伊马替尼抑制脂多糖诱导的巨噬细胞炎症表型

【目的】探讨伊马替尼（Ima）在体外对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症表型的影响。【方法】RAW264.7细胞在LPS（0.1μg/mL）或/和Ima（1μmol/L,5μmol/L）处理后,通过Q-PCR方法检测细胞因子IL-1β、IL-10、CCL2、iNOS、TNF-α和Arg1的mRNA表达变化;采用Western Blot检测iNOS蛋白表达变化以及NF-κB和MAPK信号通路活化情况;利用ELISA法检测细胞上清IL-1β、CCL2、IL-10和TNFα的蛋白表达情况。【结果】与对照组相比较,LPS刺激8h后,RAW264.7细胞内的炎症指标IL-1β、CCL2、iNOS和TNF-α的mRNA水平显著升高（P<0.001）以及抗炎指标IL-10的mRNA水平也明显升高（P<0.001）;LPS刺激24h后,细胞上清中IL-1β、IL-10、CCL2和TNF-α的蛋白水平显著上升（P<0.001）,细胞内iNOS蛋白表达以及p65,p38,ERK和AKT的磷酸化水平显著增加。和LPS组相比,Ima提前处理后,IL-1β、CCL2、iNOS和TNF-α的mRNA及蛋白水平显著下降（P<0.01,P<0.001）而IL-10的mRNA及蛋白水平显著升高（P<0.001）,这种抑制作用具有剂量依赖性。Ima的预处理抑制了LPS诱导的p65,p38,ERK和AKT磷酸化。单独用Ima处理RAW264.7细胞后,细胞的功能状态未见明显的改变。【结论】伊马替尼可抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症表型,这种作用与抑制NF-κB和MAPK信号通路的过度激活有关。     

抑制SCD1对被动吸烟小鼠肺部炎症的影响

目的 研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1（stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1）对被动吸烟小鼠肺部炎症水平的影响。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照（CON）组、SCD1抑制剂（CAY）组、吸烟（Smoke）组及吸烟加抑制剂（Smoke+CAY）组,每组11~14只,记录各组小鼠体重及肝脏系数。RT-qPCR及Western blot检测CON组与Smoke组内SCD1表达水平。肺组织HE病理染色、肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）蛋白浓度测定及细胞计数比较肺部炎症损伤水平。ELISA检测BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β水平。电化学发光法检测血浆中IL-4、IL-10、IL-13水平。结果 被动吸烟小鼠肺内SCD1水平升高。给予SCD1抑制剂后,小鼠体重减轻、肝脏系数降低。Smoke+CAY组小鼠较其他组肺部炎症改变明显,BALF中蛋白浓度、细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显升高。各组血浆中IL-4、IL-10、IL-13水平变化不明显。结论 吸烟后小鼠肺内SCD1水平升高,且抑制SCD1会加重被动吸烟小鼠肺部炎症损伤。     

右美托咪定预处理对脓毒症小鼠肺组织炎症及相关因子表达的影响

目的：探究右美托咪定（DEX）预处理对脂多糖（LPS）诱导的脓毒症（SEP）小鼠肺组织炎症反应及相关因子表达的影响。方法：将成年雄性C57BL/6小鼠随机等分为4组：对照组（C组）、脓毒症组（S组）、中剂量右美托咪定组（MD组）和高剂量右美托咪定组（HD组）。MD和HD组先分别尾静脉注射DEX溶液25和50 μg/kg,30 min后尾静脉注射LPS建立脓毒症模型。LPS注射6 h后,用ELISA试剂盒测定各组小鼠血清中炎症因子的含量;Western blot检测肺组织匀浆上清液中AKT及NF-κB（p65和IκBα）含量;采集肺组织检测湿/干重比（W/D）、总肺含水量（TLW）及肺组织损伤程度。用同样的方法建立脓毒症模型,每隔24 h观察小鼠存活情况,记录各组小鼠7 d的存活率。结果：S组小鼠血清中炎症因子TNF-α、CXCL1、CXCL5和CCL20的含量显著高于C组（P＜0.01）;与S组相比,DEX预处理可以显著抑制p65、IκBα、AKT磷酸化（P＜0.05）,降低肺组织W/D、TLW（P＜0.05）,减轻肺组织损伤程度（P＜0.01）。生存试验表明DEX预处理能显著延长脓毒症小鼠的存活时间（P＜0.05）。结论：DEX预处理可通过减少AKT和NF-κB表达,抑制肺组织相关炎症因子的表达,从而对脓毒症小鼠的肺组织起保护作用。     

肿瘤坏死因子α基因沉默对无菌性炎症的抑制作用

目的 研究局部应用靶向肿瘤坏死因子α（TNF-α）的小干扰RNA（siRNA）对磨损颗粒诱导的无菌性炎症的抑制作用。方法 构建重组慢病毒载体,设计靶向TNF-α的siRNA序列和错配序列各1条。建立小鼠气囊模型,气囊内注射聚甲基丙烯酸甲酯颗粒诱导无菌性炎症反应。将建模后的小鼠随机分为3组,每组12只,分别在小鼠气囊内注入TNF-α siRNA（TNF-α组）、错配siRNA（MS组）和PBS（对照组）;慢病毒转染后第14和28天每组各处死6只小鼠,取出气囊组织。采用Real-Time PCR法检测气囊中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达;ELISA法检测TNF-α蛋白的含量;组织学检测气囊壁厚度和炎症细胞计数;活体荧光成像定量分析绿色荧光蛋白（GFP）荧光的强度和分布。结果 慢病毒介导TNF-α siRNA的局部应用显著降低了TNF-α组中TNF-α、IL-1和IL-6 mRNA的表达（P<0.01）,也降低了TNF-α蛋白的含量（P<0.01）;TNF-α组炎症反应（囊壁厚度和细胞浸润）显著减弱（P<0.05或P<0.01）。活体荧光成像显示,GFP的表达局限于气囊局部,TNF-α组和MS组荧光量比对照组升高5倍左右。结论 局部应用TNF-α siRNA可有效抑制磨损颗粒诱导的无菌性炎症,且无全身性不良作用。     

汉黄芩素对急性肺损伤小鼠的保护作用

目的：研究汉黄芩素（WOG）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠的治疗效果及其可能机 制。方法：选用C57/BL6小鼠,采用LPS（1 μg/kg）气管内灌注的方式构建ALI模型。实验分为3组：空白对照组（Control组）、LPS诱导的ALI组（LPS组）、WOG治疗组（WOG组）。随后分别采用流式细胞术及ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中免疫细胞（中性粒细胞、巨噬细胞）含量变化及炎性细胞因子分泌情况。在此基础上,采集各实验组小鼠的肺组织进行HE染色。最后,通过对LPS下游的常见通路,即NF-κB信号通路分析,探究WOG对ALI小鼠的保护作用的分子机制。结果：WOG可以显著降低肺组织的湿重/干重比（P＜0.05）,减轻肺组织中炎性细胞的浸润,抑制TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10等炎性细胞因子的产生（P＜0.01）。Western blot结果显示,WOG可以显著抑制NF-κB信号通路表达。结论：WOG对LPS诱导的ALI小鼠具有保护作用,其机制与NF-κB信号通路的抑制相关。     

IL-27通过STAT3信号通路改善脂多糖诱导的小鼠急性肺炎

目的：探讨IL-27通过调控STAT3信号通路在脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肺炎中的作用。方法：32只雄性小鼠随机分为正常对照组、LPS组、LPS+IL-27组、LPS+IL-27抗体组,每组8只。麻醉处死后取小鼠肺脏,HE染色观察各组小鼠肺组织损伤情况;qRT-PCR检测各组小鼠肺组织及血清中STAT3、SOCS3的mRNA表达水平;Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT3、p-STAT3、SOCS3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆及血清中TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β1的表达水平。免疫组织化学及Western blot检测TNF-α、IL-1β在肺组织中的蛋白表达。结果：HE染色结果发现,正常对照组,LPS组和LPS+IL-27抗体组肺泡结构被破坏,肺泡壁弥漫性增厚,有明显的炎性细胞浸润;LPS+IL-27组病理改变较LPS组明显减轻,炎性细胞浸润减少。与正常对照组比,LPS组和LPS+IL-27抗体组小鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;LPS+IL-27组较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）,LPS+IL-27组SOCS3表达水平显著高于LPS+IL-27抗体组（P＜0.05）。各组小鼠肺组织及血清TNF-α、IL-1β表达水平较正常对照组均显著升高（P＜0.05）;LPS+IL-27组TNF-α、IL-1β表达水平较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）;LPS组和LPS+IL-27抗体组IL-10表达水平均显著高于正常对照组（P＜0.05）;LPS+IL-27组IL-10、TGF-β1的表达水平均显著高于LPS+IL-27抗体组（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示,与正常对照组比,LPS组和LPS+IL-27抗体组TNF-α阳性表达主要表达在细胞浆中,IL-1β阳性表达主要表达与细胞膜与细胞浆中,Western blot结果发现TNF-α、IL-1β在肺组织中均呈高表达（P＜0.05）;LPS+IL-27组TNF-α、IL-1β的表达水平较LPS组和LPS+IL-27抗体组显著降低（P＜0.05）。结论：外源性IL-27可能通过抑制STAT3信号通路相关蛋白磷酸化水平改善LPS诱导的小鼠急性肺炎。     

山奈素对小鼠乙醇型胃溃疡的影响及其机制

目的： 探究山奈素对小鼠乙醇型胃溃疡的影响及其潜在机制。方法： 将60只SPF级昆明小鼠随机均分为6组,每组10只,分别为正常对照组,模型组,阳性对照组,山奈素低、中、高剂量组。正常对照组和模型组给予0.5% 羧甲基纤维素钠,其他4组分别给予雷尼替丁(100 mg/kg)、低剂量山奈素(31.7 mg/kg)、中剂量山奈素(63.4 mg/kg)、高剂量山奈素(126.8 mg/kg);所有小鼠灌胃容积均为20 mL/kg,连续给药7 d;然后用无水乙醇10 mL/kg灌胃建立急性胃溃疡模型;采用溃疡指数评估胃黏膜损伤情况,ELISA法检测血清中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO含量,免疫印迹法检测胃组织COX-2、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、NF-κB p65蛋白表达。结果： 与正常对照组比较,模型组小鼠胃黏膜出现明显的血斑和上皮细胞脱落;与模型组相比,山奈素组可显著降低胃溃疡指数且高剂量组优于中、低剂量组(P均<0.05)。与正常对照组相比,模型组炎症介质COX-2、PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO血清含量明显升高,胃组织COX-2、iNOS、NF-κB p65蛋白表达明显增加(P均<0.05);与模型组相比,山奈素组胃组织COX-2、iNOS、NF-κB p65蛋白表达及血清中炎症介质含量均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论： 山奈素对乙醇型胃溃疡具有保护作用,可能通过抑制NF-κB/COX-2通路,减少下游炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量,降低iNOS活性,进而抑制NO产生。     

蒲公英甾醇通过TGF-β/Smad通路对小鼠痤疮模型炎症因子水平、胸腺组织形态的影响

目的 探讨蒲公英甾醇是否通过转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）/Smad）通路对小鼠痤疮模型炎性因子水平、胸腺组织形态的影响。 方法 将C57BL/6小鼠分为对照组(A组)、模型组(B组)、蒲公英甾醇低剂量组(C组)、蒲公英甾醇高剂量组(D组);观察各组小鼠耳部变化;苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）观察各组小鼠耳组织和胸腺组织病理变化;酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组小鼠血清中白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）和IL-8表达水平;免疫组织化学检测各组小鼠耳组织中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）阳性细胞表达率;Western blot检测各组小鼠耳组织中转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、Smad3蛋白表达。 结果 与B组相比,C组和D组减轻了痤疮小鼠耳部肿胀、发红和红斑、质地干燥粗糙等状态,且耳朵厚度也明显降低(P＜0.05);蒲公英甾醇经灌胃治疗后,痤疮小鼠的炎症得到了有效缓解,并且浸润的炎症细胞数量明显减少,表皮增厚也减轻;与B组相比,C组和D组增加了小鼠痤疮模型胸腺皮质厚度和淋巴细胞数量(均P＜0.05);蒲公英甾醇明显降低了小鼠血清中IL-1β和IL-8的表达水平(P＜0.05或P＜0.01),且小鼠耳组织中 TNF-α的阳性表达率减少(P＜0.05);与B组相比,C组和D组使小鼠耳组织中TGF-β1、Smad3蛋白表达下调(均P＜0.05)。 结论 蒲公英甾醇对小鼠耳廓痤疮模型有较好的治疗效果,调节炎性因子的表达、改善小鼠胸腺组织形态,其可能与TGF-β/Smad通路有关。     

右美托咪定对内毒素急性肺损伤小鼠炎症反应的影响

目的 ：研究右美托咪定（dexmedetomidine,DEX）对内毒素急性肺损伤小鼠的影响。方法 ：32只健康雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组（8只/组）,假手术组（control组）、内毒素急性肺损伤组（LPS组）、高浓度DEX组（HD组）、低浓度DEX组（LD组）。Control组注射等容量生理盐水;LPS组腹腔注射LPS 3 mg/kg;DEX+LPS组在应用LPS前20分钟腹腔注射DEX(40μg/kg或20μg/kg)。病理组织切片检测肺组织炎症变化、测定肺湿重/干重比（W/D）;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清IL-6、IL-8和IL-1β含量的变化;qRT-PCR检测肺组织中miR-155、miR-146a的变化。结果 ：与control组比较,LPS组和DEX组肺组织炎症明显、肺W/D比值、IL-6、IL-8和IL-1β含量及miR-155表达水平升高、miR-146a表达水平降低;与LPS组比较,DEX组肺组织炎症明显好转、肺W/D比值、IL-6、IL-8和IL-1β含量及miR-155表达水平降低、miR-146a表达水平升高;与LD组比较HD组肺组织炎症...     

亚精胺通过抑制NF-κB/NLRP3炎症小体通路减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的 ：本研究旨在观察亚精胺对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）小鼠NLRP3表达与活化的影响。方法 ：采用小动物呼吸机检测亚精胺对ALI小鼠呼吸功能的影响;检测小鼠的生存率;采用肺组织病理评分评估亚精胺对ALI小鼠肺组织形态变化的影响;ELISA检测ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-1β和IL-18的蛋白水平;qPCR检测小鼠肺组织IL-1β、IL-18、NLRP3、ASC及pro-caspase-1、NF-κB的表达;Western Blots检测小鼠肺组织IκB的表达。结果 ：亚精胺可改善ALI小鼠的呼吸功能,提高生存率;减轻LPS诱导的肺病理损伤;降低ALI小鼠炎症因子IL-1β和IL-18的表达;减少ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、pro-caspase-1、NF-κB及IκB的表达。结论 ：亚精胺可通过抑制ALI小鼠肺组织NF-κB的激活,使NLRP3炎症小体的表达及活化减少,从而抑制炎症因子的表达,最终达到减轻ALI的作用。本研究可为从调节内源性能量代谢角度,探索ALI的发生机制提供实验基础     

鼻息肉组织核因子-κB和白细胞介素4的表达及意义

目的  探讨核因子-κB（NF-κB）和白细胞介素4（IL-4）mRNA在鼻息肉组织中的表达及意义。方法  选取90例术后病检确诊为鼻息肉患者鼻腔新生物（不分侧别）作实验组,同期取80例因单纯鼻中隔偏曲而行下鼻甲部分切除的患者的下鼻甲组织（不分侧别）作为对照组。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）结合半定量分析方法检测,比较两组NF-κB、IL-4的表达水平。结果  NF-κB和IL-4在实验组表达水平高于对照组（P <0.05）。结论  NF-κB和IL-4 mRNA表达水平与炎症相关,可能与鼻息肉的发病机制相关。

     

特异性抑制转化生长因子β激活激酶1活性对妊娠期糖尿病孕妇外周血单核细胞炎症通路的影响

目的  探讨特异性抑制转化生长因子β激活激酶1（TAK1）活性的变化对妊娠期糖尿病（GDM）孕妇外周血单核细胞炎症通路的影响。方法  选取GDM孕妇及正常孕妇各30例,采集外周静脉血,分离单核细胞和血浆。依据细胞加药组别的不同,分为LPS刺激组（L组）、脂多糖组（LPS组）、TAK1抑制剂组（LT组）、TAK1抑制剂组（T组）及空白对照组（W组）,培养、加药后Western blot检测TAK1及核转录因子-κB（NF-κB）蛋白的表达量,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中LPS浓度及各组炎症因子[白介素-1（IL-1）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]水平,比较各组结果的差异,探讨TAK1的作用。结果  GDM孕妇与正常孕妇比较,血浆LPS浓度升高;TAK1及NF-κB蛋白表达量增加,炎症因子（IL-1、IL-10、TNF-α）水平升高,差异有统计学意义（P <0.05）。各小组间比较,L组相较于其他组的TAK1、NF-κB蛋白表达量增加,炎症因子（IL-1、IL-10、TNF-α）表达水平升高,差异有统计学意义（P <0.05）;正常孕妇中,LT组、T组、W组NF-κB蛋白表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）,LT组、T组未检测到TAK1明显表达,可检测到W组少量表达,LT组相对于T组,TNF-α、IL-1、IL-10表达水平升高（P <0.05）,LT组、T组与W组上清炎症因子表达水平比较,差异无统计学意义（P >0.05）;GDM孕妇中,LT组、T组、W组TAK1及NF-κB蛋白表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）,LT组相对于T组,TNF-α、IL-1、IL-10表达水平升高（P <0.05）,Pearson相关性分析发现,TAK1、NF-κB蛋白表达量与炎症因子（IL-1、IL-10、TNF-α）水平呈正相关（P <0.05）。结论  TAK1可能参与GDM孕妇外周血单核细胞炎症通路的形成,抑制TAK1的活性,可以下调通路下游关键介质NF-κB及炎症因子的表达。

     

肝X受体激动剂上调人肾小球内皮细胞血栓调节蛋白表达的机制和作用

目的  探讨肝X受体（LXR）激动剂T0901317上调人肾小球内皮细胞（HRGEC）血栓调节蛋白（TM）表达的机制和作用。方法  Western blot检测25 mmol高糖和2μmol T0901317刺激后的HRGEC上IκBα、磷酸化IκBα、核转录因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB p65表达;免疫共沉淀法检测LXR与P300之间有无结合;重组腺病毒AdTMshRNA转染HRGEC,观察其对高糖下HRGEC分泌炎症介质的影响。结果 T0901317能显著降低高糖刺激后的IκBα和NF-κB p65磷酸化（P <0.05）,LXR-α沉默后NF-κB活性增强;2μmol T0901317刺激HRGEC 24 h后以Co-IP检测LXR与P300的表达上调;T0901317明显抑制高糖刺激下的HRGEC培养上清中TNF-α、IL-1β浓度（P <0.05）,AdTMshRNA转染HRGEC后,有或无T0901317刺激,HRGEC培养上清中TNF-α、IL-1β浓度与高糖组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论  LXR可能通过与P300发生相互作用阻断了NF-κB与P300之间的竞争性结合而提高TM的表达并抑制炎症介质的分泌。

     

AMPK、NF-κB、COX-2及PGE2在非小细胞肺癌中的表达

摘要：目的  探讨腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、核因子κB（NF-κB）、环氧合酶2（COX-2）及前列腺素E2（PGE2）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其关系。方法  采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测NSCLC和正常肺组织标本中可以直接反映AMPK激活状态的乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物（P-ACC）、NF-κB、COX-2的表达,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blot检测NSCLC标本及血液、正常肺组织标本及血液中AMPK、COX-2及PGE2受体的表达。结果  免疫组织化学法检测发现,P-ACC在NSCLC中低表达,NF-κB和COX-2在NSCLC中高表达,其阳性率分别为33.9%、75.8%和66.1%,且与正常肺组织中的表达差异有统计学意义;qRT-PCR和Western blot检测发现,在NSCLC标本及血液中,AMPK mRNA表达降低,COX-2和PGE2受体mRNA表达升高。结论  在NSCLC中,AMPK低表达,NF-κB、COX-2及PGE2高表达,其相互作用可能在NSCLC的增殖、凋亡耐受、侵袭及转移过程中占据重要位置,其表达情况为临床治疗NSCLC提供新的思路。

     

胆碱能抗炎通路对失血性休克/容量复苏大鼠急性肺损伤的影响

目的  探讨胆碱能抗炎通路（CAP）对失血性休克/容量复苏（HS/R）诱发的急性肺损伤（ALI）的影响。方法  成年SPF级雄性SD大鼠20只,随机分为迷走神经刺激组（VS组）、迷走神经离断组（VO组）、对照组（SC组）和假手术组（SS组）4组,每组5只。VS组、VO组和SC组通过动脉放血/容量复苏建立失血性休克诱导的ALI模型,容量复苏前VS组电刺激右侧迷走神经15 min,VO组离断右侧迷走神经干,SC组不做特殊处理,SS组不制作ALI模型。分别于放血前（T0）、MAP降至目标值5 min后（T1）、开始复苏前（T2）、复苏至预定血压5 min（T3）、30 min（T4）、90 min（T5）和150 min（T6）等7个时间点测定血浆白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;于T0、T2和T6抽取动脉血测定氧合指数（OI）;T6处死大鼠后观察肺组织结构病理改变,并测定肺组织核转录因子-κB（NF-κB）含量。结果  T1至T6时段VS组、VO组和SC组IL-6和TNF-α浓度升高,高于SS组（P <0.05）;T3至T6时段SC组IL-6和TNF-α浓度高于VS组（P <0.05）,低于VO组（P <0.05）。T6时VS组、VO组和SC组OI均下降,3组均低于SS组（P <0.05）; VO组和SC组OI比较差异无统计学意义（P>0.05）,两组均低于VS组（P <0.05）。VS组、VO组和SC组肺组织NF-κB含量增加,高于SS组（P <0.05）,VS组、VO组和SC组间NF-κB含量比较差异有统计学意义,SC组高于VS组（P <0.05）、低于VO组（P <0.05）。VS组、VO组和SC组肺损伤评分升高,高于SS组（P <0.05）,VS组、VO组和SC组间评分比较差异有统计学意义,SC组高于VS组（P <0.05）,低于VO组（P <0.05）。结论  CAP对HS/R大鼠ALI具有一定的保护效应,其机制与NF-κB信号通路调控IL-6和TNF-α等炎症介质的释放有关。

     

高胆固醇对小鼠原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响

目的  观察高胆固醇对原代成骨细胞Akt/NF-κB信号通路的影响。方法  将小鼠原代成骨细胞按1×105接种于6孔板上,待细胞融合至80%左右,分别加入0μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml和50μg/ml的胆固醇溶液培养基继续培养24 h。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）的方法,检测成骨细胞核转录因子kappa B（NF-κB）和蛋白激酶B（Akt）的蛋白表达;采用实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞中人白细胞介素1α（IL-1α）、人白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的信使RNA（mRNA）表达;采用酶联免疫吸附法,检测细胞培养上清中IL-1α、IL-6和TNF-α的蛋白水平。结果  胆固醇诱导成骨细胞中NF-κB的增加和Akt磷酸化水平降低,增加IL-1α、IL-6与TNF-α的mRNA和蛋白表达,且呈一定的剂量依赖性。结论  高胆固醇可以通过Akt/NF-κB信号通路及其介导的炎症因子表达参与成骨细胞的调节。

     

Protective effect and mechanism of sodium tanshinone II A sulfonate on microcirculatory disturbance of small intestine in rats with sepsis

To explore the protective effect of sodium tanshinone ⅡA sulfonate(STS) on microcirculatory disturbance of small intestine in rats with sepsis,and the possible mechanism,a rat model of sepsis was induced by cecal ligation and puncture(CLP).Rats were randomly divided into 3 groups:sham operated group(S),sepsis group(CLP) and STS treatment group(STS).STS(1 mg/kg) was slowly injected through the right external jugular vein after CLP.The histopathologic changes in the intestinal tissue and changes of mesenteric microcirculation were observed.The levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α) in the intestinal tissue were determined by using enzyme-linked immunoabsorbent assay(ELISA).The expression of intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1) in the intestinal tissue was detected by using immunohistochemisty and Western blot,that of nuclear factor κB(NF-κB) and tissue factor(TF) by using Western blot,and the levels of NF-κB mRNA expression by using RT-PCR respectively.The microcirculatory disturbance of the intestine was aggravated after CLP.The injury of the intestinal tissues was obviously aggravated in CLP group as compared with S group.The expression levels of NF-κB p65,ICAM-1,TF and TNF-α were upregulaed after CLP(P<0.01).STS post-treatment could ameliorate the microcirculatory disturbance,attenuate the injury of the intestinal tissues induced by CLP,and decrease the levels of NF-κB,ICAM-1,TF and TNF-α(P<0.01).It is suggested that STS can ameliorate the microcirculatory disturbance of the small intestine in rats with sepsis,and the mechanism may be associated with the inhibition of inflammatory responses and amelioration of coagulation abnormality.     

白藜芦醇对实验性兔肺动脉高压相关炎症因子表达的影响

目的  通过检测白藜芦醇（Res）干预后实验性兔肺动脉高压（PAH）模型肺组织中相关细胞因子表达水平的差异,探讨其在PAH发病机制中的作用。方法  将36只新西兰兔随机分为6组。对照组（A组）：动物皮下注射二甲基亚砜30 mg/kg。造模组：实验组动物适应性饲养1周后,皮下注射野百合碱30 mg/kg,连续注射7 d造模,然后将造模动物随机分为5组：模型组（B组）、实验药物组（C组）、高剂量组（D1组）、中剂量组（D2组）、低剂量组（D3组）,每组6只。注射后第45天,分别进行B超、心肌细胞苏木精-伊红染色和Tunnel染色,检测造模是否成功,造模成功后按体重计算给药剂量,受试药物高剂量120 mg/（kg·d）,中剂量60 mg/（kg·d）,低剂量30 mg/（kg·d）,阳性对照药物前列腺环素1 mg/（kg·d）喂饲相应的动物,1次/d,连续6周,每日观察动物的食量、活动、毛色及大小便变化,每周称体重。每隔2周随机采集各组实验动物外周血样本,采用酶联免疫吸附法试剂盒,分别对实验动物血清3种生物学标志物[转录因子-κB（NF-κB）、环氧化酶-2（COX-2）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）]的含量进行检测。结果  Res干预实验性兔PAH模型后,NF-κB、COX-2、iNos血清表达水平改善,其中高剂量组改善效果优于阳性对照药物前列腺环素。且在实验中经对比发现,NF-κB的特异性最明显,其他指标虽然有变化,但显著性不如NF-κB。结论  Res抑制血清中分泌NF-κB、COX-2、iNos的能力优于前列腺环素,Res可以通过抑制NF-κB/iNOS/COX2通路避免细胞损伤,改善PAH症状,表现出和前列腺环素相同或更好的作用。

     

Therapeutic Effect of Propofol in the Treatment of Endotoxin-induced Shock in Rats

Lipopolysaccharide (LPS) ,amaincomponentofgram negativebacterialendotoxin[1] ,istheleadingcauseofsepsisorendotoxicshock ,andwhenadmin isteredexperimentallytoanimals ,mimicsthesameinflammatoryresponse The pathophysiologicalchangesseeninsepsisareoftennotduetotheinfec tiousorganismitselfbuttotheuncontrolledproduc tionofinflammatorymediators ,includingtumornecrosisfactor (TNF) α ,nitricoxide (NO)andneu trophilaccumulation Accumulationoftheseleadstotissuedamage ,ultimately producingthelethalit…     

抑制核转录因子κBp65对鼻咽癌CNE2细胞的生物学影响

目的  探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）沉默对鼻咽癌的生物学作用。方法  构建NF-κBp65特异性小干扰核糖核酸（siRNA）质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NF-κBp65）和阴性对照质粒表达载体（pGPU6/RFP/Neo-NC）。采用非脂质体脂类转染剂将重组质粒表达载体转入人鼻咽癌CNE2细胞,建立NF-κ Bp65沉默的稳定转染CNE2细胞株（NF-κBp65沉默组）和阴性对照细胞株（阴性对照组）;蛋白质印迹法（Western blot）分析癌细胞中NF-κBp65基因的表达水平,MTT实验及流式细胞术分析癌细胞的增殖能力和细胞周期变化;复制裸鼠移植瘤模型,分析沉默NF-κBp65对癌细胞成瘤性的影响。结果  成功获得稳定转染CNE2细胞株,NF-κBp65沉默组细胞中NF-κBp65蛋白表达水平降低;NF-κBp65沉默后,CNE2细胞周期阻滞于S期,增殖速度减慢;NF-κBp65沉默组裸鼠移植瘤生长慢,重量轻,与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义（F =14.386,P <0.05）。结论  NF-κBp65沉默能降低鼻咽癌CNE2细胞的恶性生物学行为。