STIL基因通过调控IL-6/STAT3通路影响宫颈癌细胞增殖和凋亡

目的：探讨STIL基因对宫颈癌增殖和凋亡的影响并研究其机制。方法：RT-qPCR和Western blot检测STIL mRNA和蛋白在宫颈癌组织、癌旁组织、宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、caski、人正常宫颈上皮细胞HUCEC中的表达。将HeLa细胞分为对照（NC）组、si-NC组、si-STIL组、si-STIL+IL-6组。CCK-8和平板克隆实验检测各组细胞增殖和克隆能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。Western blot检测各组细胞IL-6、IL-6R和p-STAT3蛋白表达。将稳定转染sh-STIL的HeLa细胞注射到裸鼠背部,研究抑制STIL表达对肿瘤形成的影响。结果：宫颈癌组织中STIL mRNA和蛋白表达显著高于癌旁组织（P<0.05）。HeLa、SiHa、caski细胞中STIL mRNA和蛋白表达显著高于HUCEC细胞（P<0.05）。与si-NC组比较,si-STIL组细胞吸光度、克隆数及IL-6、IL-6R和p-STAT3蛋白水平显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）。与si-STIL组比较,si-STIL+IL...     

香加皮杠柳苷通过调控circFMN2表达对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨香加皮杠柳苷（CPP）对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响及其对circFMN2的调控作用。方法 体外培养人宫颈癌细胞HeLa,加入不同剂量的CPP处理细胞,分别将si-NC、si-circFMN2转染至HeLa细胞,分别将pcDNA、pcDNA-circFMN2转染至HeLa细胞后加入CPP处理细胞;采用MTT法检测细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测癌旁组织、宫颈癌组织及HeLa细胞中circFMN2的表达量;Western blot法检测Ki-67、Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果 CPP可显著提高细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白水平（P<0.05）,显著降低Ki-67、Bcl-2蛋白水平（P<0.05）,且呈剂量依赖性;与癌旁组织比较,宫颈癌组织中circFMN2的表达水平显著升高（P<0.05）;CPP可显著降低circFMN2的表达水平（P<0.05）,且呈剂量依赖性;转染si-circFMN2可显著提高细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白水平（P<0.05）,降低Ki-67、Bcl-2蛋白水平（P...     

LncRNA PVT1调控巨噬细胞极化抑制胰腺癌细胞侵袭

目的 探讨lncRNA PVT1调控巨噬细胞向M1型极化对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制。方法 培养单核细胞株THP-1，通过感染NC shRNA慢病毒、PVT1 shRNA慢病毒、miR-NC慢病毒、miR-409-5p慢病毒、miR-409-5p抑制物慢病毒及嘌呤霉素筛选的方法得到稳定转染的THP-1细胞，检测lncRNA PVT1、miR-409-5p、音猬因子（SHH）的表达水平；进行M1型极化诱导后检测TNF-α、IL-1β、IL-6、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达水平。稳定转染的THP-1细胞进行M1型极化诱导后与胰腺癌细胞株PANC-1细胞共培养，检测PANC-1细胞的侵袭数目。结果 稳定转染PVT1 shRNA后，THP-1细胞中lncRNA PVT1、SHH表达明显降低（NC shRNA组、PVT1 shRNA组lncRNA PVT1分别为1.00±0.12、0.43±0.05;SHH分别为1.00±0.13、0.47±0.05）（均P<0.05）,miR-409-5p、TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS表达明显增加（NC shRNA组、PVT1shR...     

KDR调节PI3K/AKT/mTOR信号通路对宫颈癌增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨激酶插入区受体（KDR）调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对宫颈癌增殖、迁移和侵袭的影响。方法 通过实时荧光定量PCR实验和免疫组织化学染色测定人宫颈癌组织和其癌旁组织中KDR的表达。体外培养HeLa细胞,随机分为对照组、KDR siRNA组、KDR siRNA阴性对照组、KDR siRNA+740 Y-P(PI3K激活剂)组,分组转染后,通过MTT实验、平板集落形成实验检测各组HeLa细胞增殖;通过Hoechst 33258染色检测各组HeLa细胞凋亡;通过划痕实验、Transwell实验分别检测各组HeLa细胞迁移及侵袭;通过免疫荧光染色检测各组HeLa细胞Bax、Bcl-2表达;通过免疫印迹实验检测各组HeLa细胞上皮间充质转化相关蛋白（Claudin-1、ZO-1、Vimentin、E-cadherin）、KDR蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白（p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR）表达。结果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中KDR mRNA表达和KDR阳性表达率明...     

RNA干扰抑制CD147表达对宫颈癌细胞增殖、转移和侵袭能力的影响

目的：探讨RNA干扰（RNAi）对宫颈癌组织CD147表达及对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取2016年2月至2019年2月济南市第二妇幼保健院病理组织室110份宫颈组织，包括20例正常宫颈上皮组织和90例宫颈癌组织（30例原位宫颈癌组织和60例鳞状宫颈癌组织），免疫组化检测CD147表达。分析CD147表达与宫颈癌患者临床病理参数的相关性。以GFP-shRNA-CD147-NC和GFP-shRNA-CD147分别转染对照组和实验组细胞，另取空白细胞作为正常组。EdU标记实验检测细胞增殖；Transwell检测细胞迁移和侵袭；裸鼠成瘤模型检测细胞体内生长与转移能力；Western blot检测细胞单羧酸转运蛋白1(MCT1)、CD147蛋白表达。结果：与正常宫颈组织相比，原位宫颈癌组织中CD147阳性表达比例明显升高，与原位宫颈癌组织相比，鳞状宫颈癌组织中CD147阳性表达比例明显升高（P<0.05）;CD147表达与宫颈癌患者肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移关系密切（均P<0.05）；与正常组细胞相比，实验组细胞增殖、迁移和侵袭及体内生长和转移能力、MCT...     

DDX3表达上调在人宫颈癌细胞增殖中的作用分析

目的:探讨DDX3表达上调在人宫颈癌细胞增殖中的作用。方法:采用免疫组织化学方法检测2012年4月至2013年3月河南省人民医院59例宫颈癌组织及癌旁非肿瘤组织标本中的DDX3表达情况。同时,以宫颈癌细胞HeLa为研究对象,通过慢病毒介导的宫颈癌细胞过度表达来检测DDX3的功能。采用细胞增殖与活性检测试剂盒评估细胞存活...     

miR-451a表达抑制宫颈癌细胞侵袭和顺铂耐药的影响及作用机制

目的 探讨miR-451a对宫颈癌细胞侵袭和顺铂(DDP)耐药的影响及作用机制研究。方法 qRT-PCR检测miR-451a在宫颈癌组织中的表达水平,分析miR-451a的表达水平与患者临床病理参数的关系。宫颈癌细胞HeLa分为对照组(NC HeLa组)和miR-451a模拟物组(miR-451a mimic HeLa组),分别进行各组mimic转染,Boyden实验检测各组细胞侵袭能力。采用药物递增诱导法建立DDP耐药细胞株HeLa(DDP-HeLa),qRT-PCR检测HeLa和DDP-HeLa细胞中miR-451a的表达。DDP-HeLa细胞分为NC DDP-HeLa组和miR-451a mimic DDP-HeLa组,分别进行各组mimic转染,MTS实验检测NC HeLa组、miR-451a mimic HeLa组、NC DDP-HeLa组和miR-451a mimic DDP-HeLa组对DDP敏感性的影响。Western blotting检测各组细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。结果 miR-451a宫颈癌组织中的表达...     

Tim-3对人Jurkat T细胞NFAT信号通路的调控

目的利用基因过表达技术来研究关键免疫检查点Tim-3对人T淋巴细胞NFAT信号通路的调控作用。方法将NFAT-RE-Nluc、Tim-3基因编码序列制备成相应的慢病毒质粒,通过Fugene HD转染或者慢病毒介导的基因过表达技术,将NFAT-RE-Nluc和Tim-3基因编码序列导入到Jurkat T细胞中,通过萤光素酶报告基因检测系统检测细胞中的荧光信号强度。结果Tim-3和NFAT-RE-Nluc成功在人T淋巴细胞中表达,并且Tim-3成功定位到细胞膜上。Tim-3能够直接激活人T淋巴细胞的NFAT信号通路,诱导NFAT-RE-Nluc荧光素酶的表达。同时在Jurkat T细胞中,Tim-3也能够增强CD3抗体激活NFAT信号通路,诱导CD69的表达以及IL-2分泌的能力。结论成功构建了稳定表达Tim-3及NFAT-RE-Nluc报告基因的NFAT-RENluc Tim-3细胞株,为深入研究Tim-3与其配体Galectin-9或CEACAM1之间的相互作用,及筛选阻断Tim-3-Galectin-9-CEACAM1的更有效的新型免疫检查点药物提供了重要的基础。     

FOXF2通过Akt/mTOR信号通路影响乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞极化

目的 探讨FOXF2表达对乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化以及乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响和可能机制。方法 收集30例临床乳腺癌患者的肿瘤相关巨噬细胞及配对癌旁组织巨噬细胞，qRT-PCR和Western blot检测FOXF2 mRNA和蛋白表达。转染FOXF2过表达慢病毒至小鼠腹腔巨噬细胞（PMs）,ELISA检测巨噬细胞M1/M2极化指标iNOS、TNF-α、Arg-1和IL-10表达，Western blot检测Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达变化。将MCF-7细胞与TAMs或过表达FOXF2的TAMs共培养，CCK-8和Edu染色检测细胞增殖情况，Tunel染色检测细胞凋亡情况，Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达。结果 临床乳腺癌患者的TAMs中FOXF2 mRNA和蛋白表达较配对癌旁组织巨噬细胞明显降低（P<0.05）；与对照组相比，过表达FOXF2的TAMs的M1型极化标志物（iNOS、TNF-α）表达明显升高，M2型极化标志物（Arg-1、IL-10）表达明显降低（P<0.05）;Akt/mTOR信号通路相关蛋白磷酸化水...     

miR-145在转染的HeLa细胞中的表达及其对CDK6的靶向抑制

目的构建miR-145高效表达载体,研究其对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法人工合成miR-145基因序列,构建真核重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145,并转染HeLa细胞,将HeLa细胞分为转染miR-145组、空载体组和未经处理的HeLa细胞组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别检测miR-145及其下游靶基因细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)在各组中的表达,采用MTT法检测miR-145对HeLa细胞增殖活性的影响。结果经测序和qRT-PCR分析鉴定证明重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145构建成功,qRT-PCR和Western blot结果显示转染miR-145组的HeLa细胞中CDK6的表达水平明显降低,MTT试验结果显示转染miR-145的HeLa细胞其增殖活性明显受到抑制(P0.05)。结论成功构建miR-145真核表达载体pcDNATM6.2-GW-miR-145,miR-145能够抑制宫颈癌HeLa细胞中CDK6的表达。     

干扰LINC00313可促进miR-302的表达影响宫颈癌细胞增殖及凋亡

目的 探讨lncRNALINC00313对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其对miR-302的调控作用。方法 采用qRT-PCR法检测宫颈癌组织、癌旁组织中LINC00313的表达水平;体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分为si-NC组（转染si-NC）、si-LINC00313组（转染si-LINC00313）、si-LINC00313+anti-miR-302组（共转染si-LINC00313、anti-miR-302）、si-LINC00313+anti-miR-NC组（共转染si-LINC00313、anti-miR-NC）。qRT-PCR检测LINC00313、miR-302表达水平;MTT实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00313、miR-302的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白水平。结果 与癌旁组织比较,宫颈癌组织LINC00313的表达水平显著升高（P<0.05）;转染si-LINC00313可明显降低OD值、S期细胞比例及Bcl-2蛋白水平（P<0.05）,提高G0-G1期细胞比例、凋亡...     

宫颈癌组织中circDENND4C的表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨环状RNADENN/MADD域内含蛋白4C(circDENND4C)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法 收集41例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织,实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测组织中circDENND4C和miR-4465表达。体外培养HeLa细胞,双荧光素酶报告基因实验验证circDENND4C和miR-4465的调控关系。HeLa细胞分为正常对照（NC）组、小干扰RNA阴性对照（si-NC）组、circDENND4C小干扰RNA(si-circDENND4C)组、模拟对照（miR-NC）组、miR-4465组、si-circDENND4C+抑制剂阴性序列（anti-miR-NC）组和si-circDENND4C+miR-4465抑制剂（anti-miR-4465）组,通过四噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Westernblot检测细胞中Ki-67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达。结果 宫颈癌组织中circDENND4C的表达显著高于癌旁组织...     

下调MAC30对乳腺癌细胞焦亡、血管生成及ATP1A2蛋白的作用机制

目的 探讨下调MAC30对乳腺癌细胞焦亡、血管生成及ATP1A2蛋白水平的影响。方法 MCF-7细胞制成单个细胞悬液,分为乳腺癌组（MCF-7细胞）、NC组（MCF-7细胞转染MAC30-NC-shRNA）、MAC30 shRNA组（MCF-7细胞转染MAC30-shRNA）、ATP1A2组（MCF-7细胞转染ATP1A2-shRNA）及MAC30 shRNA+ATP1A2组（MCF-7细胞转染MAC30-shRNA、ATP1A2-shRNA）。qRT-PCR检测各组MCF-7细胞中MAC30 mRNA表达以证实转染效率,采用CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞焦亡率;体外血管形成实验检测血管形成数目;Western blot检测ATP1A2、SCr、AKT及PI3K水平。结果 乳腺癌组与NC组MCF-7细胞中MAC30 mRNA表达水平、MCF-7细胞焦亡率及MCF-7细胞血管形成数目比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。与乳腺癌组和NC组比较,MAC30 shRNA组、ATP1A2组及MAC30 shRNA+ATP1A2组MCF-7细胞中MAC30 mRNA表...     

PRR11在宫颈癌中的表达意义及对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响

目的研究富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌患者临床病例特征及预后的关系,并探讨PRR11对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响及作用机制。方法免疫组化检测PRR11在60例宫颈癌组织和20例正常宫颈组织中的表达水平,并分析宫颈癌组织中PRR11的表达与临床病例特征的关系及患者预后的影响。Western-blot检测PRR11蛋白在宫颈癌细胞系HeLa和人宫颈上皮永生化细胞H8中的表达;HeLa经脂质体分别转染PRR11 siRNA(si-PRR11)和对照(si-NC)48h后,采用MTS实验检测各组细胞增殖能力,流式细胞仪检测各组细胞周期阻滞和凋亡情况,Western-blot检测各组细胞中CyclinD1、caspase-3蛋白的影响。结果免疫组化结果显示宫颈癌组织中PRR11的阳性表达率显著高于正常宫颈组织中的表达,PRR11阳性表达与宫颈癌肿瘤大小及组织学分级显著相关(P均<0.05),宫颈癌组织中PRR11阳性表达患者生存期较短。PRR11在宫颈癌细胞系HeLa中的表达均显著高于人宫颈上皮永生化细胞H8(P<0.05);转染PRR11 siRNA后,HeLa细胞增殖能力下降、细胞阻滞在G1期,凋亡细胞增多,CyclinD1蛋白表达减少,caspase-3蛋白表达增加(P均<0.05)。结论PRR11在宫颈癌组织和细胞系中均高表达,且高表达与肿瘤大小、组织学分级及不良预后相关,同时PRR11可能通过调控CyclinD1、caspase-3蛋白促进宫颈癌增殖和抑制细胞凋亡,PRR11可以作为治疗子宫颈癌的潜在分子靶点。     

miR-497靶向细胞周期蛋白E1抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖

目的研究miR-497在宫颈癌HeLa细胞中对细胞周期蛋白E1(CCNE1)的靶向作用及其对HeLa细胞增殖的影响。方法构建pre-miR-497、CCNE1野生型(WT-CCNE1)和突变型(MT-CCNE1)真核表达载体,采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)验证pre-miR-497载体的有效性,采用MTT法检测miR-497对HeLa细胞增殖的影响,采用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR和Western blot法验证miR-497对CCNE1的靶向关系。结果测序结果提示pcDNATM6.2-GW-pre-miR-497、pmirGLO-CCNE1野生型和突变型表达载体构建成功,qRT-PCR证明转染pre-miR-497的HeLa细胞miR-497的表达显著升高。MTT法结果显示转染pre-miR-497的HeLa细胞增殖活性显著低于阴性对照miR组(P0.05)。此外,双萤光素酶法检测共转染pre-miR-497和WT-CCNE1的HeLa细胞,其萤光素酶活性显著低于对照组(P0.01),qRT-PCR及Western blot法也分别证实转染pre-miR-497的HeLa细胞其CCNE1的mRNA和蛋白水平显著下调(P0.05)。结论 miR-497能够通过靶向CCNE1调控宫颈癌HeLa细胞的增殖活性。     

Th22细胞通过释放IL-22活化宫颈癌细胞AKT通路促进其增殖

目的研究IL-22及Th22细胞在宫颈癌组织中的表达和频率,分析其与宫颈癌临床分期的相关性,探讨它们与宫颈癌发生发展的关系。方法以西南医院2016年1月至2月收集的32例宫颈癌患者为研究对象,免疫组化、Western blot检测IL-22在宫颈癌组织、癌旁组织和正常宫颈组织中的表达情况;流式细胞技术检测Th22细胞在宫颈癌患者外周血CD4~+T淋巴细胞和肿瘤浸润淋巴细胞中的频率及其表达IL-22情况,探讨其与宫颈癌临床分期的关系;细胞共培养探究IL-22是否通过促进AKT信号通路活化而促进宫颈癌细胞增殖。结果宫颈癌肿瘤组织中IL-22的表达水平显著高于癌旁和正常宫颈组织,而且Ⅲ~Ⅳ期宫颈癌组织IL-22的表达明显高于Ⅰ~Ⅱ期。宫颈癌肿瘤组织浸润淋巴细胞中,Th22细胞频率显著高于宫颈癌患者及正常人的外周血,且与宫颈癌的临床分期正相关。Th22是宫颈癌组织中IL-22主要来源。细胞共培养实验显示IL-22促进了AKT的磷酸化并诱导下游分子的表达。结论 Th22细胞通过释放IL-22活化宫颈癌细胞内AKT通路促使其增殖,干预Th22及其效应分子IL-22是宫颈癌防治的一个潜在靶标。     

circVAPA靶向miR-628-5p调控宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡

目的 探讨环状RNA(circRNA)囊泡相关膜蛋白相关蛋白A(circVAPA)对宫颈癌细胞HeLa增殖、凋亡的影响及分子机制。方法 实时定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织和癌旁组织中circVAPA和miR-628-5p表达。生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR用于阐明circVAPA和miR-628-5p潜在相关性。脂质体法将circVAPA小干扰RNA(si-circVAPA)、miR-628-5p模拟物分别转染HeLa,运用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、流式细胞术检测干扰circVAPA或过表达miR-628-5p对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。免疫印迹法（Western blot）检测Ki-67、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白（Bax）表达水平。结果 宫颈癌组织中circVAPA表达较癌旁组织显著升高,而miR-628-5p表达较癌旁组织显著降低（P<0.05）。miR-424-5p与LINC00210直接结合,干扰LINC00210后miR-424-5p表达水平显著升高,过表达LINC00210后miR-424-5p表达水平显...     

lncRNA GAS5通过miR-26a靶向调控JAK1/STAT3信号通路对子宫内膜样癌细胞凋亡及侵袭的影响

目的 探讨lncRNA GAS5通过miR-26a靶向调控JAK1/STAT3信号通路对子宫内膜样癌（EC）细胞凋亡及侵袭的影响。方法 选取2018年4月—2021年5月经我院首次确诊并进行广泛性子宫切除及腹膜后淋巴结清扫术治疗的新鲜无菌EC患者癌灶及相对癌旁组织（距离肿瘤5 cm外）共45对。使用定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测EC患者癌灶及相对癌旁组织、人子宫内膜癌细胞系ISK（高分化）、HEC-1-B（中分化）、人EC细胞系KLE（低分化）、子宫内膜腺上皮细胞（正常细胞）中lncRNA GAS5的表达。依据转染不同分为NC组（阴性对照质粒）、lncRNA GAS5组（转染lncRNA GAS5过表达质粒）、anti-miR-26a组（转染miR-26a干扰质粒）、lncRNA GAS5+miR-26a组（转染lncRNA GAS5过表达质粒+miR-26a过表达质粒）。使用EdU实验、AnneinV-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞的凋亡、细胞活力和增殖能力;使用荧光素酶报告基因分析荧光素酶活性;通过qRT-PCR和Western blot分析各组细胞中lncRNA...     

RBMS3抑制宫颈癌细胞增殖和转移的作用机制研究

目的 研究RNA结合基序单链相互作用蛋白3(RBMS3)对宫颈癌细胞增殖和转移的影响,并探讨其发挥作用的可能机制.方法 采用GEPIA网站分析RBMS3在宫颈癌组织中的表达情况.qRT-PCR和Western blotting检测RBMS3 mRNA和蛋白在宫颈癌组织和细胞系中的表达水平.构建RBMS3过表达慢病毒,感染宫颈癌细胞系Caski,分为NC组和oe-RBMS3组,采用MTS检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞转移能力,移植瘤实验检测各组细胞体内成瘤能力.Western blotting检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白wnt3a、β-catenin及其下游靶蛋白cMYC、cyclinD1、MMP-2的表达.结果 GEPIA网站分析结果显示RBMS3 mRNA在宫颈癌组织中的表达显著低于在正常宫颈组织中的表达.qRT-PCR和Western blotting结果均显示RBMS3 mRNA和蛋白在宫颈癌组织中的表达显著低于其在癌旁组织中的表达,RBMS3 mRNA和蛋白在宫颈癌细胞系中的表达显著低于其在人鳞状上皮永生化细胞H8中的表达.与NC组相比,oe-RBMS3组Caski细胞增殖、转移和体内成瘤能力均降低,细胞中wnt3a、β-catenin、cMYC、cyclinD1、MMP-2蛋白表达均降低.结论 RBMS3可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制宫颈癌细胞增殖和转移能力.     

长链非编码RNA H19通过靶向miR-18b调控Wnt/β-catenin信号通路对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)H19对宫颈癌顺铂耐药性的影响及分子机制。方法 体外培养人宫颈癌细胞株HeLa,采用顺铂梯度暴露法构建宫颈癌顺铂耐药细胞HeLa/DDP;qRT-PCR检测正常宫颈细胞ECT1/E6E7、HeLa细胞和HeLa/DDP细胞中H19、miR-18b的相对表达水平;以HeLa/DDP细胞为研究对象,根据转染载体不同将细胞分为pcDNA-NC组、pcDNA-H19组、si-H19组、si-H19+inhibitor-NC组、si-H19+miR-18binhibitor组;qRT-PCR检测细胞转染后H19和miR-18b表达水平;MTT法检测细胞存活率和顺铂半数抑制浓度（顺铂IC50值）;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-18b的靶向关系;Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3、Bax、Bcl-2及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平。结果 与HeLa细胞比较,HeLa/DDP细胞中H19表达水平显著升高（P<0.05）,miR-18b表达水平显著降低（P<...