特发性间质性肺炎蛋白质组学初步研究

目的应用蛋白质组学的方法筛选出特发性间质性肺炎(IIP)相关蛋白质,为阐明IIP的发病机制和预后提供理论依据。方法收集8例通过小切口开胸肺活检获取的新鲜肺组织及5例远离肺部良性病变的肺组织,提取组织总蛋白,运用固相PH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2-DE)技术分离组织总蛋白,图象分析软件识别差异表达的蛋白质点,运用基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获取肽质量指纹图谱(PMF),检索数据库鉴定差异表达的蛋白质点,明确其生物学功能。结果建立双向电泳图谱,质谱分析鉴定出7个差异表达的蛋白质,分别为热休克蛋白70、膜联蛋白Ⅱ和触珠蛋白等。结论建立了重复性较好的IIP与正常肺组织的双向电泳图谱,并鉴定出一些与IIP发病机制相关的蛋白质,为进一步寻找IIP特异分子标志物和靶向治疗打下坚实的基础。     

发展蛋白质组学为基础的乳腺癌诊断学的探索

在过去的十余年里,多种基因组学和组织学技术加快了新的乳腺癌诊疗模式的发展,对患者进行分子水平诊断和个性化治疗成为今后的发展趋势.与基因组学和组织学技术快速发展相比较,用于指导乳腺癌的筛查和治疗的肿瘤标志物研究进展却微乎其微,尤其是对血清或组织中乳腺癌特异性标志物的检测.该文就基因组学与蛋白质学在乳腺癌分子诊断学应用进展中存在巨大差距的潜在原因,以及改进蛋白质组学研究设计的策略予以综述.     

重症肌无力患者胸腺增生组织中11000条带的蛋白质组学分析

目的:探讨重症肌无力(MG)患者胸腺增生组织中相对分子质量为11000差异(异常)条带的蛋白质组成。方法:采用非还原性SDS-PAGE制备型电泳对11000条带进行筛选和富集;应用双向电泳得到蛋白质二维图谱,并对差异蛋白点进行质谱分析;应用免疫组化法比较20例MG胸腺增生组织和10例正常对照组织中4.1R蛋白的表达水平。结果:MG患者胸腺增生组织中目标条带的阳性率为72.7%(8/11),该条带由(30±6)个蛋白点组成,质谱分析显示有16个高表达差异蛋白点,其中3个蛋白得到鉴定,分别为4.1R蛋白、自整合抑制因子1和胆碱乙酰转移酶。免疫组化结果显示,与正常对照组的(0.98±0.18)相比,MG患者胸腺增生组织中4.1R蛋白表达水平为(1.55±0.46)明显增高(t=3.054,P=0.016)。结论:MG胸腺增生组织11000条带由多个蛋白点构成,这些蛋白主要功能涉及细胞骨架的组成、细胞内信息传递和乙酰胆碱合成等。     

脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证蛋白质组学比较研究

目的 建立脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清双向凝胶电泳图谱,初步分析其差异蛋白质表达情况.方法 双向凝胶电泳(2-DE)分离脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清标本,考马斯亮兰染色,PD-QUEST图像分析系统分析,从凝胶中选取分离较好的蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质,对差异蛋白质进行组间对比.结果 获得了分辨率较好的脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证双向凝胶电泳图谱,质谱分析了29个差异蛋白质点,获取了87张肽质量指纹图谱,通过查询数据库鉴定了29个蛋白质,其中部分蛋白质与肝阳化风证及阴虚风动证发生发展有关.结论 建立了脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清双向凝胶电泳图谱,并应用质谱技术鉴定了部分差异蛋白质点,为脑梗死肝阳上亢证与阴虚风动证与正常组血清双向凝胶电泳图谱血清蛋白质组数据库的建立提供了有意义的数据,并认为蛋白质组学能在脑梗死不同证型具有代表意义.     

肺癌相关蛋白的筛选与鉴定

目的:应用蛋白质组学方法筛选肺癌相关蛋白,为阐明肺癌发生的分子机制和预后研究提供理论依据. 方法: 收集8例手术切除的新鲜肺癌组织及同一患者手术切缘的癌旁组织,提取可溶性总蛋白. 应用等电聚焦(IEF)电泳和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰凝胶电泳(SDS-PAGE)技术将可溶性总蛋白分离,得到肺癌的蛋白质组分析型双向电泳图谱,经PDQuest凝胶图像分析软件分析后找出差异蛋白点. 胶内酶解差异表达的蛋白点,基质辅助电离解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)获得肽质量指纹图谱(PMF),搜寻蛋白质数据库,并运用生物信息学鉴定蛋白质,分析蛋白的生物学意义和生物学功能,作为肺癌标志物的候选蛋白. 结果: 分别将8例肺癌组织及配对的癌旁组织可溶性总蛋白经过重复3次双向电泳,建立了肺癌组织蛋白质表达谱. 经PDQuest凝胶图像分析软件进行分析后, 12个蛋白质斑点只在肺癌组织有表达;6个蛋白质斑点只在癌旁表达. 对高丰度的肺癌特异表达的蛋白点进行鉴定,结果表明这些特异蛋白分别为钙粒蛋白B,Calgizzarin,载脂蛋白A-I,载脂蛋白E,Ras相关蛋白Rab-14,亲环素. 结论: 建立了人肺癌组织和癌旁组织的双向电泳图谱,为建立相应的蛋白质数据库提供了基础数据;鉴定了钙粒蛋白B等肺癌相关蛋白质,为进一步寻找肺癌蛋白标志物奠定了基础,对阐明肺癌发生的分子机制和预后研究有重要理论意义.     

人宫颈癌组织及癌旁正常组织蛋白质组的比较研究

目的:构建人宫颈癌组织及癌旁组织双向凝胶电泳图谱,筛选差异表达的蛋白质.方法: 人宫颈癌组织及癌旁正常组织标本10例,应用固相pH梯度双向凝胶电泳后,ImageScanner扫描图像、ImageMaster 2-DE Elite4.01软件分析识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪得到相应的肽质指纹图谱,联网ExPASY网站查询相关数据库鉴定获得的差异蛋白质点.结果: 癌组织和癌旁正常组织凝胶的平均蛋白质点数分别为1285±85和1063±76,凝胶上蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦方向的偏差是(1.78±0.18) mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.89±0.21) mm;比较10例宫颈癌组织及癌旁正常组织的双向凝胶电泳图谱,未匹配总点数为156±18,对31个差异蛋白质点进行肽质指纹图分析,初步鉴定了8个与肿瘤基因、细胞周期调控、信号转导等有关的蛋白质.结论: 建立了分辨率高且重复性较好的人宫颈癌组织与癌旁正常组织的双向凝胶电泳图谱,并成功鉴定出部分与宫颈癌癌变相关的差异表达的蛋白质,为筛选宫颈癌特异性的诊断分子标志物奠定了的基础.     

MALDI-TOF MS直接鉴定腹水培养阳性样本的研究

目的 探讨用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定腹水培养阳性病原菌的方法.方法 收集2016年9～11月培养阳性的腹水标本202瓶,差速离心法富集菌体,利用MALDI-TOF MS对菌液进行直接鉴定.结果 202瓶样本中,196瓶为单菌株感染,6瓶为混合菌感染.单菌株感染中,菌株的种、属鉴定符合率分别为77.6％和93.4％.其中革兰阴性菌的种、属鉴定符合率为75.9％和91.1％;革兰阳性菌的种、属鉴定符合率为80.2％和95.3％;真菌的菌种、属鉴定符合率为12.5％和50.0％.6瓶混合菌感染样本,均鉴定出其中一种菌.结论 利用MALDI-TOF MS直接鉴定腹水培养阳性样本中的病原菌,鉴定准确率高,检测时间短,为腹腔感染的快速诊断提供了有力的检测手段.     

人类脑脊液的蛋白质组学研究

脑脊液成分的改变可精确地反映疾病的病理过程。蛋白质组学研究方法的出现为分析脑脊液的蛋白质组成提供了一个很好的平台。文章综述了用于脑脊液蛋白质组学分析的方法,以及利用这些方法对脑脊液蛋白质组成进行研究的进展,包括脑脊液样本的准备、二维凝胶电泳、质谱分析技术、蛋白质组学的生物信息学、脑脊液的比较蛋白质组学、脑脊液的功能蛋白质组学等。     

人类脑脊液的蛋白质组学研究

脑脊液成分的改变可精确地反映疾病的病理过程.蛋白质组学研究方法的出现为分析脑脊液的蛋白质组成提供了一个很好的平台.文章综述了用于脑脊液蛋白质组学分析的方法,以及利用这些方法对脑脊液蛋白质组成进行研究的进展,包括脑脊液样本的准备、二维凝胶电泳、质谱分析技术、蛋白质组学的生物信息学、脑脊液的比较蛋白质组学、脑脊液的功能蛋白质组学等.     

大鼠脊髓横断后难溶部分的蛋白质组学研究

本实验研究了大鼠脊髓全横断后不同时间点沉淀物中的蛋白质组变化。通过运用双向电泳、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱、串联质谱及肽质量指纹图谱方法,我们鉴定了44个蛋白．其中大部分为膜蛋白和／或细胞器蛋白。这些蛋白主要在代谢（75％）、发育（30％）和应激（30％）过程中起着正向或负向的调控作用。     

Localization of epileptic foci in Children with childhood absence epilepsy by magnetoencephalography combined with synthetic aperture magnetometry

This present study was aimed to investigate the localizable diagnostic value of magnetoencephalography (MEG) combined with synthetic aperture magnetometry (SAM) in childhood absence epilepsy (CAE).Thirteen CAE patients underwent MEG detection at resting state and after hyperventilation,and then the epileptic foci were located by SAM.In the thirteen CAE patients,epileptic foci were found in five cases (38.5%),and they were all located in the bilateral frontal lobe,suggesting that the frontal lobe in some CAE...     

PET-CT脑3D显像在癫痫定位中的临床应用价值

目的:研究18F-FDG PET脑3D显像对致痫灶定位的应用价值。方法:癫痫患者13例,继发性癫痫4例,原发性癫痫9例。皆行18F-FDG脑三维PET显像,通过目测和半定量方法分析图像。所有患者均行EEG检查,其中2例行皮层脑电图(EcoG)或深部脑电图(DEEG);12例行脑MRI或CT检查。结果:PET阳性表现为低代谢灶者检出率为92.3℅(12/13例),明显高于EEG和脑MRI/CT(分别为92.3℅、69.2℅和33.3℅,χ2分别为14.3和35.0,P均<0.01)。单病灶检出率PET明显高于EEG(分别为61.5℅和38.4℅,χ2=23.1,P<0.01)。与皮层脑电图(EcoG)或深部脑电图(DEEG)相比较,PET对致痫灶的检出灵敏度为95℅,定位准确性为89℅。结论18F-FDG PET在致痫灶的检出及定位方面有较高的灵敏度和准确性;在引导癫痫外科手术及放射定向治疗方面有较好的实用价值。     

结节性硬化症伴顽固性癫痫脑电图分析及术前定位

目的：探讨结节性硬化伴顽固性癫痫的脑电图特点及术前痫灶定位．方法：回顾性分析了37例（其中30例行手术治疗）结节硬化所致顽固性癫痫的多导多形式脑电图特点并结合临床、影像学及发作期ECT等综合定位．结果：局灶性放电（单灶）4例,一侧双灶7例,一侧多灶或双侧改变以一侧优势的17例,双侧镜灶1例,双侧双灶3例,双侧弥散性放电5例．28例患者可定侧,并与影像学检查、临床发作相一致．术中行皮质及深部电图探测,证实了术前定位．本组随访1—6年,平均3．5年．30例患者中有16例获得Ⅰ级（Engel分级）,7例获得Ⅱ级,5例为Ⅲ级,2例Ⅳ级．平均智商（IQ）从术前的55．4分提高到64．1分．结论：结节硬化伴顽固性癫痫EEG放电广泛,双灶或多灶性改变为主,大部分可通过多形式多导联脑电图定位,找出痫灶放电优势侧,并结合临床表现、影像学改变及发作期ECT等,找出原发痈灶并予以手术切除,可获得良好的治疗效果．     

顽固性癫痫的致痫灶三维定位和综合手术治疗

目的研究顽固性癫痫的外科治疗方法。方法应用三维痫灶精确定位诊疗计划系统对74例顽固性癫痫患者进行术前、术中致痫灶三维精确定位,采用癫痫外科综合手术方案处理致痫灶、致痫网。结果术中64导皮层电极及8导深部电极检测证实三维痫灶精确定位诊疗计划系统定位准确可靠,随访疗效评估满意率达71.6%,总有效率达94.6%,术后正常神经功能保持良好,无明显并发症。结论三维痫灶精确定位和癫痫外科综合手术方式是外科治疗顽固性癫痫的较好方法。     

Murine brain tissues with human cytomegalovirus infection: a proteomic study

To establish two-dimensional electrophoresis profiles with high resolution and reproducibility from murine brain tissues by human cytomegalovirus（HCMV） infection and paired murine brain tissues and to identify the differential expression proteins. Methods： Forty Kunming mice were randomly divided into infection group （20） injected with HCMVAD169 and control group （20） injected with saline into their brain. After 30 days, the murine brain tissues by HCMV infection and paired murine brain tissues were separated by two-dimensional gel electrophoresis（2-DE）, analyzed by Image Master 2D software, and identified by peptide mass fingerprint（PMF） and database searching, and make Western blotting analyses the differential expression of individual proteins. Results： Well resolved, reproducible 2-D maps of the above tissues were obtained. Some of the different proteins identified by mass spectrometry（MS） were matched in the SWISS-2D PAGE database, Western blotting analyses were further carried out to verify the differential expression of individual proteins. Conclusion： These data will be valuable for studying the diagnosis of disease at an early stage, mechanisms of pathogenic and the key to the development of anti-HCMV medicine.     

Functional localization of epileptic foci in cats using manganeseenhanced MRI

Objective： To determine the encephalic region correlated with epilepsy by manganese-enhanced MRI （MEMRI） and determine the correlation of epilepsy with calcium overloading. Methods： The cats were divided into two groups. The first group underwent EEG examination and ethological observation. The second group underwent MEMRI measurement. Signal enhanced encephalic regions were sectioned. Results： The achievement ratio of convulsive cats intramusclelarly injected with PTZ was 80%. MEMRI showed diffuse signal enhancement in the cerebral cortex of the cats with generalized tonic-clonic convulsive seizures compared with control animals. The enhancement rate of frontal-parietal-occipital lobe was 34.6% and 22.9% in temporl lobe compared with the control groups. Signal enhancement on frontal-parietal lobe persisted for 24 h after epileptic seizures were induced. The neurons of enhanced encephalic regions showed obvious degeneration and necrosis. Conclusion： Seizures can be induced in cats by intramuscular injection of PTZ （55 mg/kg）. Frontal-parietal lobe is the correlated encephalic regions of epilepsy. MEMRI plays an important role in localizing and revealing pathogenesis of epileptic seizures.     

SPECT脑血流灌注显像对癫(疒间)灶的诊断价值

目的探讨SPECT脑血流灌注显像（rCBF）对癫痫灶的检出及定位价值。方法72例临床确诊的癫痫患者行发作间期rCBF检查，并同CT、MRI影像检查结果进行比较，对其中7例拟行立体放射（伽玛刀）治疗的患者行发作期rCBF检查，立体放射治疗后随访疗效。结果①癫痫患者rCBF、CT、MRI检查阳性率分别为83．3％（60／72）、38．9％（21／54）和52．6％（20／38），rCBF阳性率明显高于CT和MRI（P〈0．01）。②7例患者发作间期rCBF影像中见14个低血流灌注区，发作期见9个相对高灌注或明显高灌注区，将两期吻合的8个异常灌注Ⅸ确定为癫痫灶。③7例患者行立体放射治疗后，根据Engels疗效分级，Ⅰ级1例，Ⅱ级4例，Ⅲ级1例，Ⅳ级1例，6例有效。结论rCBF检查是一种检测癫痫的敏感技术，发作期与发作间期rCBF检查结合可较准确地定位癫痫灶。     

EEG和MEG在额叶癫痫致痫灶定位的价值

目的：评估脑电图（EEG）和脑磁图（MEG）在难治性额叶癫痫（FLE）致痫灶定位的价值,以提高术前定位的准确性。方法：16例FLE患者,根据临床发作表现、发作间期和发作期EEG、MRI、PET—CT的检查结果进行综合评估后致痫灶定位仍困难,再行MEG检查。其中9例行手术治疗,术中皮层脑电图（ECoG）和／或深部电极脑电图（DEEG）监测并验证术前定位的准确性。结果：本组发作表现、EEG、MRI、PET—CT能准确定位的比率分别为：18．75％、31．25％、25％、43．75％;MEG棘波源定位优于EEG,可局限在脑回水平;EEG记录的痫性波范围比MEG广,但棘波优势区与MEG结果一致;术中ECoG和／或DEEG监测结果证实MEG定位的准确性。结论：MEG是一种能准确定位FLE致痫灶的术前无创性检查技术,与EEG检查相结合,可全面反映FLE的电生理状态,为外科手术治疗提供帮助。     

偶极子定位系统在癫癎外科中的应用

目的 探讨偶极子定位(Dipole localization modeling，DLM)系统对致痫灶定位的价值。方法 对82例拟行癫痫病灶切除术的患者进行DLM和MRI检查，部分病人行SPECT／PET检查；79例手术病人的皮层或深部脑电图定位与术前DLM进行对比分析。结果 DLM检查与术中定位结果基本一致，且特异性好。结论 DLM是一种新型无创性痫灶定位方法，因其特异性定位优于影像学方法，在外科治疗顽固性癫痫的领域中具有极其重要的地位。     

Intracranial electroencephalography study in epileptic patients with dual pathology

Acommon dual pathology observed on presurgical magnetic resonance imaging (MRI) of epileptic patients is extrahippocampal lesions combined with mesial temporal sclerosis.The hippocampus was highly vulnerable to many types of insults.However,it is difficult to detect subtle hippocampal atrophy in some patients.The most reliable method to confirm epileptogenicity is chronic intracranial electroencephalography (EEG) monitoring.In this study,we recorded intracranial EEG signals in 11 patients with dual pathology.