应用流式细胞仪研究HIV/AIDS患者的免疫状况

目的　探讨人类免疫缺陷病毒 ( human immunodeficiency virus,HIV)感染者和艾滋病 ( acquired immunodefi-ciency syndrome,AIDS)患者的免疫状况。方法　应用流式细胞仪 ( flow cytometer,FCM)四色荧光计数 ( CD4 5 +、CD3+、CD4 + 、CD8+ )检测 2 0例正常人、38例 HIV无症状感染者、2 4例 HIV有症状感染者和 2 1例 AIDS患者的外周血 CD4 + 、CD8+ 淋巴细胞 ,结合临床进行分析。　结果　 HIV无症状感染者、HIV有症状感染者和 AIDS患者的外周血 CD4 + 细胞数( 45 6± 99.8、2 87± 85 .3、4 5± 4 1 .9)及 CD4 + / CD8+比值 ( 0 .4 6± 0 .1 4、0 .39± 0 .1 5、0 .1 1± 0 .0 9)均明显低于正常人群的CD4 + 细胞数 ( 84 2± 2 64.1 ) ( P<0 .0 1 )及 CD4 + / CD8+ 比值 ( 1 .79± 0 .5 1 ) ( P<0 .0 1 ) ;二者随病程进展不断下降 ,且不同病程间差异明显。结论　CD4 +细胞绝对数和 CD4 + / CD8+比值可作为检测 HIV感染临床分期的重要指标     

广州地区人类免疫缺陷病毒感染者的免疫状态分析

目的：探讨广州地区各期的HIV感染者的CD4^ 、CD8^ 淋巴细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值及其变化规律。方法：使用流式细胞仪及三色荧光标记的单克隆抗体试剂对55例未经过高效抗逆转录病毒治疗(HARRT)的HIV感染者的抗凝血浆进行CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 淋巴细胞的绝对值计数，根据CD4^ 细胞计数进行分组(≥500个／mm^3为Ⅰ组，共7例499～201个／mm^3为Ⅱ组，共15例20051个／mm^3为Ⅲ组，共9例≤50个／mm^3为Ⅳ组，共24例)。另设肝炎对照组(慢性乙型肝炎患者19例)及健康对照组(正常健康人64例)。结果：(1)CD4细胞数比较：Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与两个对照组之间比较均有显著差异．Ⅰ组与两个对照组之间比较均无显著差异。(2)CD8^ 细胞数比较：Ⅰ、Ⅱ组与健康对照组、Ⅳ组与两个对照组之间比较均有显著差异，Ⅲ组与两个对照组之间比较均无显著差异。(3)CD4^ ／CD8^ 比值比较：Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组与两个对照组、Ⅰ组与健康对照组之间比较均有显著差异，I组与肝炎对照组之间比较无显著差异。(4)肝炎对照组与健康对照组之间比较．CD4^ 、CD8^ 细胞数、CD4^ ／CD8^ 比值均无显著差异。结论：随着疾病进展，HIV感染者的CD4^ 细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值进行性减少，CD8^ 细胞数在早期明显增加，晚期明显减少，CD8^ 细胞数及CD4^ ／CD8^ 比值的显著改变可能比CD4细胞数更早出现。     

肺癌患者手术前后外周血CD3^＋和CD4^＋与CD16^＋及CD4^＋／CD8^＋T细胞的表达及临床意义

目的 研究肺癌患手术前后，外周血中CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T淋巴细胞亚群的定量变化，并探讨其临床意义。方法 取肺癌术前及术后第10天外周血，用流式细胞仪检测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T细胞，进行定量分析，并与对照组比较。结果 肺癌患手术前CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等均低于对照组（P＜0．01）。肺癌未转移（淋巴结阴性）手术后CD3^ 等T细胞明显高于术前（P＜0．05）。但肺癌已转移（淋巴结阳性），手术后CD3^ 等T细胞继续下降，与术前无差异（P＞0．05）。结论 监测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等淋巴细胞亚群，对肺癌患免疫功能的评价及判断预后有重要意义。     

粒系集落刺激因子对外周血T淋巴细胞亚群的影响及与CD34+细胞动员效果的相关性

本研究观察粒系集落刺激因子(G—CSF)作为造血干细胞动员剂对外周血T淋巴细胞亚群的影响及与CD34^ 细胞动员效果的关系。对26例行自体造血干细胞移植患在G—CSF动员前后收集外周血标本，用流式细胞术检测动员前后CD3^ 、CD3^ CD4^ 、CD3^ CD8^ 、CD3^ CD4^ CD8^ 及CD3^ CD4^-CD8细胞绝对数量的变化并与外周血CD34^ 细胞的动员效果进行相关性分析。结果表明：GCSF动员后外周血CD3^ 、CD3^ CD4^ 、CD3^ CD4^ CD8^ 及CD3^ CD4^-CD8细胞的绝对数量分别增加2.23，2．62，2.99及10．96倍，而CD3^ CD4^ CD8^ 细胞的变化无统计学意义(P=0．243)。各亚群细胞的变化与CD34^ 细胞动员效果比较，仅CD3^ CD4 CD8细胞的变化与CD34^ 细胞动员效果间具有良好的相关性，r=0．796，P=0.000。结论：G—CSF将造血干细胞由骨髓动员到外周血的同时，使外周血中T细胞亚群的绝对数量发生不同程度的变化。在各T淋巴细胞亚群中CD3^ CD8^-细胞的增加与CD34^ 细胞的动员效果间具有统计学意义的相关性。     

白三烯受体拮抗剂对毛细支气管炎外周血CD4^＋CD25^＋Treg的影响及疗效观察

目的探讨白三烯受体拮抗剂（孟鲁司特）对毛细支气管炎患）DJ＇b周血CD4^＋ CD25^＋ 调节性T细胞（Treg）的影响并观察其疗效。方法将48例毛细支气管炎患儿按入院顺序分成孟鲁司特干预组和常规治疗组,常规治疗组采取综合治疗,孟鲁司特于预组在综合治疗的基础上加用孟鲁司特4mg,每晚1次口服。检测2组患者治疗前后外周血中CD4^＋CD^25＋Treg的水平,并观察2组患者咳嗽、喘憋、肺部体征的持续时间。结果治疗前2组患儿外周血CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的百分比均明显低于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;治疗后孟鲁司特干预组外周血中CD4^＋CD25^＋Treg水平较常规治疗组显著上升（P〈0．05）,同时咳嗽、喘憋、肺部体征持续时间与常规治疗组比较有统计学意义（P〈0．01）。结论孟鲁斯特纳可缩短病程,提高毛细支气管炎患儿外周血CD4^＋CD25^＋Treg的水平,在毛细支气管炎的治疗中起重要作用。     

重度烟雾吸入致大鼠急性肺损伤的免疫应答及其机制探讨

目的分析重度烟雾吸入致吸人性急性肺损伤(ALI)对大鼠肺自然免疫及特异性免疫反应。方法分别复制一氧化碳(CO)浓度为2×10~(-3)(低浓度)和4×10~(-3)(高浓度)重度烟雾吸入致大鼠吸人性ALI模型。观察染毒后0～24 h大鼠肺组织病理学变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中致炎及抗炎细胞因子的浓度;用流式细胞仪检测外周血及BALF中淋巴细胞亚群数,BALF中CD45~+淋巴细胞和非淋巴细胞数量以及CD4~+/CD8~+变化。结果肺组织病理学检查证实染毒后可致明显肺损伤。染毒2 h BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)呈一过性升高,高浓度组较低浓度组更明显,之后下降;4 h白细胞介素-6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)开始升高,其中IL-6低浓度组较高浓度组明显,IFN-γ高浓度组较低浓度组明显,至12 h达高峰,24 h开始下降,但仍高于正常对照组水平(P＜0．05或P＜0．01);6～24 h IL-10与正常对照组比较均显著升高,尤以24 h明显(P＜0．05或P＜0．01)。外周血及BALF中CD4~+、CD8~+、自然杀伤细胞、B细胞及总T细胞均较正常对照组明显下降(P＜0．05或P＜0．01)。BALF中CD45~+淋巴细胞数和CD4~+/CD8~+均较正常对照组明显减少,非淋巴细胞数较正常对照组明显增多,且高浓度组较低浓度组变化趋势明显(P＜0．05或P＜0．01)。结论重度烟雾吸入致吸入性ALI的过程中伴有持续且过度的肺自然免疫反应,这种自然免疫反应部分由活化的中性粒细胞及巨噬细胞所介导;而肺特异性免疫反应受到明显的抑制。     

卡介苗免疫大鼠的抗结核发病和CD4^＋CD8^＋双阳T细胞

目的：探讨卡介苗（BCG）对大鼠结核感染及CD4^＋CD8^＋双阳（DP）T细胞的影响。方法：60只PPD皮试阴性SD大鼠随机分成（1）卡介苗免疫（BCG）组、（2）BCG免疫后结核分枝杆菌（Mtb）攻击（BCG-TB）组、（3）Mtb攻击后不化疗（TB）组。BCG组、BCG-TB组于观察开始接种BCG。BCG-TB组、TB组于3个月末接受Mtb攻击。比较全部大鼠接种Mtb后的死亡率；实验开始和其后3、4、5、6、8个月末检测外周血中T细胞亚群。结果：BCG组、BCG-TB组无死亡；TB组感染后5个月内死亡率45％（9／20）。TB组死亡率高于BCG组和BCG-TB组，P〈O．01。实验开始时3个组组间对应参数比较差异均无显著性（P〉0．05）；3个月末BCG组、BCG-TB组之间各对应参数比较差异均无显著性（P〉O．05）；BCG组和BCG-TB组第3个月末与接种前比较，CD8^＋、DP升高，且显著高于TB组（Mtb干预之前），P〈0．01或P〈0．05。BCG组DP细胞于接种BCG后第6个月后开始回落，但仍显著高于接种前；BCG-TB组于Mtb攻击1个月后CD8^＋、DP继续升高，观察的第8个月CD8^＋、DP回落，但仍显著高于BCG接种前；TB组Mtb攻击后1个月末CD8^＋、DP有升高但低于BCG组和BCG-TB组，同时伴有CD3^＋、CD4^＋降低，差异均有显著性，P〈0．05或P〈0．01，此后维持在相近水平。Mtb攻击2个月末BCG-TB组DP高于BCG组和TB组，P〈0．05或P〈0．01。Mtb攻击5个月后3个组间DP差异无显著性（P〉0．05）。结论：BCG预防接种可保护Mtb感染宿主免于发病和死亡，增强抗结核保护性细胞免疫力表现之一为DP细胞升高，DP细胞是抗结核保护性免疫相关T细胞。DP细胞的形成与CD4^＋SP细胞上CD8^＋抗原表达有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化

目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者发病机制中的作用。方法应用流式细胞术检测ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4^＋CD25^highT细胞、CD4^＋FOXP3^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的数量；实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3 mRNA的表达水平。将ITP患者和正常人CD4^＋CD25^highT细胞与自身CD4^＋CD25^-T细胞混合培养，检测CD4^＋CD25^high T细胞免疫抑制功能。结果ITP患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞约占CD4^＋T细胞的（15．64±5．82）％，明显高于正常对照组（9．30±3．95）％（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞比例为（1．53±0．66）％，与对照组[（1．36±0．55）％]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4^＋FOXP3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞分别为（1．82±1．42）％和（1．25±0．94）％，均明显低于对照组[（3．90±1．37）％和（2．65±0．92）％]（P值均〈0．01）。ITP患者外周血FOXP3 mRNA表达水平较正常人明显下调（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞的抑制活性较正常人减弱（P〈0．01）。结论ITP患者中CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3表达水平降低，抑制活性减弱。     

炎症性肠病患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞的表达及意义

[目的]探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞在炎症性肠病（IBD）发病中的作用及其与疾病活动性的关系。[方法]采用三色流式细胞术检测40例IBD患者，其它肠病患者30例和健康对照者30例。IBD患者中活动期患者25例，缓解期患者15例，使用和未使用激素和／或免疫抑制剂活动期IBD患者分别为16例和9例。对以上各组外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞亚群的百分率进行测定。[结果]疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于其他肠病和正常对照组（P〈0．01），疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于疾病稳定期患者（P〈0．01）。活动期IBD患者中使用激素和／或免疫抑制剂与未使用激素和／或免疫抑制剂结果差异有统计学意义。IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率与疾病活动指数评分呈负相关性。[结论]IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞异常表达，可能参与疾病的发生发展，与疾病的活动性密切相关。     

调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植的研究

目的探讨外周血中调节性T淋巴细胞与反复体外受精-胚胎移植失败之间的相关性。方法用双荧光标记流式细胞分析技术,检测20例原因不明反复体外受精-胚胎移植失败患者、20例正常非孕妇女及18例第一周期体外受精-胚胎移植成功妇女外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的水平。结果反复体外受精-胚胎移植失败患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞及CD4^＋CD25^highT细胞的百分率分别为（7．89±1．16）%和（1．06±0．33）％,低于正常非孕组的（11．73±1．05）％（P〈0．01）和（1．36±o．53）％（P〈0．05）,也低于第一周期体外受精-胚胎移植成功组的（9．67±1．87）％（P〈0．05）和（1．39±0．37）％（P〈0．05）。结论外周血中调节性T细胞的减少可能与反复体外受精-胚胎移植失败的发生有关。     

沙利度胺对多发性骨髓瘤患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞作用的临床研究

本研究探讨沙利度胺治疗前后多发性骨髓瘤（MM）患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例及变化规律，为有效的免疫治疗提供理论依据。采用流式细胞术检测MM患者外周血CD3、CD4、CD8、NK及CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例；采用成组设计的两样本均数比较的t检验进行统计学分析，以P〈0．05为检验水准。结果表明：MM患者治疗前CD4^＋CD25^＋highT比例较正常人明显升高（P〉0．01），沙利度胺治疗有效患者的CD4^＋CD25^＋highT比例较治疗前明显降低（P〈0．01），治疗无效者Treg比例无显著变化（P〉0．05）。16例经化疗完全缓解，CD4^＋CD25^＋highT比例为6．91±1．12％，较治疗前升高，但无显著性差异（P〉0．05）。沙利度胺治疗有效者CD3^＋T、CD4^＋T、NK细胞比例及CD4／CD8比值较治疗前明显升高（P〉0．05或0．01），CD8^＋T治疗前后无显著变化（P〉0．05）。结论：CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制作用可能是MM免疫逃逸的重要机制，下调MM患者CD4^＋CD25^＋Treg可能是沙利度胺治疗MM有效的机制之一。     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

我国HIV感染者CD4+T淋巴细胞检测能力的研究

目前，人类关于HIV感染的检测项目很多，其中CD4^＋ T淋巴细胞的检测已成为评估HIV感染者疾病状况切实可行和相对经济的检测项目，CD4^＋ T淋巴细胞水平用来监测不同临床阶段HIV感染者免疫状况的变化，判定HIV感染者病程，预测机会性感染的出现以及评价抗HIV药物疗效。从2006年起准确检测CD4^＋ T淋巴细胞计数已经成为判断是否开始治疗AIDS和HIV感染者以及治疗效果观察对比的关键。国际上如美国CDC、英国国家室间质量评价系统（The United Kingdom National External Quality Assessment Service，NEQAS）、加拿大HIV／AIDS质量评价和免疫标准化体系（Quality Assessment and Standardization for Immunological Measures Relevant to HIV／AIDS，QASI）定期发放质控品，     

rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4^＋CD8^＋初始及记忆T细胞亚群的比较

本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员的外周血采集物（G—PB）与稳态骨髓（SS—BM）中CD4^＋、CD8^＋初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CIM5RA和CD62L的表达将CD4^＋、CD8^＋T细胞划分为初始T细胞（naive，CIM5RA^＋CD62L^＋）、中心记忆T细胞（centralmemory，TCM，CIM5RA—CD62L^＋）、效应记忆T细胞（effeetor memory，TEM，CIM5RA^-CD62L^-）、终末分化效应记忆T细胞（terminally difierentiated effeetor memory，TTTp，CIM5RA^＋CD62L^-）。用流式细胞仪测定G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞的比例组成，并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明：G—PB中CD4^＋、CD8^＋T细胞的比例组成及CD4^＋／CD8^＋比值均高于SS—BM（P〈0．05）；G—PB中CD4^＋初始T细胞的比例显著低于SS—BM（P〈0．001），而CD4^＋TEM比例显著高于SS—BM（P〈0．001）；G—PB中CD8^＋初始和记忆T细胞亚群的比例与SS—BM无显著差异（P〉0．05）；与SS—BM相比，G—PB中CD4^＋CD62L^＋T细胞的比例明显降低（P=0．001），每微升G—PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS—BM（P〈0.001）。结论：G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异，这种差异可能影响G—PB和SS—BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。     

骨髓增生异常综合征患者T细胞亚型和CD3zeta表达的分析

免疫介导的骨髓抑制和(或)造血异常被认为是导致MDS患者血细胞减少的重要机制之一。本研究旨在通过分析11例骨髓增生异常综合征患者外周血T淋巴细胞亚群及CD3zeta的表达，以进一步评价MDS患者的免疫状态，探讨MDS患者血细胞减少可能的原因。对11例诊断明确的MDS患者，用流式细胞术计数外周血表达IFNγ^ CD4^ 细胞(Th1)、IL4^ CD4^ 细胞(Th2)、IFNγ^ CD8^ 细胞(Tc1)及IL4^ CD8^ 细胞(Tc2)，同时分析CD3zeta在T细胞亚群中的表达。结果显示：CD8^ 细胞在MDS患者外周血中比例明显升高；T细胞亚群Th1／Th2、Tc1／Tc2比值与正常对照无显著差异；T细胞活化信号传导通路上的功能蛋白CD3zeta在CD8^ 细胞中的表达明显增高。结论：MDS患者外周血T细胞亚群比例异常，以CD8^ 细胞增高为主要表现；CD3zeta在CD8^ 细胞中表达明显增高，在CD4^ 细胞中变化不大，提示MDS患者细胞免疫的过度活化主要与CD8^ 细胞有关；T细胞介导的细胞免疫过度活化是MDS患者外周血细胞减少的重要机制之一。     

CD4^＋CD25^highT细胞在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用

本研究探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）治疗前后患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞（CD25-PE染色阳性〉10^2为CD4^＋CD25^highT细胞）的表达情况及其可能的作用机制。应用免疫荧光标记和流式细胞术检测20例治疗前ITP患者、20例治疗后患者及14名正常人外周血中CD4^＋CD25^highT细胞的表达。结果表明：ITP患者治疗前外周血T细胞表面CD4^＋CD25^highT细胞表达水平明显低于治疗后组及正常对照组（P均〈0．01）；ITP治疗后患者组与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：ITP治疗前患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞水平较正常对照组明显降低，而在治疗有效后有所升高。外周血CD4^＋CD25^highT细胞表达率与血小板数量呈正相关。CD4^＋CD25^highT细胞水平的检测可作为对ITP患者预后判断的一个有效指标，并可以作为免疫治疗的靶点进行进一步研究。     

CD7阳性急性髓系白血病骨髓干／祖细胞5个基因表达的研究

本研究探讨abca5、mdr-1、kdr、dapk和irf-1 5个基因在CD7^＋急性髓细胞性白血病干／祖细胞的表达。利用实时定量RT—PCR（RQ—PCR）方法检测了15例正常骨髓（NBM）和16例AML患者骨髓单个核细胞（MNC）中5个基因的表达。采用流式细胞仪（FCM）分选8例NBM和21例AML患者骨髓CD34^＋CD38^＋祖细胞和CD34^＋CD38-干细胞,利用微量细胞RQ—PCR方法检测分选细胞中5个基因的表达。结果表明：NBMMNC均表达这5个基因,其中irf-1与dapk表达水平最高,相对表达量分别为4．08和3．86;abca5和mdr-1表达水平较低,为0．49和0．84;kdr表达最低为0．02。在经分选的CD34^＋CD38^＋祖细胞中,dapk和irf-1表达明显减低（P〈0．05）,kdr表达明显增加（P〈0．05）,其余2个基因无明显变化。在CD34^＋CD38^＋Lin-干细胞中,5个基因的表达均高于CD34^＋CD38^＋祖细胞,普遍增加至近2倍,而kdr增加了3倍,其中kdr和irf-l表达的增加具有统计学差异（P〈0．05）。与NBM相比,AMLMNC中5个基因的表达水平均有不同程度减低,以abca5、mdr-1、kdr和dapk最为显著（P〈0．05）。与AMLMNC相比,AMLCD34^＋CD38^＋细胞中,irf-1和dapk表达明显减低（P〈0．05）,其余3个基因表达增加,以kdr表达增加有统计学意义（P〈0．05）。AMLCD34^＋CD38^＋与CD34^＋CD38^-细胞比较,发现5个基因在CD34^＋CD38^＋细胞中的表达均增加,尤以kdr和irf-1的表达增加有意义（P〈0．05）。AMLCD34^＋CD38^＋CD7^＋细胞与CD34^＋CD38^-CD7-细胞中5个基因的表达均比CD34^＋CD38^＋细胞中的高,其中只有CD34^＋CD38^- CD7^＋细胞中KDR和CD34^＋CD38^-CD7^-细胞中KDR和irf-1的表达增加并具有统计学差异（P〈0．05）。结论：NBM中kdr主要表达在干／祖细胞中,而dapk和irf-1主要表达在较分化的细胞中。5个基因在干细胞阶段的表达均高于祖细胞阶段。AMLCD34^＋CD38^-CD7^＋细胞与CD34^＋CD38^＋CD7^-都具有干／祖细胞的基因表达特点。     

淋巴细胞亚群不同凋亡在狼疮性肾炎患者发病中的意义

目的探讨狼疮性肾炎（LN）患者不同时期外周血单个核细胞凋亡率及CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CU4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas、sFas表达的意义。方法56例经肾活检证实的LN患者中，活动期38例，静止期18例，均采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测sFas和流式细胞仪检测PBMC凋亡率及CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas等指标。结果LN静止期sFas较健康对照组增高，活动期PBMC凋亡率、sFas明显升高（P〈0．01），CD3^＋CD4^＋细胞较健康对照组明显减少（P〈0．01）、CD3^＋CD3^＋细胞比健康对照组增多（P〈0．01）；PBMC凋亡率与sFas呈正相关。结论LN患者外周血T淋巴细胞的不同凋亡，特别是CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比例失调，是导致LN病情发展的重要机制之一。sFas可能抑制肾小球系膜细胞凋亡，而且可能是LN进展中的一个因素。     

外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例变化在肾移植受者移植后免疫监测中的应用

背景：相关实验表明调节性T细胞在移植物免疫耐受中起重要作用。 目的：观察外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例变化与肾移植受者移植后免疫变化的相关性。 设计、时间及地点：回顾性病例分析,于2007-09／2008-07在广东省第二人民医院器官移植中心及其实验室完成。 参试者：52例病情稳定的维持性血液透析患者行同种异体肾移植治疗。 方法：肾移植后患者均服用三联免疫抑制剂。所有患者移植后发生急性移植肾排斥反应以及感染均按照相应指南诊断及治疗。分别于移植前和移植后1,2,4,8,12周以及发生排斥反应和感染时抽血检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞。按其免疫力恢复情况分为正常组26例,排斥反应组17例,感染组9例。 主要观察指标：用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞的比例,所得结果进行相关分析。 结果：与正常组比较：排斥反应组CD4^＋CD25^highFoxP3／CD4^＋的比值降低（P〈0．05）,而感染组显著增高（P〈0．01）。与感染组比较：排斥反应组CD4^＋CD25^highFoxP3／CD4^＋的比值显著降低（P〈0．01）。 结论：肾移植后受者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例与受者免疫状态密切相关。CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者移植后发生感染或排斥反应的指标之一。     

活动性肺结核与潜在感染者CD8+、CD4+记忆T细胞表达水平的比较

[目的]探讨CD8+、CD4+记忆T细胞表达水平在活动性肺结核与潜伏感染者中的表达差异及其意义.[方法]本院确诊的25例活动性肺结核患者(A组)、25例肺结核潜伏感染者(B组)、30例健康人群作为健康对照组(C组),检测各组外周血CD4+记忆T细胞、CD8+记忆T细胞的表达水平,并探讨其与高分辨率CT评分(HRCT)的相关性.[结果]B组的CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平显著高于A组、C组(P＜0.05),A组的CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平显著的高于C组(P＜0.05).B组、A组的CD4+Tem、CD8+Tem水平显著的低于C组(P＜0.05),B组、A组的CD4+ Tem、CD8+ Tem水平相比差异无显著性(P＞0.05).A组患者CD4+ Tcm、CD8+ Tcm水平与HRCT评分呈显著的负相关关系(P＜0.05);A组患者CD4+Tem、CD8+ Tem水平与HRCT评分无显著的相关系(P＞0.05).[结论]CD4+、CD8+中心记忆性T细胞在活动性肺结核与潜伏感染者中水平差异显著,并且与肺结核患者病例损伤程度有关.