新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠心肌纤维化的影响及机制研究

目的 探讨益气健脾通络中药复方新风胶囊对佐剂性关节炎（AA）大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组（12只）和模型组（48只）,除正常对照（NC）组外,每只大鼠右足跖皮内注射弗氏完全佐剂（CFA）0.1 mL致炎,制备AA大鼠模型。致炎后第19天将AA模型大鼠组随机分为4组：新风胶囊（XFC）组、甲氨喋呤（MTX）组、雷公藤多甙片（TPT）组和模型对照（MC）组,并分组给药30天后处死,采用透射电镜观察各组大鼠心肌组织超微结构;反转录酶 聚合酶链锁反应（RT PCR）法及Western blot法测定各组大鼠心肌组织基质金属蛋白酶（MMP9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1） mRNA及蛋白表达水平。结果 （1）电镜观察结果显示,AA大鼠心肌细胞间胶原纤维增生明显,呈现心肌纤维化趋势。MTX、TPT、XFC组均能有效改善心肌超微结构变化,而3组间比较,XFC组大鼠心肌细胞形态完整,细胞核清晰, 细胞间仅有少量胶原纤维,明显好于其他两组。（2）与NC组比较,MC组大鼠心肌组织MMP9 mRNA及蛋白表达水平均明显上调,而TIMP1 mRNA和蛋白表达水平明显下调（P<0.01）;与MC组比较,XFC组MMP9 mRNA及蛋白表达水平均下降,TIMP1 mRNA及蛋白表达水平明显上升,差异有统计学意义（P<0.05, P<0.01）。结论 益气健脾通络中药复方新风胶囊可以有效抑制AA大鼠心肌纤维化,其机制可能与降低心肌组织MMP9 mRNA及蛋白表达,提高心肌组织TIMP1 mRNA及蛋白表达水平,调节MMP9/TIMP1平衡,改善心肌细胞外基质代谢有关。     

肺纤维化模型鼠MMP/TIMP基因表达异常及复方甘草酸苷的调控机制研究

目的研究复方甘草酸苷(SNMC)对博莱霉素造模肺纤维化大鼠之基质金属蛋白酶(MMP)活性及其基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)基因表达的调控机制。方法SPF级SD成年大鼠174只,随机分成SNMC大、中、小剂量组,模型组,阳性组及正常组。采用博莱霉素造模肺纤维化大鼠,然后分别腹腔注射SNMC、阳性药物醋酸泼尼松龙或生理盐水;每日1次,至处死前1 d。收集肺组织标本,提取总RNA,采用RT-PCR法检测MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2等基因的相对表达水平。结果SNMC促进纤维化模型大鼠体质量明显下降、肺脏器系数明显上升(P<0.05或0.01)。MMP2/9基因表达在造模12 d后达最高值,随后有较大程度回落。SNMC能够显著性抑制MMP2/9基因表达的异常亢进,且呈一定程度剂量依赖性。TIMP1/2在造模后持续呈显著上升状态,SNMC能够显著性抑制TIMP1/2基因不断升级的异常亢进表达。结论SNMC通过对MMP2/9以及TIMP1/2的系统调控,阻止了肺泡胞外基质的过度增生与异常沉积,促进胞外基质降解,从而拮抗肺纤维化进程。     

一贯煎联合骨髓间充质干细胞调控RhoA/ROCK1通路抑制大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探究一贯煎联合骨髓间充质干细胞在治疗肝纤维化过程中对RhoA/ROCK1通路的作用。方法：将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱组、一贯煎高剂量组、一贯煎中剂量组、一贯煎低剂量组、干细胞组、一贯煎+干细胞组;四氯化碳腹腔注射6周制备肝纤维化动物模型,干预4周后取材。记录大鼠阴虚表征情况;检测血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）含量;HE、Masson染色观察病理改变;实时PCR、蛋白质印迹法检测肝组织中RhoA、Rho相关激酶1（ROCK1）、α-SMA和COL-1 mRNA及蛋白表达;IHC检测α-SMA、COL-1阳性面积。结果：与正常对照组比较,模型对照组大鼠具有明显阴虚表征,肝脏出现明显炎症浸润和纤维增生,肝组织RhoA、ROCK1、α-SMA、胶原蛋白-1(COL-1)mRNA与蛋白表达显著升高（P<0.05）,α-SMA、COL-1阳性面积显著增加（P<0.05）;与模型对照组比较,一贯煎高剂量组、一贯煎中剂量组、一贯煎低剂量组、骨髓干细胞、一贯煎+干细胞组大鼠的阴虚表征、肝脏炎症和纤维化程度减轻,RhoA、ROCK1、α-SMA和COL-1 mRNA与蛋白表达显著降低（P<0.05）,α-SMA、COL-1阳性面积显著减少（P<0.05）,其中一贯煎+干细胞组较一贯煎中剂量组、干细胞组效果更优（P<0.05）。结论：一贯煎与骨髓干细胞可通过调控RhoA/ROCK1通路抑制肝星状细胞活化从而发挥抗纤维化的作用,二者协同作用效果优于各自单独作用效果。     

益气养阴活血方对肺纤维化大鼠TGF-β1、Smad3、MMP9及TIMP1表达的影响

目的 观察益气养阴活血方对肺纤维化大鼠的影响，探讨其改善肺纤维化的作用机制。方法 采用博来霉素气管滴注制备肺纤维化大鼠模型，将大鼠随机分为模型组、醋酸泼尼松组和益气养阴活血方高、中、低剂量组（中药高、中、低剂量组），每组8只，另取8只正常大鼠作为空白组，给药组予相应药物灌胃28 d，空白组和模型组予等体积生理盐水灌胃。末次给药后，行肺功能检测，HE和Masson染色观察肺组织病理改变，免疫组化染色检测肺组织纤连蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）表达，RT-PCR检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、基质金属蛋白酶9(MMP9)和基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA表达，Western blot检测肺组织TGF-β1、Smad3、p-Smad3、MMP9和TIMP1蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠吸气时间和呼气时间显著缩短，每分钟通气量和呼吸频率显著增加（P<0.01），肺组织结构损伤明显，肺泡塌陷、萎缩、间隔变宽，有大量胶原纤维沉积，肺组织FN和LN表达显著升高（P<0.01）,TGF-β1、Smad3、MMP9 mRNA和TGF-β1、p...     

补骨脂素通过炎症和Ras/Raf1介导对类风湿关节炎大鼠的保护作用

目的：研究补骨脂素减少炎症和抑制Ras/Raf1表达保护类风湿关节炎大鼠的机制。方法：将SD大鼠分成对照组、模型组（类风湿关节炎大鼠模型）、补骨脂素低剂量组（22 mg/kg补骨脂素处理）、补骨脂素中剂量组（44 mg/kg补骨脂素处理）、补骨脂素高剂量组（88 mg/kg补骨脂素处理）、补骨脂素高剂量+NC组（88 mg/kg补骨脂素+阴性对照慢病毒载体处理）、补骨脂素高剂量+Ras组（88 mg/kg补骨脂素+Ras过表达慢病毒载体处理）;采用Western Blotting检测大鼠的肾素-血管紧张素系统（RAS）、原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶-1（Raf1）、成骨细胞特异性转录因子（Osx）、Ⅰ型胶原蛋白α1链（COL1A1）、骨钙素（OC）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）蛋白表达;检测关节肿胀度,HE染色对关节组织病理评分,ELISA法检测炎症介质白细胞介素-2（IL-2)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6)水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠关节组织中Ras、Raf1、MMP-3、MMP-13蛋白表达以及关节肿胀度、关节组织病理评分和IL-2、TNF-α、IL-6水平均升高,Osx、COL1A1、OC蛋白表达均降低（均P<0.05）;与模型组比较,补骨脂素低、中、高剂量组大鼠关节组织中除Osx、COL1A1、OC蛋白表达均升高外,其他指标均显著降低（均P<0.05）;与补骨脂素高剂量+NC组比较,补骨脂素高剂量+Ras组大鼠关节组织中Osx、COL1A1、OC蛋白表达均降低,而其他指标均显著升高（均P<0.05）。结论：补骨脂素通过减少炎症和抑制Ras/Raf1表达减轻类风湿关节炎大鼠关节损伤,促进软骨修复。     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-13、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的影响,探讨PNS抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将大鼠随机分成正常组、模型组、PNS低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组和秋水仙碱(Col,0.1mg·kg-1)组.除正常组外其余各组采用CCl4皮下注射的方法诱导肝纤维化大鼠模型,每周2次,连续18周.于造模第9周起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和模型组灌胃等容量的生理盐水,疗程10周.实验结束后,计算肝脏、脾脏指数;比色法测定血清中ALT,AST含量;同时取固定部位肝脏组织,HE染色观察肝组织病理学改变,免疫组化技术测定肝组织中MMP-13,TIMP-1蛋白的表达,RT-PCR技术测定MMP-13,TIMP-1mRNA的表达.结果:与模型组相比,三七总皂苷(100,200 mg·kg-1)不仅可减轻大鼠肝纤维化程度,降低肝脏、脾脏指数及血清ALT,AST的含量,还可显著升高肝纤维化大鼠肝脏MMP-13的表达,降低TIMP-1的表达.结论:三七总皂苷对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用,其机制可能与上调MMP-13,抑制TIMP-1的表达,促进胶原降解有关.     

金钗石斛多糖对肝纤维化大鼠转化生长因子及基质金属蛋白酶的影响

目的:探讨金钗石斛多糖对肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)及基质金属蛋白酶(MMP13)的影响。方法:SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组,模型组,秋水仙碱组,扶正化瘀组,石斛多糖低、中、高剂量组,采用四氯化碳(CCL4)复合乙醇诱导大鼠肝纤维化模型,造模8周成功后,分别给予相应的干预药物,正常组、模型组给予生理盐水,每日1次,连续4周。采用荧光定量PCR技术检测大鼠肝脏TGFβ1、TIMP-1、MMP13 mRNA的表达差异。结果:与模型组相比,各治疗组肝组织内纤维化程度均有不同程度减轻;与正常对照组比较,模型组TGFβ1、TIMP-1 mRNA的表达上调(P<0.05),MMP13 mRNA的表达下调(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组均能降低大鼠肝组织TGFβ1、TIMP-1 mRNA的表达,其中扶正化瘀组、石斛多糖中、大剂量表达有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组提高MMP13 mRNA的表达,其中以扶正化瘀组、石斛多糖大剂量为甚(P<0.05)。结论:石斛多糖具有下调TGFβ1、TIMP-1 mRNA表达,上调MMP13 mRNA表达,可能是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMPImRNA表达及复方861抑制作用的研究

目的:观察胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMP1 mRNA表达以及复方861的治疗作用。方法:给雌性Wistar大鼠胆管内逆行注入粘合剂加胆管结扎制备胆管阻塞性肝纤维化模型。术后第7天开始给予不同剂量的复方861灌胃,共49天。以RT-PCR法观察复方861对肝组织TIMP1 mRNA表达水平的影响。结果:模型组肝组织TIMP1 mRNA为1.691±0.646,明显高于正常对照组(P<0.05);复方861 3g/kg、6g/kg、9g/kg组肝组织TIMP1 mRNA分别为0.858±0.132、0.771±0.227、0.872±0.306,明显低于模型组(P<0.05或0.01)。结论:胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMP1 mRNA明显增高,复方861能够抑制该增高,可能是其抗肝纤维化作用的机理之一。     

苦参碱对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠的影响

目的探讨苦参碱对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠的影响。方法将50只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组及苦参碱低、中、高剂量组(40、80、160 mg/kg),除空白组外其余组皮下注射硫代乙酰胺诱导肝纤维化模型,2次/周,共注射10周;第5周各组灌胃给药,1次/d。10周后,全自动生化分析仪检测大鼠血清ALT、AST水平及HA、CIV、IPCⅢ水平,HE染色观察肝组织病理状况,免疫组化检测α-SMA蛋白表达,qRT-PCR检测肝组织中CTGF、α-SMA、TIMP-1 mRNA表达。结果与模型组比较,苦参碱组降低了大鼠血清中ALT、AST、HA、CIV、PCⅢ水平(P<0.05,P<0.01),促进CTGF、α-SMA和TIMP-1 mRNA表达(P<0.01),抑制α-SMA蛋白表达,改善肝组织纤维化程度。结论苦参碱可抑制硫代乙酰胺诱导的大鼠肝纤维化,改善其肝功能,其作用可能与抑制CTGF、α-SMA和TIMP-1表达有关。     

葛根素对糖尿病大鼠肾功能及肾组织MMP-10与TIMP-1表达的影响

目的 探讨葛根素对糖尿病大鼠肾小球结构、功能及肾组织基质金属蛋白酶10(MMP—10)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP—1)表达的影响。方法 ip链脲佐菌素(65mg／kg)诱发糖尿病大鼠模型，每日ip葛根素注射液，共16周。给药结束后，收集尿液，测定尿蛋白(Upro)，尿肌酐(Ucr)含量；腹主动脉取血，测定血糖(Glu)，血肌酐(Scr)，尿素氮(BUN)含量；采用原位杂交法检测肾小球MMP—10，TIMP—1 mRNA表达，流式细胞术和免疫组化检测肾皮质MMP—10、TIMP—1及Ⅳ型胶原、层黏连蛋白(LN)表达。结果 糖尿病组较对照组肾小球MMP—10、TIMP—1 mRNA及蛋白表达增加，肾皮质MMP—10，TIMP—1及Ⅳ型胶原、LN表达亦增加；反映肾功能的各项生化指标水平升高。葛根素用药组较糖尿病组MMT—10、TIMP—1 mRNA、蛋白及Ⅳ型胶原、LN表达减少；肾功能有所改善。结论 葛根素对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP—10，TIMP—1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

加味茵陈四逆汤对实验性肝纤维化小鼠MMP1和TIMPs表达的影响

目的:观察预防性使用加味茵陈四逆汤对肝纤维化小鼠肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2)基因表达的影响。方法:将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。30%CCl4(1.5 mg/kg,溶解于橄榄油)腹腔注射建立肝纤维化模型,同时给予药物灌胃处理。用药14 d后,各组行HE染色,观察肝脏病理组织学改变。RT-q PCR法检测MMP1、TIMP1和TIMP2 mRNA表达。结果:(1)病理结果显示模型组肝纤维化明显,中药高、中、低剂量组较模型组纤维化减轻;(2)MMP1 mRNA模型组表达量与正常组比较明显减少(P0.05),与阳性药物组、中药中剂量和低剂量组相较表达量同样明显减少(P0.05);(3)TIMP1 mRNA、TIMP2 mRNA模型组表达量比正常组明显增多(P0.05),与阳性药物组和中药中、低剂量组相较均表达量减少(P0.05)。结论:加味茵陈四逆汤可上调肝纤维化小鼠MMP1表达,抑制TIMP1、TIMP2表达,发挥对肝纤维化的抑制作用。     

虎杖苷对糖尿病肾病小鼠AMPKα1/TLR4信号通路的影响

目的观察虎杖苷（PD）对糖尿病肾病（DN）模型小鼠腺苷酸活化蛋白激酶α1/Toll样受体4（AMPKα1/TLR4）信号通路的影响。方法采用SPF级雄性KK-Ay小鼠，经高脂饲料诱导3周建立DN模型，将30只模型成功KK-Ay小鼠随机分为模型组，阳性药组，PD高、中、低剂量组，每组6只，将6只雄性 C57BL/6J小鼠设为正常组。正常组及模型组予去离子水10 mL/（kg·d），阳性药组予缬沙坦13.33 mg/（kg·d），PD各组分别予PD 13.33、6.67、3.33 mg/（kg·d）剂量灌胃。各组小鼠每日灌胃1次，连续干预治疗12周后留取血清及肾组织标本。以RT-PCR技术检测肾组织AMPKα1、TLR4、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、IL-18 mRNA转录水平；Western Blot技术、免疫组化技术检测肾组织AMPKα1蛋白表达水平；ELISA技术检测血清MCP-1、IL-18蛋白表达水平。结果与正常组比较，模型组小鼠AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01），TLR4 mRNA转录上调（P<0.01），IL-18、MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平下调（P<0.01）。与模型组比较，各治疗组AMPKα1 mRNA转录及蛋白表达水平上调（P<0.01， P<0.05），各治疗组TLR4、IL-18 mRNA转录下调（P<0.01），阳性药及PD高剂量组IL-18蛋白表达水平下调（P<0.01， P<0.05），各治疗组MCP-1 mRNA转录及蛋白表达水平均下调 （P<0.01）。与PD高剂量组比较，PD中剂量组IL-18 mRNA转录水平上调（P<0.01），PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录表达水平上调（P<0.01），PD中剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.05），PD低剂量组AMPKα1、IL-18蛋白表达下调（P<0.01， P<0.05）。与PD中剂量组比较，PD低剂量组IL-18、MCP-1 mRNA转录水平上调（P<0.05， P<0.01），PD低剂量组AMPKα1蛋白表达下调（P<0.01）。结论PD下调IL-18、MCP-1等促炎因子过表达，减轻DN免疫炎性损伤，可能与调节AMPKα1/TLR4信号通路相关。     

一贯煎对大鼠肝纤维化拮抗作用的影响

目的:探讨一贯煎对大鼠肝纤维化的拮抗作用。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、一贯煎组。除正常组外,其余3组均建立四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化模型。造模后,一贯煎组和秋水仙碱组予相应药物灌胃、正常组和模型组以0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃次数为1次/d。灌胃4周后,检测大鼠肝组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1),通过病理染色评价肝纤维化程度。结果:与正常组相比,模型组肝纤维化程度增加,MMP-1降低、TIMP-1升高、MMP-1/TIMP降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,一贯煎组及秋水仙碱组肝纤维化程度减轻,TIMP-1降低(P<0.05);秋水仙碱组MMP-1有降低趋势,一贯煎组MMP-1有升高趋势;两治疗组MMP-1/TIMP-1有升高趋势。结论:一贯煎可拮抗CCl4诱导的大鼠肝纤维化,其机制可能与调节肝组织内MMP-1/TIMP-1含量,促进胶原纤维降解有关。     

竹节参总皂苷通过调节TGF-β1/Smad3通路改善衰老大鼠心肌纤维化的作用研究

研究竹节参总皂苷(saponins extracted from Panax japonicas,SPJ)对衰老大鼠心肌纤维化的改善作用及作用机制。将18月龄SD雄性大鼠随机分为衰老模型组、SPJ低剂量组、SPJ高剂量组,每组10只;衰老模型组,SPJ低、高剂量组分别灌胃给予等量的生理盐水,SPJ 10,60 mg·kg^-1·d^-1,每周6次,持续灌胃6个月至24月龄;另取10只6月龄大鼠作为青年对照组。处死动物后,采用HE染色观察各组大鼠心肌形态;Masoon染色观察各组大鼠胶原沉积的变化;RT-PCR法检测各组大鼠心脏组织中胶原相关蛋白COL1α2,COL3α1,肌成纤维细胞标记物α-SMA和基质金属蛋白酶MMP9,MMP2的mRNA表达水平;Western blot法检测各组大鼠心脏组织中TGF-β1,p-Smad3,IL-1β,TNF-α的蛋白表达。SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维紊乱程度,减少炎性细胞浸润,降低衰老大鼠胶原蛋白沉积;能明显下调衰老心脏组织中COL1α2,COL3α1,α-SMA和MMP9,MMP2的mRNA表达水平;同时,能有效抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3,TNF-α,IL-1β蛋白的表达量。SPJ能有效改善衰老大鼠心肌纤维化程度,其作用机制与抑制衰老心脏中TGF-β1,p-Smad3蛋白表达,降低心肌炎症反应有关。     

五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织MMP-2及其抑制剂表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅳ型胶原以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2表达的影响,探讨五田保肝液对大鼠酒精性肝纤维化的治疗效果和可能机制。[方法]随机将100只Wistar大鼠分成6组:正常组、五田保肝液低、中、高剂量组、模型组、阳性药对照组,其中正常组10只,其他各组均18只。采用白酒加少量玉米油、吡唑的混合物灌胃,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,造模12周后处死大鼠,以免疫组化法检测大鼠肝组织Ⅳ型胶原蛋白的表达,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA的表达。[结果]各组Ⅳ型胶原蛋白的表达均比正常组显著升高,但五田保肝液各剂量组和阳性药组Ⅳ型胶原蛋白的表达比模型组降低;模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2的mRNA表达比正常组显著升高,但TIMP-2的mRNA表达升高幅度更大;五田保肝液和阳性药组MMP-2mRNA的表达较模型组升高,但TIMP-2mRNA的表达较模型组降低,且五田保肝液以中、高剂量效果更明显。[结论]五田保肝液可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化的发生发展。     

舒肝和络醒脾方对肝纤维化模型大鼠TNF－α/NF－κB信号通路的影响

目的：观察舒肝和络醒脾方对肝纤维化模型大鼠 TNF－α/NF－κB信号通路以及炎症因子的影响，探讨舒肝和络醒脾方干预肝纤维化进程的相关机制。方法：将雄性 Wistar 大鼠随机分为正常对照组，模型组，阳性对照组，舒肝和络醒脾方高、中、低剂量组共6组，每组10只。除正常对照组外，其余各组大鼠均采用腹腔注射40% CCl4油溶液方式诱导肝纤维化模型，注射同时采用相应药物进行灌胃治疗，8周后取大鼠肝脏与血液标本。造模期间观察记录各组大鼠一般情况；HE染色与Masson染色观察大鼠肝组织病理形态学变化；免疫组织化学法检测肝组织α－MA表达水平；双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清 IL－1β、TNF－α 炎症因子水平；RT－qPCR 法检测 TNF－α、NF－κB p65 的 mRNA 表达水平；Western blot技术检测TNF－α、NF－κB p65的蛋白表达水平。结果：同模型组比较，大鼠经药物干预后一般状况均改善；肝脏病理形态明显改善（P < 0. 05）；α－SMA表达水平明显下降（P < 0. 05）；炎症因子IL－1β与TNF－α表达水平明显下降（P < 0. 05）；TNF－α、NF－κB p65的mRNA水平和蛋白表达均明显下降（P < 0. 05）。其中舒肝和络醒脾方高剂量组效果较为显著且稳定，和阳性对照组疗效趋同。结论：舒肝和络醒脾方可延缓由 CCl4诱导的肝纤维化进程，其作用机制可能与 TNF－α/NF－κB 信号通路有关。     

复方丹参片通过调控TGF-β1/Smad 通路及基质金属蛋白酶水平对肾纤维化大鼠的作用机制研究

目的基于TGF-β1/Smad 通路和基质金属蛋白酶水平探讨复方丹参片对肾纤维化大鼠的保护作用及相 关机制。方法采用灌胃腺嘌呤（250 mg·kg-1）的方式制备肾纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为正常组、模型 组、氯沙坦组（0.09 g·kg-1）及复方丹参低（0.3 g·kg-1）、高（0.6 g·kg-1）剂量组。各组大鼠给予相应剂量灌胃给 药,每日1 次,连续干预4 周。检测大鼠血清Cr、BUN 水平;采用HE 及Masson 染色法观察肾脏组织病理形 态及纤维化程度;采用免疫组织化学法检测肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7 蛋白表达水平;采用 Western Blot 法检测肾脏组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大 鼠血清Cr、BUN 水平明显升高（P＜0.05）;肾脏出现明显纤维化病变;肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、 TIMP-1 蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Smad7、MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与模 型组比较,低、高剂量复方丹参片均能明显降低大鼠血清Cr、BUN 水平（P＜0.05）;明显改善肾脏纤维化病 变;降低肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、TIMP-1 蛋白表达水平（P＜0.05）,升高Smad7、MMP-2、 MMP-9 蛋白表达水平（P＜0.05）。结论复方丹参片可能通过抑制TGF-β1/Smad 通路及提高基质金属蛋白酶 水平来实现对肾纤维化大鼠的保护作用。     

鹿茸多肽对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的保护作用及其机制研究

目的研究鹿茸多肽（Velvet Antler Polypeptides,VAP）对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化的保护作 用及其机制。方法采用腹腔注射四氯化碳法诱导小鼠肝纤维化动物模型。将小鼠随机分为正常组、四氯化碳 组、四氯化碳+鹿茸多肽组（20、40 mg·kg-1）、阳性对照组（水飞蓟宾组,SB,100 mg·kg-1）。各组动物每天给予 相应剂量药物灌胃,连续干预6 周。采用HE 染色法观察病理组织形态;采用ELISA 法检测血清谷丙转氨酶 （ALT）、谷草转氨酶（AST）及炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）的含量;采用免疫组化法检测肝纤维化标志物 （α-SMA,Col-I）的蛋白表达水平;采用Western Blot 法检测肝脏MAPK 和PI3K/Akt 信号蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠肝脏出现大量脂肪变性和炎性浸润,肝脏纤维化标志物α-SMA、Col-I 明显高表 达,肝损伤指标ALT、AST 水平均明显升高（P＜0.01）,促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均明显升高（P＜ 0.01）。与模型组比较,鹿茸多肽组能明显降低α-SMA、Col-I 的表达水平,改善肝脏纤维化病理改变,降低 ALT、AST、TNF-α、IL-1β、IL-6 血清含量（P＜0.01）,并逆转肝脏MAPK 和PI3K/Akt 的信号蛋白表达水平。 结论鹿茸多肽可能是通过干预MAPK 和PI3K/Akt 信号传导路径,从而实现对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化 的保护作用。     

枳棋子提取物对实验大鼠肝组织中TIMP-1与MMP-13表达的影响

目的：探讨枳棋子提取物对实验大鼠肝组织基质金属蛋白酶-13（MMP-13）与金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法：SD大鼠48只，随机分为2组：正常对照组（16只）与模型组（32只），用四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型，共造模6周，6周末各组分别处死大鼠8只，取肝脏进行HE染色；模型组大鼠随机分为3组：自然恢复组、对照组和给药组，于12周末处死各组大鼠，取肝脏，运用半定量逆转录聚合酶链反应（砌：PCR）检测肝组织中MMP-13 mRNA与TIMP-1 mRNA的表达。结果：MMP-13 mRNA的表达在各组之间并无显著性差异，而TIMP-1 mRNA在各组之间有显著性差异，与正常组相比，自然恢复组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA显著升高（P〈0．05），而与自然恢复组相比，对照组和给药组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA的表达显著降低（P〈0．05），其中给药组TIMP-1 mRNA比对照组显著降低（P〈0．05）。结论：枳棋子提取物逆转肝纤维化的机制可能是减少肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-1 mRNA的表达．逐渐恢复肝脏胶原降解系统。从而逆转肝纤维化。     

芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞 αvβ3-ILK/AKT 信号通路的影响

目的:探讨芪术颗粒对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝窦内皮细胞(Liver sinus endothelial cells,LSECs)中整合素αvβ3-整合素连接激酶(Integrin-linked protein kinase,ILK)/蛋白激酶B (Protein kinase B,AKT)信号通路的影响。方法:腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液建立大鼠肝纤维化模型,原代分离肝纤维化大鼠及正常大鼠LSECs。70只雄性Wistar大鼠随机分为6组,芪术颗粒低、中、高剂量组,分别给予芪术颗粒0.5倍、1倍、2倍剂量灌胃,阳性药组给予复方鳖甲软肝片灌胃,正常组及模型组给予三蒸水灌胃,每天分别灌胃2次,连续灌胃5次。制备含药血清及正常血清。将制备的正常血清加入到正常组大鼠分离出的LSECs,其余组将对应的血清加入肝纤维化大鼠分离出的LSECs,常规培养48 h,Western blot检测LSECs中整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路的变化情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠LSECs中αvβ3、磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白表达均升高(P 0.01)。与模型组比较,阳性药组及芪术颗粒各剂量组大鼠LSECs中整合素αvβ3表达均降低(P 0.05,P 0.01),随芪术颗粒剂量的增大,αvβ3表达逐渐降低;磷酸化ILK/ILK、磷酸化AKT/AKT蛋白的表达均减少(P 0.01),尤以芪术颗粒高剂量组降低最明显。与阳性药组比较,芪术颗粒高剂量组LSECs整合素αvβ3、磷酸化ILK、磷酸化AKT蛋白表达均降低,但差异无统计学意义(P 0.05)。结论:芪术颗粒可通过抑制肝纤维化大鼠LSECs整合素αvβ3-ILK/AKT信号通路发挥其抗肝纤维化作用。