上皮间质转化与恶性肿瘤的转移和侵袭

上皮细胞间质化(EMT)与恶性肿瘤的局部浸润及远处转移有着非常密切的关系。在EMT过程中,细胞表面上皮标志物E-钙黏蛋白表达下调,间质标志物波形蛋白、N-钙黏蛋白表达上调是其主要标志。本文就恶性肿瘤EMT机制的最新研究进展作一综述。     

上皮间质转化在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌（PCa）是一种最常见的恶性肿瘤,据2010年美国癌症协会估计每年新发病例在各种肿瘤中最多,死亡率仅次于肺癌。未发生远处转移的PCa患者的5年生存率已接近100％,但是,发生转移的PCa患者的预后很差。因此研究肿瘤转移的机制尤其是肿瘤细胞如何从原位脱离就显得非常重要。在本文中,我们将讨论目前最流行的转移机制上皮间质转化的作用及其在PCa转移中的潜在作用。我们也将进一步讨论了间质上皮转化及其在肿瘤转移中的作用,最后是两者的相互作用在肿瘤转移全过程中的作用。     

上皮间质转化与肿瘤转移研究进展

上皮细胞间质转化是一种基本的生理病理变化,其在胚胎发育、慢性炎症、纤维化和肿瘤浸润转移中发挥重要作用。近年来,人们发现EMT与肿瘤的发生及转移可能存在关联,使其迅速成为肿瘤研究的焦点。对于EMT的研究不但能进一步了解其影响肿瘤的机制,而且可促进EMT生物标记物及靶向治疗的研究,这对侵袭性肿瘤的诊治具有重大意义。1 EMT概述     

转化生长因子β1对间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌腹膜转移的影响

目的：观察转化生长因子β1（TGF-β1）对腹膜间皮细胞上皮-间质表型转化的调控及对胃癌细胞腹膜转移的影响。方法 TGF-β1作用人腹膜间皮细胞系HMrSV5,倒置显微镜下观察间皮细胞形态学变化。采用Western-blot检测上皮细胞表型蛋白（细胞角蛋白和E-钙黏素）、间皮细胞表型蛋白（α-SMA和弹性蛋白）及Smad2蛋白水平的表达情况。采用黏附试验观察表型转化间皮细胞对胃癌细胞系HSC-39黏附的影响。间皮细胞（8×104／孔）与胃癌细胞系HSC-39（4×104／孔）共培养,采用体外Transwell侵袭实验观察腹膜微环境变化对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果 TGF-β1作用腹膜间皮细胞24 h后部分细胞转变为狭长型,72 h后间皮细胞转变为典型纤维细胞样外观。TGF-β1作用间皮细胞可诱导弹性蛋白和α-SMA表达上调,细胞角蛋白和 E-钙黏素表达下降,并且呈现时间依赖性变化（P＜0．05）。 TGF-β1作用15 min后,间皮细胞内磷酸化Smad2表达开始升高,30 min达到顶峰,较对照组增加432％（P＜0．01）;但总Smad2表达则无明显变化（P＞0．05）。 TGF-β1作用72 h后,间皮细胞与HSC-39胃癌细胞的黏附率较对照组增加（146±17）％（P＜0．05）。胃癌细胞与TGF-β1刺激的间皮细胞共培养48 h后,平均每视野转移癌细胞数目为61．1±11．4,较对照组（31．9±8．1）明显增多（P＜0．05）。结论 TGF-β1能够诱导间皮细胞向成纤维细胞样转化,Smad2信号转导通路在间皮细胞表型转化中发挥重要作用;而这种腹膜微环境变化可增强胃癌细胞的黏附和侵袭能力,为癌细胞转移播散提供适宜的“土壤”环境。     

MicroRNA在胃癌上皮-间质转化中的研究进展

上皮-间质转化不仅参与正常胚胎发育过程中器官和组织的生成,而且也有助于提高癌细胞的侵袭及转移.当上皮-间质转化受到刺激时,细胞和细胞之间黏附及极性由于黏附分子如E-钙黏蛋的消失而被打乱,导致细胞之间的相互作用发生改变,导致细胞发生间充质表型的改变,最终激活癌细胞的迁移和侵袭.研究证明部分转录因子、生长因子以及相关信号通路参与上皮-间质转化过程,而miRNA可通过调控癌基因或抑癌基因参与胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移过程,其中也涉及上皮-间质转化的调控.本文就近年来miRNA在胃癌EMT过程中的具体调控机制予以综述.     

上皮-间质转化及其调控基因Snail在肿瘤侵袭转移中的作用

上皮间质转化(EMT)和锌指转录因子Snail在肿瘤的侵袭和远处转移过程中起重要作用。笔者就两者在肿瘤侵袭转移中的作用结合文献进行综述。     

胃癌患者外周血循环肿瘤细胞上皮间质转化的研究进展

胃癌转移是导致胃癌相关死亡的首要原因，循环肿瘤细胞的形成是实现肿瘤血行转移的最初阶段，为最终形成肿瘤转移病灶提供了可能，循环肿瘤细胞检测对于癌症的早期诊断，疗效与预后的评估，个体化治疗的选择等方面具有重要的临床意义，上皮间质转化促进了肿瘤细胞转移的发生，通过综述胃癌患者外周血循环肿瘤细胞富集检测技术，分析胃癌患者原发灶、循环肿瘤细胞及转移灶发生上皮间质转化及间质上皮转化的上皮间质标志物的表达情况，探究胃癌转移可能的发生途径和模式。     

上皮-间充质转变的概念变迁及与肿瘤转移研究进展

上皮-间充质转变(EMT),即上皮细胞向间充质细胞表型转变的生物学过程。越来越多的研究发现并证实EMT在肿瘤转移的启动到完成各步骤中均起到关键作用,是转移的标志性事件之一,有望成为新型靶向治疗的重要方向。然而,无论国内外研究,EMT的命名、定义及在转移中的具体价值和作用机制均有不少混淆和争议之处。因此,有必要围绕EMT的概念变迁及与肿瘤转移的最新研究进展做一介绍。     

Smad4在TGF-β诱导人胆管癌细胞上皮-间质转化中的作用

目的 探讨Smad4在TGF-β诱导人胆管癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 用转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理RBE人胆管癌细胞系24h后,观察其形态变化,采用Western Blotting检测TGF-β1处理0h、12h、24h、48h后RBE细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达.通过RNA干扰技术建立稳定干扰Smad4表达的细胞系,在无TGF-β1处理或TGF-β1处理24h后,观察Smad4干扰组与野生型组和空载体组细胞的形态差异,Western Blotting检测各组N-cadherin和E-cadherin的表达水平.结果 TGF-β1诱导RBE细胞的形态由上皮样向间质样转变,促进 N-cadherin表达增加和E-cadherin表达降低.在无TGF-β1处理时,Smad4干扰组细胞比野生型组和空载体组细胞的形态更趋于上皮样,E-cadherin表达水平也显著高于野生型组和空载体组(P＜0.05).在TGF-β1处理24h后,Smad4干扰组细胞形态的间质样变化程度、N-cadherin表达量明显低于野生型组和空载体组(P＜0.05);野生型组和空载体组细胞E-cadherin的表达缺失,而Smad4干扰组细胞仍表达较高水平的E-cadherin,两者间差异显著(P＜0.05).结论 TGF-β依赖Smad4介导人胆管癌细胞发生上皮-间质转化.     

上皮间质转化与肝细胞癌肺转移的相关性研究

目的 研究上皮间质转化和肝细胞癌肺转移的关系.方法 2000年1月至2004年3月于中山医院肝外科手术病理诊断为肝细胞癌的患者中,根据术后随访期内有无肺转移分为有肺转移组和无远处转移组,每组随机选择50例患者的原位肝癌组织制成组织芯片.用免疫组织化学染色(二步法)方法检测组织芯片上肺转移组和无远处转移组患者的肝痛组织的上皮间质转化的标志(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin),单因素和多因素分析这些标志和肝细胞癌肺转移的关系.结果 单因素分析了性别、年龄、HbsAg、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤大小、数目、癌栓、包膜、肝门淋巴结、肿瘤分化程度、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibroneetin)的表达与肺转移的相关性,结果显示:患者AFP水平>400 ng/ml、肿瘤直径>10 cm、门静脉癌栓、分化程度低、E-cadherin的低表达、Fibronectin的高表达、Vimentin的高表达与肝细胞癌肺转移相关;多因素分析显示肿瘤直径>10 cm、门静脉癌栓、分化程度低、Fibronectin高表达是肝细胞癌肺转移的危险因素.结论 肝细胞癌患者肝癌组织的上皮间质转化与其发生肺转移有密切关系.     

上皮间质转化在结直肠癌侵袭转移中的作用机制

上皮间质转化是在一定的微环境中,上皮细胞向间质细胞转化的现象,从而获得间质细胞不易黏附、运动能力增强、抗凋亡等特性.在胚胎发育和肿瘤发展过程中均发现上皮细胞向间质细胞转化的现象.研究表明,上皮间质转化在结直肠癌侵袭转移过程中发挥着重要作用,其作用机制涉及多种信号通路和相关分子.     

胰腺癌放、化疗抵抗诱导上皮间质转化

目的：探讨对放、化疗抵抗的胰腺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)的意义。
方法：采用健择化疗同期进行放疗对多株人胰腺癌细胞系进行干预,持续2周左右,杀死约90%左右的各细胞系细胞,获得放疗、化疗抵抗的胰腺癌细胞。高倍显微镜下观察细胞形态学变化。transwell小室试验检测细胞侵袭力。利用Western-blot检测上皮表型标志物E-cadherin(E-cad)和间质表型标志物波形蛋白(vimentin)的表达。
结果：放、化疗抵抗的胰腺癌细胞发生与EMT相符的形态学改变:细胞呈纺锤体状,极性消失,并出现伪足;放、化疗抵抗的3株胰腺癌细胞侵袭力增强,其穿过小孔的数目增加(均P﹤0.05);E-cad表达下降,vimentin表达上调。
结论：放、化疗抵抗的人胰腺癌细胞发生EMT,其与胰腺癌治疗抵抗有关。     

上皮-间质转化在肝癌非手术治疗后促进残癌侵袭、转移的研究进展

上皮-间质转化(EMT)以上皮表型的缺失伴随上皮间质特性的获得为主要特征。上皮-间质转化现象与肝癌非手术治疗后残癌的侵袭、转移能力增加关系密切。本文对近年来有关EMT在各种肝癌非手术治疗后,促进残癌侵袭、转移的研究进展进行综述。     

不同前列腺癌细胞系及其皮下肿瘤上皮间质转化特性鉴定

目的:通过比较不同人前列腺癌细胞系在SC ID鼠皮下成瘤特性,鉴定前列腺癌细胞系及其皮下肿瘤上皮、间质标志蛋白的表达情况,探讨前列腺癌细胞系成瘤过程与上皮-间质转化(EMT)之间关系。方法:将DU145、Tsu、PC3和LNCaP 4种人前列腺癌细胞系分别接种于SC ID鼠皮下,比较其成瘤特性;用W estern印迹法鉴定人前列腺癌细胞系及其相应皮下肿瘤钙粘蛋白、波形纤维蛋白的表达,并比较其成瘤前后的区别,探讨上皮间质转化与成瘤的关系。结果:EMT阳性细胞(DU145和Tsu)成瘤率、成瘤速度高于EMT阴性细胞(PC3和LNCaP),4种细胞系成瘤的上皮性的标志蛋白钙粘蛋白表达出现不同变化:DU145表达下调,PC3、LNCaP表达缺失,Tsu表达上调,共同特点是间质性的标志蛋白波形纤维蛋白表达消失。结论:EMT阳性细胞成瘤能力高于EMT阴性细胞,皮下肿瘤的形成过程中的确存在间质-上皮转化(MET)现象。     

CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的研究

目的观察胃癌细胞CDl33表达与胃癌侵袭的关系,进而探讨其是否通过上皮间质转化（EMT）促进胃癌侵袭和转移。方法通过免疫磁珠分选技术,将KATO-Ⅲ细胞分为CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞,利用Transwell小室法检测其侵袭能力,并通过Western blot和RT-PCR方法检测siRNA干扰CDl33基因沉默前后其EMT相关因子的表达差异。Western blot法检测50例胃癌组织及癌旁组织CDl33和EMT相关因子的表达．并分析其相关性。结果CDl33阳性组穿膜细胞数（67．7±10．5）显著高于CDl33阴性组（13．3±6．8,P=0．001）。CDl33阳性细胞中Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达显著高于CDl33阴性细胞．而E-cadherin表达则明显低于CDl33阴性细胞（均P〈0．05）。siRNA干扰后,Snail和N-cadherinmRNA及蛋白表达明显下调,而E-cadherin表达则显著上升（均P〈0．05）。胃癌组织中CDl33、Snail及N-cadherin蛋白相对表达为0．635±0．119、0．599±0．114及0．754±0．154,明显高于癌旁组织的0．485±0．116（P=0．029）、0．259±0．108（P=0．020）和0．329±0．134（P=0．001）,而E-cadherin蛋白表达相对表达为0．378±0．123,明显低于癌旁组织的0．752±0．156（P=O．003）。相关分析显示,Snail及N-cadherin的表达与CDl33表达呈正相关（P〈0．05）,而E-cadherin的表达则与CDl33表达呈负相关（P〈O．05）。结论CDl33阳性胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。     

细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用

目的：探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化（EMT）过程的相关性。 方法：采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织（研究组）与13例正常胰腺组织（对照组）中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。 结果：研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中Snail、Slug均不表达,E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.225,P=0.025）,与vimentin表达呈正相关（r=0.493,P<0.01）;Slug表达与vimentin表达呈正相关（r=0.358,P=0.001）。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关（均P<0.01）。 结论：Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用,是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。     

肿瘤起始细胞及上皮-间质转化在肿瘤转移及耐药中的作用

目的总结肿瘤起始细胞(tumor initiating Cells,TICs)和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及其在肿瘤转移和耐药中的研究现状。方法检索近年来国内外有关TICs和EMT及其与肿瘤转移和耐药关系的文献并做综述。结果 TICs是肿瘤细胞中一小群具有自我更新、高度增殖及多向分化能力的细胞,表达多种表面标志物,如CD133、CD44等,在肿瘤的侵袭、转移和耐药中起着重要的作用。EMT是肿瘤上皮细胞失去极性转变为间质细胞的一种现象,常见于胚胎发育及组织修复,能够促进肿瘤的侵袭、转移以及逃避宿主的免疫反应,EMT可能是TICs所致肿瘤转移和复发的根源。靶向TICs或EMT的治疗可能有效预防肿瘤的复发及改善患者的预后。结论 EMT是TICs致肿瘤转移及耐药的重要机理,对于TICs和EMT的研究可用于探索更有效的针对肿瘤的靶向治疗策略。     

胃癌细胞奥沙利铂耐药与上皮-间质转化关系研究

目的：探讨胃癌细胞奥沙利铂（oxaliplatin,L-OHP）耐药与上皮-间质转化（EMT）的关系。 方法：采用逐步递增L-OHP浓度持续体外诱导人胃癌SGC-7901细胞,建立L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP;通过形态学、群体倍增时间、药物敏感性检测确定SGC-7901/L-OHP成功建立;比较SGC-7901/L-OHP细胞与亲代细胞EMT相关标记物N-cadherin和E-cadherin表达差异。 结果：经6个月诱导,L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP成功建立,表现为该细胞的形态由上皮表型转变为间质样细胞表型;群体倍增时间较亲代细胞明显延长（P<0.05）;L-OHP的IC50为亲代细胞的9.7倍。与亲代细胞SGC-790比较,SGC-7901/L-OHP细胞中N-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调,E-cadherin mRNA和蛋白表达明显下调（均P<0.05）。 结论：EMT可能是人胃癌细胞对L-OHP产生耐药的重要机制。     

miR-21在TGF-β1引起的肝卵圆细胞上皮间质转化中的作用

[摘 要] 目的 探讨microRNA-21（miR-21）在TGF-β1引起的肝卵圆细胞（hepatic oval cell,HOC）上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）中的作用。方法 体外培养大鼠肝卵圆细胞,用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后,Western blotting检测EMT相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和Vi-mentin）表达情况;用10 ng/mL TGF-β1刺激HOC 5 d后,实时荧光定量PCR检测miR-21的表达情况;分别用miR-21增强和抑制慢病毒转染HOC构建稳定的细胞株,PCR检测miR-21的表达情况;接着用TGF-β1刺激miR-21抑制慢病毒转染的HOC 5 d,Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达;用miR-21增强慢病毒转染HOC后,Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。结果 TGF-β1刺激HOC 1、3、5、7 d后,E-cadherin逐渐减低,N-cadherin和Vimentin逐渐升高。TGF-β1刺激HOC 5 d后miR-21的表达增强了4.32倍。分别用增强和抑制慢病毒转染HOC后,miR-21的表达增强了3.82倍和抑制了0.22倍。下调miR-21表达后,TGF-β1致HOC的EMT作用减弱。miR-21过表达后,HOC发生了EMT。结论 抑制miR-21的表达可以减少TGF-β1引起的HOC的EMT作用,从而减轻肝纤维化。     

上皮-间质转化在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌(PCa)是老年男性常见疾病,其发病率居西方国家男性恶性肿瘤第2位。近年来,我国的发病率呈上升趋势。肿瘤的转移是导致前列腺癌患者死亡的主要原因。在肿瘤的发生发展过程中,浸润区肿瘤细胞与其微环境相互作用,经历上皮-间质转化(EMT),最终出现远处转移。因此研究EMT在前列腺癌发生发展中的作用,对前列腺癌治疗有重要意义。本文主要参考近3年相关的文献,以治疗靶点为方向,对促进前列腺癌EMT的因素,作一综述。