3-methyladenine下调自噬对脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨自噬对脑缺血再灌注损伤的影响。方法 将CD-1小鼠随机分为假手术组和缺血再灌注(t-MCAO)模型组,模型组分别在6、12、24和48h处死小鼠取脑,用Western blot半定量检测再灌注后缺血侧/左侧皮层,海马和纹状体中LC3Ⅱ蛋白的表达变化；随后将小鼠随机分为3-methyladenine(3-MA)(2、10、50mM)组和盐水对照组,两组都用线拴法建立t-MCAO模型,用Western blot检测不同浓度的3-MA对缺血再灌注后24h的LC3Ⅱ蛋白的表达影响,并用TTC染色观察3-MA(10mM)组和PBS对照组缺血再灌注后24h的梗死体积。 结果 缺血再灌注后缺血侧的LC3Ⅱ蛋白表达升高,在海马和皮层区,与假手术组相比24h升高最为明显并且差异有统计学意义(P<0.05)； 3-MA(10mM)时可明显下调自噬,并且与盐水对照组相比能显著减少梗死体积(P<0.001)和水肿程度(P<0.01)。结论 自噬的下调对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用。     

自噬相关基因Atg12和LC3-Ⅱ在脑缺血再灌注大脑表达的实验研究

目的：探讨局灶性脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia reperfusion injury,CIR）时大脑皮质自噬相关蛋白-12（autophagy related protein-12,Atg12）和自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ（autophagy microtubule-associated protein light chain 3 antibodyⅡ,LC3-Ⅱ）的激活规律,在此基础上探讨其对脑组织自噬的影响。方法：实验分为假手术组（sham组）和缺血再灌注组（CIR组）,且CIR组下设CIR 0、6、12、24、48、72h共6个亚组。除sham组和CIR 24h组为每组20只外（其中10只用于模型鉴定）,其余为每组10只。采用大脑中动脉栓塞术制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后采用神经功能评分、2,3,5-三苯基氯化四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色、脑组织含水量来鉴定脑缺血模型是否成功。采用免疫组化和免疫印迹方法检测大脑皮质Atg12和LC3-Ⅱ的表达规律。结果：与sham组比较,CIR 24h组可见明显的神经功能缺损、脑梗死和明显的脑水肿。免疫组化结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[阳性率分别为（15.49±4.18）%、（18.54±3.62）%],在24~48 h达高峰[（33.63±3.26）%、（29.62±1.73）%],72 h之后逐渐减弱[（24.90±3.96）%、（20.36±3.51）%]。免疫印迹结果显示,Atg12和LC3-Ⅱ在大鼠脑缺血再灌注6 h开始表达[表达量为（0.372 3±0.076 5）、（0.148 4±0.011 5）],在24~48 h达高峰[（0.741 7±0.071 8）、（0.451 3±0.019 0）],72 h之后逐渐减弱[（0.365 0±0.042 0）、（0.245 1±0.030 3）]。结论：脑缺血时Atg12和LC3-Ⅱ在调节脑缺血的脑组织自噬方式中具有重要的作用。     

Cystatin C对脑缺血再灌注损伤大鼠LC3的影响

中风是引起人类死亡和致残的主要原因之一,其中缺血性中风即脑梗死,主要由脑血管闭塞引起.而所有脑血管中,若大脑中动脉闭塞常会导致脑血流量大幅度减少,从而造成谷氨酸兴奋、氧化应激和炎症反应等一系列神经中毒的事件,最终导致神经细胞死亡,如细胞凋亡、坏死和自噬[1-3].自噬不仅参与神经细胞死亡的过程,还有研究发现自噬可以起到神经保护的作用[4].本研究应用Cystatin C干预脑缺血再灌注损伤大鼠,观察自噬相关蛋白LC3的变化,研究Cys C对缺血再灌注损伤大鼠自噬的影响.     

缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注自噬的影响

目的观察缺血预处理后不同间隔时间对大鼠脑缺血再灌注海马自噬的影响。方法参照ZeaLonga线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将实验动物随机分为3组:假手术组(Sham组,n=10)、缺血再灌注组(I/R组,n=10)、缺血预处理组(IPC组,n=30),缺血预处理组再按缺血预处理后不同间隔时间分为1 d、3 d、5d 3个亚组,每组10只。缺血2 h再灌注24 h后用免疫组织化学法检测自噬相关蛋白BECLIN I、LC3-II的表达情况,透射电镜观察神经细胞中自噬和溶酶体的激活以及细胞超微结构的变化。结果(1)神经功能障碍评分:与Sham组比较,I/R组及IPC组均出现不同程度神经功能障碍(P<0.01),IPC组症状评分低于I/R组(P<0.05)。(2)脑梗死体积:与Sham组比较,I/R组及IPC组均有不同程度梗死灶(P<0.01);IPC组脑梗死灶体积明显低于I/R组(P<0.01),3 d亚组梗死体积少于1 d、5 d亚组(P<0.01)。(3)免疫组织化学染色:与Sham组比较,I/R组及IPC组BECLIN 1及LC3-II阳性表达增多(P<0.01),IPC组阳性表达显著低于I/R组(P<0.01),IPC 3 d亚组阳性表达低于1 d、5 d亚组(P<0.01)。(4)脑组织超微病理形态改变:Sham组细胞正常;I/R组及IPC组可见数量不等、处于不同时期的自噬体和或自噬溶酶体,线粒体肿胀,膜破裂,可见空泡,各级溶酶体显著增多,可见变形次级溶酶体,高尔基体分裂;IPC组自噬体及各级溶酶体数量较I/R组减少,各IPC亚组间自噬体及各级溶酶体数量无可见变化。结论缺血预处理可能通过下调自噬水平减轻缺血再灌注损伤,缺血预处理3 d优于1 d、5 d。     

自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的：本研究检测微管轻链Ⅰ蛋白3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与浆液性卵巢癌及粘液性卵巢癌发生、发展的相关性和意义。方法选取204例上皮性卵巢肿瘤标本,其中,卵巢浆液性囊腺瘤46例,交界性浆液性肿瘤28例,浆液性囊腺癌40例,黏液性囊腺瘤32例,交界性黏液性囊腺瘤30例,黏液性囊腺癌28例,另选取正常卵巢上皮组织28例作为对照。使用 SP 法检测正常卵巢上皮组织、上皮性卵巢肿瘤组织中 LC3-Ⅱ的表达,并结合浆液性癌、黏液性癌临床病理因素进行分析。结果①正常卵巢上皮中 LC3-Ⅱ无表达,卵巢良性浆液性囊腺瘤、交界性浆液性肿瘤及浆液性癌中 LC3-Ⅱ的阳性率分别为4．5%、71．0%、95．0%,交界性浆液性肿瘤和浆液性癌中 LC3-Ⅱ的表达明显高于良性浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P <0．01)。卵巢良性黏液性囊腺瘤、交界性黏液性肿瘤及黏液性癌中 LC3-Ⅱ的阳性率分别为6．7%、66．7%、92．9%,交界性浆液性肿瘤和浆液性癌中 LC3-Ⅱ的表达明显高于良性浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P <0．01);②在40例卵巢浆液性癌、28例卵巢黏液性癌中,LC3-Ⅱ表达与患者年龄、FIGO 分期及病理学分级等临床病理特征均无关。结论 LC3-Ⅱ在卵巢上皮性交界性肿瘤、癌中表达增高,自噬活性增强,可能与卵巢上皮性恶性肿瘤的进展有关。     

大鼠肢体缺血再灌注急性肺损伤细胞自噬及其相关蛋白的表达

目的：研究大鼠双下肢缺血再灌注所致急性肺损伤（LIR‐ALI）肺组织细胞早期自噬及其相关蛋白的表达。方法采用LIR‐ALI模型,12只雄性SD大鼠,以随机数字表法分为假手术（Sham）组,肢体缺血再灌注（I/R）组,每组6只。采用ELISA检测血清白乳酸脱氢酶（LDH）和免疫荧光法检测肺组织病理变化,利用RT‐PCR检测各组肺组织Beclin1和Atg5mRNA表达及Westernblot检测LC3蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组LDH值升高,显示大鼠LIR‐ALI模型造模成功且肺组织免疫荧光特异性标记抗体高表达（P＜0．01）。采用2－△△CT法分析肺组织Beclin1和Atg5mRNA相对表达量,在I/R组较Sham组升高（P＜0．01）;Westernblot法检测显示,I/R组较Sham组LC3‐Ⅰ、LC3‐Ⅱ高表达、LC3‐Ⅱ/GAPDH亦明显升高（P＜0．01）。结论大鼠LIR‐ALI后激活肺组织细胞自噬及其相关蛋白高表达。     

Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA的影响

目的 探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型.大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 h 4个亚组.各组于再灌相应时间点行神经功能缺损评分,并断头取脑行HE染色及Real time-PCR检测.结果 神经功能缺损:与假手术组比较,模型组、Sal组各时间点均有神经功能缺损(P<0.01);与模型组比较,再灌24、72 h Sal组神经功能缺损评分降低(P<0.05).HE染色:模型组神经元减少、缺失,细胞肿胀,部分破裂,细胞核固缩、偏移、深染,胶质细胞增生,经Salubrinal干预后,再灌各时间点神经元增多,胞膜较完整,核固缩现象较轻,水肿轻微.Real time-PCR检测:与假手术组比较,模型组、Sal组各指标于再灌各时间点均增高(P<0.01).与模型组比,Sal组LC3-ⅡmRNA表达于再灌12、24、72 h下降明显(P<0.05);Sal组LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA于再灌后各时间点下降均明显(P<0.01).结论 Salubrinal通过下调LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值,对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

自噬相关蛋白Beclin1和LC3在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨自噬相关蛋白Beclin1和LC3在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法收集2011年1月—2014年1月结肠癌患者80例,取结肠癌组织标本及相应的正常组织标本各80份。用免疫组化法检测结肠癌和正常结肠组织中自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达,分析二者和结肠癌临床病理学参数,包括年龄、分化程度、TNM分期和淋巴结转移等的关系。结果结肠癌和正常结肠组织中Beclin1的阳性表达率分别为33.8%(27/80)、73.8%(59/80),LC3阳性表达率分别为22.5%(18/80)、68.8%(55/80),Beclin1和LC3在结肠癌的阳性表达率显著低于正常结肠组织(P<0.01)。不同年龄、分化程度结肠癌组织中Beclin1和LC3的表达差异无统计学意义(P>0.05),而不同TNM分期(P<0.01)和淋巴结转移结肠癌组织中Beclin1和LC3表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论自噬相关蛋白Beclin1和LC3的低表达可能与结肠癌的发生发展和预后不良有关。     

电针对脑缺血/再灌注模型大鼠双侧脑区IL-1β、ICAM-1表达的影响

目的: 探讨脑缺血/再灌注损伤大鼠大脑健、患侧白介素-1β（IL-1β）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的变化趋势及电针对二者的影响。方法: 采用大脑中动脉线栓法制备大鼠脑缺血/再灌注模型（MCAO）。将大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,造模后各组又分为6个时程组（12h、24h、48h、72h、96h、144h）,每个时程组10只大鼠。取脑组织,制备冰冻切片,免疫组化检测健、患侧脑组织中IL-1β、ICAM-1的表达情况。结果: 在脑缺血大鼠患侧与健侧脑区,IL-1β和ICAM-1的表达均呈现典型的双峰模式。模型组患侧IL-1β在12h和48h到达峰值,健侧在12h和144h到达峰值。模型组患侧IL-1β表达在48h明显高于健测（P<0.05）,在96h和144h又明显低于健侧（P<0.05）; 电针组患侧IL-1β表达在24h、48h和144h均低于健侧（P<0.05）。 模型组患侧的ICAM-1在24h和72h达到峰值,健侧在24h和144h到达峰值;电针组患侧ICAM-1表达在各时间点均低于健侧（P<0.05）。结论: 提示针刺可能通过降低大鼠患侧脑组织中IL-1β和ICAM-1的表达抑制炎症反应,从而改善脑缺血/再灌注对脑组织的损伤。     

抑制大鼠脑缺血再灌注损伤中GSK-3β活性对自噬的影响及可能机制

目的：探讨大鼠缺血再灌注损伤中抑制糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β）后对自噬的影响及如何通过酵母自噬启动ATG1激酶同源蛋白（Unc-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1）影响自噬的机制。方法：实验选取SD大鼠为研究对象,分为假手术组（Sham 组,仅结扎颈内动脉）、缺血再灌注组（MCAO 组,大脑中动脉栓塞术制备局灶脑缺血再灌注模型）、GSK-3β干扰片段组（siGSK-3β组,建模前24 h注射GSK-3β干扰片段）、GSK-3β无意义序列组（ConsiGSK-3β组,建模前24 h注射无意义序列）、GSK-3β抑制剂组（SB216763组,建模前6 h注射抑制剂SB216763）,每组5只。免疫印迹检测大脑皮质酪氨酸216号位点磷酸化GSK-3β[GSK-3β（P-tyr216）]、自噬相关蛋白轻链3抗体Ⅰ/Ⅱ（autophagy microtubule-as－sociated protein light chain 3 antibodyⅠ/Ⅱ,LC3BⅠ/Ⅱ）、泛素结合蛋白（sequestosome 1,P62）、磷酸化ULK1（phosphorylated ULK1,P-ULK1）、乙酰化ULK1（acetylated ULK1,AcK）的表达,电镜显示自噬体数量。结果：与Sham组比较,MCAO组中GSK-3β（P-tyr216）增高（P=0.000）。siGSK-3β、SB216763组相较MCAO组,LC3BⅡ/LC3BⅠ升高（P=0.000）、P62表达下降（P=0.000）、P-ULK1表达增高（P=0.000）、AcK表达下降（SB216763：P＜0.05;siGSK-3β：P＜0.01）,电镜可见自噬小体。结论：在脑缺血再灌注损伤中,GSK-3β活性抑制后可通过磷酸化ULK1增强细胞自噬。     

Beclin-1、LC3-Ⅱ在宫颈病变组织中的表达及意义

目的 检测Beclin-1、LC3-Ⅱ在宫颈病变组织及HPV感染中的表达, 并探讨其临床意义。方法选取昆明医科大学第二附属医院妇科2014年10月至2016年6月的行宫颈癌筛查 (HPV、TCT) 的患者, 筛查结果任意一项异常患者均行宫颈活检, 最终选取病检结果为正常的宫颈组织40例 (其中HPV感染20例, 无HPV感染20例) ;CINⅠ30例;CINⅡ/Ⅲ30例;年龄范围为25～55岁;妊娠及已行宫颈治疗过的患者不纳入研究范围。用Western Blot法检测正常宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ相对表达量。结果 (1) Beclin-1在正常的宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中的相对表达量分别为 (0.561±0.041) 、 (0.421±0.018) 、 (0.351±0.016) ;LC3-Ⅱ在正常宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中的相对表达量为 (0.683±0.027) 、 (0.435±0.029) 、 (0.325±0.017) ;Beclin-1、LC3-Ⅱ在3组间的相对表达量差异有统计学意义 (P <0.001) ;Beclin 1, LC3-Ⅱexist in the relative expression between the 3 group were statistically significant (P <0.001) (2) 病检结果为正常的宫颈组织中HPV感染组中Beclin-1和LC3-Ⅱ的相对表达量均显著低于无HPV感染组 (P <0.05) 。结论随着宫颈病变级别的增加, 自噬相关基因Beclin-1、LC3-Ⅱ的相对表达量呈下降趋势, 提示自噬基因活性下降或缺失可能参与宫颈癌的进展。     

LC3Ⅱ、Beclin1在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与相关病理因素的关系

目的 通过检测正常宫颈组织、宫颈低级别上皮内瘤变(LSIL)组织、宫颈高级别上皮内瘤变(HSIL)组织和宫颈鳞状细胞癌组织中自噬基因LC3Ⅱ和Beclin1的表达水平,分析LC3Ⅱ、Beclin1与宫颈鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系及其相关性,探讨自噬基因在宫颈鳞状细胞癌发生、发展中的作用及其对患者生存的影响.方法 ...     

三七总皂苷对顺铂诱导肾损伤大鼠模型自噬蛋白LC3和Beclin1的影响

目的研究三七总皂苷（PNS）对顺铂诱导肾损伤大鼠肾组织中自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达的影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,顺铂模型组,顺铂 PNS组,在给药24 h后处理动物,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和β-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶(NAG)水平,利用透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞粒体形态及自噬体,通过Western blot检测自噬蛋白LC3和Beclin1蛋白的表达。结果大鼠暴露于顺铂24 h后,与空白对照组比较,顺铂模型组血清Cr、BUN显著升高（P<0.05）,尿NAG水平没有明显变化,电镜观察到自噬体出现,肾组织LC3和Beclin1蛋白表达显著升高（P<0.01）。与顺铂模型组比较,顺铂 PNS组血清Cr明显降低（P<0.05）,LC3和Beclin1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论PNS可能通过提高Beclin1的表达,增强肾组织的自噬而降低顺铂诱导的大鼠肾损害。      

通络清脑注射粉针对脑缺血-再灌注损伤大鼠的脑保护作用及神经元自噬相关蛋白表达的影响研究

背景　细胞自噬所致神经元凋亡是脑缺血后神经损伤的重要环节,而以通络清脑注射粉针为代表的清热解毒通络疗法在只辨病、不辨证的情况下治疗大鼠脑缺血亦能取得良好疗效,因此推测通络清脑注射粉针发挥脑保护作用的机制很可能与抑制细胞自噬有关。目的　探讨通络清脑注射粉针对脑缺血-再灌注损伤大鼠的脑保护作用及神经元自噬相关蛋白表达的影响。方法　本实验于2019年1月-2020年3月实施,共选取SPF级成年雄性SD大鼠36只,编号后采用随机数字表法分为假手术组、模型组、通络清脑组,每组12只。采用线栓法制备大鼠脑缺血-再灌注损伤模型（假手术组大鼠只进行血管分离、不进行其他操作）,通络清脑组大鼠经尾静脉缓慢推注浓度为18.75 mg/ml的通络清脑溶液3.2 ml/kg,假手术组、模型组大鼠经尾静脉注射等体积0.9%氯化钠溶液。比较三组大鼠建模24 h后神经功能学评分、脑梗死体积占比及再灌注24 h后海马区神经元损伤情况、海马区和皮质区自噬体形成情况、海马区神经元自噬相关蛋白〔包括磷酸化核因子-κB（p-NF-κB）、Beclin1、自噬微管相关蛋白1轻链3（LC3）〕表达情况。结果　模型组、通络清脑组大鼠建模24 h后神经功能学评分、脑梗死体积占比高于假手术组,而通络清脑组大鼠建模24 h后神经功能学评分、脑梗死体积占比低于模型组（P<0.05）。再灌注24 h后假手术组大鼠海马区神经元未见明显坏死、海马区和皮质区均偶见自噬体,模型组大鼠海马区缺血区神经元结构破坏严重、大量神经元丢失且海马区和皮质区均可见双层膜结构自噬体,通络清脑组大鼠海马区缺血区神经元坏死范围较模型组缩小、神经元损伤明显缓解且海马区和皮质区自噬体数量均减少。再灌注24 h后模型组、通络清脑组大鼠海马区p-NF-κB、LC3相对表达量及模型组Beclin1相对表达量高于假手术组,而通络清脑组大鼠海马区p-NF-κB、Beclin1、LC3相对表达量低于模型组（P<0.01）。结论　通络清脑注射粉针可有效改善脑缺血-再灌注损伤大鼠神经功能,减轻脑梗死程度、神经元损伤,减少自噬体形成及神经元凋亡,抑制神经元自噬相关蛋白p-NF-κB、Beclin1、LC3的表达,其发挥脑保护作用的机制可能与抑制神经元过度自噬有关。     

七氟烷通过诱导SIRT1依赖型自噬减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探究七氟烷对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的影响及沉默信号调控因子1(SIRT1)自噬在其中发挥的作用.方法 SD大鼠分为假手术组、脑中动脉缺血(MCAO)模型组及七氟烷处理组(0.6％、1.2％、2.4％),不同浓度的七氟烷预处理大鼠,MCAO建模并进行神经功能评分,TTC染色检测脑梗死体积分数,并称量脑含水...     

Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤中的表达

目的 研究自噬蛋白Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤的表达.方法 选取云南省肿瘤医院2011年11月至2014年10月经手术切除的MFH组织标本, 应用免疫组织化学SP方法检测恶性纤维组织细胞瘤组织中Beclin 1、LC3蛋白表达情况.结果 在本组21例标本中Beclin 1、LC3基因表达均显著升高, P<0.05.结论 Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤组织中呈高表达, 并且两者间显著相关, 可能与恶性纤维组织细胞瘤的发生及发展密切相关.     

自噬相关蛋白 Beclin1、LC3在甲状腺癌合并颈部淋巴结转移中的表达及临床意义

目的:探究分析与细胞自噬相关的蛋白Beclin1及LC3在甲状腺癌合并颈部淋巴结转移中的表达及其在临床治疗中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测,选取48例我院2012年2月至2014年2月收集的甲状腺癌组织、30例癌旁正常组织用以检测Beclin1及LC3蛋白表达,另取38例甲状腺癌转移淋巴结以及30例的正常淋巴结临床标本,用以检测Beclin1及LC3蛋白表达。结果:在取材的所有样本中均有表达Beclin1,但在甲状腺癌组织中含量低于癌旁正常的甲状腺组织(P<0.01),转移淋巴结中Beclin1水平明显低于正常淋巴结组(P<0.01);免疫组化结果显示在所有样本中也检测到LC3蛋白表达,在甲状腺癌组织中的含量最低,并且显著低于癌旁甲状腺组织(P<0.01),在发生转移的淋巴结组织中,LC3含量低于正常淋巴结组织(P<0.01)。结论:自噬功能相关蛋白Beclin1与LC3的表达与甲状腺癌是否发生转移密切相关,是肿瘤向囊外扩展的直接标记。该蛋白具有作为甲状腺癌淋巴结转移的术前评估指标的潜在可能,具有一定的指导意义。     

丙炔苯丙胺对帕金森病模型大鼠结肠自噬相关蛋白Beclin1及LC3表达的影响

目的观察丙炔苯丙胺对帕金森病(PD)模型大鼠肠功能障碍、自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达的影响,探讨丙炔苯丙胺对PD肠功能障碍的治疗作用及可能机制。方法 2013年1月—2017年10月唐山市开平医院与华北理工大学附属医院合作实验。选取健康SD大鼠72只按随机数字表法分为假手术组(n=24)、帕金森病模型组(模型组,n=24)、丙炔苯丙胺干预组(干预组,n=24),后2组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,而后模型组大鼠每日生理盐水灌胃,干预组予丙炔苯丙胺0.5 mg/kg灌胃。分别于4 d、8 d各取大鼠12只采用免疫组化法和蛋白印迹法检测结肠Beclin1和LC3的表达水平,并测定1 h粪便排出量及含水率。结果与假手术组比较,模型组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均增加,1 h粪便排出量及含水率均减少(4 d:t/P=-28.614/0.000、-28.472/0.000、-21.561/0.000、-92.225/0.000、86.986/0.000、26.175/0.000。8 d:t/P=-24.523/0.000、-15.922/0.000、-26.262/0.000、-72.051/0.000、16.288/0.000、23.270/0.000);与模型组比较,干预组4 d、8 d结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均减少,1 h粪便排出量及含水率均增加(4 d:t/P=8.254/0.000、7.572/0.000、11.846/0.000、43.157/0.000、-12.137/0.000、-7.727/0.000。8 d:t/P=18.981/0.000、8.480/0.000、21.154/0.000、63.285/0.000、-21.597/0.000、-17.980/0.000);与干预4 d组比较,干预8 d组大鼠结肠Beclin1、LC3阳性细胞及蛋白表达均明显减少,1 h粪便排出量及含水率显著增加(t/P=47.432/0.000、46.778/0.000、18.048/0.000、5.801/0.002、-7.045/0.001、-4.183/0.009)。结论丙炔苯丙胺可改善PD大鼠肠功能障碍,其作用机制可能与其抑制结肠过度自噬有关。     

自噬与脑缺血再灌注损伤的关系及其作用机制研究进展

自噬是一种进化上高度保守的在所有真核生物中均存在的细胞自清除和再循环机制,近年来研究发现,自噬与脑缺血再灌注损伤关系密切。目前脑缺血再灌注损伤是治疗缺血性脑卒中过程中的一大难题,自噬通过多种机制参与调控脑缺血再灌注损伤,但自噬带来的结果是减轻脑缺血再灌注损伤还是加速了缺血脑组织的死亡仍存在不同说法,本文综述了近年来自噬参与脑缺血再灌注损伤的主要相关通路以及自噬激活水平与再灌注损伤预后的关系,以期提供新的研究思路。