糖尿病早期大鼠视网膜功能的电生理学研究

目的:观察糖尿病大鼠早期视网膜功能的改变,指导临床对糖尿病视网膜病变(DR)的防治。方法:用图形视网膜电图(PERG)和闪光视网膜电图(FERG)分别记录正常和链脲菌素诱导的糖尿病大鼠8周以内PERG-q波及FERG-b波潜时,并进行统计学分析。结果:糖尿病大鼠在1周时PERG-q波和FERG-b波的潜时与正常大鼠相比都显著延长(P<0.001),并且PERG-q波潜时在3天时就发生显著改变(P<0.001),早于FERG-b波潜时的改变(发生在1周)。结论:糖尿病大鼠早期在发现眼底可见的视网膜病变之前就有神经功能的异常,并且糖尿病对视网膜组织的损害首先是发生在神经节细胞,进而神经节细胞以前的视网膜功能受损。     

实验性糖尿病大鼠性激素水平的变化研究

本文用链脲佐菌素（ＳＴＺ）复制了实验性Ｉ型糖尿病（ＩＤＤＭ）动物模型，给药两周后，糖尿病雌大鼠在动情间期血清Ｅ２水平较对照组显降低，Ｅ２／Ｔ比值下降，但血清ＦＳＨ，ＬＨ，Ｔ水平与对照组比较无差异。实验结果提示：ＩＤＤＭ雌鼠生殖功能异常可能与Ｅ２水平，Ｅ２／Ｔ比值降低有关。     

链脲霉素诱导糖尿病大鼠的早期视觉电生理改变

目的　观察糖尿病大鼠病程早期的视网膜电图变化 .方法　按照国际临床视觉电生理学会的标准化方案 ,采用 REPIport系统和银 -氯化银角膜电极以及不锈钢针状电极对链脲霉素诱导的糖尿病大鼠模型进行 2 wk的暗适应视网膜电图 (scot- ERG)、振荡电位 (OPs)、明适应视网膜电图(phot- ERG)和 30 Hz闪烁反应记录 (30 Hz flicker) .结果　大鼠 scot- ERG的 a波和 b波和 OPs的 O2 波的潜伏期 ,在 1wk时 [a波 (2 7.2± 1.9) ms,b波 (72± 6 ) ms,O2 波 (38± 4 )ms],与未打药时相比 [a波 (2 4 .1± 1.2 ) ms,b波 (6 4 .6±2 .9) m s,O2 波 (34.1± 1.6 ) ms],显著延长 ,2 wk时潜伏期继续增加 [a波 (2 8.4± 1.9) ms,b波 (76± 10 ) ms,O2 波 (41± 6 ) ms],幅值一直没有显著改变 .结论　视觉电生理学检查特别是 scot- ERG和 OPs波是早期诊断糖尿病视网膜病的可靠手段     

实验性糖尿病早期大鼠背根神经节一氧化氮合酶基因表达的变化

目的：观察糖尿病早期(2周)大鼠背根神经节(DRG)中一氧化氮合酶(nNOS、iNOS、eNOS)的表达变化以及胰岛素对其的影响。方法：按60mg／kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型(16只)，造模成功后随机分成2组(模型组和治疗组)，治疗组于造模成功后第2天开始给予胰岛素治疗，正常对照组(8只)与模型组予皮下注射同样体积的生理盐水。2周后取各组大鼠背根神经节，Trizol法提取总RNA，应用RT—PCR法测定3种NOS mRNA的表达。结果：在糖尿病早期大鼠DRG中，iNOS表达明显上调，胰岛素能有效逆转此变化。而nNOS和eNOS的表达无明显变化。结论：在早期糖尿病DRG中iNOS基因表达异常，可能与糖尿病外周神经病变的发生发展有关。     

视网膜电图振荡电位在糖尿病性视网膜病变早期诊断的价值

目的：探讨视网膜电图振荡电位（oscillatory potentials,OPs)在糖尿病性视网膜病变早期诊断中的价值，以及与糖尿病病程、血糖和血压的关系。方法：测定102例2型糖尿病患者的视网膜电图振荡电位，分析暗适应OPs的波幅及潜时，并将OPs、眼底荧光血管造影和检眼镜检查三者对糖尿病性视网膜病变的异常检出率进行比较；同时测定患者的血压、空腹血糖及糖化血红蛋白，与OPs进行相关分析。结果：在糖尿病性视网膜病变前期组，暗适应OPs总波幅、OPs各子波波幅（OP1－OP4）降低及OP1、OP2潜时延长，均与对照组有显著性差异（P＜0．01），且与糖尿病性视网膜病变各期有明显的相关性，其中以OPs总波幅的相关性最好；OPs、眼底荧光血管造影及检眼镜检查三者对糖尿病性视网膜病变的异常检出率依次为67．6％、52．9％和45．1％；OPs总波幅与血糖、病程、血压（包括收缩压和舒张压）均呈负相关。结论：暗适应OPs总波幅是目前诊断早期糖尿病性视网膜病变最敏感的指标，它不仅能早期发现病变，还能反映视网膜的进行性损害；及早发现和控制高血糖、高血压，对减少和延缓糖尿病性视网膜病变的发生发展有重要意义。     

糖尿病视网膜病变大鼠模型的实验研究

目的 建立和评价链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病视网膜病变大鼠模型.方法 用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,分为空白对照组、糖尿病组（1、3、5个月）,进行HE染色和电镜观察,测定视网膜神经节细胞平均个数.结果 糖尿病组大鼠出现血糖明显升高,组织学显示出现明显的糖尿病视网膜病变.视网膜神经节细胞平均个数：与空白对照组比较,糖尿病1个月组和糖尿病3个月组差异有统计学意义（P＜0.05）;糖尿病5个月组差异有统计学意义（P ＜0.000）.结论 链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜病变模型可以成为糖尿病视网膜病变研究的动物模型.     

实验性糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠模型的建立

目的:建立2型糖尿病合并动脉粥样硬化的大鼠模型。方法:选取48只成年雄性SD大鼠,其中38只制成T2DM模型,分成HD组(SD大鼠10只)、STZ组(T2DM大鼠15只)和STZ+HD组(T2DM大鼠23只),HD组和STZ+HD组喂以高脂饲料,STZ组喂以基础饲料,观察血糖、胰岛素、血脂水平和胰腺和胸主动脉病理变化。结果:第1、3、6个月末,STZ、STZ+HD组的FBG、BPG、胰岛素、血脂均明显高于HD组,差异有统计学意义(P<0.05),第3、6个月末,STZ+HD组的BPG、血脂明显高于STZ组,6个月STZ+HD组胰岛素水平较STZ组高,差异有统计学意义(P<0.05)。胰腺和主动脉病理学观察有显著改变。结论:腹腔注射STZ+高脂喂养可成功复制糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠模型。     

链脲佐菌素诱发性糖尿病大鼠早期视网膜病变模型的建立

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病(DM)大鼠早期视网膜的形态学改变,评价该方法作为早期糖尿病视网膜病变(DR)动物模型的可行性。方法 64只体质量(180±20)g的雄性SD大鼠随机均分为CON组、DM组(n=32),DM组按60mg/kg体质量腹腔注射1%STZ1次建立DM大鼠模型;CON组腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为对照。注射前DM组、CON组平均体质量、血糖水平差异均无统计学意义。DM成模后每周测量各组体质量、血糖等一般生理指标。成模后第10周,各组随机抽样对视网膜组织进行H-E染色、FITC-dextran灌注视网膜血管铺片及透射电镜超微结构观察。结果 STZ腹腔注射诱导DM成模率100%。STZ腹腔注射后,DM组体质量增加不明显,后期甚至有所减轻;CON组体质量逐步增长,10周时DM组体质量明显低于CON组[(169.9±26.9)gvs(439.2±23.5)g,P<0.001]。STZ腹腔注射72h后,DM组血糖明显高于CON组[(26.63±4.54)mmol/Lvs(6.37±0.49)mmol/L,P<0.001],至第10周DM组血糖均>16.7mmol/L,CON组保持在5.6～...     

持续高血糖对大鼠多焦视网膜电图影响的研究

目的:观察链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠在造模后6个月内的多焦视网膜电图变化情况,研究持续高血糖对大鼠视功能的损害.方法:SD大鼠采用STZ腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,选取造模成功20只大鼠,在造模前和造模后1周、2周、1～6月分别进行多焦视网膜电图记录评价.结果:随着高血糖状态的持续mfERG的N1波和P1波峰潜时有延长的趋势;而N1波和P1波的振幅随着高血糖状态持续而降低,其中P1波的反应密度变化明显.结论:STZ糖尿病大鼠在两周即可出现视功能的损害,并随着高血糖状态的持续而不断加重.     

糖尿病早期大鼠坐骨神经形态学的研究

目的研究糖尿病早期大鼠周围神经形态学变化，为糖尿病周围神经病变动物模型的确立提供客观理论依据。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠建立糖尿病模型，光镜及电镜下观察大鼠6周末坐骨神经病理形态学变化，并对坐骨神经横切面进行定量分析。结果DM大鼠6周时坐骨神经出现了明显的病理损害。光镜下见坐骨神经有髓鞘神经纤维空泡样变性、轴索肿胀。电镜下见严重脱髓鞘改变。病理图象分析结果与电镜结果相符。结论STZ诱导DM大鼠早期已出现明显的周围神经损害，符合糖尿病周围神经病变(DPN)的病理特点，说明DPN模型建立成功。     

生长抑素对糖尿病大鼠早期视网膜电图的影响

目的：探讨生长抑素对糖尿病(DM)大鼠早期视觉电生理改变的影响,阐明生长抑素对DM大鼠早期视网膜病变的治疗作用。方法：选取20只Wistar雄性大鼠作为研究对象,腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导建立DM大鼠模型后,随机分为生长抑素治疗组和模型对照组,每组10只。生长抑素治疗组大鼠腹腔注射生长抑素10 μg/kg/d,连续8周,模型对照组大鼠给予同体积生理盐水。另取Wistar雄性大鼠10只作为正常对照组。分别测定各组大鼠血糖及视网膜电图改变,并对各指标进行统计学分析。结果：与模型对照组比较,生长抑素治疗组大鼠8周时血糖水平下降 (P<0.05)。与正常对照组比较,生长抑素治疗组与模型对照组大鼠1、2、4、6和8周时杆细胞反应、最大反应的a波和b波的潜伏期均延长(P<0.05),幅值于第6和8周时下降(P<0.05);与模型对照组比较,生长抑素治疗组大鼠8周时杆细胞反应、最大反应的a波和b波的潜伏期缩短(P<0.05),生长抑素治疗组各观察时间点幅值均无改变(P>0.05)。结论：生长抑素对于DM大鼠早期视网膜病变具有治疗作用。     

链脲佐菌素联合烟酰胺诱导2型糖尿病大鼠模型的建立

目的：研究链脲佐菌素联合烟酰胺诱导2型糖尿病大鼠模型的方法。方法 Wistar大鼠隔夜禁食,腹腔注射烟酰胺60 mg/kg,15 min后腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg,在诱导后72 h、2周及4周观察大鼠行为、形态学改变,测量体重,空腹检测鼠尾静脉血糖,血糖大于11．1 mmol/L的大鼠即为诱导成功。结果诱导后的大鼠出现懒动、精神萎靡症状,与空白对照组相比体重下降（P＜0．05）、血糖上升（P＜0．05）;与单独使用链脲佐菌素诱导组相比体重上升（P＜0．05）、血糖较低（P＜0．05）。结论链脲佐菌素联合烟酰胺诱导糖尿病大鼠成功率高,是制备2型糖尿病大鼠模型的有效方法。     

MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜组织中的表达

目的：采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）法复制糖尿病大鼠模型,观察糖尿病模型大鼠不同时期视网膜组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达水平,阐明MMP-2在糖尿病大鼠糖尿病视网膜病变（DR）中的作用。方法：雌性SD大鼠分为正常对照组（n=24）、4周模型组（n=30）、6周模型组（n=30）和8周模型组（n=30）,模型组大鼠连续5 d腹腔注射小剂量STZ复制糖尿病大鼠模型,正常对照组大鼠注射等量的柠檬酸钠溶液。4、6和8周时检测各组大鼠体质量和血糖水平。末次检测后麻醉获取大鼠右眼视网膜组织,采用RT-PCR和Western blotting法检测MMP-2 mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色观察大鼠视网膜组织中MMP-2表达情况。结果：造模前,各组大鼠体质量和禁食12 h的空腹血糖值比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。4周模型组大鼠死亡3只,6周时死亡5只,8周时死亡7只,存活动物继续进行实验。各模型组大鼠体质量均明显低于同时期正常对照组（P < 0.05或P < 0.01）,而空腹血糖值明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。各模型组大鼠视网膜组织中MMP-2 mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常对照组（P < 0.05）。正常对照组大鼠视网膜结构层次清晰分明、细胞排列整齐,可见单层排列的神经节细胞,核圆形或椭圆形状,核较大;与正常对照组比较,模型组大鼠视网膜组织结构松散,内核层及视杆细胞层细胞外界膜模糊,数量减少。MMP-2阳性细胞可见棕黄色颗粒沉淀,在神经节细胞层胞浆和血管内皮细胞尤为集中。4、6及8周模型组MMP-2阳性表达水平均高于正常对照组（P < 0.05）。结论：MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜上表达,并随着糖尿病大鼠模型维持时间的延长呈递增趋势,说明MMP-2与DR有关。     

糖尿病大鼠视网膜早期病变中PDGF-B的表达

目的:探讨血小板源生长因子-B(PDGF-B)mRNA表达水平在糖尿病(DM)大鼠视网膜中的变化规律及其作用.方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组(25只)与造模组(35只).造模组以链脲佐菌素(STZ)尾iv,3 d后测定血糖≥16.7 mmol/L,尿糖 以上者定为DM大鼠.分别于造模成功后1,2,3 mo末各组随机取6只大鼠,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PDGF-B mRNA在大鼠视网膜中的表达水平;电镜观察DM大鼠视网膜超微结构的改变.结果:随着病程的延长,视网膜中PDGF-B mRNA表达水平在DM组明显升高,与正常对照组相比于造模后1 mo末时即差异具有统计学意义(P＜0.05),3 mo末时差异显著(P＜0.01);DM大鼠视网膜超微结构的损害随病程进展逐渐加重.结论:PDGF-B mRNA在视网膜中的表达水平随DM病程进展逐步升高.     

糖尿病早期大鼠血清代谢轮廓的变化

目的：通过检测1型糖尿病（DM）大鼠血清核磁共振（NMR）谱图的改变来揭示其代谢轮廓的变化。方法：SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）造成DM模型5周后,收集大鼠的血清并进行NMR分析。结果：DM大鼠相比对照组大鼠的血清代谢轮廓明显不同,D-葡萄糖、甘油、酪氨酸、甘氨酸、胆碱、谷氨酰胺、丙酮酸、3-羟基丁酸、乳酸、丙酮和低密度脂蛋白／极低密度脂蛋白等代谢产物出现了显著变化（P〈0．05或P〈0．01）。结论：代谢组学结果说明DM发生时,糖代谢、氨基酸代谢和脂类代谢出现了紊乱,这为进一步认识DM的发病机制提供了线索。     

抵挡汤早期干预对糖尿病大鼠视网膜VEGF和PKC基因表达的影响

目的 通过链脲佐菌素( STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,探讨不同时间段给予抵挡汤干预对糖尿病大鼠视网膜病变基因表达的影响及其作用机制.方法 高脂饲料喂养大鼠12周时尾静脉注射STZ制备2型糖尿病大鼠模型,抵挡汤早期组、抵挡汤中期组和抵挡汤晚期组分别于8周、13周和16周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于13周分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,上述各组给药均至实验24周时结束.观察抵挡汤对糖尿病大鼠体重、血糖、血胰岛素的影响,采用逆转录聚合酶链反应法( RT-PCR)检测糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF) -mRNA和蛋白激酶C(PKCβ2)-mRNA表达水平的变化.结果 实验第13周时,与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖明显升高(P＜0.01),大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达量也显著升高(P＜0.01).与模型对照组比较,抵挡汤给药干预的3组大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达有显著降低(P＜0.05);与抵挡汤晚期组和抵挡汤中期组比较,抵挡汤早期组VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA的表达明显降低(P＜0.05).与模型对照组相比,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达降低(P＜0.05).结论 抵挡汤早期干预可延缓糖尿病大鼠视网膜病变的发展,这与抵挡汤降低大鼠视网膜VEGF和PKCβ2基因表达从而抑制炎症反应有关.     

Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用

目的探讨Lazaroid对早期糖尿病大鼠视网膜的保护作用。方法20只SD大鼠采用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病动物模型,10只于成模2周后经尾静脉注射Lazaroid进行干预(糖尿病Lazaroid干预组),其余10只不予干预(糖尿病不干预组)。另设立不建模且不干预的空白对照组(n=10)。分别于实验前后进行视网膜电流图检查,对视网膜组织切片进行透射电子显微镜观察。结果糖尿病Lazaroid干预组和空白对照组在实验前后的暗适应最大电反应b波、振荡电位(OPs)振幅值差异无统计意义(P>0.05)。糖尿病不干预组实验前后的暗适应最大电反应b波、OPs振幅值明显下降(P<0.05);与空白对照组比较,成模4周后的糖尿病不干预组大鼠的神经节细胞内出现线粒体的改变;而同期糖尿病Lazaroid干预组大鼠视网膜未出现明显神经节细胞的改变。结论糖尿病动物模型在建立的早期已经出现视觉电生理的变化,并且有神经细胞超微结构的改变;全身使用Lazaroid对早期糖尿病大鼠模型视网膜神经元具有保护作用。