow transplantation,Allo-BMT）急性移植物抗宿主病（acute graft-vetsus-host disease,aGVHD）动物模型,为Allo-BMT中aGVHD研究提供理想的实验平台。方法：以雄性C57BL／6（H-2b）为供鼠,雌性BALB／C（H-2d）为受鼠,受鼠致死性全身照射（total body irradiation,TBI）（8.0Gy）预处理后,在移植物中混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞以引起不同程度的aGVHD。根据存活期、外周血白细胞计数、临床表现及病理检查等判断aGVHD程度。结果：单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现aGVHD,75％的小鼠长期存活（〉30d）。混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞的Allo-BMT小鼠出现aGVHD的时间和程度均有差异,其中骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合组小鼠,均可在相对集中的时间内（8-15d）观察到典型的aGVHD临床和病理改变。结论：建立Allo-BMT aGVHD模型需要加入一定比例的脾细胞,供鼠骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合进行的Allo-BMT,可作为理想的aGVHD动物模型。     

雷帕霉素抑制小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病作用的初步研究

目的:探讨新型免疫抑制药物雷帕霉素(RAPA)对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的抑制作用,并与传统免疫抑制药物比较作用效果。方法:用主要组织相容性抗原(MHC)完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠为雄性C57BL/6 J(H-2b)鼠,受鼠为雌性BALB/c(H-2d)鼠]建立allo-BMT/aGVHD动物模型,随机分5组,第1、2和3组分别给予RAPA、环孢菌素A(CsA)加甲氨蝶呤(MTX)、RAPA加CsA加MTX联合用药作为aGVHD抑制方案,第4组为空白对照,第5组为未移植组。观察各组小鼠骨髓移植后aGVHD的出现情况。结果:移植小鼠出现典型的aGVHD症状,未用aGVHD预防方案的移植小鼠(第4组)死亡高峰在移植后第5~7天,死亡率达100%。用不同aGVHD预防方案的第1~3组小鼠aGVHD症状明显减轻,平均生存时间(MST)较第4组显著延长(分别延长3.5、1.9和6.0 d,P<0.05)。不同aGVHD预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无显著性。经用各预防方案后,移植小鼠aGVHD病理表现减轻,且RAPA、CsA和MTX联合用药组的病理分级轻于RAPA单药组或CsA加MTX标准方案组。结论:RAPA可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,增强小鼠对骨髓移植的免疫耐受,对小鼠骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)有明显抑制作用,可减轻GVHD症状和病理损害程度,延长平均生存时间。     

NK细胞对小鼠H-2单倍体相合骨髓移植后GVHD及造血重建的影响

目的:研究自然杀伤(NK)细胞在单倍体相合骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)及造血重建的影响. 方法: 以近交系Balb/c(H-2d)×C57BL/6(H-2b)杂交F1代小鼠(H-2d/b)为供鼠、Balb/c(H-2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行半相合骨髓移植,根据临床表现、病理检查及外周血白细胞(WBC)数,比较不同移植组GVHD发生及造血重建情况. 结果: 骨髓 T细胞组中90%的小鼠出现GVHD,外周血WBC平均在移植后4 wk恢复正常;而骨髓 T 低浓度NK细胞组中20%小鼠出现GVHD, 外周血WBC平均在移植后3 wk恢复正常;骨髓 T 高浓度NK细胞组中仅10%出现GVHD,外周血WBC也平均在移植后3 wk恢复正常. 后两组较骨髓 T细胞组GVHD发生率显著下降(P＜0.01),外周血WBC恢复时间显著提前(P＜0.01). 结论:在小鼠单倍体相合骨髓移植中,同种反应性NK细胞可降低GVHD发生率,促进造血重建.     

大小鼠之间造血干细胞嵌合体抗异种移植物抗宿主病

目的探讨克服异种骨髓移植间强烈的移植物抗宿主病(GVHD)的措施。方法(1)将12只SD大鼠经5.0 Gy亚致死剂量全身照射后,4 h内每只经尾静脉输入28只正常BALB/c小鼠骨髓细胞8×107个。2 d后从腹腔注射环磷酰胺(Cy)100 mg/kg·b.w.,诱导形成对BALB/c小鼠产生特异性免疫耐受的嵌合体大鼠10只。(2)24只BALB/c小鼠接受9.0 Gy致死剂量全身照射后随机均分为3组,照射后4 h内经尾静脉注射骨髓细胞进行移植。A组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个;B组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;C组输注嵌合体SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;观察GVHD的发生情况。结果A组有2只小鼠死于感染和放射损伤,所有对象均未观察到明显GVHD表现。B组平均累积存活时间为10 d[95%可信区间为(8,12)],死前均出现不同程度的典型GVHD表现。而C组除2只小鼠分别于移植后18、31 d死亡外,其余的均存活超过150 d。三组间比较有统计差异(P<0.002)。结论对有受者嵌合体的供者进行异种骨髓移植,有助于克服异种移植物抗宿主病。     

来氟米特预防小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的实验研究

目的 评估来氟米特（LEF）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）术后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用.方法 以SPF级雄性C57BL/6（H-2b）为供鼠,雌性BALB/C（H-2d）为受鼠,建立allo-BMT/aGVHD动物模型,并将大鼠随机分为：A组（模型对照组）、B组（环孢菌素A组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）、C组（LEF组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）,同时根据临床表现、病理组织学检查、平均生存时间评估各组aGVHD的严重程度.结果 B组和C组受鼠平均生存时间均较A组显著延长（均P〈0.01）,B组和C组间平均生存时间的差异均无统计学意义（均P〉0.05）;B组和C组受鼠的aGVHD临床表现和病理改变均较A组明显减轻.结论 LEF可有效预防小鼠allo-BMT术后出现的aGVHD,并可减轻其症状和病理损害程度,同时显著延长平均生存时间.     

小鼠脾细胞在混合骨髓移植中的作用

目的:观察同异基因小鼠脾细胞输注比例和输注量在混合半相合骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)和嵌合状态的影响.方法:受鼠全身照射后,经尾静脉回输同基因和半相合异基因供鼠骨髓及两者不同比例脾细胞.A组未加入异基因供鼠脾细胞,B组加入的同异基因供鼠脾细胞量相等,C组加入异基因供鼠脾细胞量是同基因供鼠脾细胞量的两倍.回输后观察GVHD临床表现,取肝、皮肤、小肠送病理学检查评定GVHD分级.测定 70天、 150天嵌合率.监测造血重建和受鼠生存率.结果:混合骨髓移植各组小鼠生存期均超过50天.其中A组,临床和病理无GVHD表现, 150天嵌合水平大幅度下降.B组,临床和病理无明显GVHD表现, 150天嵌合水平中等幅度下降.C组病理有GVHDⅡ级表现, 150天嵌合水平下降不明显.半相合骨髓移植对照组小鼠出现典型的GVHD临床和病理表现,仅20%小鼠生存期超过50天.结论:小鼠混合半相合骨髓移植中,同异基因小鼠脾细胞输注比例和输注量对移植排斥和GVHD有协调作用.     

细胞因子浓度改变在高压氧抗小鼠急性移植物抗宿主病中的作用

目的:观察高压氧(HBO)对异基因骨髓移植小鼠血清IL-2,TNF-α,IL-4及IL-10浓度的影响,探讨HBO防治急性移植物抗宿主病(aGVHD)的机制.方法:受鼠移植前接受高强度预处理.HBO组移植前3 d及移植后2周接受高压氧处理.2周后用ELISA法检测受鼠血清细胞因子的浓度.结果:对照组均出现aGVHD,而HBO组没有出现aGVHD.HBO组血清IL-2和TNF-α浓度均明显低于对照组(P＜0.05);而IL-4和IL-10则明显高于对照组(P＜0.05).结论:HBO可有效预防异基因骨髓移植小鼠出现aGVHD,其机制可能与HBO显著降低受鼠血清IL-2和TNF-α浓度及升高IL-4和IL-10浓度有关.     

Effect of NK cells on GVHD in H-2 haploidentical bone marrow transplantation in mice

Objective To study the effect of natural killer (NK) cells on graft-versus-host disease (GVHD) after H-2 haploidentical bone marrow transplantation (BMT) in mice. Methods Murine model of H-2 haploidentical BMT was established by using Balb/c (H-2d) mouse as recipient, and Balb/c(H-2d)×C57BL/6 (H-2b) (H-2d/b) mouse as donor. Lethally irradiated Balb/c (H-2d) mice were transplanted with the bone marrow cells from Balb/c(H-2d)×C57BL/6(H-2b) (H-2d/b) mice containing donor spleen cells and/or NK cells. GVHD and survival rates were studied by observation of clinical manifestations and pathological changes. ResultsIn the group of bone marrow spleen cells, GVHD was induced in 90% mice; but in the group plus with low amount of NK cells,GVHD was induced in 20% mice; and in the group transplanted with high amount of NK cells, GVHD was induced only in 10% mice. Compared to the group transplanted only with BM plus spleen cells, the incidences of GVHD in the latter two groups decreased significantly (P＜0.01) and the survival rates at different periods of 15, 30, 45 and 60 days increased obviously (P＜0.01 ). Conclusion In mouse H-2 haploidentical BMT, alloreactive NK cells can reduce the incidence of GVHD and increase the survival rate.