甲基汞对豚鼠耳蜗外毛细胞外向钾电流的影响

目的：观察甲基汞对豚鼠耳蜗外毛细胞侧膜K+电流的影响,探讨甲基汞耳毒性的离子机制。 方法：采用全细胞膜片钳技术分别观察汞污染度为1/1000 LD₅₀ 、1/100 LD ₅₀、1/10 LD₅₀对外毛细胞Ca²⁺敏感外向I_K（Ca）电流的影响。 结果：汞中毒后I_K（Ca）幅值分别为（1.48±0.28）、（1.36±0.16） 和（1.22±0.13）nA,与正常对照组相比分别下降了8%、16%和25%（P<0.05）。 结论：甲基汞以浓度依赖方式抑制Ca2+敏感的外向K+电流,使I_K(Ca)幅值降低,最后导致听觉机能下降。这可能是甲基汞中毒的耳毒性机制之一。     

豚鼠球囊毛细胞外向电流的研究

实验应用全细胞式膜片钳技术,在豚鼠球囊Ⅱ型毛细胞侧膜上研究了却(K~+)通道电流.结果表明:(1)阻断内向电流后,当钳制电位为-l00mV,以10mV的步距阶跃,阶跃从-70～+20mV,随着膜电位的去极化,可记录到一系列快速、瞬时的A型K~+通道电流,四氨基吡啶(4-Ap)对其有特异性阻断作用,激活电压为(-56.43±4.9)mV;(2)除A型K~+流外,当钳制电位为-70mV,以10mV的步距阶跃去极化-50~+40mV,可产生一系列无衰减的延迟整流性K~+流,TEA(四乙基氯化氨)能使该电流幅度下降(53.3±6.0)%.     

离体缰核的单向电压依赖性钾通道

目的：观察和探讨缰核细胞膜上延迟整流钾电流的性质。方法：应用细胞吸附式膜片钳记录技术。结果：去极化阶跃电压激活该通道电导为３０－３５ｐＳ的外向单通道电流；呈电压依赖性；平均开放时间随去极化电位的增长由３．７２±１．５ｍｓ提高到３２．２５．６ｍｓ。可以认为，通道的开放不依赖于电极内Ｃａ＾２＋的存在，四乙基胺明显抑制通道的开放结论：由以上结果判断，此电流为外向延迟整流钾电流。     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道电流的记录及其特性

目的：观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性通道的特性，方法：膜片钳记录方法。结果：观察到该 最小激活电压为－３８．６±２．１ｍＶ。复极过程中通道关闭常数为１０９．２５±８．５ｍｓ，并可被１０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＴＥＡ所阻断。结论：人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依赖性钾电流，其特性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似。     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道电流的记录及其特性

目的：观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性钾通道的特性。方法：膜片钳记录方法。结果：观察到该通道的最小激活电压为－38．6±2．1mV。复极过程中通道关闭常数为109．25±8．5ms,并可被10mmol／L的TEA所阻断。结论：人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依整性钾电流,其物性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似。     

人外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道

目的:观察人外周血淋巴细胞膜上电压依赖性钾通道的特性.方法:膜片钳记录方法.结果:观察到该通道的最小激活电压为-38.6士2.1 mV.复极过程中通道关闭常数为109.25±8.5 ms,并可被10 mmol/L的TEA所阻断.结论:人外周血淋巴细胞膜上存在着电压依赖性钾电流,其特性与神经和肌肉细胞膜上的延迟整流性钾电流相类似.     

链霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞钙敏感外向钾电流的影响

目的研究链霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜K+电流的影响,以进一步揭示氨基甙类抗生素耳毒性的离子机制。方法全细胞膜片钳制技术。结果记录到Ca2+敏感的外向K+电流［Ik(Ca)］;分别观察了0.1,1,10,100,1000μmol/L链霉素对Ca2+敏感的外向K+电流的影响。在指令电位+80mV时,链霉素的抑制率分别为0,(6.72±4.42)%,(15.54±5.43)%,(18.02±5.32)%,(30.86±11.21)%。结论链霉素以浓度依赖方式抑制Ca2+敏感的外向K+电流,这可能是其急性耳毒性机制之一。     

应用膜片钳制技术对豚鼠耳蜗外毛细胞高电导钾通道电生理特性的研究

为了研究耳蜗外毛细胞的基本电生理特性，应用细胞膜片钳制技术对豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜的高电导的钾通道进行了初步研究。结果显示，其高电导钾通道有以下典型特征：①具有明显的电压依赖性。在膜去极化时，通道被激活，其去极化程度越高，通道活动越强。在非对称性钾浓度梯度下，其反转电位为－３０ｍＶ，斜率电导约１３３±３ｐＳ（ｎ＝５）；②通道活动能被特异性阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）在较高浓度下（＞１０ｍｍｏｌ／Ｌ）阻断，ＴＥＡ的阻断效应呈浓度依赖性；③胞浆内钙浓度的增高，能显著激活该通道，增加其开放概率和平均开放时间。上述结果表明：豚鼠耳蜗外毛细胞存在着高电导的电压依赖的钙激活的钾通道。该研究为进一步开展通道活动的调控，以及药物等因素对通道活动影响的研究，提供了有价值的资料。     

脱氧鬼臼毒素对大鼠背根神经元电压依赖性钾通道的作用

目的:探讨脱氧鬼臼毒素(DOP)对外周神经系统的毒性作用机制?方法:采用全细胞膜片钳技术研究DOP对急性分离大鼠背根(DRG)神经元电压依赖性钾通道的作用,从离子通道水平探讨其神经毒性作用机制?结果:10?20?40?80 μmol/L的DOP对全钾电流(IK)和延迟整流钾电流(IKDR)均有影响,且能以浓度依赖方式?部分可逆地阻断电压依赖性钾电流,使电流电压曲线向去极化方向移动?同时,DOP对IKDR的抑制率[(43.22 ± 6.85)%]明显高于IK[(27.55 ± 4.65)%]?结论:DOP对钾离子电流的影响可能是鬼臼毒素类化合物引起外周神经病变的机制之一?     

顺铂对豚鼠耳蜗外毛细胞钙激活的钾电流的作用的初步研究

目的：研究顺铂对豚鼠耳蜗外毛细胞的钙激活的钾电流的作用，方法：应用膜片钳技术从单离的逐鼠耳蚋外毛细胞获得钙激活的钾通道记录，并观察顺铂对它的作用，结果：结果表明该通道活动受到细胞外的浓度为10^-5M的顺铂的抑制，结论：豚鼠耳蜗外毛细胞的钙激活的钾通道是顺铂的作用位点之一。     

缺氧缺糖对大鼠大脑皮层神经元电压依赖性钾通道的影响

目的：研究在缺氧缺糖状态下，大鼠大脑皮层神经元膜电压依赖性钾通道的开关动力学变化。方法：急性分离大鼠大脑皮层神经元和细胞贴附膜片钳技术。结果：与对照组相比，在缺氧缺糖状态下，电压依赖性钾通道开放时间常数τ１和τ２分别由对照组的０．４２９ｍｓ和８．２０９ｍｓ增加至１．８５５ｍｓ和１７．４６４ｍｓ（Ｐ＜０．０１），关闭时间常数τ和通道的电流幅度无明显变化。结论：缺氧缺糖可导致大鼠皮层神经元电压依赖性钾通道开放显著增加，对胞外钾离子聚集起重要作用，从而提高细胞的兴奋性，参与神经元的损伤。     

人外周血淋巴细胞膜电压依赖性钾通道特性分析及试分型

目的 :研究人淋巴细胞膜电压依赖性钾〔K(v)〕通道的特性 ,为某些疾病状态下该通道特性变化提供对照。并试观察该通道是否存在不同亚型。方法 :膜片钳全细胞电流记录方法。结果 :在记录到的 39个细胞中 ,K(v)通道的激活电压为 - (40 .3± 2 .5) m V,在重复去极化状态下通道无失活 ,复极过程中通道的关闭时间为 (116 .3± 8.2 ) ms,且通道电流可被 10 mmol/ L的四乙基铵 (TEA)所阻断。结论 :人外周淋巴细胞膜可能仅具有一种〔K(v)〕通道 ,其特性与鼠 n型〔K(v)〕通道基本一致。     

溶血磷脂酸对豚鼠心肌细胞电压依赖性钾离子通道电流的作用

目的：观察溶血磷脂酸(LPA)对豚鼠心肌细胞电压依赖性钾离子通道电流的作用。方法：用膜片钳实验技术记录胶原酶急性分离的豚鼠心室肌细胞钾通道电流。结果：共记录了33个心室肌细胞的电压依赖性外向K+通道电流发现1.0 μmol•L^-1和10.0 μmol•L^-1 LPA可明显降低K+通道电流的幅值。 结论：LPA可能参与心肌梗塞时心律失常的发生。     

骨髓基质细胞K+通道的膜片钳研究

目的 研究小鼠骨髓基质细胞K+通道的特性。方法 采用膜片钳细胞附式和内面向外式的单通道记录方式记录原代培养的小鼠骨髓基质K+通道电流。结果 骨髓基质细胞膜上存在一类单通道电导为（16.7±1.4）pS的K+通道,通道电流活动在75 s内不失活。随着去极化程度的增大,通道的开放时间τo2延长,关闭时间τc2缩短,通道开放概率增加。结论 骨髓基质细胞膜上存在一性质类似于延迟整流的K+通道,提示后者在骨髓基质细胞信号转导中起作用。     

急性冠状动脉综合征患者淋巴细胞电压依赖性钾通道的变化

[郭丽芬,张存泰,吴杰等.中华心血管病杂志,2007,35(9):818～821]用全细胞膜片钳技术和Western印迹法,探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血淋巴细胞电压依赖性钾通道(Kv)电流及Kv1.3蛋白表达的变化。收集12例ACS患者和10例健康志愿者外周血淋巴细胞,采用膜片钳全细胞电流记录方法,记录淋巴细胞膜Kv的电流密度。用Western印迹法检测外周血淋巴细胞Kv1.3蛋白的表达。发现ACS患者淋巴细胞Kv的电流密度为(269±94)pA/pF,明显高于正常人[(191±64)pA/pF,P<0.01]。ACS组淋巴细胞膜电容为(2.3±0.7)pF,对照组为(2.2±0.5)pF,两组间差…     

电压依赖性钾通道与Miconazole在低氧性肺血管收缩中的作用

目的观察大鼠肺动脉平滑肌细胞(PaSMCs)膜上电压依赖性钾通道(Kv)与细胞色素P450氧化酶抑制剂Miconazole在低氧性肺血管收缩中的作用。方法采用急性酶分离法分离出大鼠肺动脉平滑肌细胞(PaSMCs),利用全细胞膜片钳技术记录PaSMCs的Kv通道的电流特性;用低氧液体灌流PaSMCs造成急性低氧模型,记录低氧作用前后Kv通道的电流变化;用不同浓度的Miconazole作用于PaSMCs,记录加药前后的电流变化。结果低氧液体灌流以及不同浓度的Miconazole对Kv均有明显的抑制作用,且Miconazole的抑制作用具有一定的浓度依赖性,在加用Kv的特异性的阻断剂4氨基吡啶(4AP)后再加用该药不能进一步抑制Kv电流。结论低氧和Miconazole均作用于Kv通道的同一部位,支持PaSMCs膜上的Kv通道在低氧性肺血管收缩中起重要作用,而细胞色素P450氧化酶可调节细胞内的氧化还原状态,可能系一重要的氧感受器。     

马桑内酯对大鼠瞬时外向钾电流的影响

目的:用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(Coriaria Lactone,CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(Transient outward potassium current,IA)的影响,从而探讨CL癫痫的电生理机制及与IA的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据.方法:采用全细胞膜片钳技术记录IA,进行以下实验:①培养大鼠皮层神经元IA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元IA的影响;③CL对神经元IA的I-V曲线的影响;结果:测试电压为 65mV时,5μg·ml-1、50μg·ml-1、100μg·ml-1CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制均有统计学差异;50μg·ml-1与100μg·ml-1CL的效应无显著性差异.结论:CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内呈剂量依赖性,这可能与CL的致痫机制有关.     

胃动素对大鼠下丘脑PVN神经元细胞电压依赖性钾电流的影响

目的:研究胃动素对大鼠下丘脑PVN神经元细胞电压依赖性钾电流的影响。方法:采用急性分离新生Wistar大鼠下丘脑细胞和全细胞膜片钳技术的方法,观察胃动素对大鼠下丘脑PVN神经元细胞电压依赖性钾电流的影响。结果:胃动素可抑制大鼠下丘脑PVN神经元电压依赖性钾电流,使电流由(5.406±0.86)nA降至(3.621±0.78)nA,差异有统计学意义(P0.05)。步进电刺激下丘脑神经元,随着刺激电压强度的增强,钾外向电流增加,使电压-电流曲线(Ⅰ~Ⅴ曲线)右移,但不改变Ⅰ~Ⅴ曲线的形态。结论:胃动素可通过抑制大鼠下丘脑PVN神经元细胞电压依赖性钾电流,发挥其增强胃肠运动的作用。