苯甲酸阿格列汀合成工艺的改进

目的改进苯甲酸阿格列汀的合成工艺。方法以6-氯尿嘧啶为起始原料,先与碘甲烷反应合成3-甲基-6-氯尿嘧啶,继而在无机碱的参与下与2-溴甲基苄腈反应得2-(6-氯-3甲基-2,4-二氯代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈,然后再在无机碱的存在下与(R)-3-氨基哌啶二盐酸发生取代反应,最后与苯甲酸成盐得苯甲酸阿格列汀。结果合成得到苯甲酸阿格列汀,总收率达到57.09%,纯度为99.6%。结论该工艺经过改进,降低了毒害,成本降低,经济环保,适合工业化生产。     

苯甲酸阿格列汀有关物质的合成

以苯甲酸阿格列汀(1)的工业化生产路线为基础,制备了苯甲酸阿格列汀的7个有关物质：2,2’-[[6-氯-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1,5(2H)-基]-二(亚甲基)]二苯甲腈(7)、2-[[5-溴-6-氯-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基]甲基]-苯甲腈(8)、2,2’-[[6-乙氧基-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1,5(2H)-基]-二(亚甲基)]二苯甲腈(9)、(R)-2-[[3-甲基-2,4-二氧代-6-[(哌啶-3-基)氨基]-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基]甲基]苯甲腈(10)、(R)-2-[[6-[3-[[3-(2-氰苄基)-1-甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘧啶-4-基]氨基]哌啶-1-基]-3-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基]甲基]苯甲腈(11)、(R)-2-[[3-甲基-6-[3-[(1-甲基-2,6-二氧代-1,2,3,6-四氢嘧啶-4-基)氨基]哌啶-1-基]-2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基]甲基]苯甲腈(12)、(R)-N-[1-[3-(2-氰基苄...     

LC-MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定健康人血浆中麦考酚酸浓度的方法,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法20名健康受试者单剂量口服麦考酚吗乙酯胶囊,以兰索拉唑砜为内标,血浆样品经蛋白沉淀处理后,采用CAPCELL PAK C_(18)(50 mm×2.1 mm,3.5μm,No:AKIE01045)分离。样品经电喷雾离子源(ESI)离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子检测方式测定麦考酚酸(m/z 319.1/191.1)和内标兰索拉唑砜(m/z 384.0/180.0)的浓度,计算主要药动学参数及相对生物利用度。结果麦考酚酸在0.1～20mg·L~(-1)内线性良好,定量下限为0.1 mg·L~(-1)。方法的相对回收率在85%～115%之间,批内、批间RSD均<15%。受试制剂与参比制剂的t_(1/2)分别为(12.45±5.30)、(14.26±7.47)h,t_(max)分别为(0.74±0.36)、(0.75±0.58)h,ρ_(max)缸分别为(10.29±3.29)、(11.43±4.83)mg·L~(-1)。结论建立的LC-MS/MS法专属性强、灵敏度高,操作简便、快速。受试制剂与参比制剂生物等效。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氨蝶呤的浓度

目的:建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中甲氨蝶呤(MTX)的浓度,应用于急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿的治疗药物监测.方法:色谱柱为Agilent C18 SB-Aq(2.1 mm×100 mm,3.5μm);流动相为A相:(0.05%甲酸-7.5 mmol·L-1甲酸铵)水溶液,B相:甲醇,梯度洗脱;流速为0.4 mL·min-1,柱温为30℃.MTX和内标氨基蝶呤(IS)在ESI正离子模式下的定量离子对分别为455.2→308.1和441.2→294.0.结果:MTX在0.01~10μmol·L-1浓度范围内线性良好,日内、日间的精密度和准确度均在±15%以内,MTX在低、中、高浓度的回收率为96.9%~105.0%.结论:本研究建立的HPLC-MS/MS法测定MTX血浆浓度的方法快捷、准确,适用于MTX的临床ALL患儿血药浓度的监测.     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中拉西地平药物浓度的方法学研究

摘 要 目的：建立测定人血浆中拉西地平浓度的方法。方法: 200 μl血浆样本采用500 μl叔丁基甲醚萃取浓缩,采用HPLC MS/MS测定,以¹3C8 拉西地平为内标,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18 （150 mm×2.1 mm, 5 μm）,流动相为水（含5 mmol·L^-1甲酸铵） 乙腈（15〖KG*9〗∶〖KG-*2〗85,v/v）,流速0.3 ml·min^-1,柱温40℃,进样量10 μl,采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,以[M+NH4]+作为分子离子峰,用于拉西地平定量的三对反应离子对为m/z 473.5→m/z 410.3、m/z 473.5→m/z 400.1和m/z 473.5→m/z 354.3,用于内标定量的反应离子对为m/z 481.4→m/z 362.3。结果: 拉西地平在0.1 10 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r＞0.996 9）,定量下限为0.1 ng·mL^-1;日内、日间精密度为3.15% ～7.04%,相对偏差（RE）为-8.58 ～12.17%,提取回收率为107% ～118%,RSD＜15%。血浆样品在经历3次冻融（-20 ℃到室温）循环和冷冻放置40 d等条件下均稳定,处理后样品在室温和自动进样器中（4℃）各放置24 h均稳定（RSD＜15%）。结论: 该方法快速、准确、灵敏度高、专属性强,可应用于拉西地平相关的生物等效性一致性评价和药动学研究。     

GC-MS/MS法测定苯甲酸阿格列汀中基因毒杂质2-氰基氯苄和邻二溴甲基苯腈的含量

目的:建立气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)同时测定苯甲酸阿格列汀中基因毒杂质邻二溴甲基苯腈和2-氰基氯苄的含量.方法:采用6％氰丙基苯-94％二甲基硅氧烷(Agilent DB-624,30 m×0.32 mm,1.8μm)色谱柱,程序升温;进样口温度:260℃,进样体积1μL,线速度,5:1分流比进样.质谱条...     

LC-MS／MS法测定人血浆中米格列醇

目的:建立测定人血浆中米格列醇的 LC-MS/MS 法。方法:以盐酸格拉司琼为内标,以 Kromasil CN 柱(2.1 mm×150mm,3.0μm)为分析柱;采用0.05%三氟乙酸乙腈溶液-0.05%三氟乙酸水溶液(80:20)为流动相;流速0.2 mL·min~(-1);柱温45℃。质谱条件为电喷雾电离源(ESI~ ),以选择反应离子监测(SRM)方式进行检测,用于定量分析的反应离子分别为 m/z208.1→146.1(米格列醇),m/z 313.1→138.0(盐酸格拉司琼)。结果:米格列醇在0.01～4.0μg·mL~(-1)浓度范围内线性良好;最低检测限为2.0 ng·mL~(-1)(S/N=4);日内、日间精密度(RSD)均小于7%;低、中、高3个浓度的方法回收率均大于90%。结论:本法专属性强,灵敏度高,样品处理简单,可用于米格列醇临床药物动力学研究。     

HPLC法检查苯甲酸阿格列汀原料药的有关物质

目的:建立检查苯甲酸阿格列汀原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱梯度洗脱法。色谱柱为C18,流动相A为0.2%磷酸溶液(pH 3.0),流动相B为乙腈,以1.0 ml/min流速进行梯度洗脱,检测波长为225 nm,进样量为20μl。采用不加校正因子主成分自身对照法检查特定杂质F-1的量。结果:苯甲酸阿格列汀与F-1及其他未知杂质均分离良好,前二者检查质量浓度线性范围分别为0.187 2⁰.748 8、0.184 50.748 8、0.184 5⁰.738 0μg/ml(r=0.999 7、0.999 9);F-1的检测限和定量限分别为2.5、7.5 ng,平均回收率为100.9%(RSD=1.10%,n=3);3批样品中F-1量均≤0.06%。结论:建立的方法灵敏快速、结果准确可靠,可作为苯甲酸阿格列汀原料药的有关物质检查方法。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中维格列汀浓度及其应用

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人EDTA抗凝血浆中维格列汀的浓度,并将其应用于药代动力学研究。方法:以稳定同位素标记¹³C-¹⁵N-维格列汀为内标,血浆样品用乙腈进行蛋白沉淀处理,采用Hypurity C₁₈(150 mm×2.1 mm, 5μm)色谱柱,以甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,柱温40℃,进样量2μL,采用电喷雾离子源(ESI源),多反应监测正离子模式进行检测。用于定量分析的维格列汀监测离子对m/z 304.3→154.2,内标监测离子对m/z 310.3→160.3。考察其专属性、标准曲线、定量限、精密度、回收率、基质效应、稳定性,并使用该方法对健康受试者的血浆维格列汀浓度进行测定。结果:血浆中维格列汀质量浓度在1.11～534.0 ng·mL^-1范围内线性关系良好。4个浓度水平的批内、批间精密度(RSD)均在0.9%～8.5%,准确度在99.8%～109.3%。低浓度血浆样品室温...     

高效液相色谱-质谱联用法测定血浆富马酸卢帕他定浓度

目的 建立高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆富马酸卢帕他定浓度. 方法 以氯雷他定为内标, 待测血浆样品经氢氧化钠碱化, 加醋酸乙酯 二氯甲烷（4：1）萃取后, 用液-质联用方法进行检测. 结果 血浆富马酸卢帕他定的浓度线性范围为0.05～13.00 μg&#8226;L^-1, 最低定量浓度为0.05 μg&#8226;L^-1; 提取回收率为65.06%～73.25%. 结论 该法分离效果良好, 灵敏度高, 回收率高, 可用于人体血药浓度测定及药动学研究.     

LC-MS法测定曲马多在人体中的血药浓度

目的建立LC-MS法测定曲马多在血浆中的浓度。方法血浆样品经过饱和NaHCO3溶液碱化后,用乙酸乙酯萃取;流动相为甲醇-10 mmol/L(含0.5%甲酸)的醋酸铵水溶液(60︰40,v/v),流速为1.0 ml/min,采用电喷雾离子化(ESI),以选择性离子检测(SIM)方式进行检测。结果曲马多的线性范围在5.075～609.0 ng/ml,最低定量限为5.075 ng/ml,方法提取回收率为82.7%～85.9%,相对回收率为97.9%～102.0%,日内日间RSD均<10%。结论本方法准确,灵敏,重现性好,可用于曲马多血药浓度的检测及药动学的相关研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中氯法拉滨的浓度

目的:建立测定人血浆中氯法拉滨浓度的方法。方法:血浆样品经甲基叔丁基醚提取处理后,采用高效液相色谱串联质谱电喷雾(HPLC-MS/MS)法进行测定,色谱柱为Thermo C18,流动相为乙腈-水(250∶3,其中含4 mmol·L-1乙酸铵和0.3%甲酸),流速为0.5 mL·min-1,进样量为10μL,内标为克拉屈滨。用于定量氯法拉滨和克拉屈滨的离子反应分别为m/z 304.2→170.0、m/z286.1→170.0。每个样品的分析时间为5 min。结果:氯法拉滨和克拉屈滨的保留时间分别为3.83、3.90 min。氯法拉滨血药浓度在2.5～500 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),日内、日间RSD均<14%,方法回收率为95.64%～99.23%。结论:本方法简便、灵敏、快速、准确,适用于氯法拉滨的血药浓度测定及药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中妥舒沙星的浓度

目的 建立快速、灵敏测定人体血浆中妥舒沙星浓度的高效液相色谱-串联质谱方法。方法 采用Agilent EclipsePlus C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,3.5μm）,乙腈（含0.1%甲酸）-5 mmol.L 1甲酸铵水溶液（36∶64）为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL.min 1,柱温40℃。采用多重反应监测（MRM）对妥舒沙星（m/z 405.2→387.2）和内标环丙沙星（m/z 332.2→314.2）的测定。结果 妥舒沙星的线性范围为6-2 000 ng.mL 1,回归方程为y=0.183 5x＋1.461 9×10 4,r=0.996 2,最低定量下限为6 ng.mL 1（S/N〉5）,日内、日间RSD均〈10%,高（1 800 ng.mL 1）、中（750 ng.mL 1）、低（15 ng.mL 1）浓度标准血样的平均回收率分别为97.5%,103.3%,105.9%。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于妥舒沙星的临床血药浓度监测和药动学研究。     

高效液相色谱-质谱联用法测定血浆中阿奇霉素浓度

目的建立测定阿奇霉素血药浓度的高效液相色谱-质谱联用法,并对其生物等效性进行评价。方法血浆样品加入内标后用甲醇沉淀蛋白,离心后用高效液相色谱-质谱分析,流动相为10 mmol/L醋酸铵(含0.1%冰醋酸)-甲醇(35∶65),流速为1.0 mL/min,选择性碎片离子检测。健康受试者分别口服阿奇霉素参比制剂和受试制剂500 mg后,测定其血浆中阿奇霉素的质量浓度,并计算生物等效性。结果血浆中阿奇霉素在5.91～1 182 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,最低检测限为2.37 ng/mL。结论所建立的分析方法灵敏、准确、简便,可用于测定人血浆中阿奇霉素的质量浓度。     

人血浆中辛伐他汀的HPLC-MS/MS测定

建立了HPLC-MS／MS法测定人血浆中辛伐他汀的浓度，并以24名健康志愿者进行了两种辛伐他汀片的生物等效性研究。采用C18柱，流动相为0．5％甲酸溶液和乙腈，梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子化，定量分析离子分别为m/z482．0-441．0（辛伐他汀）和m／z468．0→427．0（洛伐他汀，内标）。辛伐他汀在0．2-50ng／ml范围内线性关系良好。方差分析和双单侧t检验表明两制剂生物等效。     

高效液相色谱－质谱联用测定人血浆中奥美拉唑的浓度

目的：建立高效液相色谱－质谱联用法测定人血浆中奥美拉唑的浓度。方法以泮托拉唑为内标,血浆样品经乙腈沉淀、取上清稀释后,进样,经HPLC－MS／MS分析。采用Ultimate XB－C18（2．1 mm ×150 mm,3μm）,流动相甲醇（0．1％甲酸）∶水（0．1％甲酸）＝（70∶30,V／V）;流速：0．2mL? min －1,柱温：40℃,电喷雾离子源（ESI）,以多离子反应监测方式（MRM）进行正离子监测,奥美拉唑和内标泮托拉唑的定量分析离子对分别为m／z 346．2→m／z 198．0和m／z 384．0→m／z 200．0。结果奥美拉唑的线性范围为5．00～2000．00μg? L－1,定量下限为5．00μg? L －1。方法回收率在96．4％～107．9％,日内和日间精密度（RSD）均小于15％。结论该方法操作简便、灵敏、准确、快速,适用于奥美拉唑的人体药代动力学研究。     

人血浆中奥美沙坦的HPLC-MS/MS测定

建立了HPLC—MS／MS法测定人血浆中的奥美沙坦，以替米沙坦为内标。采用C18色谱柱，流动相为甲醇-水（64：36，含0．2％乙酸）。质谱条件为电喷雾离子源，多离子反应监测，定量分析离子为m／z447→429（奥美沙坦）和m／z515→497（替米沙坦）。血浆样品采用固相萃取处理，线性范围为4～1000ng／ml，检测限为1ng／ml。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中穿心莲内酯的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人血浆中穿心莲内酯的浓度。方法:血浆样品经甲醇沉淀后,以甲醇-水（69:31,v/v）为流动相,流速为0.7 ml·min^-1,色谱柱为Hedera-C₁₈（4.6 mm×150 mm,5μm）,柱温为25℃,选择性离子检测（SIM）,穿心莲内酯[M-H₂O-H]-和内标脱水穿心莲内酯[M-H]-均为m/z 331.10。结果:血浆内源性杂质不干扰待测物测定,穿心莲内酯的线性范围为0.987～148.050 ng·ml^-1,定量下限为0.987 ng·ml^-1,批内、批间精密度（RSD）均<8%。样品稳定性良好。结论:该法灵敏、快速、简便,可用于穿心莲内酯的药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中金丝桃素的浓度

目的：建立HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中金丝桃素的浓度。方法：血浆样本加入适量内标,经乙腈直接沉淀蛋白后采用HPLC-MS/MS进行分析。色谱柱采用Ultimate C18柱（150 mm×2.1 mm,5.0μm）;流动相由乙腈-5 mmol·L^-1醋酸铵（含0.1%甲酸）（90∶10）组成,柱温35℃;流速0.5 ml·min^-1;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行定量分析。金丝桃素和内标吡格列酮在负离子模式下定量分析离子对分别为m/z 503.2→m/z 405.1和m/z 355.0→m/z 41.9。结果：金丝桃素在0.1-13.2 ng·ml^-1线性关系良好（r〉0.99）,最低定量限为0.1 ng·ml^-1,提取回收率为84.19%-98.71%,日内、日间精密度均不高于18.47%。结论：该方法分析速度快、灵敏、准确,为临床进一步研究金丝桃素提供了基础。