20例晚期卵巢癌顺铂联合化疗

卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤,尤其是晚期病人死亡率很高。因此,如何提高这些患者的疗效已成为当前妇科肿瘤治疗中的重要课题。近年不少报道用顺铂联合化疗治疗卵巢癌取得一定疗效。我们对20例晚期卵巢癌采用顺铂联合化疗,初步总结如下。     

大剂量顺铂联合化疗治疗卵巢癌腹水

目前 ,卵巢癌已居妇科恶性肿瘤病死率的首位。而卵巢癌并发腹水约占总病例数的 1/3～ 1/5。大量腹水蓄积于腹腔内可引起食欲不振、腹胀、腹痛、呼吸急促等一系列症状。我们根据卵巢癌主要为局部蔓延和腹腔种植的特点 ,自 1990年 1月～ 1997年 12月 ,对 49例卵巢癌并发腹水患者采用大剂量顺铂联合化疗治疗 ,疗效较好 ,报告如下。1　资料与方法1.1　病例选择　 1990年 1月～ 1997年 12月初次住院患者 ,根据临床症状 ,结合盆腔检查、B超、CT检查 ,预计腹水量 >2 0 0 0 ml者 ,经 B超下腹腔穿刺抽腹水行细胞学检查明确诊断为卵巢癌 ,并排除卵巢…     

顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡的形态学观察

顺钱在孵巢肿瘤化疗中疗效肯定,为进一步探讨其作用机制,本实验采用ＡＯ１０／１７细胞为标本,通过光镜、电镜观察顺铂作用后细胞的形态改变,流式细胞仪（ＦＣＭ）分析其ＤＮＡ含量及二苯胺法测定其ＤＮＡ降解。结果发现２０ｕｍｏｌ／Ｌ顺铂作用后２４～３６ｈ,发生细胞凋亡,其细胞形态学改变包括体积缩小;核染色质浓缩,并沿核膜周围聚集,最后形成有膜包绕的凋亡小体,并被邻近细胞吞噬;还有一些细胞胞浆中出现空泡。２０ｕｍｏｌ／Ｌ顺铂作用后１２ｈ,ＦＣＭ显示Ｇ１峰前出现凋亡峰,其ＤＮＡ含量为Ｇ１期细胞的３０％～７０％…     

顺铂联合γ射线对裸鼠卵巢癌腹腔播散的抑制作用

目的；观察顺铂联合γ射线对卵巢癌腹腔播散的抑制作用。方法；采用裸鼠卵巢癌腹腔播散模型，用顺铂和γ射线照射进行治疗。结果：低剂量顺铂单独和联合γ射线可部分抑制，而高剂量顺铂联合γ射线可完全抑制卵巢癌的腹腔播散。结论：顺铂联合γ射线有协同抗卵巢癌的作用。     

WWOX与ERK1在食管鳞状细胞癌中表达及其临床病理意义

目的检测食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中含WW结构域的氧化还原酶（WW domain-containing oxidoreductase,WWOX）蛋白和细胞外信号调节蛋白激酶1（extracellular signal regulated protein kinase 1,ERK1）表达及其与ESCC病人临床病理参数的相关性。方法采用免疫组织化学EliVisionTM plus法检测150例ESCC和80例正常食管黏膜组织（对照组）中WWOX和ERK1蛋白的表达情况。结果ESCC组织中WWOX和ERK1蛋白的阳性表达率分别为46.0%和58.7%;对照组中WWOX和ERK1蛋白的阳性率分别为85.0%和42.5%,差异均有统计学意义（P < 0.05）。ESCC组织中WWOX蛋白阳性率与ERK1蛋白阳性率呈负相关关系（P < 0.01）。WWOX和ERK1蛋白阳性表达率在ESCC病人不同肿瘤组织浸润深度、TNM分期和是否淋巴结转移间差异均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。生存分析显示,WWOX蛋白阳性表达病人的生存时间高于阴性者（P < 0.05）。多因素回归分析显示,WWOX和ERK1蛋白阳性表达及TNM分期是影响ESCC病人术后生存的独立影响因子（P < 0.05~P < 0.01）。结论WWOX和ERK1的异常表达参与了ESCC的发生、发展、浸润以及转移,早期联合检测WWOX和ERK1蛋白表达对ESCC的进展和预后判断有重要意义。     

整合素β1对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响研究

目的 探讨整合素β1介导的细胞与细胞外基质(extraceUular matrix,ECM)的黏附,及其黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡抑制作用即耐药性的影响研究.方法 利用酶联免疫吸附实验(ELISA)及吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)双荧光染色法分析卵巢癌株型SKOV3、3AO、8910细胞由顺铂诱导的细胞凋亡情况,并采用分组对照的方法检测整合素β1及整合素β1与特异性配体的黏附作用在细胞凋亡中的作用.结果 卵巢癌3株细胞均可由顺铂诱导凋亡(P<0.01).经顺铂(10 μg/mL)作用48 h后,生长于整合素β1的配体-纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)上的3株细胞的富集系数(enrichmentfactor,EF)明显低于生长于非整合素配体一多聚赖氨酸上的细胞EF值;吖啶橙-溴化乙锭双荧光染色法结果显示生长于FN上的细胞凋亡率明显低于生长于多聚赖氨酸上的细胞凋亡率,用整合素β1的特异性阻断抗体封闭过的细胞再次生长于FN上,EF又明显提高(P<0.01).结论 整合素β1介导的细胞与FN的黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡有抑制作用,提示细胞黏附可能通过抑制细胞凋亡而促使细胞产生耐药性.     

不同剂量大蒜素对卵巢癌化疗中顺铂副反应的影响

目的观察不同浓度大蒜素对卵巢癌化疗中顺铂副反应的影响。方法将我院2005年3月—2007年12月间,120例卵巢癌顺铂化疗患者,随机分成两组：A组（60例）,给予大蒜素10mg／kg静脉输注;B组（60例）,给予大蒜素40mg／kg静脉输注。比较化疗后患者副反应发生情况。结果两组年龄、体重、化疗次数比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。B组化疗后胃肠道反应、肾毒性等并发症的发生率明显低于A组（P〈0．05）。结论静脉输注40mg／kg大蒜素可减轻卵巢癌化疗中顺铂的副反应。     

拓扑替康联合顺铂治疗复发性卵巢癌临床观察

卵巢癌为妇科第三大肿瘤,就诊时75％的患者已届晚期,目前在治疗上也存在着一些分歧,由于此时肿瘤已累及腹腔脏器或腹腔以外的组织器官,大多数的患者预后较差。晚期卵巢癌5年生存率仅为14％～29％。临床上以肿瘤细胞减灭术和     

超大剂量顺铂治疗卵巢癌的护理分析

顺铂作为卵巢癌术后标准化疗药物治疗卵巢癌已开展多年，体外研究结果提示，顺铂剂量与疗效呈直线关系，即剂量越大疗效越好，但顺铂的毒副反应又是大剂量应用的限制因素。我病区为改善卵巢癌的化疗效果，进行了超大剂量顺铂试验性化疗（顺铂≥１３０ｍｇ／ｍ２／４周），...     

褪黑素联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用

目的：探讨褪黑素（MLT）、顺铂（DDP）单独及联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用,为MLT作为卵巢癌化疗辅助药物的研究提供理论依据。方法：将体外培养至对数生长期的卵巢癌SKOV3细胞分为对照组、单用MLT组（0.5、1.0和2.5 mmol/L）、单用DDP组（25和50 mg/L）、联合应用MLT及DDP组（MLT 0.5 mmol/L联合DDP 25 mg/L; MLT 0.5 mmol/L联合DDP 50 mg/L;MLT 1.0 mmol/L联合DDP 25 mg/L;MLT 1.0 mmol /L联合DDP 50 mg/L;MLT 2.5 mmol/L联合DDP 25 mg/L;MLT2.5 mmol/L联合DDP 50 mg/L）。应用显微镜观察法、MTT法测定用药后卵巢癌SKOV3细胞的凋亡及增殖抑制率,并采用免疫化学方法测定卵巢癌SKOV3细胞用药后的血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：显微镜下观察结果显示用药组细胞贴壁能力减弱、变小变圆、折光性减弱、细胞皱缩、核固缩、染色质凝集、核碎裂。联合用药组凋亡细胞增多;MTT 法检测结果显示0.5、1.0和2.5 mmol/L-1的MLT单独应用或与25和50 mg/L的DDP联合应用均有抑制细胞生长作用（P<0.05）,且随浓度升高抑制率升高,联合用药组两药物间均有协同作用,两药相互作用指数（CDI）＜1;免疫化学染色法显示单用药组及联合用药组VEGF表达较对照组均降低,联合用药组VEGF表达明显降低（P<0.05）。结论：MLT对卵巢癌细胞生长有抑制作用,MLT联合DDP对VEGF表达下调有协同作用,提示适当浓度的MLT配伍DDP作用于卵巢癌细胞SKOV3可达到较好疗效。     

骨桥蛋白促进卵巢癌细胞SKOV3侵袭潜能的实验研究

目的检测卵巢癌细胞株SKOV3中骨桥蛋白（OPN）的表达,探讨OPN对卵巢癌细胞侵袭潜能的影响。 方法pcDNA3.1(-)/OPN重组质粒转染SKOV3细胞,以空质粒转染作对照。采用RT PCR及Western blot法检测OPN mRNA和蛋白表达水平,并用基质凝胶侵袭实验检测两组细胞侵袭力。 结果重组质粒转染SKOV3细胞后OPN mRNA和蛋白表达明显升高。侵袭实验证实重组质粒转染组细胞侵袭力明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论OPN对卵巢癌细胞的侵袭潜能有促进作用。     

染料木黄酮与顺铂联用对耐药卵巢癌细胞SKOV-3的影响

目的:探讨染料木黄酮与顺铂联用对耐药卵巢癌细胞系SKOV-3增殖与凋亡的影响. 方法:采用MTT比色法检测染料木黄酮和顺铂联用对SKOV-3细胞增殖的影响,Hoechst染色荧光显微镜下观察联合用药后细胞形态的改变,流式细胞仪分析细胞周期并检测凋亡率. 结果:联用不同浓度的染料木黄酮后顺铂对SKOV-3细胞IC50降低率为32.3%～79.8%,两药联合作用系数在0.586～0.869之间,为轻度至高度协同作用. 染料木黄酮与顺铂联用可显著提高凋亡率,两药联用诱导SKOV-3细胞凋亡和阻滞G2/M期、干扰S期进程,凋亡率与G1期细胞比例呈负相关(rs=-0.953, P<0.05). 结论: 染料木黄酮可以增强顺铂对SKOV-3细胞的增殖抑制作用和杀伤作用,两种药物具有协同作用. 染料木黄酮阻滞细胞于G2/M期并同时干扰S期进程可能是两药发挥协同作用的重要机制.     

三氧化二砷和顺铂对人卵巢癌细胞株3AO体外杀伤效应的对比研究

目的 :比较As2 O3 和顺铂 (cDDP)对卵巢癌细胞株的生长抑制作用和凋亡诱导作用。方法 :采用MTT测定法和流式细胞分析法 (FCM) ,检测As2 O3 对体外培养的人卵巢癌细胞株 3AO细胞的生长抑制率和诱导凋亡率及对细胞周期的影响 ,并与cDDP进行比较。采用吖啶橙染色 ,观察As2 O3 作用后 ,凋亡细胞的形态学变化。结果 :As2 O3 可以有效地抑制 3AO细胞生长并诱导其凋亡 ,具有量 效性及时 效性 ,与cDDP相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。As2 O3 作用后 ,S期细胞通过受阻 ,形态学观察发现细胞呈典型的凋亡细胞特征。结论 :与cDDP相比 ,As2 O3 对卵巢癌细胞株 3AO细胞具有更有效的生长抑制作用及诱导凋亡作用 ,并使S期细胞阻滞。     

洛铂诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的探讨洛泊对体外培养的浆液性卵巢癌细胞SKOV3凋亡的诱导作用。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,用MTT比色法检测洛铂对SKOV3细胞株的增殖抑制作用以及流式细胞仪检测洛铂对SKOV3细胞株的凋亡率。结果体外培养的卵巢癌SKOV3细胞经不同浓度的洛泊处理后细胞生长明显受到抑制,洛泊作用于卵巢癌SKOV3细胞可诱导细胞的凋亡。结论卵巢癌SKOV3细胞对洛泊敏感,洛泊对卵巢癌细胞的杀伤作用是通过诱导细胞凋亡途径实现的。     

hTERT基因反义cDNA转染对卵巢癌细胞系SKOV3生物学行为的影响

目的: 研究反义hTERT基因对卵巢癌细胞系SKOV3生物学行为的影响.方法: 构建反义hTERT基因的真核表达载体,采用LIPOFCTAMINETM Reagent转染卵巢癌细胞系SKOV3,通过RT-PCR、Trap-ELASA、生长曲线、裸鼠体内致瘤能力等方法比较转染前后细胞hTERT基因表达、端粒酶活性、细胞生长、致瘤性等方面的变化.结果:转化细胞系细胞hTERT基因的表达受到抑制,端粒酶活性下调,肿瘤细胞的增殖与生长速度明显降低,细胞的克隆形成能力及裸鼠体内的成瘤能力下降,肿瘤的恶性表型部分逆转.结论:应用反义技术下调hTERT基因表达可有效降低端粒酶活性并部分逆转卵巢癌细胞的恶性表型,hTERT基因可望成为卵巢癌基因治疗的新靶点.     

雷帕霉素联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞株凋亡和周期的影响

目的:探讨雷帕霉素单独及联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞凋亡、周期的影响及可能的分子机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞,流式细胞术检测雷帕霉素单独及联合顺铂对细胞凋亡及周期分布的影响;实时RT-PCR检测对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达的影响。结果:雷帕霉素单独作用可抑制细胞生长增殖,引起G1期阻滞,S期及G2-M期细胞明显减少,使得大部分细胞处于有丝分裂间期,进而促进细胞凋亡,呈现明显的时间依从性,72 h效果最明显;联合顺铂凋亡率明显高于单独用药组(P0.01)。实时RT-PCR结果显示,雷帕霉素作用24 h可引起mTOR mRNA表达下调,72 h抑制表达低于24 h(P0.05)。结论:雷帕霉素作用于PI3K/AKT/mTOR信号传导通路的mTOR位点,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,与传统化疗药顺铂有协同效应,可增强肿瘤细胞对于顺铂的化疗敏感性。     

丙戊酸对体外培养的卵巢癌细胞上皮性钙粘附素表达的影响

目的：探讨丙戊酸(valproic acid,VPA)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞上皮性钙粘附素（E cadherin）表达的影响。方法：将VPA以不同浓度(0、1、2、3、4、5?mmol/L)不同作用时间(24、48、72?h)作用于SKOV3细胞,相差显微镜下观察细胞形态的变化；用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖；用流式细胞仪测定细胞周期动力学变化；用免疫细胞化学方法检测E cadherin蛋白表达情况；用流式细胞术测定SKOV3细胞E cadherin蛋白含量。结果：①3?mmol/L作用48?h后SKOV3细胞形态出现明显变化；②不同浓度(0、1、2、3、4、5?mmol/L)VPA作用不同时间(24、48、72?h)后, SKOV3细胞增殖活性比较,差异有统计学意义(P<0.05) ；不同浓度(0、1、2、3、4、5?mmol/L)VPA作用不同时间(48、72?h)后,首先引起细胞周期分布的改变,随剂量的加大和用药时间的延长,凋亡率逐渐升高；③3?mmol/L VPA作用48?h后,与对照相比，SKOV3细胞浆中的棕色颗粒明显增多；④VPA作用48?h后, SKOV3细胞E cadherin蛋白含量明显增多(P<0.05)。结论：VPA可以抑制SKOV3的生长，并且在蛋白水平上调卵巢癌细胞分泌E cadherin。     

糖皮质激素对人卵巢癌细胞系(3AO)的诱导分化作用

目的　观察不同浓度的地塞米松 (Dex)对人卵巢癌细胞系 ( 3AO)增殖及分化的影响 ,在 3AO细胞中是否有糖皮质激素受体 (GR)的表达。方法　以不同浓度Dex( 1× 10 -10 ～ 1× 10 -6 mol/L)处理培养 3AO细胞后 ,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况 ,采用氨基安替比林法测定碱性磷酸酶 (AKP)活性 ;采用酶联免疫法测定 3AO细胞分化标志抗原CA12 5水平的变化 ;测定GR拮抗剂RU486作用于 3AO细胞后能否阻断糖皮质激素的效应 ,用放射配体结合分析法和定量RT PCR法检测 3AO细胞中GR的表达。结果　Dex对 3AO细胞的增殖有明显抑制作用 ,1× 10 -6 mol/LDex作用 5d后活细胞计数为对照组的 5 6.78% ,同时伴有细胞形态的变化 ;Dex还可使 3AO细胞AKP活性增高 ,这种作用具有时间和剂量依赖性 ;1× 10 -6 ～ 1× 10 -10 mol/LDex作用于3AO细胞后 ,明显抑制卵巢癌细胞标志抗原CA12 5的表达 ;RU486可完全阻断Dex对 3AO细胞活性的诱导作用 ;在细胞中存在高亲和力、低容量GR。结论　Dex对 3AO细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用 ,在 3AO细胞中存在GR ,Dex调节 3AO细胞增殖分化的作用通过GR介导     

人卵巢癌顺铂耐药细胞裸鼠腹腔转移模型的建立

目的　探讨建立人卵巢癌顺铂耐药细胞裸鼠腹腔转移模型的方法。方法　人卵巢癌细胞株 3AO和顺铂耐药细胞株 3AO/cDDP细胞体外培养。 4× 10 6个 3AO、3AO/cDDP分别接种于裸鼠腹腔 96h后 ,各随机分为 2组 ,分别腹腔内注射生理盐水和顺铂 (cDDP) ,观察各组裸鼠的致瘤率、生存期和生存延长率。采用流式细胞技术观察转移瘤LRP、MRP基因的表达情况。转移瘤瘤体行病理学检查。结果　 3AO、3AO/cDDP细胞的裸鼠致瘤率差异无显著性 ,P >0 .0 5 ;cDDP能提高 3AO荷瘤鼠的生存期及生存延长率 ,与 3AO/cDDP荷鼠相比 ,差异有显著性 ,P <0 .0 5 ;3AO/cDDP转移瘤的LRP、MRP基因的表达水平显著高于 3AO转移瘤 ,P <0 .0 5 ;病理学检查提示裸鼠腹腔转移瘤细胞具人恶性特征。结论　该方法建立裸鼠卵巢癌腹腔转移模型具有成瘤率高的特点 ,并能保持顺铂耐药特征。