miR-19a介导JAK/STAT信号通路促进卵巢癌细胞增殖的研究

目的 探讨miR-19a对卵巢癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 选取人卵巢癌细胞株SKOV3、正常人卵巢表面上皮细胞HOSEpiC以及30例上皮卵巢癌组织和20例癌旁组织为研究对象.对SKOV3细胞株进行转染,分为NC组(未进行任何处理)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-19a组(转染miR-19a mimic).MTT检测细胞增殖能力;克隆形成实验检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期;采用实时荧光定量PCR检测卵巢癌中miR-19a、JAK2、STAT3、p-JAK2和p-STAT3基因mRNA水平;Western blot检测细胞JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平.结果 卵巢癌组织miR-19a水平高于正常卵巢组织,SKOV3细胞株中miR-19a表达水平高于HOSEpiC细胞(P<0.01).转染后48 h和72 h,与NC组、miR-NC组相比,miR-19a组细胞增殖能力明显升高(P<0.05).与NC组、miR-NC组相比,miR-19a组细胞克隆数目、S期细胞百分比明显升高(P<0.05).与NC组、miR-NC组相比,miR-19a组细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值明显升高(P<0.05).与NC组、miR-NC组相比,miR-19a组细胞p-JAK2、p-STAT3基因mRNA表达水平,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值明显升高(P<0.05).结论 卵巢癌组织miR-19a高表达,miR-19a过表达可能通过Akt/mTOR通路促进卵巢癌细胞的增殖.     

SOX9基因下调JAK2/STAT3信号诱导肺癌细胞凋亡及降低免疫逃逸相关因子表达的研究

目的:探讨SOX9基因对肺癌细胞凋亡、免疫逃逸相关因子HIF-1α和VEGF表达及JAK2/STAT3信号通路的影响。方法:以脂质体Lip-2000为载体,将针对SOX9特异性靶点的siRNA转染肺腺癌A549细胞,Western blot检测SOX9的蛋白表达; CCK8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率; DCFH-DA检测ROS水平; Western blot检测免疫逃逸相关因子HIF-1α、VEGF及JAK2/STAT3信号通路p-JAK2、p-STAT3和下游相关基因survivin的蛋白表达。结果:转染SOX9的siRNA的肺癌细胞SOX9的表达明显降低;与阴性对照组比较,si-SOX9组细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高,ROS水平显著升高,HIF-1α、VEGF、p-JAK2、p-STAT3和survivin的蛋白表达均显著降低。结论:siRNA抑制SOX9基因可降低肺癌细胞活力,诱导细胞凋亡,降低免疫逃逸相关因子HIF-1α和VEGF表达,机制可能与提高细胞ROS水平和下调JAK2/STAT3信号通路有关。     

Rab18通过JAK2/STAT3下调PLIN2并减少THP-1巨噬细胞脂质蓄积

目的：研究Rab18是否通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路下调脂滴包被蛋白2(PLIN2)表达,并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积。方法：采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育人THP-1巨噬细胞不同时间（0、6、12和24 h）,用Western blot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,使用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积的变化。制备野生型、活化型和失活型Rab18巨噬细胞,予以ox-LDL孵育,Western blot和RT-qPCR检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞内p-JAK2和p-STAT3的核转位情况。用JAK2抑制剂AG490预处理活化型Rab18细胞,再用ox-LDL孵育该细胞,Western blot和RT-qPCR检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞中PLIN2的表达,油红O染色和GPO-PAP酶法观察细胞...     

miR-143-3p靶向IL-6R/STAT3通路抑制IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞血管生成

目的探究miR-143-3p在IL-6诱导的人肺微血管内皮细胞(HLMVEC)血管生成中的作用和机制。方法首先使用100 ng/ml重组IL-6蛋白处理HLMVEC细胞,管腔形成实验分析IL-6对细胞管腔形成数目的影响,Real-time PCR检测IL-6对miR-143-3p和VEGF mRNA表达的影响。Western blot检测VEGF蛋白水平的变化。然后使用miR-143-3p mimics过表达miR-143-3p,按照上述方法检测miR-143-3p对IL-6诱导的管腔形成数目、VEGF mRNA和蛋白表达的影响。此外,使用双荧光素酶报告基因检测法分析miR-143-3p和IL-6R的关系,Real-time PCR检测miR-143-3p过表达对IL-6R mRNA表达的影响,Western blot检测IL-6R、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平的变化。结果 IL-6能够增加管腔形成数目和VEGF的表达,降低miR-143-3p的表达。过表达miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的管腔形成、VEGF、IL-6R和p-STAT3的表达水平,但是不影响STAT3的表达。此外还发现IL-6R是miR-143-3p的一个靶基因。结论 miR-143-3p能够抑制IL-6诱导的内皮细胞血管生成,这可能是通过抑制IL-6R/STAT3通路发挥作用的。     

miR-135a靶向调节SP1对人骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-135a通过靶向调节SP1对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖和凋亡的影响。方法收集人正常成骨组织和OS组织,培养正常成骨细胞(h FOB1.19)和OS细胞(MG-63),Real-time PCR法检测miR-135a和SP1的表达,Western blot法检测SP1表达。转染miR-135a mimics和inhibitor,MTT法和Brd U-ELISA法检测OS细胞增殖变化,Western blot法检测凋亡蛋白Bax、BCL-2和Caspase 3的表达。双荧光素酶报告基因检测miR-135a与SP1的靶定关系。Western blot法检测miR-135a对OS细胞中SP1表达的影响。Western blot法检测miR-135a对OS细胞中JAK2/STAT3表达的影响。结果 OS组织和细胞中miR-135a表达均显著降低,SP1表达均显著升高。转染miR-135a mimics可降低OS细胞活性,减少Brd U阳性标记率。同时,miR-135a mimics增加OS细胞Bax和Caspase 3的表达,减少BCL-2的表达。miR-135a mimics降低荧光素酶报告基因的荧光强度,结合位点突变后荧光素酶活性升高。上调miR-135a显著降低SP1的表达并降低JAK2和STAT3的磷酸化水平。miR-135a inhibitor作用均与mimics相反。结论 miR-135a可通过靶向调节SP1抑制人OS细胞增殖,诱导OS细胞凋亡,并下调JAK2/STAT3活化。     

纳扎替尼调控miR-940/JAK2/STAT3途径对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨纳扎替尼（nazartinib）对肺癌细胞NCI-H2170增殖和凋亡的影响及作用机制。方法：体外培养NCIH2170细胞，采用不同浓度的nazartinib作用于NCI-H2170细胞；转染miR-940抑制剂至NCI-H2170细胞；8 nmol/L的nazartinib作用于转染miR-940抑制剂的NCI-H2170细胞。CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达，RT-qPCR检测miR-940表达。结果：(1)1、2、4、8 nmol/L的nazartinib降低了NCI-H2170细胞OD值及细胞中CyclinD1、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达（P<0.05），提高细胞凋亡率及细胞中Cleaved-caspase-3蛋白和miR-940表达（P<0.05）；(2)敲减miR-940降低了NCI-H2170细胞OD值及细胞中CyclinD1、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达升高（P<0.05），而凋亡率及Cle...     

miR-34a 调控PAX6 的表达增强视网膜母细胞瘤的侵袭和迁移

目的:miR-34a 靶向PAX6 调控JAK1/ STAT3 信号通路影响视网膜母细胞瘤的侵袭和迁移。方法:免疫组化检测PAX6 在视网膜母细胞瘤组织中的表达;PCR 检测miR-34a 在不同视网膜母细胞瘤细胞株和视网膜母细胞瘤组织中的表达;双荧光素酶报告基因系统检测miR-34a 对PAX6 转录活性的影响;Transwell 侵袭实验检测miR-34a 的表达对视网膜母细胞瘤细胞Rb44 的侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-34a 的表达对视网膜母细胞瘤细胞Rb44 的迁移能力的影响;Western blot检测过表达miR-34a 后JAK1/ STAT3 信号通路的蛋白表达水平。结果:与正常组织比较,miR-34a 在视网膜母细胞瘤组织中表达明显降低,PAX6 在非视网膜母细胞瘤中表达较高;Western blot 检测在Rb44 视网膜母细胞瘤中表达水平最低;双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-34a 可以直接调控PAX6 的转录活性;过表达miR-34a 后,视网膜母细胞瘤细胞株Rb44 的侵袭和转移能力明显降低;过表达miR-34a 后,PAX6 的表达水平下调,p-JAK1 和p-STAT3 蛋白表达下调。结论:miR-34a 靶向PAX6 的表达,通过JAK1/ STAT3 通路调控视网膜母细胞瘤的侵袭和迁移能力。     

威灵仙总皂苷抑制佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路

目的研究威灵仙总皂苷(TSC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的JAK2/STAT3信号通路的作用机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只。除正常组外,采用Freund完全佐剂诱导AA大鼠模型。造模第12天,灌胃给予相应药物,1次/d,连续16 d,观察药物对AA大鼠体质量及足肿胀度的影响;取固定部位踝关节组织,HE染色观察病理学改变;实时荧光定量PCR法测定滑膜细胞中Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)mRNA表达;Western blot法检测磷酸化JAK2及非磷酸化JAK2(p-JAK2、JAK2)、磷酸化STAT3及非磷酸化STAT3(p-STAT3、STAT3)的蛋白表达。结果 TSC可有效缓解AA大鼠体质量减轻及明显抑制AA大鼠足肿胀,明显改变炎细胞浸润,减少血管翳生成,减轻组织增生,有效抑制JAK2、STAT3 mRNA表达及降低p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3的相对表达。结论 TSC降低AA大鼠JAK2、STAT3 mRNA表达并抑制p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3相对表达,抑制JAK2/STAT3信号通路。     

绿原酸调控miR-124/STAT3轴减轻ox-LDL诱导的血管内皮细胞炎症损伤

目的：探讨绿原酸（CGA）通过调节miR-124/信号转导和转录活化因子3(STAT3)轴对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）炎症损伤的影响。方法：体外培养HUVECs细胞，分为对照组、ox-LDL组、ox-LDL+CGA 25、50、100μmol/L组、ox-LDL+CGA 100μmol/L+NC inhibitor组、ox-LDL+CGA 100μmol/L+miR-124 inhibitor组，ox-LDL浓度均为150μg/ml。RT-qPCR检测细胞中miR-124、STAT3 mRNA水平；CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡率；ELISA检测细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平；Western blot检测细胞中STAT3、CyclinD1、Bax、Caspase-3蛋白表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-124与STAT3的靶向关系。结果：与对照组相比，ox-LDL组HUVECs凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、STAT3 mRNA及蛋白表达水平显著升...     

乙肝病毒X蛋白抑制小鼠足细胞系MPC5增殖并促进其凋亡

目的探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对条件永生型小鼠足细胞系(MPC5)增殖与凋亡的影响。方法用携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证转染效率。实验分空白对照组(MPC5 group)、阴性对照组(MPC5-pEX-neo group)、HBx转染组(MPC5-pEX-HBx group)。MTT法检测足细胞存活率;流式细胞计量术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中nephrin、STAT3、JAK2、p-STAT3和p-JAK2、caspase-3蛋白表达。结果 HBx转染MPC5细胞48 h后HBx表达最高。HBx转染组中nephrin蛋白表达水平显著低于空白对照及阴性对照(均P0.01)。转染HBx基因后足细胞增殖明显受抑,同时凋亡率显著增高(均P0.01)。此外,HBx转染组STAT3、p-STAT3、JAK2和p-JAK2蛋白表达较空白对照及阴性对照组均显著增高(均P0.01), caspase-3在HBx转染组中的表达也显著增高(均P0.01)。结论 HBx可下调足细胞中nephrin蛋白表达,抑制足细胞增殖,并促进其凋亡的发生。其作用机制可能与STAT3/JAK2信号通路活化有关。     

miR-98-5p对STAT3诱导的人舌鳞癌细胞SCC-25凋亡、 增殖和成瘤性的影响*

目的：探讨miR-98-5p 对人舌鳞癌细胞SCC-25 凋亡和肿瘤干样特性及裸鼠成瘤的影响。方法：将SCC-25 细胞转染mimic mock、miR-98-5p mimic、inhibitor-NC、miR-98-5p inhibitor 后分为对照（ control）组、模拟物 对照（ mimic-mock）组、模拟物（ mimic）组、抑制剂阴性对照（ inhibitor-NC）组和抑制剂（ inhibitor）组。 逆转录- 聚合酶链反应（ RT-PCR）检测miR-98-5p 表达;克隆形成法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡; RT-PCR 检测Ki67、增殖细胞核抗原（ PCNA）、Bax、Bcl-2 mRNA水平;细胞成球实验检测细胞成球体积、成 球数目;免疫印迹检测信号转导和转录活化因子3（ STAT3）磷酸化情况;建立移植瘤裸鼠模型,慢病毒转染 mimic,将裸鼠随机分为control 组和mimic 组,检测肿瘤质量和体积,免疫印迹检测STAT3 磷酸化情况,免疫组 织化学检测Ki67 阳性表达率。结果：与control 组相比较,mimic 组miR-98-5p 水平显著升高,克隆形成率显著降低, 凋亡率显著升高,Ki67、PCNA mRNA水平显著降低,Bax/Bcl-2 比值升高,成球体积、成球数目显著降低,p-STAT3/ STAT3 水平显著降低;inhibitor 组miR-98-5p 水平显著降低,克隆形成率显著升高,Ki67、PCNA mRNA水平显 著升高,Bax/Bcl-2 比值降低,成球体积、成球数目显著升高,p-STAT3/STAT3 水平显著升高;mimic 组肿瘤质 量显著降低,肿瘤体积显著降低,Ki67 阳性表达率显著降低,p-STAT3/STAT3 水平显著降低。结论：miR-98-5p mimic 可通过抑制STAT3 诱导人舌鳞癌细胞SCC-25 凋亡,抑制增殖和移植瘤生长。     

橙皮苷介导JAK2/STAT3通路改善急性牙髓炎模型大鼠牙髓组织损伤的机制研究

目的 探索橙皮苷（Hesperidin）治疗急性牙髓炎模型大鼠牙髓组织损伤的效果及其可能机制。方法 采用内毒素脂多糖（LPS）诱导法建立SD大鼠急性牙髓炎模型，将SD大鼠随机分为空白对照组、LPS组、橙皮苷组、JAK2激动剂+橙皮苷组及STAT3激动剂+橙皮苷组，HE染色观察各组大鼠牙髓组织病理学改变；ELISA法检测各组大鼠牙髓组织炎性因子水平；Western blot检测大鼠牙髓组织JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 同对照组相比，LPS组大鼠牙髓组织牙髓细胞排列紊乱、空泡性变，血管显著扩张充血，炎症细胞浸润，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高，p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值升高（P<0.05）；橙皮苷组大鼠牙髓组织炎性病理改变较LPS组明显改善，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低，p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值下降（P<0.05）；与橙皮苷组大鼠相比，JAK2激动剂+橙皮苷组及STAT3激动剂+橙皮苷组牙髓组织炎性病理改变加重，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高，p-JAK2/J...     

lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR-519d-3p的靶基因,受其负调控。过表达MMP2可部分逆转沉默TTN-AS1和过表达miR-519d-3p对A549细胞侵袭的抑制作用。结论:肺腺癌组织中lncRNA TTN-AS1呈现高表达情况,它可能通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭能力。     

PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在SO_2抗大鼠肢体缺血再灌注致急性肺损伤中的作用

目的:探讨PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在二氧化硫(SO2)抗肢体缺血再灌注(I/R)致急性肺损伤中的作用。方法:应用双大腿根部绑扎止血带复制大鼠双后肢缺血再灌注肺损伤模型。在再灌注前20 min腹腔注射Na2SO3/Na HSO3;在再灌注前1 h静脉注射Stattic或LY294002。应用TUNEL、ELISA、Western blot等方法检测细胞凋亡、细胞因子表达及相关信号通路蛋白表达的情况。结果:与对照组相比,I/R组的MDA及MPO含量、肺系数、细胞凋亡指数、细胞因子表达以及p-STAT3、p-Akt蛋白的水平均显著增高;当应用Na2SO3/Na HSO3后,上述反映肺损伤的各项指标均下降。Western blot检测结果显示I/R后,肺组织中p-STAT3和p-Akt蛋白的水平均明显增加。而应用Na2SO3/Na HSO3后,p-Akt蛋白的水平继续增加,但p-STAT3蛋白的水平却减少(P0.05)。结论:JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路都参与了SO2抗肢体缺血再灌注致急性肺损伤的作用。JAK2/STAT3通路的活化,能够使I/R损伤加重;相反,PI3K/Akt信号通路的活化,可以使I/R损伤减弱。此外,JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路之间存在交互作用。     

虾青素通过阻断JAK1/STAT3通路抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡

目的探讨虾青素对A549肺癌细胞增殖、凋亡的影响及可能的作用机制。方法实验分为对照组、DMSO溶剂对照组、(20、40、60、80、100)μmol/L虾青素组;CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2、Bax、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和Janus激酶1(JAK1)蛋白水平。结果虾青素能够抑制A549细胞增殖,使A549细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡增加;虾青素上调Bax蛋白水平,下调Bcl-2、STAT3、JAK1蛋白水平。结论虾青素通过抑制JAK1-STAT3信号通路抑制肺癌A549细胞增殖并促进其凋亡。     

miR-128 调控AK2 蛋白的表达通过STAT3 信号通路对宫颈癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨miR-128 调控AK2 蛋白的表达通过STAT3 信号通路对宫颈癌细胞生物学行为的影响其机制。方法:qPCR 和Western blot 检测宫颈癌组织和细胞中AK2 和miR-128 的表达情况;双荧光素酶实验检测miR-128 和AK2 之间的相互作用;CCK-8 增殖试验检测miR-128 对宫颈癌细胞增值能力的影响;裸鼠体内成瘤试验检测miR-128 对宫颈癌细胞成瘤能力的影响;Western blot 检测miR-128 对STAT3 信号通路蛋白水平的影响;Western blot 检测过表达AK2 蛋白逆转miR-128对p-STAT3 的抑制水平。结果:在宫颈癌组织中AK2 表达水平相比正常宫颈组织中高,miR-128 在宫颈癌C33a 细胞株中表达水平较低;双荧光素酶试验证实miR-128 可以直接靶向调控AK2 的表达;CCK-8 增殖实验表明miR-128 可以抑制宫颈癌细胞株的增殖能力;体内成瘤实验表明miR-128 的增高可以抑制宫颈癌细胞成瘤能力[体积(3.05±0.35)cm3 vs (0.86±0.11)cm3 ,P =0.031;(3.26±0.39)g vs (0.89±0.15)g,P = 0.016];Western blot 实验表明miR-128 可以抑制p-STAT 的激活[(42.12±6.28)% vs (91.25±9.29)%, P<0.05],而AK2 的过表达又可以逆转miR-128 对p-STAT 的抑制作用。结论:miR-128 靶向调控AK2 的表达进而通过STAT3 通路的激活调控宫颈癌细胞的生物学行为。     

miR-24-3p靶向KLF6基因调控IL-6/STAT3信号通路影响食管癌细胞的活力和凋亡

目的:探讨微小RNA-24-3p(miR-24-3p)对食管癌细胞活力和凋亡的影响及机制。方法:以人正常食管上皮细胞HEEC为对照,采用RT-qPCR检测食管癌细胞TE11、Eca109和EC9706中miR-24-3p和KLF6 mRNA的表达,Western blot检测KLF6蛋白的表达。用anti-miR-24-3p和KLF6 siRNA转染EC9706细胞,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测检测细胞中与增殖、凋亡相关的蛋白以及IL-6/STAT3信号通路相关蛋白的表达,ELISA法检测IL-6的表达。双萤光素酶报告基因实验验证miR-24-3p与KLF6靶向调控的关系。结果:食管癌癌细胞TE11、Eca109和EC9706中miR-24-3p表达上调(P<0.05),KLF6的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。敲减EC9706细胞miR-24-3p表达可抑制其细胞活力,诱导其凋亡,并抑制细胞CDK4、cyclin D1、CDC25A、p-STAT3、IL-6及Bcl-2的表达,促进caspase-3和Bax的表达。结论:miR-24-3p可靶向KLF6基因调控IL-6/STAT3信号通路影响食管癌细胞的生长和凋亡。     

乙肝病毒X蛋白通过激活JAK2/STAT3信号通路调节肾小管上皮细胞凋亡

 目的：观察乙肝病毒X蛋白(HBx)对肾小管上皮细胞凋亡的作用,并探讨其在乙型病毒肝炎相关性肾炎(HBVGN)发病中的分子机制。方法：将构建好的HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染至体外培养的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)中。Western blotting法检测转染后目的蛋白的表达及JAK2/STAT3信号通路的活化。细胞免疫荧光检测STAT3及p-STAT3表达水平。CCK-8法检测细胞增殖活性。Hoechst 33342染色观察细胞的形态学改变。透射电镜观察细胞的超微结构及凋亡。Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：转染目的基因HBx后,p-JAK2及p-STAT3表达水平均显著增加;同时,细胞增殖明显受抑。透射电镜、Hoechst 33342染色及Annexin V/PI双染流式细胞术检测发现HBx促进HK-2细胞凋亡。AG490（JAK2/STAT3信号通路阻断剂）孵育后能够部分阻断JAK2/STAT3信号通路,减少HBx所致细胞凋亡。结论：HBx通过激活JAK2/STAT3信号通路导致肾小管上皮细胞凋亡,可能参与了HBV直接损伤肾组织的致病机制。     

橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响

目的：研究橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响。方法：构建重症肺炎大鼠模型，分为SD组、Control组、Model组（肺炎模型）、Hesperidin-L组（12 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-M组（24 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-H组（36 mg/kg橙皮苷治疗），检测肺组织湿干重比（W/D），对肺组织病理损伤程度评分，计数肺泡灌洗液中炎症细胞数目，qRTPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA水平，ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量，Western blot检测肺组织中Bax、ccaspase-3、Bcl-2、p-STAT3、p-JAK2、STAT3、JAK2、JAK1和p-JAK1蛋白表达水平，TUENL染色检测肺组织中细胞凋亡水平。结果：与Control组相比，Model组大鼠肺组织病理评分升高，W/D升高，肺泡灌洗液中单核巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、白细胞数目均升高，肺组织中炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达水平和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均...     

干扰HDAC1通过调控STAT3信号通路影响皮肤鳞癌细胞凋亡

目的:探讨干扰组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)对皮肤鳞癌细胞凋亡的影响。方法:皮肤鳞癌细胞A431分别转染HDAC1小干扰RNA(HDAC1 si RNA)和小干扰RNA阴性对照(si RNA NC),RT-PCR和Western blot检测转染后细胞中HDAC1的表达水平,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测信号转导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)和cleaved caspase-3的蛋白水平。同时用STAT3信号通路抑制剂作用于转染HDAC1 si RNA的A431细胞,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测STAT3、p-STAT3和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:HDAC1 si RNA能够抑制A431细胞中HDAC1的m RNA和蛋白表达。干扰HDAC1表达后细胞活力和细胞中p-STAT3水平下降,而细胞凋亡率和细胞中cleaved caspase-3水平升高。STAT3信号通路抑制剂作用后,转染HDAC1 si RNA的A431细胞活力及p-STAT3水平下降,细胞凋亡率及细胞中cleaved caspase-3水平升高。结论:干扰HDAC1表达可能通过调控STAT3信号通路抑制皮肤鳞癌细胞活力,促进皮肤鳞癌细胞凋亡。