活化性受体NKG2D及其配体的研究进展

NK细胞是肌体免疫系统至关重要的组成部分,其表达多种活化性和抑制性细胞表面受体。NKG2D是较为独特的活化性受体,属C型凝集素家族跨膜蛋白,分布较广,NK细胞、T细胞和其他免疫细胞都可以产生,其配体具有多样性,MHCⅠ类相关分子（MIC）是人类NKG2D识别的配体之一,应激性表达在一些肿瘤细胞或病原体感染细胞的表面。NKG2D既能直接活化NK细胞,又能以协同刺激的方式促进CD8^＋αβT细胞的活化,在抗肿瘤免疫和病毒感染等方面发挥重要作用。     

NKG2D及其配体研究进展

NKG2D是较为独特的NK细胞活化性受体，其配体具有多样性，因而其识别机制较独特；其表达范围不仅局限于NK细胞，还在T细胞、巨噬细胞、树突状细胞中有表达，功能上，不仅有直接刺激作用，还能作为协同刺激分子传递第二信号。NKG2D及其配体的研究对抗肿瘤免疫、抗感染免疫、自身免疫病的认识具有重要意义。本文对NKG2D及其配体的研究进展作一综述。     

NKG2D及其配体在白血病免疫监视中的作用

NKG2D是免疫细胞表面的激活性受体,在机体的抗肿瘤免疫、抗感染免疫以及自身免疫病的发生中发挥重要作用。NKG2D识别肿瘤细胞表面的配体,激活效应细胞,产生有效的抗肿瘤免疫应答,是肿瘤免疫监视机制之一。近来研究发现白血病细胞表达多种NKG2D配体,参与白血病的免疫监视。本文就NKG2D及其配体对白血病免疫监视和免疫逃逸的作用作一综述。     

NKG2D及其配体研究进展

NKG2D是较为独特的NK细胞活化性受体 ,其配体具有多样性 ,因而其识别机制较独特 ;其表达范围不仅局限于NK细胞 ,还在T细胞、巨噬细胞、树突状细胞中有表达 ,功能上 ,不仅有直接刺激作用 ,还能作为协同刺激分子传递第二信号。NKG2D及其配体的研究对抗肿瘤免疫、抗感染免疫、自身免疫病的认识具有重要意义。本文对NKG2D及其配体的研究进展作一综述。     

NKG2D配体在鼻咽癌细胞的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响

NK细胞对靶细胞的杀伤活性与其细胞表面的受体和靶细胞表面的配体密切相关，NKG2D为NK细胞活化性受体，表达于所有的NK细胞表面，是介导NK细胞识别和溶解肿瘤细胞的主要活化性受体。NKG2D配体为MHCⅠ类链相关基因产物（MICA、MICB）及ULBPS（人巨细胞病毒UL16蛋白的结合蛋白ULBP1、ULBP2、ULBP3），NKG2D的配体在多种肿瘤细胞表达，其在鼻咽癌细胞的表达尚未见报道。本文通过流式细胞仪技术探讨其在鼻咽癌细胞CNE2的表达情况，并进一步分析其在NK细胞杀伤CNE2细胞中的作用。     

NKG2D受体与白血病的免疫监视和免疫逃逸

NK细胞是机体肿瘤免疫中的第一道防线,NKG2D是NK细胞表面最强的一种活化性受体。1991年在筛选人类NK细胞的优势表达基因时被发现,也是近年来研究者较为关注和研究深入的一个受体。许多研究表明,NKG2D在白血病免疫中起着重要的作用,因而研究具有重要意义。     

NKG2D与NKG2DL在肺癌免疫调节中的作用及临床意义

NKG2D与NKG2DL是目前研究的热点,NKG2D可表达于几乎所有的NK细胞、CD8+αβT细胞、γδ T细胞及少量CD4+αβT细胞的细胞膜表面,与其配体NKG2DL结合后,可激活NK细胞及T细胞,诱导机体的抗肿瘤免疫应答,杀伤表达NKG2DL的肿瘤细胞,因此,NKG2D及其配体NKG2DL在肿瘤的免疫调节过程中起着极其重要的作用.目前肺癌的预后仍不容乐观,迫切需要发展一种新型的治疗方法来达到特异杀灭肿瘤细胞而不损伤或仅轻微损伤正常细胞的目的,这使得免疫疗法成为一种极具吸引力及应用前景的治疗肺癌的方法.     

膜型/分泌型MICA对NK细胞受体NKG2D的相反调节效应及其对NK细胞受体谱的影响

目的　观察膜型和分泌型MICA对NK细胞受体表达的影响 ,以探讨NK细胞抗肿瘤活化机制及肿瘤细胞表达MICA分子的意义。方法　用MTT法测定人NK细胞系 (NK92 )的细胞毒活性 ;用RT PCR或FACS检测NK细胞受体 (NKG2D ,NKG2A B ,KIR2DL1,KIR2DS1)及NKG2D的识别配体MICA的表达。结果　肿瘤细胞表面的MICA分子可上调NKG2D的表达 ,下调抑制性受体NKG2A B和KIR2DL1的表达 ;而分泌型MICA (sMICA)分子对NKG2D及抑制性受体的表达均有抑制作用。结论　膜型MICA分子可上调NKG2D的表达 ,激发NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒效应 ;分泌型MICA分子则通过降低NKG2D的表达下调机体的抗肿瘤免疫效应 ,肿瘤细胞分泌sMICA分子为肿瘤发生免疫逃逸的机制之一。     

卵巢肿瘤患者自然杀伤细胞活化性受体NKG2D与其配体MICA表达的初步研究

目的:研究卵巢癌、良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面活化性受体NKG2D的表达及局部组织中相应配体MICA的表达情况,并结合临床病理因素分析探讨宿主NK细胞受体NKG2D在抗卵巢癌中的作用及其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法:对4 2例卵巢癌、2 3例良性卵巢肿瘤及2 0例正常妇女,采用流式细胞术检测外周血NK细胞NKG2D的表达状况,RT PCR技术检测在上述部分相应组织标本中MICA的表达。结果:恶性、良性卵巢肿瘤患者及正常人外周血NK细胞NKG2D的表达水平分别为( 94 2 3±6 0 2 ) %、( 98 70±0 98) %、( 98 6 1±1 5 9) % ,恶性组与另两组之间比较,差异有统计学意义(P <0 0 5 ) ;相应配体MICA在卵巢癌组织中的表达率较良性卵巢肿瘤中明显增高,差异有统计学意义(P <0 0 1) ;在卵巢癌病人是否绝经、不同组织类型、分化程度、手术分期及是否淋巴转移等各组临床病理情况下,其表达率未见明显差异(P >0 0 5 )。结论:卵巢恶性肿瘤患者外周血NK细胞活性降低,其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一。NKG2D的配体MICA的基因表达可能与卵巢癌的恶性转化有一定的相关性,卵巢癌的免疫逃逸可能与NKG2D表达下调及其配体MI CA的表达升高有关     

卵巢肿瘤患者外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NK活性检测的临床意义

通过研究卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面受体的表达情况及NK活性的变化,分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床价值。分离受检者外周血单个核细胞,应用MTT法检测NK细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测NK细胞受体NKG2D和NKG2A的表达,并结合临床病理因素作比较分析。结果显示,与良性卵巢肿瘤组和正常组相比,卵巢癌患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低,NK细胞表面NKG2D的表达水平降低,而NKG2A的表达水平明显升高,其变化与卵巢癌的病情进展有关。此结果表明,卵巢癌患者机体NK细胞杀伤活性下降,NKG2D与NKG2A二者之间的平衡表达可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用。     

人MICA基因多态性和表达特性与肿瘤的关系

近年来,关于MICA与肿瘤关系的研究进展显著。MICA是NK细胞活化性受体NKG2D的配体,可高表达于上皮源性的肿瘤细胞;NKG2D不仅表达于NK细胞,还表达于CTL和Vδ1γδT细胞;NKG2D以一种可诱导的方式识别并结合MICA,从而活化上述抗瘤效应细胞。     

氧化应激可选择性诱导细胞的NKG2D配体的表达

目的 探讨氧化应激与细胞NKG2D配体表达的关系,分析氧化应激对NK细胞功能的影响。方法 加H2O2诱导培养的肿瘤细胞处于氧化应激状态。用RT-PCR、Real-time PCR和流式细胞仪等方法分析细胞多种NKG2D配体的表达。用CCK-8法检测NK92细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果 氧化应激可诱导肿瘤细胞多种NKG2D配体的表达,不同的肿瘤细胞诱导表达的NKG2D配体不同;NKG2D配体表达上调可有效提高NK细胞的细胞毒活性,此效应可被抗NKG2D抗体所阻断。结论 NKG2D配体可能在机体的免疫应答中发挥正向的调节作用。     

MHC I类链相关蛋白A的表达调控与抗肿瘤免疫

MHC I类链相关蛋白A(MICA)是非经典的HLA I类分子,是活化性受体NKG2D的配体,在感染、肿瘤及细胞应激情况下表达上调,其表达量及形式的变化,直接影响多种免疫效应细胞功能表现。本文就近年来对MICA的表达调控以及与抗肿瘤免疫关系方面进行综述。     

MHC Ⅰ类链相关蛋白A的表达调控与抗肿瘤免疫

MHC I类链相关蛋白A(MICA)是非经典的HLA I类分子,是活化性受体NKG2D的配体,在感染、肿瘤及细胞应激情况下表达上调,其表达量及形式的变化,直接影响多种免疫效应细胞功能表现。本文就近年来对MICA的表达调控以及与抗肿瘤免疫关系方面进行综述。     

妊娠期uNK、pNK细胞NKG2A与NKG2D的表达及其生物学意义的研究

目的:研究妊娠期妇女子宫NK细胞(uNK细胞)与外周血NK细胞(pNK细胞)表面NKG2A和NKG2D及其相应配体的表达,探讨uNK细胞表面NKG2A和NKG2D的不平衡表达与母胎界面所形成的免疫耐受关系。方法:采用流式细胞术检测30例孕6～9周的正常妊娠妇女uNK细胞和pNK细胞NKG2A、NKG2D的表达状况;RTPCR技术检测绒毛膜组织HLAE、MICA的表达。结果:子宫NK细胞NKG2A的表达显著高于外周血NK细胞,二者分别为(97.86±1.75)%与(33.35±10.92)%;子宫NK细胞NKG2D的表达水平与外周血NK细胞相近,分别为(93.21±4.52)%与(97.80±1.72)%,滋养层组织仅检测到HLAEmRNA的表达。结论:妊娠期子宫NK细胞表面高表达抑制性受体NKG2A,同时滋养层组织表达相应的配体HLAE,这可能是维持母胎界面免疫耐受的重要因素。     

IL-2促进PBMC来源的NK、NKT、CD8+T细胞高表达NKG2D

目的 观察大剂量IL-2活化的人外周血单个核细胞（PBMC）中，NKG2D在NK细胞、T细胞和NKT细胞表面的表达规律。方法 使用三重免疫荧光标记的流式细胞术检测NKG2D的表达情况。使用sMICA蛋白与人PBMC共同培养，之后使用流式细胞术分析NKG2D在NK细胞中的表达情况。使用半定量RT-PCR方法检测大剂量IL-2活化的人PBMC中NKG2D及其锚定蛋白DAP10 mRNA的表达变化。结果 使用大剂量IL-2活化人PBMC细胞后，NKG2D在NK细胞、CD^＋T细胞和NKT细胞表面的表达均增加，但是在CD4^＋T细胞表面始终不表达。同时IL-2可以拮抗sMICA对NKG2D的下调作用。半定量RT-PCR结果显示，使用大剂量IL-2活化人PBMC之后，NKG2D及其锚定蛋白DAP10的mRNA水平并不发生明显变化。结论 大剂量IL-2培养人PBMC之后，NKG2D在NK细胞、CD8^＋T细胞和NKT细胞表面的表达均增加，可能是PBMC活化并获得广谱抗肿瘤效应的机制之一．     

激活性受体自然杀伤细胞2D及其配体的研究进展

自然杀伤细胞2D(natural killer cell 2D,NKG2D)是NK细胞、CD8+T细胞的一种活化性受体,属于C型凝集素样超家族,可与靶细胞表面的NKG2D配体结合,通过接头蛋白传递活化信号,激活或协同激活免疫效应细胞对靶细胞的杀伤效应,在抗肿瘤、抗感染免疫中具有极为重要的作用.随着对NKC2D及其配体研究的不断深入,开发其在疾病预防与治疗方面的应用将成为新的研究热点.本文就NKG2D及其配体的表达形式、信号转导作用及其功能的最新研究成果作一综述.     

NKG2D的结构与功能

目的:探讨NK细胞活化性受体NKG2D的结构与功能。方法:采用回顾性分析法系统归纳总结国内外近20年有关NKG2D结构与功能的研究资料。结果:NKG2D是表达于NK细胞表面的Ⅱ型膜蛋白受体,其基因定位于12p12. 3-p13. 1,含10个外显子和9个内含子。NKG2D单聚体蛋白质的三维结构含2个α螺旋,2个β片层,4个二硫键,主要依靠接头蛋白传递活化信号。NKG2D以同源二聚体形式结合DAP10,并使之磷酸化,然后与肿瘤表面的相应配体MICA、MICB、ULBPs结合,激活PI3K、PLCγ2、JNK-cJunN等信号通路,使NK细胞TNF-α、IFN-γ、颗粒酶释放分泌增加,Fas L、TRAIL表达上调,对肿瘤细胞发挥细胞毒性效应。结论:活化的NK细胞高表达NKG2D,而肿瘤细胞则高表达MICA、MICB、ULBPs,活化NK细胞表面的NKG2D与MICA、MICB、ULBPs结合,触发NK细胞释放多种细胞因子、分泌颗粒酶、表达Fas L、TRAIL,使靶细胞溶解,多途径发挥抗肿瘤作用。     

NK细胞受体群谱偏移与肿瘤免疫逃逸及逆转

NK细胞功能的发挥取决于其表面活化受体和抑制性受体识别靶细胞表面相应配体后所传递信号的平衡状态。肿瘤在发生发展的过程中进化出许多机制,调控NK细胞活化受体和抑制性受体的表达及肿瘤细胞NK细胞识别的配体表达的平衡状态,通常表现为活化受体/配体表达受到抑制而抑制性受体/配体表达增强的群谱偏移现象,成为肿瘤细胞削弱肿瘤微环境中NK细胞功能、诱导NK细胞免疫耐受甚至功能耗竭,最终导致肿瘤免疫逃逸的重要机制。本文就肿瘤发生发展过程中NK细胞受体/配体表达的失衡与肿瘤免疫逃逸的关系及基于逆转NK受体及其配体失衡的免疫治疗策略(尤其是抑制性受体的Checkpoint阻断疗法和CAR修饰的NK细胞治疗)等方面的研究进展做一综述。     

MIC基因的研究进展

MICA和MICB是MIC(MHC classⅠchain-related Gene)家族的功能性基因,属于非经典的HLA-Ⅰ类基因,且具有较高的多态性。它们只在正常的胃肠道上皮和大多数上皮性肿瘤细胞表达。MICA/B为NKG2D的配体,与NKG2D/DAP10结合,激活NK细胞等发挥免疫监视作用;并且发现MICA/B与某些自身免疫性疾病(如阿狄森氏病、白塞氏病等)存在一定的相关性。