miR-139通过下调CXCR4/CXCL12生物轴抑制乳腺癌定向转移的分子机制研究

摘 要：［目的］ 检测miR-139在乳腺癌细胞系及组织中的表达,验证CXCR4是否为miR-139直接调控的靶基因,并探究miR-139是否可通过靶向抑制CXCR4/CXCL12生物轴从而抑制乳腺癌细胞的定向转移。［方法］ 实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）用于检测miR-139在34对转移性乳腺癌患者的原发灶、转移灶及癌旁组织中,在5株乳腺癌细胞系及1株正常乳腺上皮细胞中的表达。将包含miR-139的重组慢病毒质粒及其阴性对照空载体质粒vector分别以病毒/细胞数量=20的比例感染MDA-MB-231细胞,经2.0μg/ml嘌呤霉素筛选,成功构建稳定表达miR-139或vector的MDA-MB-231细胞,将MDA-MB-231vector和MDA-MB-231miR-139细胞分别经尾静脉注射到BALB/c裸鼠中,构建乳腺癌裸鼠转移模型,观察过表达miR-139对裸鼠体内转移能力的影响。TargetScan软件用于预测miR-139的靶基因,根据预测结果,将野生型或突变型CXCR4的3’-UTR区域克隆到荧光素酶报告基因的下游（CXCR4-wt或CXCR4-mut）并分别与miR-139 mimics或scramble共转染后检测荧光素酶的活性。qRT-PCR和Western blot分别检测转染miR-139 mimics和scramble后CXCR4、CXCL12的mRNA和蛋白表达。［结果］ miR-139在转移性乳腺癌原发灶和转移灶中的表达均低于癌旁组织,且转移灶中表达最低,miR-139在乳腺癌细胞系中的表达水平显著低于正常乳腺上皮细胞MCF-10A,且MDA-MB-231细胞中最低。尾静脉注射MDA-MB-231miR-139的裸鼠肺转移灶的个数均显著低于MDA-MB-231vector细胞。TargetScan软件预测CXCR4为miR-139直接调控的靶基因,CXCR4-wt+miR-139共转染组比CXCR4-wt+scramble共转染组的荧光素酶活性强度显著降低,CXCR4-mut+miR-139共转染组和CXCR4-wt+scramble共转染组间荧光素酶活性强度无显著性差异。转染miR-139后,CXCR4和CXCL12的mRNA和蛋白表达水平均显著下调,CXCR4/CXCL12生物轴下游的p-AKT和p-ERK蛋白表达水平也显著下调。［结论］ miR-139可通过靶向调控CXCR4/CXCL12生物轴而抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231定向转移。     

趋化因子受体CXCR7及其与肿瘤的关系

CXCR7是继CXCR4之后发现的趋化因子CXCL12的新受体.目前研究表明,CXCL12/CXCR7生物轴对多种肿瘤的发展有重要影响,与CXCL12/CXCR4生物轴的作用有一定相似性.CXCR7广泛表达于多种肿瘤组织及肿瘤细胞,在肿瘤细胞的生长增殖、黏附迁徙中起重要作用.抑制CXCR7表达或阻断其信号传导通路可能为肿瘤治疗提供新策略.     

CXCR4和CXCR7在肿瘤中的研究进展

以往的研究认为趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)是趋化因子CXCL12的唯一受体,CXCL12/CXCR4生物轴在肿瘤发展过程中起重要作用,然而最近研究发现CXCL12尚存在CXCR7这一新的受体,并且CXCL12/CXCR7生物轴同样对肿瘤的发生发展起重要作用.本文就有关趋化因子受体CXCR4和CXCR7在肿瘤中的表达、促进肿瘤增殖和转移、促进血管新生以及肿瘤治疗等方面的研究作一综述.     

CXCL12和CXCR4在食管鳞癌组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的：新近研究显示CXCL12／CXCR4在多种肿瘤组织中有表达,并与肿瘤细胞的增殖、侵袭特性相关;本研究旨在检测CXCL12及其受体CXCR4在食管鳞癌中的表达,研究两者对食管癌预后的影响及其与临床及病理因素之间的关系。方法：收集食管癌术后标本186例及正常食管上皮组织20例（对照组）,应用免疫组化法检测食管癌组织中CXCR4与CXCL12的表达。结果：186例食管癌组织中CXCR4的表达率为67．2％,CXCL12的表达率为63．4％,20例正常食管上皮组织中无CXCR4及CXC112蛋白表达。多因素分析：PTNM分期及CXCR4的表达是影响食管癌根治术后患者预后的独立因素（P〈0．05）：CXCL12阳性组与阴性组5年生存率分别为18．8％和21．0％,差异无统计学意义（P〉0．05）。CXCR4阳性组与阴性组5年生存率分别为2．2％和28．5％。差异有统计学意义（P〈0．05）;有淋巴结转移组及病理分期T3期组CXCR4表达率较无淋巴结转移组及病理分期T1-2组高（P〈0．05）,食管癌组织中CXCR4的表达与CXCL12的表达之间无相关性。结论：CXCL12和CXCR4在食管癌组织中均有较高的表达,CXCR4的表达水平与食管肿瘤的发展及预后有一定的关系。     

CXCL12／CXCR4生物轴与消化系统恶性肿瘤

消化系统恶性肿瘤发病率及死亡率均远远高于其它系统恶性肿瘤，对消化系统恶性肿瘤的预防和治疗研究亟待进一步深入。细胞移位是相当多病理生理过程的基本步骤，包括恶性肿瘤细胞的生长及转移。越来越多地研究认为肿瘤细胞通过化学趋化因子及其相应受体介导的化学趋化机制调节其生长和转移，趋化因子在恶性肿瘤中具有多方面作用，归纳为：①诱导白细胞向肿瘤组织浸润，调节免疫功能，尤其是肿瘤相关的巨噬细胞、T细胞和树突状细胞；②引导肿瘤细胞迁移到特定部位；③调节血管生成；④直接活化肿瘤细胞，调控其恶性肿瘤相关的功能表现。近年研究发现，趋化因子CXCL12及其受体CXCR4构成的生物轴在包括乳腺癌在内的多种实体瘤的生长、转移中发挥重要作用。CXCL12／CXCR4生物轴与消化系统恶性肿瘤之间关系密切，CXCL12的刺激促进CXCR4的表达及消化系统恶性肿瘤的转移；CXCR4持续高表达预示肿瘤的复发及预后不良；在CXCL12作用下，肿瘤细胞黏附／迁移和增殖能力亦显著增强，这些效应被CXCR4的抗体所拮抗。未来研究寄希望通过拮抗影响肿瘤转移的CXCL12与CXCR4等趋化因子及其受体的作用来阻断消化系统恶性肿瘤转移，将可能会成为一种新的治疗消化系统恶性肿瘤的有效途径。     

CXCL12，CXCR4及CXCR7表达检测对乳腺癌患者疾病预后意义探讨

目的：探讨乳腺癌患者肿瘤组织中CXCL12,CXCR4和CXCR7 mRNA表达情况在肿瘤转移和疾病预后中的价值。方法采用定量PCR方法检测115例乳腺癌,临近正常组织及乳腺癌肿瘤转移患者颈部淋巴结样本中CXCL12,CXCR4和CXCR7 mRNA表达情况。随访资料采用Kaplan-Meier生存分析,对影响生存质量的因素进行多重变量Cox回归分析。结果与正常组织相比,乳腺癌组织中CXCR4和CXCR7表达明显增加,差异均有统计学意义（P﹤0.001）,两种组织中CXCL12的表达差异无统计学意义（P﹥0.05）;CXCL12在肿瘤原发部位和淋巴结转移部位的表达差异有统计学意义（P﹤0.05）,转移瘤的CXCR4和CXCR7表达均增加（P﹤0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果表明,与CXCR4和CXCR7低表达患者相比,高表达患者的总生存率较低（P﹤0.05）。Cox回归模型显示,CXCL12、CXCR4和CXCR7表达均为影响乳腺癌患者生存情况的独立因素。结论本研究结果表明CXCL12、CXCR4和CXCR7 mRNA表达在乳腺癌患者肿瘤发展和转移中发挥重要作用,可以作为乳腺癌患者疾病预后的生物标志物。     

基于TCGA数据库分析泛凋亡相关基因构建肺腺癌预后模型的预测价值及其对肿瘤免疫微环境的影响

摘 要：［目的］ 探讨泛凋亡（PANoptosis）对肺腺癌（lung adenocarcinoma，LUAD）患者预后及免疫微环境的预测价值。［方法］ 从TCGA数据库下载LUAD样本与正常样本的基因表达谱及临床数据，从已发表的文献中获取PANoptosis相关基因并分析其在肿瘤组和对照组间的差异表达基因。通过单变量Cox分析和LASSO-Cox回归分析构建生存预后模型，将患者按风险评分划为高、低风险组。通过Kaplan-Meier生存曲线和受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线下面积（area under the curve，AUC）评价模型的预测性能，再对模型风险评分进行独立预后分析。GO和KEGG富集分析探索生物功能和潜在的信号通路。采用TIMER数据库ESTIMATE算法综合分析PANoptosis相关基因与免疫微环境相关性。通过qRT-PCR验证PANoptosis预后相关基因在LUAD组织和正常肺组织间的差异表达。［结果］ 共有15个PANoptosis相关基因在LUAD组和正常组间存在差异性表达，从中筛选出4个PANoptosis预后相关基因（RIPK3、NLRP3、FADD、MLKL）。在LASSO-Cox回归模型中，高风险组的生存率低于低风险组（P<0.001）。单变量和多变量Cox分析显示该评分模型是LUAD的独立预后因素（HR=2.179，95%CI：1.347～3.524，P=0.001），而GO和KEGG分析显示差异表达基因主要富集于与免疫相关的通路。高低风险组之间免疫微环境、免疫细胞差异和免疫检查点基因表达差异显著。此外，qRT-PCR实验也证实PANoptosis相关基因FADD（P=0.007）和NLRP3（P<0.001）在LUAD组和正常组之间表达存在差异。［结论］ 本研究构建的PANoptosis相关基因的生存预后模型可以预测LUAD患者的预后及免疫微环境。     

CXCL12及受体CXCR4在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义

目的:探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在卵巢上皮性癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测6例正常卵巢表面上皮、44例卵巢上皮性癌原发灶和30例相应大网膜转移灶组织中的CXCL12和CXCR4蛋白表达。结果:正常卵巢表面上皮无CXCL12和CXCR4蛋白表达;卵巢上皮性癌原发灶的CXCL12和CXCR4表达阳性率分别为91%和59%。CXCL12表达强度与术中腹水量有显著相关性(P=0.014)。难治复发组的CXCR4阳性率(81%)显著高于无复发组(28%,P<0.001)。单因素分析显示:CXCR4阳性表达的患者中位数肿瘤无进展生存时间和总生存时间(15个月、27个月)明显短于CXCR4阴性表达者(>21个月、>32个月,分别为P<0.001和P=0.017)。多因素分析显示:CXCR4表达和残余灶大小是影响卵巢上皮性癌患者的肿瘤无进展生存时间和总生存时间的独立预后因素。结论:CXCR4在卵巢上皮性癌中的表达阳性率较高,是影响其预后的独立指标之一。     

结直肠癌CXCL12-CXCR4/CXCR7轴作用机制研究进展

目的 探讨趋化因子CXCL12及其受体与结直肠癌的关系,以总结最新研究进展。方法 应用PubMed、Web of Science数据库和中国期刊全文数据库(CNKI)检索系统,以“结直肠癌、CXCL12、CXCR4、CXCR7、靶向治疗和趋化因子等”为中文关键词,以“colorectal cancer、CXCL12、CXCR4、CXCR7、targeted therapy、chemokines”等为英文关键词,检索2010-01-01-2022-03-31的相关文献,共检索到中文文献76篇,英文文献256篇。纳入标准：(1)结直肠癌发生时CXCL12、CXCR4和CXCR7表达水平变化;(2)CXCL12-CXCR4/CXCR7轴对结直肠癌发生发展的影响及作用机制;(3)靶向干预CXCL12-CXCR4/CXCR7轴对结直肠癌的影响及相关临床研究。排除标准：结直肠癌与非CXCL12/CXCR4或CXCL12/CXCR7信号轴。最终共纳入分析文献56篇,中文16篇,英文40篇。结果 CXCL12及其受体在结直肠癌组织及常见转移部位表达显著升高,相关分子信号可通过CXCL12-CXCR4/...     

趋化因子CXCL12及其受体在人前列腺癌嗜神经过程中的表达及相关机制

目的：阐述CXCL12-CXCR4在前列腺癌嗜神经过程中的作用及相关机制。方法：H＆E染色观察前列腺癌细胞对肿瘤组织及其周围神经的浸润，免疫组织化学方法检测CXCL12和CXCR4、MMP-2、MMP-9在22例人前列腺癌和20例前列腺增生组织中的表达差别，浸润神经的肿瘤细胞CXCR4和CXCL12的表达。结果：在人前列腺癌组织中，存在着较明显的肿瘤细胞侵犯神经现象，人前列腺癌组织中CXCL12、CXCR4、MMP-2和MMP-9表达阳性率均较前列腺增生组织明显升高（P〈0．05），侵犯神经的肿瘤细胞表达CXCR4，神经组织内神经鞘膜细胞表达CXCL12。结论：在前列腺癌组织中存在肿瘤细胞嗜神经现象，肿瘤肿瘤细胞分泌CXCL12，CXCR4与MMP-2、MMP-9促进了癌细胞的嗜神经浸润。