氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制的观察

目的观察氟尿嘧啶缓释剂植入对人结直肠癌裸鼠移植瘤生长抑制效果及其对肿瘤细胞半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响。方法用人结直肠癌LoVo细胞株建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并将其分为4组:磷酸盐缓冲液(PBS)尾静脉注射组(A组)、5-氟尿嘧啶(5-FU)尾静脉注射组(B组)、5-FU瘤内注射组(C组)、氟尿嘧啶缓释剂植入组(D组)。用药15d后记录肿瘤质量、瘤体体积,计算抑瘤率,瘤体HE染色,采用免疫组化法检测caspase-3的表达。结果氟尿嘧啶缓释剂能够显著抑制结直肠癌移植瘤的生长,D组与A、B、C组肿瘤质量、体积比较差异均有统计学意义(P<0.05);氟尿嘧啶缓释剂能上调caspase-3的表达,D组与A、B、C组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氟尿嘧啶缓释剂比传统的氟尿嘧啶更能有效抑制结直肠癌移植瘤的生长,并可上调caspase-3的表达,提示氟尿嘧啶可能通过凋亡途径介导肿瘤细胞的凋亡而发挥抗肿瘤作用,其确切的抑瘤效果值得在临床化疗中推广。     

氟尿嘧啶缓释剂对裸鼠子宫内膜癌的治疗及对非编码RNA MEG3和自噬的调控

目的观察氟尿嘧啶缓释剂植入对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响及其对非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)和自噬的调控。方法用人子宫内膜癌RL-95-2细胞株建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为三组:对照组不作处理;注射组通过尾静脉注射氟尿嘧啶(5-Fu),剂量为4 mg/kg;植入组瘤体内植入缓释剂,剂量为4 mg/kg。记录瘤体体积、瘤重,计算各组抑瘤率;HE染色观察瘤体形态学;qPCR和蛋白印迹分别检测基因和蛋白表达。结果与对照组相比,注射组和植入组瘤体体积和瘤体体重均减少(P0.05);与注射组相比,植入组瘤体体积和瘤体体重均减少(P0.05)。注射组抑瘤率为15.91%,植入组抑瘤率为34.47%。HE染色显示植入组坏死区域大于注射组。相对于对照组,注射组(t=3.328,P=0.004 3)和植入组(t=5.367,P=0.000 0)LC3-Ⅰ的表达降低,且植入组LC3-Ⅰ的表达低于注射组(t=2.400,P=0.000 8),差异均有统计学意义。相对于对照组,注射组(t=4.178,P=0.000 7)和植入组(t=6.764,P=0.000 0)LC3-Ⅱ的表达升高,且植入组LC3-Ⅱ的表达高于注射组(t=2.683,P=0.016 3),差异均有统计学意义。植入组瘤体LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显大于注射组,差异有统计学意义(t=5.571,P=0.000 0)。注射组和植入组LncRNA MEG3和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值呈正相关(r=0.858 1、0.713 5,P均0.05)。结论氟尿嘧啶缓释剂对裸鼠子宫内膜癌的抑制效果好于静脉注射给药,其机制可能是通过LncRNA MEG3正性调控激活细胞自噬从而抑制肿瘤。     

氟尿嘧啶缓释制剂抑制人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤生长的机制研究

目的探讨氟尿嘧啶缓释制剂对人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤生长的抑制作用,进一步验证氟尿嘧啶缓释制剂是一种有效抑制肿瘤生长,副作用少的新型化疗药。方法 24只裸鼠接种人结直肠癌细胞LOVO细胞株,建立裸鼠皮下种植瘤模型,随机分为PBS对照组、5-FU注射液化疗组和缓释剂植入组,每组8只,记录三组裸鼠肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,比较各组种植瘤生长情况,并HE染色观察各组肿瘤组织病理学改变,免疫组化法检测Bcl-2/Bax蛋白水平表达的变化。结果裸鼠皮下接种肿瘤细胞7d后成功致瘤。用药后肿瘤生长曲线及第30天肿瘤体积大小:PBS对照组为(3240+187)mm3、5-FU注射液化疗组为(1568+86)mm3、缓释剂植入组为(600+38)mm3,三组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。HE染色:缓释剂植入组相比其他组肿瘤细胞异性型明显,恶性程度明显,腺管状结构不明显,小区肿瘤细胞有凋亡明显,仅有少量坏死,肿瘤组织边界清晰,未见侵袭脂肪及肌层组织。5-FU注射液化疗组、缓释剂植入组Bcl-2蛋白表达均低于PBS对照组,Bax表达均高于PBS对照组;其中5-FU注射液化疗组Bcl-2低于缓释组,Bax高于缓释组。结论氟尿嘧啶缓释制剂对人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤有较好的抑瘤作用,作用机制很可能通过介导下调Bcl-2和上调Bax的表达。     

特异性溶瘤重组腺病毒KH901对荷瘤鼠肿瘤生长的抑制作用和表达GM-CSF的研究

目的 探讨特异性溶瘤重组腺病毒KH901的抗肿瘤效果及表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的水平.方法 裸鼠皮下接种人肝细胞癌(Hep3B)细胞或人前列腺癌(LNcap)细胞,建立相应裸鼠移植瘤模型.KH901瘤体内注射给药,同时设阳性对照[5-氟尿嘧啶(5-FU)或顺铂尾静脉注射]和阴性对照[生理盐水(NS)尾静脉注射],以相对肿瘤增殖率(T/C%)和抑瘤率观察抗肿瘤效果;建立人肺癌 (A549) 裸鼠移植瘤模型,瘤体内注射KH901,分别于首次给药后第2、7、11、14、18、36d各取3只动物眶静脉采血并摘取肿瘤,以ELISA法测定血清和肿瘤匀浆液上清中GM-CSF含量.结果 ①在Hep3B裸鼠抑瘤实验中,KH901高剂量(3×1010 VP/鼠)组的T/C%和抑瘤率分别为7.31%、93.61%,与KH901低剂量(3×108 VP/鼠)组(40.27%、68.76%)和5-FU组(37.33%、61.49%)相比显示出较强的抑瘤效果(P＜0.05).②在LNcap裸鼠抑瘤实验中,KH901多次给药(3×1010 VP/鼠×3)组的T/C%和抑瘤率分别为5.47%、95.29%,其抑瘤效果强于顺铂组(25.47%、71.93%),但与KH901单次给药(3×1010 VP/鼠×1)组(12.94%、87.94%)相比差异无统计学意义.③在A549裸鼠移植瘤模型中,肿瘤和血清中的GM-CSF分别在第7d[(47.72±9.21) ng/mg]和第11d[(92.45±18.64) ng/mL]出现高峰,随后,GM-CSF表达量逐渐降低.结论 KH901有明显的抗肿瘤作用,在体内肿瘤中表达高水平的GM-CSF,并渗入血管到循环系统,形成血液GM-CSF的高峰.     

放射性125I粒子对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤VEGF表达的影响

目的 探讨放射性125I粒子对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响.方法 建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,将24只小鼠随机分为对照组和观察组,每组12只.观察组小鼠植入125I粒子,对照组小鼠植入空白粒子.检测裸鼠移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率.采用免疫组织化学法检测移植瘤组织内VEGF蛋白表达.采用PCR法检测移植瘤组织内VEGF mRNA表达.结果 观察组小鼠移植瘤体积及瘤重[(0.658±0.213) g]均明显小于对照组[(1.807±0.625) g],组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05);观察组小鼠平均抑瘤率为(68.2±5.3)%;观察组移植瘤中VEGF蛋白表达及VEGF mRNA表达分别为(22.6±5.9)、(98.7±8.2),均明显低于对照组的(58.5±6.4)、(138.7±5.2),组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 放射性125I粒子植入可显著抑制肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长,抑制VEGF表达可能是其主要作用机制.     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.     

Survivin反义寡核苷酸诱导人胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡的研究

目的研究survivin反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人胃癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响,并探讨其诱导人胃癌移植瘤凋亡的分子生物学机制。方法建立SGC-7901胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,即survivin-ASODN+脂质体组、survivin-ASODN组、脂质体组和空白对照组(蒸馏水)。瘤体内隔日给药,停药后48小时处死裸鼠,剥离瘤组织,称取瘤重,计算抑瘤率。western-blot法检测各组凋亡相关蛋白survivin、Caspase-3蛋白的表达。结果 survivin-ASODN+脂质体组的移植瘤生长速度明显减慢,其抑瘤率为:33.19%。survivin-ASODN+脂质体组的survivin蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05),Caspase-3蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论 survivin反义寡核苷酸转染胃癌移植瘤能够明显抑制肿瘤生长,其主要机制与降低survivin蛋白的表达,诱导Caspase-3高表达,从而促进肿瘤细胞凋亡有关。     

5-氟尿嘧啶缓释剂瘤内植入治疗胰腺癌的实验研究和临床研究(英文)

目的纲察5-氟尿嘧(5-FU)缓释剂对荷胰腺癌裸鼠肿瘤细胞及胰腺癌患者血清肿瘤标记物和细胞免疫的影响。方法(1)5-FU缓释剂的体外释放实验和体外抑瘤实验。(2)将荷胰腺癌细胞株PC3裸鼠60只,姑且机分成静脉对照组(A组)、5-Fu缓释剂植组(E组)治疗前、后14D测肿瘤大小。治疗2周后观察肿瘤组织学变化。免疫组化法测定bcl-2和Bax的蛋白表达水平;TUNEL法检测凋亡指数(AI)。(3)手术探查不能切除之胰腺癌69例随机分成3组。将5-FU缓释剂瘤内植入治疗组、术后行5-FU静脉化疗组和对照组。分别于术前1d和术后第14天采血,测定各组血清中NK细胞,T细胞亚群和CEA,CA50 ,CA19-9 ,CA242血清肿瘤记物水平。结果5 mg 5-FU缓释剂第1天释放量最大,为0 .85 mg,第3天为0 .45 mg,其后在0 .25 mg水平维持稳定的缓慢释放;释放时间长达14d以上。5-FU缓释剂第1天的浸出液对人胰腺癌细胞株PC-3的抑制率达60 .27 %,第3天为34 .25 %,以后稳定在25 %左右。5-FU缓释剂瘤内注谢治疗组裸鼠移植瘤生长速度减慢,bcl-2ad基因表达明显低于其他各组,而Bax基因表达明显高于其他各组,肿瘤细胞的AI明显高于其他各组。D组和E组肿瘤组织中炎症反应和血管内膜增厚程度明显高于其他各组。术后治疗组CD4+/CD8+和NK细胞水平高于静脉5-FU化疗组,而血清中上述5种肿瘤标记物低于对照组和静脉化疗组。结论5-FU缓释剂能在2周内在体外较稳定地特续释放,对人胰腺癌细胞株PC-3有持续抑制作用。该剂瘤内注射可明显抑制荷胰腺癌瘤裸鼠瘤体的生长,其作用机与药物在肿瘤组织中引起的炎症反应和血管内膜增厚等因素有关;并可能与诱导肿瘤细胞的凋亡有关。该剂植入胰腺癌实体内,能明显降低5种血清肿瘤标记物水平,同时对患者的细胞免疫功能影响较小,5-FU缓释剂可望成为治疗不能切除之胰腺癌的较好的制剂。     

门静脉灌注化疗联合5-氟尿嘧啶缓释剂区域性植入治疗进展期胃癌疗效观察

目的观察门静脉灌注化疗联合5-氟尿嘧啶(5-FU)缓释剂区域性植入治疗进展期胃癌的疗效。方法选取2007年10月—2009年3月我科诊治的进展期胃癌患者136例,根据是否进行术中门静脉灌注化疗或5-FU缓释剂区域性植入,分为门静脉灌注化疗联合5-FU缓释剂区域性植入组37例(A组),单纯5-FU缓释剂区域性植入组34例(B组),单纯门静脉灌注化疗组33例(C组),单纯手术对照组32例(D组)。各组患者均根据肿瘤部位和侵犯程度行标准D2根治性手术,术后4周统一行5-FU、奥沙利铂(OXA)、亚叶酸钙(CF)方案(FOLFOX6方案)化疗6个周期。观察各组出现的并发症及不良反应情况,血常规及肝肾功能变化。各组患者定期复查并随访3年,了解其肝转移或局部复发情况,记录患者3年生存率。结果术后各组患者均完成了随访,无失访病例。A组肝转移或局部复发率为10.8%(4/37)、B组为29.4%(10/34)、C组为30.3%(10/33)、D组为56.3%(18/32),差异有统计学意义(χ2=16.670,P<0.05);其中A组肝转移或局部复发率低于B组、C组和D组,差异均有统计学意义(χ2值分别为3.873,4.142和16.313,P<0.05);B组和C组肝转移或局部复发率低于D组,差异均有统计学意义(χ2值分别为4.861和4.461,P<0.05)。A组3年生存率为91.9%(34/37)、B组为73.5%(25/34)、C组为72.7%(24/33)、D组为46.9%(15/32),差异有统计学意义(χ2=17.352,P<0.05);其中A组3年生存率高于B组、C组和D组,差异均有统计学意义(χ2值分别为4.254,4.510和16.894,P<0.05);B组和C组3年生存率高于D组,差异均有统计学意义(χ2值分别为4.905和4.524,P<0.05)。各组均有并发症及不良反应发生,但A、B、C组未影响术后化疗,且血常规及肝肾功能无明显异常。结论门静脉灌注化疗联合5-FU缓释剂区域性植入治疗可显著降低进展期胃癌患者肝转移或局部复发率,提高其3年生存率,效果优于单纯门静脉灌注化疗或5-FU缓释剂区域性植入,且操作简单、定位准确、安全可行,值得临床推广应用。     

Survivin在人乳腺癌裸鼠移植瘤中的表达及As2O3处理后表达变化

目的探讨Survivin在人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤中的表达及As2O3的抑制作用.方法复制人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤模型,抽签法随机分为阴性对照(生理盐水)组、阳性对照(DDP 1.5 me/kg)、实验1组(As2O3 1.5me/kg)、实验2组(As2O3.0 mg/kg),用原位杂交、免疫组化法分别检测瘤组织中survivin mRNA及survivin、caspase-3蛋白的表达.结果阴性(生理盐水)对照组中,survivin mRNA、survivin蛋白均主要呈中度阳性表达,其阳性表达分别为82.42%、78.85%;实验组1、实验组2中度阳性表达随着As2O3剂量的增加而下降(P＜0.01),二组的survivin mRNA、survivin蛋白阳性表达分别为25.96%、6.90%和18.00%、5.85%,与阳性和阴性对照组的表达比较呈明显下降趋势.原位杂交、免疫组化法检测结果一致.而caspase-3蛋白的阳性表达与survivin相反.结论 Survivin在人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤中高表达,而As2O3有显著抑制其高表达的作用,且呈剂量依赖性.