三个抗弓形虫单抗免疫学特性的比较研究

<正> 材料和方法 一、单克隆抗体(McAb)的制备:按本室1984年建株的报道方法进行。 二、McAb的免疫反应特性测定方法:1.间接荧光试验;2.ELISA双McAb夹心法或ELISA单抗二抗夹心法。以上两法均与高效价免疫兔血清(PcAb)进行对比试验。     

抗β2-mG杂交瘤细胞系的制备及其单克隆抗体应用研究

本文应用纯化的β2-mG免疫BALB/c小鼠,制备了11株抗β2-mG单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系。首次应用β2-mG McAb建立了竞争性、宽范围(0.31～10μg/ml)的β2-mG放射免疫测定法(RIA),并将此法与市售商品药盒多克隆抗体(PcAb)RIA(检测范围0.005～0.08μg/ml)进行了比较,两者之间有极显著正相关(P<0.001)。实验结果表明:β2-mG McAb完全可以替代PcAb。作者又采用β2-mG McAb,将生物素-亲合素系统(BAS)引入时间分辨免疫荧光测量法(TRIFMA),成功地在国内首次建立人血清β2-mG的BAS-TR-IFMA,其可测范围达1.25-40μg/ml。     

用两种不同抗体致敏的血球试剂检测HBsAg的对比

<正> 在乙型肝炎病毒诊断方面,国内外一些学者已采用相应的 McAb 试剂。为考核 McAb 致敏血球在检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)临床诊断中的价值,我们应用卫生部上海生物制品研究所生产的常规抗体(简称多克隆抗体 PcAb)致敏诊断血球,以及新近供应的 McAb 致敏的诊断血球平行检测各类肝炎患者的血清316份。     

单克隆与多克隆抗体快速诊断轮状病毒性胃肠炎的比较研究

<正> 轮状病毒胃肠炎是广为流行的急性传染病,严重影响婴幼儿的生命与健康。实验诊断方法多,比较繁复,使用的动物免疫血清诊断试剂,又有制备较困难、效价低,且受非特异性因素影响等缺点,为探索更为快速简易和特异敏感的方法,我们制备了抗轮状病毒单克隆抗体(McAb),用之与多克隆抗体(PcAb)对比,进行了快诊轮状病毒胃肠炎的比较研究。     

单克隆抗体标记吖啶橙及葡萄球菌A蛋白快速检定霍乱弧菌的实验研究

我们曾报道了“多克隆抗体(PcAb)吖啶橙(Ao)免疫荧光法用于细菌快速鉴定”经实际应用证明这是一种敏感、特异、快速、简易适于基层应用的方法。本文报道的是以抗霍乱孤菌单克隆抗体(McAb)用于此简易法和葡萄球菌A蛋白协同凝集试验快速检定霍乱弧菌的实验研究结果。     

125Ⅰ标记的FLt4多抗导向定位淋巴结的可行性分析及其代谢动力学研究

探讨125Ⅰ标记的Flt4多抗(125Ⅰ-Flt4 PcAb)导向定位淋巴结的可行性及其在体内的代谢动力学特点,为应用Flt4 PcAb进行前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)的检测提供实验依据.应用氯胺T法对Flt4 PcAb进行125Ⅰ标记;125Ⅰ-Flt4 PcAb经大鼠足背皮下注射,研究125Ⅰ-Flt4 PcAb在淋巴结内浓集及其在体内的代谢动力学特点.结果表明125Ⅰ-Fit4 PcAb经皮下注射后,在胭窝淋巴结的ID(%)/mg值最高,血液次之,其它各组织器官均很小;胭窝淋巴结的ID(%)/mg值在注射后0.5h达最高,血液32h达最高;其在体内的代谢可进行二室动力学模型拟合,吸收相半衰期(T1/2Ka)为0.64±0.1d,清除相半衰期(T1/2β)为3.5±0.5d.这提示125Ⅰ-Flt4PcAb能够对淋巴结进行导向定位;它在体内的代谢符合二室动力学模型,清除相半衰期较长.     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎的实验研究

本文应用JEV-McAb对感染JEV的小白鼠及幼山羊进行实验性治疗,并对乙脑免疫机理作一初步探讨。结果表明,JEV-McAb对经不同途径感染各种JEV毒株的小白鼠都有较好的保护作用,其效果明显优于PcAb。小鼠感染后120小时,大部分已发病,个别已濒死,这时给予混合McAb或其F(ab′)_2,仍可保护约半数存活。McAb对感染JEV的幼羊也有较好的     

抗原捕获ELISA检测卡波济肉瘤相关疱疹病毒的方法建立

目的 建立检测卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的抗原捕获ELISA方法,初步探讨其临床应用的可行性. 方法 以纯化的抗gpK8.1单克隆抗体(McAb)和多克隆抗体(PcAb)配对作为包被抗体和检测抗体,建立和优化抗原捕获ELISA检测方法,评价其敏感性、特异性和重复性,并初步用于3例已知KSHV阳性血清和257例临床血清样品中抗原的检测. 结果 包被的McAb浓度为5μg/ml、检测抗体浓度为1.6 μg/ml时,P/N值最高,检测的敏感度为31.28 ng/ml,且与EB病毒(ESV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HSV-2)等抗原无交叉反应,特异性高.检测3例KSHV阳性患者血清均为阳性,在257例临床血清样品中,4例捕获到KSHV抗原. 结论 建立了检测KSHV的抗原捕获ELISA方法,为可能的KSHV检测试剂研制提供重要实验依据.     

肾综合症出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合症出血热病毒(HFRSV)陈株免疫获得5株单克隆抗体(McAb)。B_9株McAb具 有血凝抑制和体内保护活性;F_3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性。B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部份反应,与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株都反应。B_(11),F_3、H_7、H_(11)4株McAb可用于酶联免疫吸附试验(FLISA )。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特性研究

用肾综合征出血热病毒(HFRSV)陈氏株免疫获得5株单克隆抗体(McAb).B_9株McAb具有血凝抑制和体内保护活性:F_-3、H_(11)株McAb具有较弱的中和活性及体内保护活性;B_9株McAb与重型HFRSV毒株的大部分发生反应.与轻型HFRSV毒株不反应;F_3、H_7株McAb与检测的24个HFRSV毒株均发生反应.B_(11)、F_3、H_7、H_(11)等4株McAb可用于酶联免疫吸附试验。     

抗hGITRaa27-165多克隆抗体生物学活性的初步鉴定

目的:明确兔源性抗人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体胞外段的多克隆抗体(anti-hGITRaa27-165 PcAb)与人类天然GITR分子的结合能力及其对CD4+T细胞的生物学作用。方法:分离、刺激培养人外周血单个核细胞后,利用流式细胞术(FCM)检测anti-hGITRaa27-165 PcAb与细胞膜表面GITR分子的结合能力;免疫磁珠分离人外周血收集CD4+T细胞,以3H-TdR掺入试验分别检测在细胞刺激生长剂存在或不存在的情况下,anti-hGITRaa27-165PcAb对CD4+T细胞增殖的影响。结果:兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb可以与天然构象的GITR分子结合,且此种结合具有浓度依赖性;在细胞生长刺激因子存在或不存在情况下,该多抗均能促进CD4+T细胞增殖。结论:本室制备的兔源性anti-hGITRaa27-165 PcAb具有与天然分子结合的能力以及一定的生物学活性,进一步的研究可考虑将其应用于临床相关疾病的检测和治疗。     

分泌抗A群脑膜炎球菌多糖单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立

用A群脑膜炎球菌悬液免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞,经50％PEG处理进行融合。采用微量被动血凝试验(PHA)筛选及有限稀释法克隆化后,获得4株分泌抗A群脑膜炎球菌多糖单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系(WSA—C_(11),WSA—E_6,WSA—D_4,WSA—F_8),培养上清和诱生的小鼠腹水的特异性抗体的PHA和ELISA滴度分别为1.28—5.12×10~(-2)和1×10~(-5)—10~(-6)、4株McAb和PHA滴度均被A群脑膜炎球菌多糖抗原抑制,其血凝抑制滴度与所加抑制抗原的量成线性关系,4株McAb均与3株A群脑膜炎球菌菌株呈现强的玻片凝集反应,3株B群,2株C群,1株D群,及7株新群脑膜炎球菌菌株不发生效义玻片凝集反应。试验证明4株杂交瘤细胞所分泌的抗体是针对具有群特异性的A群脑膜炎球菌多糖抗原的。4株McAb具有很高的亲和力,经80～160倍稀释与A群脑膜炎球菌菌株仍呈现强的玻片凝集反应,而A群脑膜炎球菌诊断血清(Pc-Ab)高于10倍稀与本菌的玻片凝集反应明显减弱,McAc的细菌试管定量凝集反应滴度也较PcAb诊断血清高16～32倍。4株McAb均属小鼠IgM类。杂交瘤细胞系染色体计数为91～95条。4株条交瘤细胞在体外连续培养4个多月,40余代,经液氮冻存复苏后仍保持稳定的分泌抗体的能力。     

人血清免疫球蛋白工作标准的制备与标定

本文报导混合浓缩人血清工作标准(89-1)的制备和用WHO相应参考标准血清标定出其中五类免疫球蛋白(Igs)及IgG4亚类含量。该制剂主要用于体外测定IgG、IgA、IgM的工作标准,也可供作体外测定IgD、IgE、IgG4的工作标准。混合前每份血清均无乙型肝炎表面抗原、转氨酶正常。定量分装为每安瓿0.5ml,经冷冻干燥后,4℃保存。参照国际参考标准血清67/97及67/37,分别以免疫单扩散法标定89-1中IgG、IgA、ISM含量;以酶联免疫吸附试验(ELISA)标定IgD、IgG4和IgE含量。其中IgG、IgG4、IgA、IgM含量,应用本室制备的相应单克隆抗体(McAb)标定,而IgD和IgE应用多克隆抗体(PcAb)进行标定。并用五剂量法及四剂量法分别计算Igs含量。     

人体实质性肿瘤的单克隆抗体及其临床应用(文献综述)

<正> 自杂交瘤技术问世以来,现已迅速运用单克隆抗体(McAb)试图解决肿瘤抗原及肿瘤的诊断、治疗等一系列问题。本文主要介绍人体实质性肿瘤McAb的研制近况及探讨用于临床诊断和治疗的可能性。 一、人体实质性肿瘤McAb的研制: (一)已建立的杂交瘤及其McAb的特性:目前制得肿瘤McAb大部分是小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾脏细胞融合的杂交     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎的实验研究

本文应用JEV-McAb对感染JEV的小白鼠及幼山羊进行实验性治疗,并对乙脑免疫机理作一初步探讨。结果表明,JEV-McAb对经不同途径感染各种JEV毒株的小白鼠都有较好的保护作用,其效果明显优于PcAb。小鼠感染后120小时,大部分已发病,个别已濒死,这时给予混合McAb仍可保护约半数存活。McAb对感染JEV的幼羊也有较好的保护作用。羊脑内注入JEV48小时后,出现发热不安等症状,这时由腹腔和椎管两种途径同时给予混合McAb,保护率达100％。但单一腹腔或椎管注射无效,可能与血脑屏障的作用有关。存活实验动物脑组织内未分离出病毒;而死亡实验动物病毒分离阳性,脑组织双PAP及HE染色证实JEV抗原阳性并伴有脑炎的病理学改变。中和活性是JEV-McAb的主要保护方式,中和效价高的McAb保护率也高。     

^125标记的Flt4多抗导向定位淋巴结的可行性分析及其代谢动力学研究

探讨^125I标记的Flt4多抗（^125I-Flt4 PcAb）导向定位淋巴结的可行性及其在体内的代谢动力学特点,为应用Flt4PcAb进行前哨淋巴结（sentinel lymph node,SLN）的检测提供实验依据。应用氯胺T法对Flt4PcAb进行^125I标记;将^125I-Flt4 PcAb经大鼠足背皮下注射,研究^125I-Flt4 PcAb在淋巴结内浓集及其在体内的代谢动力学特点。结果表明^125I-Flt4 PcAb经皮下注射后,在腘窝淋巴结的ID（%）/mg值最高,血液次之,其它各组织器官均很小;腘窝淋巴结的ID（%）/mg值在注射后0.5h达最高,血液32h达最高;其在体内的代谢可进行二室动力学模型拟合,吸收相半衰期（T1/2Ka）为0.6&#177;0.1d,清除相半衰期（T1/2β）为3.5&#177;0.5d。这提示^125I-Flt4 PcAb能够对淋巴结进行导向定位;它在体内的代谢符合二室动力学模型,清除相半衰期较长。     

用单克隆抗体作探针研究大肠杆菌RNA多聚酶α亚基的排布(文摘)

本文用3株抗大肠杆菌RNA多聚酶α亚基的单克隆抗体(McAb 124D1,126 C6,129C4)研究了大肠杆菌RNA多聚酶α亚基性质。采用~(125)I标记McAb双抗体夹心检测与RNA聚合酶的结合能力。研究发现:3株单克隆抗体都不能抑制d(A-T)n引导的r(A-U)n合成;McAb 129 C4和McAb 126 C6株可以抑制RNA多聚核心酶体外重新构建,McAb 124 D1株则无作用;     

小鼠杂交瘤腹水、实体瘤及血清中单抗滴度观察

<正> 单克隆抗体(McAb)的生产常规都是将杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔诱发其产生腹水而获得。但在制备腹水的过程中,常可见到小鼠腹腔生长成大量实体瘤而影响腹水的产生。为了能及时获得所需的McAb,我们在制备抗B型葡萄球菌肠毒素(SEB)McAb腹水的过程中,比较了实体瘤与相应鼠腹水和血清中所含特异性McAb的滴度。     

Tamm-Horsfall糖蛋白单克隆抗体制备及其临床应用

用0.58mol/L NaCl沉淀提取Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)制备了三株抗THP单克隆抗体(McAb)。免疫印迹技术(Immunoblotting Technigue,IBT)证明这些McAb特异性地和94kD THP抗原结合,ELISA抑制试验表明三株McAb识别THP抗原的不同位点。用McAb双夹心ELISA法测定尿THP的含量,表明尿THP含量与血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)呈显著负相关(P<0.01),与内生肌酐清除率(Ccr)呈明显正相关(P<0.01),BUN、Scr、Ccr正常的各种肾病尿THP含量无明显异常(P<0.05)。测定尿THP含量可作为判断肾功能损害程度的良好指标。     

主要组织相容性抗原的单克隆抗体

本文将论述与组织相容性抗原反应的单克隆抗体(McAb),并着重讨论己产生了大部分相应McAb的种属(即:小鼠、大鼠、人、和鸡)。这样,既论述那些广泛分布的抗原的McAb(如H-2k,D,L;HLA-A、B、C),也涉及那些分布有限的抗原的McAb(Ia,DR)。本综述所含内容,限于由以上种属主要组织相容性复合物(MHC)基因编码的决定簇图。 毫无疑问,MHC抗原的McAb是可以产生的。这一事实可从关于小鼠抗某些种属MHC