钙调神经磷酸酶对心肌凋亡作用研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是目前所知的惟一依赖于Ca2 钙调素的SerThr磷蛋白磷酸酶,在分类上属于磷蛋白磷酸酶2B(PP2B)。20世纪70年代末80年代初由加拿大籍华人王学荆教授,美籍华人张槐耀教授及美国的Klee教授分别在猪脑中发现并纯化成功[1]。CaN在细胞信号传递过程中直接受Ca2 的调节,起去磷酸化作用,参与多种细胞功能调节。在细胞因子介导的T细胞活化中起调节枢纽作用,在神经递质和激素的释放、神经突触的生长发育和突触可塑性方面亦具有重要的调节作用,与学习记忆和老年性痴呆有关[1]。CaN介导的信号通路在心血管的形态发…     

登革病毒感染对人血管内皮细胞血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的:研究登革病毒2型(DV2)体外感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的影响.方法:原代分离、纯化、培养人HUVEC细胞,用生长良好的2～3代细胞进行实验.分别用病毒感染复数(MOI)为1、2、4、8、16的DV2病毒液感染HUVEC,阴性对照组直接以RPMI 1640培养,应用细胞计数试剂-8(CCK-8)法测定DV2感染前和感染后6、12、24、48、72和96 h的细胞活性.另以MOI=2的DV2病毒液感染细胞,阴性对照组直接以RPMI 1640培养,于感染后6、12、24、48、72、96 h分别收集病毒感染的HUVEC,采用流式细胞术测定细胞表面VCAM-1表达水平;采用RT-PCR法检测细胞中VCAM-1 mRNA转录水平.结果:当病毒MOI=2时对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义.DV2感染可以促进HUVECs中VCAM-1 mRNA的转录,96 h内均有增加,与对照组相比有显著性差异(P<0.05).其中,正常状态下HUVEC基本无VCAM-1 mRNA转录,感染12 h达到最高峰,12～48 h表达量显著高于其他时间(P<0.05).DV2 感染HUVEC后, VCAM-1蛋白表达在12～72 h显著升高(P<0.05),与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:DV2感染上调HUVEC的VCAM-1 mRNA转录和蛋白表达.这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一.     

钙调神经磷酸酶抑制剂治疗白癜风的进展

<正>白癜风作为一种后天形成的皮肤病,其可在全身各个部位发生,无论是面部、手足部、颈部等都可发生,且患者越发呈现年轻化。其有着反复发作、无明确治疗方法等特点,因此虽然临床上由很多治疗方法,但是却无一种可以使其痊愈,给患者的生活及工作带来较大的影响。1白癜风的诊治临床上对白癜风的诊治较为简单,对病史进行全面收集,无需进行皮肤活检来诊断。欧美国家的白癜风工作组制订了白癜风评估表具有较强的指导作用,其主要包括对患者进行询问,看其     

钙调神经磷酸酶在心肌肥大中的作用

钙调神经磷酸酶在心肌肥大的病理生理过程中发挥着重要作用。钙调神经磷酸酶的结构、功能及抑制剂等各方面的研究对于探讨心肌肥大的发病机制、为心肌肥大的预防和治疗提供了一条新思路。本文就钙调神经磷酸酶在心肌肥大中的研究现状进行综述。     

钙调神经磷酸酶在心血管系统的生物学功能

钙调神经磷酸酶（Calcineurin,CaN）是典型的Ca^2＋／CaM结合酶和调节酶。CaN在Ca^2＋信号传递系统中起举足轻重的作用,参与多种生物学效应。新近的研究表明,CaN介导的信号通路在心血管的形态发生中起重要作用,并参与心肌肥大、血管平滑肌细胞增殖和内皮细胞功能的调节。本文对CaN的分子结构、酶学特性及在心血管系统的生物学功能方面的研究进展进行介绍。     

钙调神经磷酸酶在逼尿肌肥大发生中的作用研究

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)催化亚单位α、β、γ(CnAα、CnAβ、CnAγ)3种亚型在肥大逼尿肌的表达变化,探讨其在逼尿肌肥大发生中的作用.方法选用10周龄雌性Wistar大鼠实行膀胱出口部分梗阻手术.手术分别于2、4、6周取下大鼠膀胱.以RT-PCR检测3种亚型mRNA表达,Western blot测定亚型蛋白表达量的变化.肥大标志物肌球蛋白重链(MHC)表达变化通过考马斯亮蓝胶染色光密度测定.结果①RT-PCR可检测到CnAα、CnAβ,未检测到CnAγ.②Western blot检测,CnAα手术后2周比对照组表达显著增加(P＜0.01),4周、6周表达下降.CnAβ表达无显著变化.③肌球蛋白重链表达变化与CnAα表达变化具有相关性.结论CnAα在逼尿肌肥大发生中起重要的作用,CnAβ作用不明显.     

实验性腹膜炎小鼠脾、肾钙调神经磷酸酶的变化

目的：观察实验性腹膜炎小鼠脾、肾钙调神经磷酸酶（CAN）在腹膜炎病程中变化。方法：36只小鼠随机分为6组，即腹膜炎48h、5d、10d、14d、21d组与对照组，腹膜炎组腹腔注射1％冰醋酸0．2mL，对照组腹腔注射等量生理盐水，每组各6只。采用比色法测定脾、肾组织CaN活性。结果：脾CaN活性在实验性腹膜炎5d、10d、14d、21d呈持续性低水平（P〈0．01）；肾CaN活性在实验性腹膜炎10d达高峰14d、21d与10d相比呈下降趋势但仍高于对照组，差异有显著性。结论：实验性腹膜炎小鼠脾、肾CaN活性变化与病程进展有关。     

功能训练对脑梗死大鼠钙调神经磷酸酶水平影响的实验研究

目的 探讨功能训练对局灶性脑梗死后大鼠钙凋神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)水平的影响.方法 采用局灶性大脑中动脉闭塞动物模型,运用免疫荧光染色技术,检测功能训练对脑梗死不同时间内CaN-A水平变化情况.结果 功能训练6～72h梗死灶周围区CaN水平渐升高,并在功能训练第3天CaN水平达到高峰,第7天逐渐回落,但仍保持较高水平,均明显高于制动组(P＜0.05).结论 局灶性脑梗死后功能训练通过调节CaN的去磷酸化水平,达到保护缺血神经元损伤的目的,促进运动功能的恢复.     

钙调神经磷酸酶与AD的关系研究及运动干预

老年痴呆病（AD）的两大主要病理特征老年斑外周和神经纤维缠结的结构都是由NFT构成的。NFT的主要成分是过度磷酸化的tau蛋白。钙调神经磷酸酶是目前已知的惟一一个Ca^2＋／CaM调节的丝／苏氨酸蛋白磷酸酶,是脑内tau蛋白去磷酸化的一个非常重要的磷酸酶。本文主要目的是综述一下目前关于钙调神经磷酸酶（CaN）与AD关系的研究现状,并且通过运动对CaN活性的影响来预测运动对AD的预防与治疗的可能影响。     

质子泵抑制剂致急性肾损伤巢式病例对照研究

<正>质子泵抑制剂(proton pump inhibitors,PPIs)作用于H+-K+-ATP酶,主要用于抑制基础以及应激等原因导致的胃酸分泌,还可与抗菌药物合用于治疗幽门螺杆菌感染^[1],近年来在呼吸系统和肿瘤方面的疗效也得到关注^[2-3]。     

Bax抑制因子1通过促进视神经萎缩蛋白1表达抑制小鼠动脉血管钙化

目的 探讨Bax抑制因子1（BI-1）和视神经萎缩蛋白1（OPA1）蛋白对血管钙化的影响。方法 ApoE-/-糖尿病小鼠高脂喂养12周后予以腹腔注射Nε（- 1-羧甲基）-L-赖氨酸16周建立血管钙化模型,实验将小鼠分为4组,6只/组：对照组（ApoE-/-小鼠普通饲料喂养）、钙化组（ApoE-/-小鼠建立钙化模型）、钙化+BI-1TG组（血管特异性过表达BI-1的ApoE-/-小鼠建立钙化模型）和钙化＋BI-1TG＋OPA1-/-组（血管特异性过表达BI-1和基因敲除OPA1的ApoE-/-小鼠建立钙化模型）。另β磷酸甘油诱导血管平滑肌细胞建立细胞钙化模型。使用von Kossa染色检测血管钙化程度,使用ELISA检测主动脉钙含量,使用免疫组织化学方法检测Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达、使用TUNEL检测细胞凋亡率,使用Western blot检测BI-1、OPA1、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3水平的表达。结果 血管钙化后,BI-1和OPA1蛋白表达均下降（P=0.0044）,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达增加（P=0.0041）。过表达BI-1促进OPA1蛋白表达,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达均减少（P=0.0006）。基因敲除OPA1蛋白后,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3又明显增多（P=0.0007）。结论 BI-1可能通过促进OPA1表达,减轻钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,继而抑制血管钙化。     

The effects of proton pump inhibitor on hepatic vascular responsiveness and hemodynamics in cirrhotic rats

Background

Liver cirrhosis is associated with increased intrahepatic resistance due to hepatic fibrosis and exaggerated vasoconstriction. Recent studies have indicated that proton pump inhibitors (PPIs), in addition to acid suppression, modulate vasoactive substances and vasoresponsiveness. PPIs are frequently prescribed in patients with cirrhosis due to a higher prevalence of peptic ulcers, however other impacts are unknown.

Vaspin通过PI3K/Akt通路发挥抗炎及血管内皮保护作用减轻脂多糖致急性呼吸窘迫综合征小鼠肺损伤

目的探讨Vaspin对LPS致ARDS小鼠的保护作用及其可能机制。方法40只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表分为对照 组、LPS组、Vaspin组和wortmannin（PI3K抑制剂）组,每组10只。苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变,肺湿干比评估肺 水肿,BCA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量,评估肺组织通透性改变;髓过氧化物酶（MPO）试剂盒检测肺组织 MPO活性,ELISA 检测肺组织中白细胞介素（IL-1β）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量,免疫组织化学法（IHC）观察肺组织中 VCAM-1表达;Western blot法检测肺组织cleaved caspase-3和Akt磷酸化水平。结果与对照组比较,LPS组小鼠肺组织呈现典 型ARDS病理改变,肺组织湿干比W/D值、BALF蛋白含量、肺组织MPO活性、IL-1β和TNF-α水平,肺组织VCAM-1 表达及 cleaved caspase-3蛋白表达水平显著增高（P<0.05）,而p-Akt蛋白表达明显下调（P<0.05）;Vaspin干预能显著缓解上述变化（P< 0.05）;而wortmannin组与Vaspin组相比,其湿干比W/D值、BALF蛋白含量、MPO活性和IL-1β、TNF-α及cleaved caspase-3蛋白 表达水平显著升高（P<0.05）,伴Akt磷酸化水平显著下调（P<0.05）。结论Vaspin可通过其介导的抗炎、抗凋亡及血管内皮保护 效应对LPS致ARDS肺损伤发挥保护性调控,其可能机制为上调了PI3K/Akt通路。     

质子泵抑制剂对根除幽门螺杆菌治疗的影响

目的：观察近期内使用质子泵抑制剂（ｐｒｏｔｏｎｐｕｍｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＰＰＩ）对抗幽门螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ）治疗的影响。方法：将Ｈｐ阳性的消化性溃疡患者分为：Ａ组２９例（奥美拉唑２０ｍｇ,２／日,阿莫西林１ｇ,２／日,替硝唑０．５ｇ,２／日,治疗２周）;Ｂ组２８例（奥美拉唑２０ｍｇ,１／日,治疗２周后以Ａ组相同方案继续治疗２周）。结果：Ａ组２７例（２７／２９）Ｈｐ根除,Ｂ组为２１例（２１／２７）。二者比较０．１０＜Ｐ＜０．２０。全部患者共４８例（４８／５６）Ｈｐ根除,５例（５／５６）发生副作用。结论：如在使用ＰＰＩ后近期内开始抗ＨＰ治疗可使ＨＰ根除率有所下降。洛赛克２０ｍｇ,２／日,阿莫西林１ｇ,２／日,替硝唑０．５ｇ,２／日,两周疗法Ｈｐ根除率较高,副作用少     

模拟潜水过程中兔血管内皮细胞的变化

目的:观察模拟潜水前、后血管内皮标记物及血管内皮细胞形态的变化。方法:14只新西兰白兔,在0.55MPa下停留35min,再升至0.7MPa停留35min,阶段减压出舱,检测加压前与减压后血浆内皮素1(ET1)和第Ⅷ因子(vWF),比较加减压前后的变化;电镜下观察阶段减压后血管内皮细胞形态变化。结果:减压后较加压前血浆ET1水平由(1.33±0.23)ng/L增至(2.99±0.35)ng/L,vWF活性由(2.35±0.47)%降至(1.89±0.34)%;减压后部分血管内皮细胞肿胀、脱落。结论:加减压过程能造成血管内皮的损伤。     

高糖激活WNT信号通路促进血管平滑肌细胞钙化

目的探讨高糖导致血管钙化机制是否与WNT信号通路有关。方法采用体外血管钙化模型,高糖诱导血管平滑肌细胞
钙化,检测WNT信号分子和骨相关蛋白Cbfa1,Osx,OCN,BMP2的表达以及细胞钙化程度。观察WNT信号抑制剂Dkk1对高
糖诱导的血管平滑肌细胞钙化和Cbfa1,Osx,OCN,BMP2表达的影响。结果高糖能上调血管平滑肌细胞WNT信号通路分子
包括Wnt3a,Wnt7a,Fzd4,Wisp1 mRNA的表达（1.86±0.15, 1.68±0.13, 2.10±0.17, 2.30±0.20, P<0.05）,促进WNT信号通路关键
分子β-catenin的磷酸化（2.70±0.22, P<0.05）,激活WNT信号通路。使用WNT信号抑制剂Dkk1能减轻血管平滑肌细胞钙化,
下调骨相关蛋白Cbfa1,Osx,OCN,BMP2 mRNA的表达［（51±9）%,（58±11）%,（56±10）%,（62±10）%,P<0.01）］。结论WNT
信号通路参与了高糖诱导的血管平滑肌细胞钙化。
     

钙调神经磷酸酶对血管平滑肌细胞增殖中蛋白激酶G表达的影响

目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中蛋白激酶G(PKG Iα)表达的影响.方法:对大鼠VSMCs培养并行细胞鉴定,分为对照组、低浓度环孢菌素A(CsA,0.5 mg/L)干预组、高浓度CsA(5 mg/L)干预组以及苯肾上腺素(PE)刺激组(5 mg/L CsA 10 μmol/L PE).其中CsA为CaN特异性抑制剂,PE为已知的CaN激活剂,能够刺激细胞增殖.应用RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot法定性及定量测定VSMCs增殖中PKG Iα mRNA以及蛋白的表达水平.结果:0.5 mg/L CsA组PKG Iα mRNA以及蛋白的表达水平与对照组相比差异无统计学意义,而5 mg/L CsA组PKG Iα mRNA及蛋白的表达明显高于对照组,5 mg/L CsA 10 μmol/L PE组中PKG Iα mRNA的表达比5 mg/L CsA组减少了32.2%,蛋白的表达减少了36.7%,但仍明显高于对照组.结论:CaN能够调节培养VSMCs中PKG Iα的表达,增殖细胞用CaN特异性抑制剂CsA灭活CaN后,PKG Iα的表达明显增加,给予PE再次激活CaN后,PKG Iα的表达明显减少.