Nrf2介导姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤的保护作用

背景：研究表明氧化应激在骨关节炎的发生发展中起重要作用,姜黄素具有抗氧化、清除自由基作用。 目的：通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。 方法：体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为正常组、模型组(H2O2)、姜黄素低、中、高剂量剂量组(20,40,80 μmol/L)。姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后收集细胞,MTT法测定细胞存活率,测定细胞超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶含量,Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平,荧光显微镜观察细胞核形态变化。 结果与结论：与正常组比较,模型组软骨细胞存活率降低,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量降低,丙二醛含量增加,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平下调,呈现出凋亡细胞的特征。经姜黄素预先处理,软骨细胞存活率升高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量升高,丙二醛含量降低,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平升高,细胞核形态改善,随姜黄素浓度升高变化更明显。结果说明,姜黄素对H2O2所致软骨细胞氧化应激损伤保护作用可能是通过增强Nrf2表达来实现的。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

姜黄素通过激活Nrf2/Nox4通路调控压力负荷诱导的心力衰竭

目的 探讨姜黄素(CUR)对小鼠压力负荷性心力衰竭(HF)的保护作用及可能机制.方法 30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组(Sham)、心力衰竭组(HF)和姜黄素治疗组(HF+CUR).通过主动脉弓缩窄(TAC)建立小鼠压力负荷性心力衰竭模型.实验第4周,收集各组小鼠心肌组织,称取心脏重量,计算心脏重量指数...     

比索洛尔激活Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激缓解急性心肌梗死大鼠心肌损伤

目的 探索比索洛尔对急性心肌梗死大鼠氧化应激损伤的影响及可能机制.方法 大鼠随机分为假手术组(Sham)、急性心肌梗死大鼠模型组(AMI)、比索洛尔治疗组(Bis)和比索洛尔+锌原卟啉9组(Bis+ZnPP),每组10只.造模后第8天,超声检测各组大鼠心功能;TTC染色后计算心肌梗死面积;HE和MASSON染色观察心肌损伤和纤维化程度;ELISA检测各组大鼠血清中磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH-Px)含量;Western blot检测各组大鼠心肌中核因子E2相关因子2(Nrf2)及HO-1蛋白表达情况.结果 比索洛尔显著提升心肌梗死大鼠缩短分数(FS％)及射血分数(EF％),降低左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)及左室舒张末期后壁厚度(LVPWd),减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤,抑制纤维化,降低血清中CK、CK-MB、LDH含量,降低心肌组织中MDA含量,并升高SOD、GSH-Px活性,上调心肌中Nrf2与HO-1蛋白的表达(P＜0.05).而给予HO-1抑制剂ZnPP后,Bis的上述作用均被减弱或抑制.结论 比索洛尔减轻急性心肌梗死大鼠氧化应激,与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.     

圣草酚通过调节Nrf2通路促进氧化应激诱导的肝癌细胞的凋亡

目的:探究圣草酚对氧化应激诱导的肝癌细胞凋亡的作用机制.方法:CCK-8测定圣草酚对细胞的毒性.将Huh7细胞分为对照组、H2O2组、圣草酚组、H2O2+圣草酚组,分别用0.5 mmol/L H2O2或78 μmol/L圣草酚处理细胞48h;2,7-二氯荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)探针测定ROS的含量;试剂盒检测S...     

Nrf2-ARE抗氧化通路在帕金森病中的作用

正帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经变性疾病,氧化应激的增加是PD发病的一个重要机制。神经组织因其高氧耗和高脂肪含量,比其它脏器对氧化应激更敏感。随着需氧生物线粒体呼吸的出现,一些副产物也伴随产生,主要是活性氧(reactive oxygen species,ROS)的形式~[1],其以非特异方式与核酸、蛋白质和膜脂质反应,引起基因突变、损伤或酶活性丢失以及膜渗透性的改变~[2]。氧化应激也可产生活性氮(reactive nitrogen species,RNS)和亲电反应体(reactive electrophilic species,RES)。这些反应产物     

白果内酯激活Nrf2/HO-1通路抑制星形胶质细胞的氧化应激缓解CPZ诱导的髓鞘脱失

目的:探讨白果内酯(BB)是否可以减轻星形胶质细胞的氧化应激反应抑制髓鞘脱失及其可能的机制.方法:体内采用双环己酮草酰二腙(CPZ)脱髓鞘C57BL/6小鼠模型,从第4周末开始,BB治疗组腹腔注射BB 2周.体外采用脂多糖(LPS)刺激原代星形胶质细胞24 h的炎症模型.结果:BB在体内抑制CPZ诱导的氧化应激反应,促...     

汉黄芩素对LPS-ATP诱导的巨噬细胞氧化应激的抑制作用

目的:探究汉黄芩素对巨噬细胞炎症反应中氧化应激的抑制作用。方法:将巨噬细胞RAW264.7分为对照组(正常培养不予刺激),模型组(LPS和ATP联合刺激,LPS刺激4 h后加入ATP刺激30 min),汉黄芩素干预组(同样予以LPS和ATP联合刺激,LPS刺激的同时加入汉黄芩素)。检测试剂盒检测SOD、NO、MDA分泌水平,免疫荧光检测各组细胞Nrf2的核转位情况,RT-qPCR检测Nrf2和抗氧化酶mRNA转录水平。结果:与模型组相比,汉黄芩素可减少LPS-ATP联合刺激的巨噬细胞MDA、NO分泌水平,上调Nrf2 mRNA的表达并促进胞浆内Nrf2的核转位,上调胞内抗氧化酶HO-1、SOD、GPx、CAT及NQO-1 mRNA的转录,增加SOD的活性。结论:汉黄芩素对LPS-ATP诱导的巨噬细胞氧化应激具有抑制作用,可能是通过抑制氧化应激来下调ROS水平,起到减轻炎症反应的作用。     

连翘酯苷A通过抑制PI3K/Akt通路并激活Nrf2/HO-1通路抑制LPS诱导的炎症及氧化应激

目的 探讨连翘酯苷A(forsythiaside A,FSA)对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症和氧化应激的影响.方法 建立LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞模型,给予不同质量浓度连翘酯苷A,以观察其对炎症介质(NO和PGE2)生成和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)表达的影响,并探讨其可能机制.结果 ...     

姜黄素活化肝细胞Nrf2抗氧化系统效应及缓解胰岛素抵抗作用机制研究

目的探讨姜黄素对HepG2细胞Nrf2信号功能的调控作用与其改善胰岛素抵抗的效应关系,并进一步研究高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗时姜黄素干预对肝脏Nrf2系统功能及糖异生作用的影响。方法在人肝癌细胞HepG2上分别用葡萄糖氧化酶（GO）或长期胰岛素处理,分别制成氧化应激和高胰岛素血症胰岛素抵抗模型;用蛋白印迹方法（WB）检测姜黄素对Nrf2抗氧化系统的作用。另外,对细胞进行短时胰岛素刺激,观察胰岛素信号（PKBSer473磷酸化水平）变化。为研究姜黄素的整体动物药物作用,在高脂诱导的胰岛素抵抗小鼠模型用姜黄素进行干预（雄性C57BL/6J小鼠,给予高脂饲料加上3%的姜黄素）,在第25周进行丙酮酸耐量实验,并于第27周取肝脏组织检测Nrf2系统功能变化。结果姜黄素可明显激活HepG2细胞Nrf2系统,并对抗GO氧化应激所致的PKB磷酸化损害。在高脂饲喂小鼠胰岛素抵抗模型,姜黄素可改善丙酮酸耐量,提示其增强胰岛素作用（抑制肝脏糖异生）,从而缓解肝脏糖代谢异常;姜黄素还明显激活高脂肥胖小鼠肝脏受抑制的Nrf2信号功能。结论姜黄素通过增强内源性Nrf2系统功能对抗氧化应激,是其缓解肝细胞胰岛素抵抗的重要药理机理。     

泽明红山颗粒激活Nrf2/HO-1通路抑制非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝损伤

目的 探讨泽明红山颗粒对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝功能影响及可能机制.方法 SPF级C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组(control组)、非酒精性脂肪性肝炎模型组(NASH组)与非酒精性脂肪性肝炎模型+泽明红山颗粒组(ZMHS组).NASH和ZMHS组小鼠采用高脂纯化饲养(MD45％添加0.5％胆固醇...     

姜黄素对2 型糖尿病肾病大鼠保护作用及机制研究

目的:探讨姜黄素对2 型糖尿病肾病(DN)大鼠保护作用及可能的作用机制。方法:30 只Wistar 大鼠随机分为对照组、DN 组和姜黄素组,每组10 只。DN 组和姜黄素组采用高脂饲料喂养后注射链脲佐菌素建立DN 模型,造模成功后姜黄素组以200 mg/ kg 姜黄素灌胃,每天1 次,对照组和DN 组给予等量羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药12 周。末次给药后收集24 h 尿量,称重,腹腔麻醉后心脏取血,检测血糖(Blood glucose,BG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacylglyceride,TG)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿微量白蛋白(Vrine microalbumin,mAlb),计算尿蛋白排泄率(Urinary protein excretion rate,UAER);处死大鼠,摘取双肾除去包膜后称重(KM),计算肾重指数(KI);多聚甲酚固定肾皮质用于苏木素-伊红(HE)染色,肾皮质制成匀浆检测MDA 和SOD 活性,Western blot 检测肾组织中核因子相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO鄄1)蛋白表达。结果:DN 组和姜黄素组BG、TC、TG、KI、BUN、Scr、UAER、MDA显著高于对照组,BM、KM、SOD 显著低于对照组,且姜黄素组上述指标升高或降低幅度小于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05);HE 染色结果显示,与DN 组比较,姜黄素组肾小管变性明显减轻,炎性细胞浸润明显减少;Western blot 结果显示对照组Nrf2 和HO-1 蛋白表达显著低于DN 组和姜黄素组,而姜黄素组显著高于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可能通过激活Nrf2/ ARE 信号通路,降低糖尿病肾病大鼠氧化应激、发挥肾脏保护作用。     

右美托咪定激活Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激缓解大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对神经性疼痛大鼠坐骨神经处神经阻滞作用及可能的机制.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、慢性坐骨神经结扎建立神经病理性疼痛模型组(CCI)和DEX治疗组(DEX);测定各组大鼠机械性缩足反射阈值和热缩爪潜伏期;HE染色观测各组大鼠坐骨神经病理改变;...     

姜黄素对巨噬细胞的极化调节作用研究进展

巨噬细胞是创面愈合和组织修复过程的“总指挥”,对整个愈合过程具有不可替代的指导作用.巨噬细胞在不同微环境中可分别被诱导分化为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞,前者在创面中能吞噬并清除外源性异物和坏死细胞,促进炎症反应的发生;后者在创面中通过释放各种细胞因子,调节创伤修复,抑制炎症反应的发生.不同极化状态的巨噬细胞在创伤愈合过程中发挥着不同的作用.姜黄素能够促进M0和(或)M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化.但至今姜黄素对巨噬细胞极化调节作用机制还尚不完全清楚.深入探讨姜黄素对巨噬细胞的调节机制及作用效应,将为创面愈合提供新的治疗策略和靶点.     

盐酸羟考酮激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路抑制氧化应激缓解大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨盐酸羟考酮对脊髓损伤大鼠氧化应激的影响及神经性病理疼痛的作用。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤模型组（SCI组）和盐酸羟考酮组（OHI组）,Allen’s方法建立脊髓损伤大鼠模型。于实验开始前1d及造模后1d、3d、7d、14d对各组大鼠进行BBB评分,进行热缩爪潜伏期和机械性缩爪潜伏期的测定;利用HE染色观察脊髓损伤病理变化;免疫荧光法检测活性氧ROS的表达;ELISA检测血清中SOD、MDA、GSH-PX的含量;TUNEL法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Nrf2、Keap1、HO-1的表达水平。结果 盐酸羟考酮抑制SCI大鼠病理损伤,缓解神经病理性疼痛,抑制ROS的释放,抑制MDA的分泌,促进SOD、GSH-PX的释放,上调Nrf2、HO-1的表达,下调Keap1的表达。结论 盐酸羟考酮通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路抑制氧化应激,缓解SCI大鼠神经病理性头痛,降低病理损伤。     

雷帕霉素经自噬/Nrf2途径调节肿瘤相关巨噬细胞功能在膀胱癌进展中的作用

目的:探讨雷帕霉素诱导自噬对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)功能的影响机制及其在膀胱癌进展中的作用.方法:诱导并鉴定TAMs,用雷帕霉素诱导TAMs自噬,电镜观察自噬小体数量变化,免疫荧光检测自噬标记物LC3表达.建立TAMs与膀胱癌细胞非接触共培养模型,划痕和Transwell实验观察自噬增强的TAMs对膀胱癌细胞迁移侵...     

尿石素A(urolithin A)通过激活Nrf2通路和自噬抑制高脂诱导的肝细胞炎症反应及氧化应激

目的 研究尿石素A(UA)对高脂诱导的肝细胞炎症以及脂肪堆积的作用及机制.方法 采用核因子E2相关因子2(Nrf2)短发夹RNA (shRNA)慢病毒感染,建立稳定敲减Nrf2的L02肝细胞系.空载体对照细胞及敲低Nrf2的L02细胞给予游离脂肪酸(FFA)建立高脂细胞模型、BODIPY493/503染色检测细胞内脂肪...     

利多卡因对脓毒症大鼠心肌损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

目的:探究利多卡因对脓毒症大鼠心肌损伤及核因子E2相关因子2/血红素加氧酶1(Nrf2/HO-1)通路的影响.方法:健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和利多卡因组,每组15只.模型组和利多卡因组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型,假手术组大鼠仅打开腹腔而不进行盲肠结扎穿孔,造模后利多卡因组大鼠给予利多卡因10 ...     

苹果多酚通过调控Keap1/Nrf2通路减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的：探讨苹果多酚(AP)调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法：按照随机数字表法将SD大鼠分为对照(control)组、模型(model)组、低剂量(25 mg/kg)AP组(AP-L组)、高剂量(100 mg/kg)AP组(AP-H组)、地塞米松(DEX)组和AP-H+ML385(Nrf2抑制剂)组,每组12只。各组大鼠根据分组给药,每天腹腔注射给药1次,持续给药14天,control组、model组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。末次给药1 h后,除control组外,其它组大鼠均向气管内注射LPS以构建ALI模型,control组大鼠的气管内注射等体积的生理盐水,造模24 h后,收集大鼠肺泡灌洗液、血清及双侧肺组织用于实验。检测肺泡灌洗液中细胞总数、中性粒细胞数;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;HE染色观察大鼠肺组织病理损伤情况;检测大鼠肺组织湿重/干重比;试剂盒检测大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化...     

核转录因子Nrf2最新研究进展

背景：核转录因子Nrf2属于CNC亮氨酸拉链转录激活因子家族,与抗氧化反应、抗炎反应及细胞保护作用等有关。 目的：总结核转录因子Nrf2的功能,与肿瘤的转归和抗肿瘤药物性,以及与全身各个系统其他疾病的相关性。 方法：应用计算机检索1990-01/2011-07PubMed数据库,检索词为“Nrf2,Keap1”。选择核转录因子Nrf2的基础研究与临床应用方面的文献,排除陈旧及重复试验文章,最终纳入50篇符合标准的文献。 结果与结论：Nrf2不仅与抗氧化应激有关,而且与肿瘤的发生发展及转移、抗肿瘤药物性相关,同时发现除与氧化应激性疾病有关,还与全身各个系统其他疾病的发生及中毒有关。Nrf2诱导物有可能成为有潜力的基因靶向治疗药物。