TSH—RRA测定甲亢病人血中TRab的初步应用

甲亢是临床中的多发病,现已知它是一种自身免疫性疾病。其抗原是甲状腺细胞膜上的TSH受体,患者血清中存在此受体之抗体     

白细胞介素15研究进展

ＩＬ－１５是新近发现的一种细胞因子，它广泛分布于外周单核细胞、上皮细胞和成纤维细胞中；能刺激Ｔ，Ｂ淋巴细胞增殖与分化，具类似于ＩＬ－２的生物学活性；能以高亲和力结合到多种淋巴细胞以及人内皮细胞、鼠胸腺细胞等血源和非血源细胞上；ＩＬ－１５Ｒ表现为ＩＬ－２Ｒβ和γ亚单位组成的高亲和力受体。     

Graves病早期检测TSH受体抗体的临床意义

直接作用于甲状腺细胞膜上的促甲状腺激素(TSH)受体的抗体,简称为TRAb.TRAb是一类多克隆抗体(PcAb),其中包括TSI,TFII,TGFI和TGII等.这些抗体之间存在着相对的平衡,平衡的破坏会引起临床症状的变化.Graves病是一种自身免疫性甲状腺疾病(AITD),表现为有毒性弥漫性甲状腺肿伴有临床甲亢症状.TRAb的早期检测对诊断Graves病具有重要的临床意义.     

Graves病患者治疗前,后血清甲状腺激素抗体和TSH结合抑制免疫？…

本文研究了Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者在抗甲状腺药物（ＡＴＤ）治疗前、后血清甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）和ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＩＩ）的变化，发现治疗前ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ的检出率分别为９１．７％和７９．２％，治疗后两抗体的活性及阳笥率均显著下降，表明抗甲状腺药可改善ＧＤ患者的免疫异常。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性不相关，提示ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）具有异质性。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性与血清甲状腺激素     

可溶性白细胞介素15受体α亚单位的原核表达、纯化及生物学活性鉴定

目的:对鼠白细胞介素15受体α亚单位(IL-15Rα)的胞外区段,即可溶性IL-15Rα(sIL-15Rα)进行原核表达及纯化,并测定其配体结合能力及相应生物学功能.方法:采用RT-PCR方法,以鼠脾脏细胞总RNA为模板扩增编码sIL-15Rα的基因片段,经测序确证后与原核表达载体pQE-30连接,所得重组表达质粒pQE-30 /sIL-15Rα转化E.coli M15构建表达重组子.通过降低诱导温度和IPTG浓度的方式实现重组蛋白的可溶性表达,金属镍螯合的Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白,并经SDS-PAGE和Western blot验证.采用固相受体结合分析法测定重组蛋白与IL-15间的亲和力,并以CTLL-2细胞为靶细胞测定重组蛋白的生物学活性.结果:成功构建了重组表达质粒pQE-30 /sIL-15Rα,并在25℃、0.5 mmol/L IPTG条件下实现了重组蛋白的可溶性表达.所得重组蛋白的相对分子量约为29 kD,纯度大于95%,与IL-15之间的亲和力为4.9×10-11 mol/L,具有显著的协同IL-15促CTLL-2细胞增殖效应.结论:获得了功能性的重组蛋白sIL-15Rα,为深入系统地研究IL-15Rα的独特生物学性状,以及开展IL-15靶向性的研究工作奠定了基础.     

TSH发光免疫分析与IRMA的比较

本文采用发光免疫分析 (Access)和免疫放射度量分析(IRMA)对促甲状腺素 (TSH)进行了对比分析 ,现将结果报告如下。材料和方法一、材料 :收集日常工作中甲状腺功能检测标本 ,- 2 0℃保存。分别将低、中、高TSH浓度血清混合配成混合血清待测。二、方法 :TSH发光免疫分析试剂盒由宁波海尔施公司进口 ,测量仪器为Bachman公司提供的Access全自动发光免疫分析仪。TSHIRMAkit由上海奥瑞恩诊断试剂有限公司提供 ,方法采用室温过夜。γ -计数器为中国科大众诚机电有限公司生产的DFM - 96十探头γ -计数器。测量结果以 x±s,差异性用t检验…     

TSH受体抗体放射受体分析药盒稳定性质量控制

促甲状腺素受体抗体(TRAb)的测定用于诊断自身免疫性甲状腺疾病(AITD),尤其对于早期诊断Graves病具有重要的临床意义.本文报道了对TRAb放射受体分析药盒(TRAb RRA Kit)的质量评价;并对质控血清在TRAb RRA Kit稳定性质量控制方面做出评价,结果表明TRAb RRA Kit两组高、低值质控血清的批间CV均小于15%.     

积极开展TSH受体抗体的放射受体分析

甲亢中最常见的是毒性弥漫性甲状腺肿,又称Graves病,约占甲亢总数的70%以上.Graves病是一种常见的自身免疫性疾病,临床上以神经兴奋性增强、组织代谢亢进及甲状腺弥漫性肿大为特征.促甲状腺激素受体抗体(TSH receptor antibody,TRAb)是引起Graves病的主要原因,未经治疗的Graves病患者,其血清中几乎都存在TRAb;阳性的Graves病母亲患者,其新生儿体内亦存在TRAb,并可因此而引起新生儿甲亢. 1956年Adams和Purves从Graves病患者的血清中,发现一种比促甲状腺激素(TSH)效应持续长称之为长效甲状腺刺激物(LATS)的异常物质.现已知道LATS及其类似物系一类多克隆自身TSH受体抗体.关于这种自身抗体的命名,除早年的LATS外,以后由于采用不同的测定方法,还用过其他不少名称,如人甲状腺刺激素(HTS)、LATS保护物(LATS-P)、TSH置换活性物(TDA)、甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)或甲状腺刺激抗体(TSAb)等,以上这些可统称为TSH受体抗体(TRAb).     

β-TSH IRMA与TSH RIA比较

促甲状腺素(TSH)是一种由一种由垂体前叶分泌的糖蛋白激素，它由两条肽腱即α和β亚单位，经非共价腱结合组成的。TSH的α亚单位与FSH、LH、HCG结构极其相似，只有β亚单位-TSH才具有生物活性和免疫活性，因此测定β-TSH有较真实反映患者促甲状腺激素水平。本文通过β-TSH-IRMA，     

用HOEC活性酯法合成肝半乳糖受体的配体糖肽

肝半乳糖基受体存在于哺乳动物肝细胞内和膜上,特异性识别结合血浆去唾液酸糖蛋白的末端半乳糖基。利用这种受体与其配体相互识别结合的机制,可以把连接到配体上的药物定向转运到肝细胞内,进行肝病的导向诊断和治疗。人工半合成的糖化白蛋白和合成糖肽同样被肝半乳糖受体所识别结合,在体内具有一定的肝脏选择性,可用于药物的导向转运。本文报道从游离乳糖和L-赖氨酸出发,经保护、接肽、糖化等十几步反应,制备肝半乳糖受体的配体糖肽——三-(3-S-硫代乳糖基丙酰)二聚赖氨酸甲酯。应用了新的HOEC活性酯方法,进行二肽糖化,产物和中间体的化学结构经光谱、比色和元素分析等证实,配体糖肽的受体亲和力待测。     

人源性bFGF单链抗体的筛选、表达及鉴定

目的 用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与bFGF特异性结合的人源性单链抗体(scFv).方法 用rhbFGF对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,并通过phage ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定,得到的阳性克隆进一步进行原核可溶性表达及鉴定.结果 从104个随机挑选的克隆中,筛得39株抗bFGF的抗体,通过对抗体可变区基因进行多样性分析,发现存在8种不同抗体可变区基因,挑选其中8株phage ELISA显色最高的克隆进行酶切和测序鉴定,发现其中7株为正确的抗体基因序列,通过大肠杆菌成功的进行了scFv的可溶性表达,通过竞争ELISA发现其中一株scFv能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1βⅢC的结合.结论 通过筛选噬菌体抗体库获得到7株抗bFGF特异性抗体,其中一株抗体能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1的结合.     

炎症反应相关基因诱导表达的信号转导及其负相调节

炎症反应相关基因属于快速反应基因类型。近年来我们课题组对炎症反应相关基因表达的正相与负相调节进行了一些研究。　　 1.上皮细胞抗菌肽基因的诱导表达及其信号转导 :热灭活BCG全菌体及其分子量范围为 18kD - 30kD的胞壁蛋白SephadexG - 15 0柱层析组分可刺激肺腺上皮细胞hBD - 1基因的表达 ,被刺激细胞培养上清的抗菌活性显著增强 ,CAT报告基因分析显示hBD - 1基因上游 - 314到 +5 4区域具有BCG诱导的转录活性 ,其中含有转录因子C/EBPβ、AP - 1、CP2结合位点 ;双歧杆菌胞壁和胞壁蛋白对肠上皮细胞抗菌肽基因表达的诱导作用…     

特异、灵敏的人血清甲转状腺蛋白单克隆抗体ELISA方法的建立

目的 :甲状腺球蛋白 (ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ,Ｔｇ)是甲状腺滤泡上皮细胞合成的一种糖蛋白 ,分子量为 660ｋＤ ,沉降系数为 1 9Ｓ。在正常生理情况下有一小部分进入血液循环 ,在某些病理情况下 ,如甲状腺机能亢进、甲状腺癌、亚急性甲状腺炎及地方性甲状腺肿等症可因甲状腺滤泡上皮细胞被破坏或通透性增加 ,而引起血中Ｔｇ水平的增高。Ｔｇ在血中的含量甚微 ,目前多采用放射免疫技术检测 ,但因该法受到一些条件限制 ,不能广泛应用。本文建立了ＴｇＭｃＡｂＥＬＩＳＡ双抗体加心法 ,提高了检测的特异性 ,灵敏度。其灵敏度为 1ｎｇ/ｍＬ…     

人甲状腺促性腺激素释放激素及其受体的表达

目的　探讨人甲状腺中是否存在促性腺激素释放激素 (GnRH)及促性腺激素释放激素受体 (GnRH R)并细胞定位 ,试图从转录及翻译水平讨论人甲状腺可否合成GnRH及GnRH R ,为探讨GnRH可能影响甲状腺的功能提供形态学依据。　方法　采用免疫组织化学法和原位杂交技术。　结果　所测人正常甲状腺组织均呈较强的GnRH和GnRH R免疫反应阳性 ,甲状腺滤泡上皮细胞、滤泡旁细胞均为阳性细胞。免疫反应阳性物质主要分布在阳性细胞胞质内 ,胞核呈阴性。原位杂交结果同免疫组织化学染色基本一致 :甲状腺滤泡上皮细胞胞质和滤泡旁细胞胞质可检测到较强的GnRHmRNA及GnRH RmRNA阳性杂交信号。胞核均呈阴性 ,未检测到杂交信号。　结论　人甲状腺不仅表达GnRH和GnRH R ,而且可以自身合成GnRH和GnRH R。GnRH可能以自分泌的方式影响甲状腺的生理功能     

Graves病患者治疗前、后血清甲状腺刺激抗体和TSH结合抑制免疫球蛋白活性的观察

本文研究了Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者在抗甲状腺药物（ＡＴＤ）治疗前、后血清甲状腺刺激抗体（ＴＳＡｂ）和ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＩＩ）的变化，发现治疗前ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ的检出率分别为９１．７％和７９．２％，治疗后两抗体的活性及阳性率均显著下降，表明抗甲状腺药可改善ＧＤ患者的免疫异常。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性不相关，提示ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ）具有异质性。ＴＳＡｂ和ＴＢＩＩ活性与血清甲状腺激素水平无相关关系，说明体外测定的ＴＳＡｂ或／和ＴＢＩＩ活性并不能完全反映甲亢的严重程度。     

甲状腺球蛋白在分化型甲状腺癌患者131I治疗中的应用价值

分化型甲状腺癌(DTC)包括乳头状癌和滤泡状癌,约占甲状腺癌的80%～90%.其中甲状腺乳头状癌约占50%～70%,甲状腺滤泡状癌约占5%～20%[1],且发病率在逐年上升.而甲状腺球蛋白(Tg)是甲状腺滤泡上皮细胞分泌的大分子糖蛋白,是分化型甲状腺癌(DTC)的肿瘤标志物,可作为DTC患者治疗后随访的重要参考指标[2].本文对我院2005年1月~2012年10月收治的78例DTC患者131I治疗前后Tg进行随访,探讨其在DTC患者诊治中的临床价值.     

人IgE分子Fc段受体结合区的表达、纯化及功能鉴定

利用哺乳动物细胞表达、纯化具有生物学功能的人IgE Fc段与受体结合的功能区(Fcε2-4)。以CRL8033细胞株为模板,PCR扩增人IgE Fcε2-4的cDNA并构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体转染CHO-K1细胞并以G418加压筛选。利用有限稀释法、Dot-blot及FACS筛选出高表达目的蛋白的稳定细胞株并进行扩增。CHO-K1培养上清经偶联抗IgE抗体(Omalizumab)的亲和层析柱分离纯化后,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定纯度,并采用表面等离子共振(SPR)法对该蛋白与其抗体的亲和力进行检测。结果表明,SDS-PAGE显示最终获得了纯度高于95%的人IgE Fcε2-4蛋白,呈二聚体状态,分子量约78kD,SPR检测结果显示,该蛋白与Omalizumab抗体特异性高亲和力结合(kD值约3.8nmol/L)。提示,本实验获得了结构及糖基化修饰正确的人IgE Fcε2-4结构域,为进一步研究其功能及探索新的抗体药物奠定了基础。     

促甲状腺素受体在Grave氏疾病中作为一种促有丝分裂抗原的证据

Grave氏病(GD)是一种伴有形成甲状腺抗体的自身免疫性疾病。其抗体之一——促甲状腺抗体(TsAb),被认为和发病机理有关。TsAb的作用,与通过腺苷酸环化酶而作用于甲状腺滤泡细胞的促甲状腺素(TSH)类似。因TsAb的形成是由于一种免疫耐受性的改变或抗原的某些改变,所以有人提出这种抗原就是TSH受体。曾报道过在体外从GD患者取得的致敏淋巴细胞,不但用甲状腺匀浆特异刺激后,而且在非特异刺激后也能产生     

亮氨酸脑啡肽与TRH-TSH-甲状腺轴互相影响的研究

目的：探索阿片类物质与TRH－TSH－甲状腺轴之间的关系的相互影响。方法：制造大鼠高甲状腺激素水平及低甲状腺激素水平动物模型,用放免法测定甲状腺激素（T3、T4、TRH、TSH）、鸦片类物质亮氨酸脑啡肽（L－EK）及用高压液相－电化学法测定神经递质5－羟色胺（5－HT）。结果：高甲组T3、T4呈逐渐升高（P＜0．01）;血清TRH迅速下降以后又回升;下丘脑TRH呈持续抑制状态,TSH显著降低（P＜0．001）,L－EK升高（P＜0．05）,5－HT降低（P＜0．05）。低甲组T3、T4显著降低（P＜0．001）,血清TSH、TRH含量逐渐升高（P＜0．001）,垂体TSH、下丘脑TRH含量逐渐降低（P＜0．01）,以后又回升;L－EK升高,5－HT降低（P＜0．01）。结论：甲状腺功能改变后TRH、TSH升高而降低,并不伴随脑纹状体中L－EK必然的同步升高而降低。     

白细胞介素15研究进展

ＩＬ－１５是新近发现的一种细胞因子，它广泛分布于外周单核细胞、上皮细胞和成纤维细胞中；能刺激Ｔ，Ｂ淋巴细胞增殖与分化，具类似于ＩＬ－２的生物学活性；能以高亲和力结合到多种淋巴细胞以及人内皮细胞、鼠胸腺细胞等血源和非血源细胞上；ＩＬ－１５Ｒ表现为ＩＬ－２Ｒβ和γ亚单位组成的高亲和力受体。