六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:研究六月青皂苷(Liuyueqing Saponins,LYQS)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响.方法:实验动物随机分为5组:空白对照组、环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)模型组和LYQS高、中、低剂量组.除空白对照组外,其它各组小鼠于给药的第2、4、6、8、10天腹腔注射CTX(0.02 g·kg-1·d-1)造模.空白对照组和CTX模型组均用生理盐水(20ml·kg-1·d-1)灌胃;LYQS高、中、低剂量+CTX组用LYQS[(1、0.5、0.25)g·kg-1·d-1)]灌胃,给药10天后,检测小鼠血中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量、血红蛋白(Hb)含量和TNF-α、IFN-γ、TGF-β1、IL-2含量;检测胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞转化功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞杀伤活性和血清50％溶血值(HC50);观察二硝基氟苯诱导的迟发型超敏反应.结果:与CTX模型组比较,LYQS各剂量组的胸腺指数明显提高;高剂量组的WBC数量、耳肿胀度明显提高;高、中剂量组的RBC、Hb、IL-2、脾脏指数、HC50、脾淋巴细胞转化功能、巨噬细胞廓清指数和吞噬指数明显提高;高、中剂量组的TGF-β1明显降低.结论:LYQS能增强CTX免疫抑制模型小鼠的特异性及非特异性免疫反应,提高其免疫功能.     

地塞米松联合归脾汤通过调控巨噬细胞极化平衡缓解免疫性血小板减少症

目的：探讨归脾汤通过抑制核因子κB(NF-κB)通路调控单核巨噬细胞极化平衡而缓解气虚型原发性免疫性血小板减少症（ITP）的作用及机制。方法：收集64例初诊原发性ITP患者，随机分成两组各32例：地塞米松（Dex）治疗组和Dex+归脾汤联合治疗组；另选择同期健康者30例为对照组。采用血细胞分析仪检测初诊ITP组、Dex治疗组和Dex+归脾汤联合治疗组的血小板数量。收集治疗前后各组血清，使用ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和5-羟色胺（5-HT）的表达。磁珠分选各组外周血单个核细胞，体外培养后用佛波酯诱导为M0型巨噬细胞，并分别用脂多糖（LPS）+IFN-γ或白细胞介素4(IL-4)诱导；利用流式细胞术检测各组细胞的M1型指标CD80或M2型指标CD206；使用ELISA检测各组细胞上清中IL-12和IL-10的表达。采用Western blot法检测NF-κB通路相关蛋白p65、p-p65及吲哚胺2,3双加氧酶（IDO）蛋白水平。结果：与初诊ITP组比较，两组治疗均能够升高血小板数量（P<0.05），而与Dex治疗相比，Dex+归脾汤联合治疗效果...     

原发免疫性血小板减少症患者CD4+T细胞CD28的表达及其与IFN-γ/IL-10比率的关系

目的 研究原发免疫性血小板减少症(ITP)患者治疗前、后,外周血CD4+的T淋巴细胞中共刺激分子CD28的表达及与IFN-γ/IL-10比率的关系.方法 采用流式细胞术分析30例ITP患者糖皮质激素治疗前、后和26例正常对照外周血CD4+T细胞上CD28表达率,用ELISA双夹心法检测外周血血清中IFN-γ和IL-10的水平,评价CD4+ CD28+与IFN-γ/IL-10平衡状态、血小板计数之间的关系.结果 ITP患者治疗前CD4+ CD28+的表达显著高于正常对照组(P＜0.05),治疗后与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);ITP患者治疗前IFN-γ水平较正常对照组显著增高,IL-10水平显著降低,IFN-γ/IL-10比值显著增高(P＜0.01),治疗后与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);ITP患者治疗前CD4+ CD28+与IFN-γ/IL-10比值呈正相关(P＜0.05),与血小板计数呈负相关(P＜0.05).结论 共刺激分子CD28与ITP免疫紊乱密切相关,可能通过参与Th1优势状态形成而在ITP的发病中发挥一定作用.     

γ-干扰素在小剂量美法仑治愈肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血血小板计数的影响及其意义

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)在小剂量美法仑治愈肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血血小板(PLT)计数的影响及其意义.方法:利用单一剂量美法仑治愈荷瘤野生型C57BL/6小鼠模型, 取遗传背景相同、基因型不同的IFN-γ+/- 和IFN-γ-/- C57BL/6小鼠各6只, 观察7.5 mg/kg美法仑治疗后两组荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化, 并且分别在美法仑用药前第3天、用药后6 h、用药后第4、 7、 11、 15、 28天内眦静脉取血, 肝素抗凝后进行血常规检测, 观察两组荷瘤小鼠外周血PLT计数的动态变化并进行比较, 了解美法仑治疗后荷瘤小鼠化疗的疗效及其外周血PLT计数的变化与体内IFN-γ免疫功能之间的关系.结果:美法仑用药前两组荷瘤小鼠肿瘤结节的直径和外周血PLT计数比较差异无统计学意义(P>0.05).7.5 mg/kg美法仑用药后第1天, 两组荷瘤小鼠肿瘤结节缩小均不明显;用药后第4天, 荷瘤IFN-γ-/-小鼠肿瘤生长轻度受抑后进行性增大, 并在用药后2周内所有小鼠肿瘤复发、死亡, 而对照组IFN-γ+/- 小鼠肿瘤的肿瘤结节进行性缩小、肿瘤消退并治愈.7.5 mg/kg美法仑用药后6 h, 荷瘤IFN-γ+/- 小鼠外周血PLT计数较前明显升高, 达(1935±378)×109/L (P<0.01), 而荷瘤IFN-γ-/-小鼠外周血PLT计数较前无明显升高, 为(1183±186)×109/L (P>0.05), 两组数据比较差异具有统计学意义(P<0.01).美法仑用药1 d以后, 荷瘤IFN-γ+/- 小鼠外周血PLT计数较前逐渐下降, 用药后第11天降至(1158±270)×109/L, 恢复至化疗前水平(P>0.05);而荷瘤IFN-γ-/-小鼠外周血PLT计数一直维持在正常水平;两组荷瘤小鼠外周血PLT计数比较差异无统计学意义.结论:小剂量美法仑治疗荷瘤C57BL/6小鼠过程中, IFN-γ免疫功能正常的荷瘤IFN-γ+/-小鼠在用药后6 h出现外周血血小板计数的"一过性"增高, 小鼠肿瘤治愈;而IFN-γ免疫功能缺陷的荷瘤IFN-γ-/-小鼠在用药后6 h不出现外周血PLT计数的增加, 小鼠肿瘤复发死亡.提示在小剂量美法仑治愈肿瘤过程中荷瘤小鼠外周血PLT计数的升高与其体内IFN-γ的免疫功能密切相关.     

ITP患者血清中可溶性Tim3/Galectin9水平及其临床意义

目的探讨原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者血清中可溶性Tim3(sTim3)、Galectin9及Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)、Th17(IL-17)、Treg(TGF-β)细胞因子表达水平变化在ITP患者发病中的作用及意义。方法采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测35例ITP初诊患者和20例正常对照血清中sTim3、Galectin9及IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的表达水平。结果与正常对照组比较,35例ITP患者血清中sTim3、Galectin9的表达水平升高(P0.001);血小板数量降低(P0.001);Th1和Th17相关细胞因子表达水平升高(均P0.05),Th2和Treg相关细胞因子表达水平降低(均P0.05);sTim3与IFN-γ、PLT呈相关性,sTim3与IL-4、IL-17、TGF-β无相关性;Galectin9与sTim3、IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β、PLT无相关性。结论在ITP患者血清中sTim3和Galectin9表达水平升高,可能在ITP免疫失衡中发挥了一定作用。     

人来源脂肪干细胞对特发性血小板减少性紫癜小鼠疗效分析

目的 通过注射人来源脂肪干细胞(hADSC)，了解hADSC能否改善特发性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠血小板水平和调控辅助性T细胞(Th)细胞免疫功能紊乱。方法 选择无特定病原体级健康白变种实验室(BALB/c)雌性小鼠30只，体质量为15～25 g，鼠龄6～8周。选择年龄21～36岁女性健康志愿者6例，通过外科医生无菌条件下获取的不再临床应用的人体脂肪组织。应用贴壁细胞培养法及梯度离心法，将分离后脂肪干细胞鉴定、培养和增殖；将30只BALB/c小鼠随机分为正常组、对照组和治疗组，除了正常组，对照组和治疗组小鼠按免疫法建立小鼠ITP模型。建模后，治疗组输注hADSC，而对照组则注射等量的磷酸盐缓冲溶液(PBS)。再用血细胞分析仪检测各组外周血血小板，用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测外周血血小板相关免疫球蛋白(PAIgG)和Th1/Th2/Th3/Th17细胞因子水平，并用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测脾脏组织中相关因子mRNA表达。结果 与正常组干扰素γ(IFN-γ)(128.44 pg/mL±10.29 pg/mL)、白细胞介素(IL)2 (20.14 pg/mL...     

炙甘草多糖对小鼠巨噬细胞再极化的影响

目的:建立探讨炙甘草中等分子量多糖(MPRR)诱导巨噬细胞极化的情况,阐明肿瘤微环境中极化后巨噬细胞对小鼠4T1乳腺癌细胞生长的影响。方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,采用IL-4诱导并建立M2型极化模型,将培养细胞分为未诱导细胞(M0)组、M2极化(IL-4诱导)组、MPRR诱导组和Rp组(IL-4诱导12 h后MPRR再极化诱导组),流式细胞术分析巨噬细胞极化标志(CD86和CD206)的表达。免疫印迹技术分析转录因子STAT-6表达和磷酸化。收集不同条件下巨噬细胞培养上清液,ELISA法检测其IFN-γ和TGF-β浓度。结果:与对照组比较,IL-4诱导后细胞发生M2极化,可检测到RAW264.7细胞表面CD86表达下降(P0.05),CD206表达增加(P0.05)。而MPRR促进细胞向M1极化,可观察到其促进CD86表达而降低CD206表达(P0.05)。M2极化后STAT-6磷酸化增加,IFN-γ分泌减少而TGF-β分泌增加(P0.05);经MPRR处理减弱STAT-6磷酸化和TGF-β的分泌,促进IFN-γ分泌(P0.05)。结论:炙甘草水溶性多糖促进巨噬细胞的M1极化,可拮抗IL-4诱导其M2极化效应,炙甘草多糖可调节小鼠巨噬细胞再极化。     

特发性血小板减少性紫癜患者Th1/Th2的细胞因子水平及临床意义

目的:检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血Th1(IL-2、IFN-γ)及Th2(IL-4、IL-10)细胞因子的变化,探讨ITP患者发病与Thl/Th2优势活化状态之间的关系.方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测30例ITP患者治疗前、治疗后及26例健康志愿者外周血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平.结果:ITP患者治疗前IFN-γ及IL-2因子水平高于治疗后和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而IL-4及IL-10因子治疗前水平低于治疗后和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Thl型细胞因子介导的免疫应答在ITP的发病机制中占主导地位,糖皮质激素治疗可调整Th1/Th2细胞因子的偏移状态.     

孟鲁司特钠对ITP 模型小鼠T 淋巴细胞亚群及晚期氧化蛋白产物的影响

目的:探讨孟鲁司特钠对特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠T 淋巴细胞亚群、细胞因子及晚期氧化蛋 白产物(AOPP)的水平,分析孟鲁司特钠治疗ITP 的机制。方法:将40 只ITP 模型小鼠随机分为对照组、模型组、孟鲁司特钠 低剂量组(3 mg/ kg)和孟鲁司特钠高剂量组(12 mg/ kg)。成功造模后第8 天开始,连续14 d 给药后,计算血小板数量(PLT)、 胸腺、脾脏指数,采用流式细胞仪检测外周血T 淋巴细胞亚群,酶联免疫法检测血清中IL-6、TNF鄄琢、AOPP 水平。结果:与空白 组小鼠比较,模型组小鼠的PLT、脾脏指数、CD8+ 、IL-6、TNF-α、AOPP 水平显著升高(P<0.05),CD3+ 、CD4+ 、CD4+ / CD8+ 水平显 著下降(P<0.05);与模型组比较,孟鲁司特钠低、高剂量组小鼠脾脏指数、CD8+ 、IL-6、TNF-α、AOPP 水平显著降低(P<0.05), CD3+ 、CD4+ 、CD4+ / CD8+水平显著上调(P<0.05)。结论:孟鲁司特钠能够通过调节免疫功能紊乱,消除AOPP 积累,降低IL鄄6、 TNF鄄琢水平,对ITP 起治疗作用。     

ITP患者脾切除前后外周血Th亚群细胞因子的变化及意义

目的: 探讨辅助性T淋巴细胞(T helper lymphocyte,Th)亚群细胞因子在原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术前后的表达及意义。方法: 采用QuantiGene Plex (QGP)方法检测22例ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1(IL-2和IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-5、IL-6和IL-10)、Th3(TGF-β₁)和Th17(IL-17)细胞因子mRNA表达水平的变化。30例健康体检者作为对照组。结果: (1)术前组IL-2表达水平较对照组明显降低(P<0.05),IL-17表达水平较对照组明显升高(P<0.05),其它细胞因子表达水平在术前组和对照组之间无显著差异(P>0.05)。术后组TGF-β₁表达较术前组和正常对照组均明显升高(P<0.05);术后组IL-2 表达较术前有所升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。其它细胞因子表达水平在术前组和术后组之间无显著性差异(P>0.05)。(2)术前IL-2与IFN-γ之间成正相关(r=0.647,P<0.01),术前其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。术后3对细胞因子之间成正相关,分别是IL-2与IFN-γ(r=0.787, P<0.01),IL-17与IL-2(r=0.554,P<0.01),IL-17与IFN-γ(r=0.461,P<0.05);术后其它细胞因子之间均无明显相关性(P>0.05)。 结论: ITP患者存在Th亚群细胞因子失衡,脾切除术可改善ITP患者部分Th亚群细胞因子的失衡。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的:观察Th22细胞在原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中的变化.方法:用流式细胞术分别检测ITP初诊组、治疗后完全反应(CR)组及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例.用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各组外周血中IL-22、TGF-β、TNF-α、IL-6的表达水平.用半定量RT-PCR分别检测各组外周血中IL-22 mRNA的表达水平.并逐层分析比较.结果:ITP初诊组和治疗后组Th22细胞比例、外周血中IL-22、TNF-α、IL-6的表达水平以及IL-22mRNA的表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.01),治疗后组Th22细胞比例、IL-22、TNF-α、IL-6、IL-22 mRNA的表达水平均低于初诊组(P＜0.05);ITP初诊组和治疗后组TGF-β水平分别为(3.27±1.02)ng/L、(5.41±1.69)ng/L明显低于正常对照组(9.65±2.78) ng/L(P＜0.01),且初诊组TGF-β的水平低于治疗后组(P＜0.05).结论:ITP患者体内Th22细胞数量增加、TNF-α、IL-6的表达升高、TGF-β的表达减低.     

再障患者细胞因子与对应血象三系水平测定的临床意义

目的：评价再障患者外周血象白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）三系数量与其各自对应的细胞因子水平的关系，探讨细胞因子对再生障碍性贫血（AA）发病的影响及其临床意义。方法：用放射免疫分析检测外周血中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、白细胞介素-2（IL-2）、血小板生成素（TPO）水平；用化学发光免疫法检测外周血促红细胞生成素（EPO）；用全自动五分类血球计数仪检测血象。统计：所有数据采用SPSS10．0统计软件处理。结果：AA组外周血中WBC数：量、RBC数量、PLT数量及白细胞因子GM—CSF（P〈0．05）水平明显低于正常对照组；而IL-2、EPO、TPO（P〈0．05）细胞因子水平均明显高于正常对照组；GM—CSF与外周血WBC有正相关性，EPO与外周血RBC有一定的负相关性；TPO与PLT亦呈负相关。结论：再障患者外周血象兰系数量与对应细胞因子水平有一定的相关性。     

甘草甜素对C57BL/6小鼠脾脏中DC和巨噬细胞及其细胞因子分泌的影响

为探讨甘草甜素(glycyrrhizic acid,GA)对C57BL/6小鼠脾脏DC和巨噬细胞数量及其细胞因子分泌的影响,研究将小鼠分为对照组和GA组,后者连续4 d同一时间皮下注射GA,对照组给予等量生理盐水注射。8 d后处死两组小鼠并分离脾脏,制备单细胞悬液,FACS检测DC、巨噬细胞及其表型IFN-γ、IL-12、IL-10的百分比。结果显示,GA组小鼠脾脏中DC[(0.92±0.15)%]以及DC表达的细胞因子IL-12[(1.15±0.50)%]、IFN-γ[(1.84±1.25)%]与对照组[(1.06±0.14)%、(1.16±0.41)%、(2.12±1.03)%]相比均呈现出减少的趋势,但差异没有统计学意义(P 0.05);而DC表达的IL-10 [(0.40±0.07)%]与对照组[(0.20±0.04)%]相比明显升高(P0.01);脾脏中巨噬细胞[(2.35±0.48)%]较对照组[(1.43±0.06)%]明显升高(P0.01);巨噬细胞表达的细胞因子IFN-γ[(2.02±0.23)%]、IL-12 [(0.74±0.24)%]与对照组[(2.55±0.6)%、(1.31±0.20)%]相比均明显减少(P0.05),巨噬细胞表达的细胞因子IL-10[(0.50±0.05)%]较对照组[(0.35±0.05)%]明显升高(P0.05)。由此,文章认为C57BL/6小鼠给予GA后,可在一定程度上提高脾脏中巨噬细胞及其表达的IL-10水平和降低其表达的IFN-γ、IL-12水平,也可提高DC表达的细胞因子IL-10的水平,这提示GA在机体固有免疫反应中起一定的双向调节作用,其主要通过提高巨噬细胞百分比发挥免疫作用,以及通过抑制巨噬细胞的细胞因子IFN-γ、IL-12表达和提高其与DC表面负性因子IL-10的表达发挥负性调节作用。     

sPD-1/sPD-L1与Th1/Th2及Th17/Treg相关细胞因子在原发免疫性血小板减少症中的研究

目的:探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)中s PD-1/s PD-L1的表达情况及其与Th1/Th2、Th17/Treg的平衡关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测35例初诊ITP患者和20例健康体检者外周血血清中s PD-1、s PD-L1、IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的水平。结果:①与正常对照组相比,ITP患者s PD-1、IFN-γ、IL-17水平升高(P=0. 008、P=0. 031、P=0. 005),IL-4、TGF-β水平降低(P=0. 028、P=0. 042),s PD-L1水平无明显变化(P=0. 107)。②Pearson相关性分析显示:s PD-1与IFN-γ呈正相关(r=0. 516,P=0. 006),与血小板计数呈负相关(r=-0. 562,P=0. 002);血小板计数与IFN-γ呈负相关(r=-0. 531,P=0. 004); s PD-1与IL-4、IL-17、TGF-β无相关性(P均0. 05)。结论:s PD-1可能通过抑制PD-1/PD-L1负性调节通路,导致T亚群失衡,在ITP疾病中发挥一定的作用。     

猪苓多糖对巨噬细胞RAW264.7的双向免疫调节作用

目的观察猪苓多糖对γ干扰素(IFN-γ)诱导M1亚型巨噬细胞膜表面蛋白的影响及对相关细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA的作用,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节作用。方法实验分为空白对照组、IFN-γ模型组、猪苓多糖组和IFN-γ加猪苓多糖组。IFN-γ诱导巨噬细胞极化为M1型后用猪苓多糖干预,采用流式细胞术检测膜蛋白CD14、TLR4、CD86、CD40、CD16/32的阳性表达率,ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-17及IL-10的表达量,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β及IL-10 m RNA的相对表达量。结果 IFN-γ可单独诱导M1巨噬细胞模型,猪苓多糖作用于M1型巨噬细胞,分泌的因子增加,但是对膜蛋白影响不大;猪苓多糖单独作用于巨噬细胞,可以增加膜白蛋的表达量,分泌的因子和空白对照组比较有统计学差异。结论猪苓多糖可以极化巨噬细胞为M1型,可以增加由IFN-γ诱导的M1炎症因子的表达,同时也增加抑炎因子的表达,有着双向的调节作用。     

促红细胞生成素对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:检测促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对荷黑色素瘤小鼠免疫功能的影响.方法:将C57BL/6小鼠随机分为3组:正常对照组、盐水处理组和EPO处理组,盐水处理组和EPO处理组小鼠皮下接种黑色素瘤细胞B16.17天后,检测各组小鼠外周血中红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)和白细胞(WBC)数量及脾脏脏器指数;应用流式细胞术检测脾细胞CD4+、CD8+T细胞亚群的分布;ELISA检测血清中IL-2和TNF-α细胞因子的水平.结果:盐水处理组荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量明显低于正常对照组小鼠(P＜0.05),应用EPO可明显提高荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量及脾脏脏器指数(P＜0.05),三组小鼠外周血中WBC数量无明显差别(P＞0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠脾脏CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+T细胞比值明显低于正常小鼠(P＜0.05).EPO处理组与盐水处理组相比,CD4+T细胞百分率无差别(P＞0.05),而CD8+T细胞百分率下降(P＜0.05),致使EPO处理组小鼠CD4 +/CD8+T细胞比值升高(P＜0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠血清中TNF-α、IL-2含量明显低于正常小鼠(P＜0.05),EPO处理组小鼠血清中IL-2水平与盐水处理组相比增高(P＜0.05),但该两组小鼠血清中TNF-α含量无明显差别(P＞0.05).结论:EPO在改善荷瘤小鼠贫血状态的同时,还可通过提高外周血CD4 +/CD8+T细胞比值和IL-2含量而增强小鼠的免疫功能.     

急性免疫性血小板减少症患儿IgG-Fc受体表达变化

目的 探讨小儿急性免疫性血小板减少症(aITP)外周血单核细胞(MC) IgG-Fc受体(FcγR)表达变化.方法 急性ITP患儿组27例,同龄健康对照组25例,流式细胞术检测单核细胞表面活化型受体FcγR Ⅰ及FcγRⅢ表达;荧光定量PCR( real-time PCR)检测MC活化型FcγRⅡa及抑制型FcγRⅡb mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆IFN-γ、IL-4和IL-10浓度.结果 (1)急性ITP患儿组MC FcγR Ⅰ和FcγRⅢ表达明显高于对照组(P＜0.05);FcγRⅡa mRNA及FcγRⅡa/FcγRⅡb mRNA比值显著高于对照组及治疗后,经地塞米松治疗后,活化型FcγR Ⅰ、FcγRⅢ、FcγRⅡa mRNA表达下降,抑制型FcγRⅡb mRNA表达增加,FcγR活化型/抑制型平衡逐渐恢复.(2)血浆炎症细胞因子IFN-γ浓度较对照组显著增高;抗炎因子IL-4显著低于对照组.IFN-γ浓度水平与MC FcγRⅡa mRNA表达显著正相关(r=0.79,P＜0.05),IL-4与FcγRⅡb mRNA表达正相关(r=0.84,P＜0.05).结论 单核细胞活化型FcγRs过度表达,抑制型FcγRⅡb表达降低,活化型/抑制型FcγRs表达失衡可能参与儿童急性ITP免疫发病机制,MC FcγRs异常表达可能与细胞因子IFN-γ、IL-4的改变有关,地塞米松治疗可恢复FcγRs活化型/抑制型平衡表达.     

猪苓多糖对M1型巨噬细胞细胞因子表达的调节作用

目的通过诱导构建M1型巨噬细胞模型研究猪苓多糖对白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和转化生长因子β(TGF-β)、IL-10 mRNA的表达影响,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节机制。方法实验分为空白对照组、γ干扰素(IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞模型组、猪苓多糖高中低剂量组,浓度分别为200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL。用IFN-γ诱导RAW264.7巨噬细胞,用流式细胞术检测M1型巨噬细胞特异性指标CD16/CD32、CD86的表达,实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-10、iNOS、TNF-α、TGF-β的mRNA表达,观察不同剂量猪苓多糖对M1型巨噬细胞的影响。结果与空白组比较,IFN-γ的诱导RAW264.7巨噬细胞分化M1型巨噬细胞的特异性标志物CD16/CD32、CD86的表达明显升高。100μg/mL猪苓多糖组在3、6、9、12、24 h,IL-1β、iNOS、IL-10、TGF-β、TNF-α的mRNA表达升高,不同剂量猪苓多糖给药6 h后各因子的表达量升高(P0.01)。结论 IFN-γ单独作用于巨噬细胞,可以有效的诱导RAW264.7巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞;猪苓多糖促进M1型巨噬细胞IL-1β、iNOS、IL-10、TNF-α的mRNA表达。     

子痫前期小鼠动物模型的NK细胞和细胞因子的变化

目的:探讨磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导的先兆子痫模型小鼠中自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量及其表面受体的变化,同时了解外周血中的细胞因子(TGF-β、TNF-α和IFN-γ)的水平.方法:用磷脂酰丝氨酸(PS)/磷脂酰胆碱(PC)诱导小鼠出现先兆子痫(PE)样症状,流式细胞仪检测自然杀伤(NK)细胞在外周血、脾脏及子宫的数量和表面受体,酶联免疫法检测外周血中TGF-β、TNF-α和IFN-γ.结果:我们建立的PE样小鼠模型是成功的;与对照组相比,gd17.5时PS/PC组外周血和脾脏中NK细胞数目增加.gd11.5时子宫中NK细胞数目突然增加,随后逐渐降低,且在gd14.5和gd17.5时PS/PC组比对照组NK细胞数目明显减少.PS/PC组脾脏中表面受体CD122表达显著降低,而CD244、CD94及NKG2D均显著增加;子宫中所有表面受体显著降低.在gd11.5、gd14.5及gd17.5时,与对照组相比,PS/PC组外周血中TGF-β的表达水平显著增加;而TNF-α和IFN-γ表达的水平大多不发生明显变化.结论:PE可能与母胎界面处NK细胞的数量及表面受体改变有关.外周血中TGF-β的增加可能抑制子宫处NKG2D等NK细胞表面受体的表达.关于TNF-α和IFN-γ在PE样小鼠模型中的作用还需进一步研究.     

调节性T细胞及其细胞因子在儿童免疫性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

目的 探讨调节性T细胞(Tregs)及其细胞因子转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素-10(IL-10)在儿童免疫性血小板减少性紫癜(ITP)中作用.方法 选择滨州市滨州医学院附属医院儿童血液与神经病区2015年5月至2016年5月确诊为ITP患儿20例作为实验组,同期门诊健康查体儿童20例作为对照组,两组儿童在年龄、性别差异无统计学意义.采用流式细胞仪检测外周血Treg细胞数量,酶联免疫吸附测定试验(ELISA)血清中TGF-β和IL-10的含量.结果 ITP患儿外周血Treg细胞的数量明显低于正常对照组(P＜0.05);ITP患儿血清中TGF-β和IL-10的含量也低于正常对照组(P＜0.05),差异具有统计学意义.结论 ITP患儿外周血中Treg细胞数量的减少与TGF-β和IL-10含量的降低可能与ITP的免疫失调有关.