二仙汤对免疫性卵巢早衰模型小鼠免疫相关指标影响

目的:观察二仙汤对免疫性POF模型小鼠免疫学方面的影响,探讨二仙汤对免疫性POF的作用机理.方法:应用小鼠透明带ZP3第330～342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)为免疫原建立免疫性POF小鼠动物模型,并用二仙汤干预,观察小鼠性周期,用ELISA法检测小鼠外周血抗透明带抗体,称卵巢重量、脾脏、胸腺重量,计算其脏器指数.结果:模型组外周血中AzpAb阳性,水平升高;卵巢重量、胸腺重量降低,脾重指数明显增高;中药处理后POF小鼠上述情况均有不同程度改善.结论;二仙汤对免疫性卵巢早衰动物的免疫功能有一定的改善作用.     

二仙汤对免疫性卵巢早衰模型小鼠FoxP3基因表达的影响

目的:观察二仙汤对免疫性POF模型小鼠FoxP3基因的影响。方法:用小鼠透明带ZP3第330～342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)为免疫原建立免疫性POF小鼠动物模型,并用二仙汤干预,用RT-PCR观察小鼠卵巢上FoxP3基因的表达。结果:模型组卵巢中FoxP3的基因水平下降;各用药组FoxP3的基因表达均增强,中西药无明显差异。结论:二仙汤能使FoxP3基因蛋白表达增强。     

二仙汤加味治疗卵巢早衰临床观察

卵巢早衰是指妇女在40岁以前因某种原因引起以闭经、不育、雌激素缺乏以及促性腺激素水平升高为特征的一种疾病。如何恢复卵巢早衰患者的内分泌功能,提高生活质量,是女性生殖内分泌临床研究的主要课题。2005年1月-2007年12月,笔者自拟二仙汤加味治疗卵巢早衰患者36例,取得较好的临床效果。     

补肾二仙汤治疗卵巢早衰的临床观察

目的探讨补肾二仙汤治疗卵巢早衰患者的,临床疗效和免疫调节机制。方法60例卵巢早衰患者按照就诊次序以2：1比例分为两组,治疗组40例予补肾二仙汤治疗,对照组20例采用人工周期疗法,疗程6个月。停药3个月后,观察两组疗效及治疗前后血清生殖激素和T淋巴细胞的变化。结果治疗组总有效率为72．5％（29／40例）,对照组为45、0％（9／20例）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后两组促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）下降,雌二醇（E2）升高（P〈0．05）;治疗后治疗组血清FSH值降低[（22．57±12．49）IU／L],与对照组[（31．10±14．50）IU／L]比较差异有统计学意义（P〈0205）。治疗组治疗后CD4升高、CD8降低、CD4／CD8比值升高,与治疗前及对照组治疗后比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论补肾二仙汤有助于改善卵巢早衰,具有较好的临床疗效。     

二仙汤加减治疗卵巢早衰的系统评价

目的:系统评价二仙汤加减方治疗卵巢早衰的有效性和安全性。方法:采用Cochrane系统评价法,检索Cochrane图书馆临床对照试验数据库、Cochrane图书馆系统评价数据库、荷兰医学文摘数据库(EMBASE)、PubMed、(美)联机医学文献分析和检索系统(MEDLINE)和中国知网(CNK)I等数据库,纳入二仙汤加减方治疗卵巢早衰的随机/半随机对照试验,不限语种。评价纳入研究的方法学质量,采用RevMan5.1.7软件对有关数据进行Meta分析。结果:共纳入相关文献11篇。与西药组比较,二仙汤加减方月经改善率高于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01),治疗后血清黄体生成素(LH)水平改善低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。与西药组比较,二仙汤加减方结合西药人工周期与对照组在各指标的改善上,差异无显著性意义。与西药组相比,二仙汤加减方结合艾灸月经改善率及治疗后血清雌二醇(E)2水平改善高于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:卵巢早衰的治疗,二仙汤加减对月经恢复较单纯的西药人工周期治疗好,对血清激素水平的改善相似,二仙汤加减结合西药人工周期对月经恢复及血清激素水平的改善与单纯的西药人工周期疗法相似,二仙汤加减结合艾灸对月经恢复较单纯西药组治疗好,对血清激素水平的改善相似。     

细胞凋亡途径探讨二仙汤治疗大鼠卵巢早衰实验研究

目的：通过卵泡颗粒细胞的凋亡途径探讨二仙汤对化疗性损伤卵巢早衰的影响。方法：将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组和二仙汤组,腹腔注射顺铂建立化疗性损伤大鼠卵巢早衰动物模型。造模后连续4周各组灌胃给予相应药物治疗。观察大鼠一般情况;测定血清中E2、FSH、LH和Pro含量;观察卵巢组织形态;TUNEL法分析卵泡颗粒细胞的凋亡;免疫组化检测BAX、Bcl-2和VEGF蛋白的表达情况。结果：模型组体质量下降,动情周期紊乱,治疗后体质量增加,动情周期恢复。与正常组比较,模型组E2、LH下降,FSH水平升高,Pro含量各组比较无显著差异。TUNEL检测模型组较正常组阳性表达增多,二仙汤组较模型组阳性表达减少。模型组较正常组BAX表达明显升高,Bcl-2下降,二仙汤治疗后与模型组比较BAX表达量下降,Bcl-2表达升高;VEGF蛋白在模型组中表达明显低于正常组,二仙汤组较模型组表达增多,阳性组表达略有恢复。结论：顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡,造成卵巢功能过早衰退;二仙汤通过调节血清中各激素含量,改变凋亡细胞相关蛋白的表达量来降低顺铂对卵巢的损害,促进卵泡发育,改善并增强卵巢功能。     

B6AF1雌性小鼠免疫性卵巢早衰模型建立

目的：本文主要研究自身免疫性卵巢早衰小鼠模型的建立和鉴定方法,为治疗和预防免疫性卵巢早衰提供实验基础。方法：将A/J雄鼠和C57BL/6雌鼠进行杂交繁殖B6AF1小鼠,筛选出B6AF1雌性小鼠,运用透明带多肽片段ZP3免疫B6AF1雌性小鼠,对阴道脱落细胞进行巴士染色,第14天结束造模,第7天和第14天分别进行模型鉴定。将卵巢进行H&E染色和ZP3免疫荧光染色,采用ELISA法检测小鼠血清中E₂和FSH的含量,来观察小鼠动情周期、卵巢组织形态学、抗透明带抗体免疫荧光和相关性激素的变化,评判免疫性卵巢早衰模型小鼠建立情况。结果：利用透明带ZP3多肽免疫B6AF1雌性小鼠14天,小鼠动情周期紊乱,卵巢组织有炎细胞浸润,卵巢中有明显透明带出现,血清中性激素E2含量下降和FSH含量上升,第7天上述变化不明显。结论：利用透明带多肽ZP3免疫B6AF1雌性小鼠14天,能够成功建立自身免疫性卵巢早衰模型,该模型发病率高,方法简单,能为免疫性卵巢早衰的研究提供基础。     

归肾育宫汤对免疫性卵巢早衰小鼠外周血清性激素的影响

目的:归肾育宫汤是陕西省名中医杨鉴冰教授治疗卵巢早衰的经验方,本文旨在探寻该方对免疫性卵巢早衰小鼠外周血清性激素的影响。方法:60只昆明小鼠,随机分成空白组、模型组、雌激素组、归肾育宫汤大剂量组、归肾育宫汤中剂量组、归肾育宫汤小剂量组,每组10只;除空白组外其余均采用透明带多肽3(2P3)腹腔多点注射复制小鼠卵巢早衰模型,造模成功后,对大、中、小剂量组分别给予归肾育宫汤70g/(kg·d)、35g/(kg·d)、17.5g/(kg·d),雌激素组给予结合雌激素片0.125mg/(kg·d),空白组、模型组给予等量生理盐水,给药4周后,处死大鼠,取血清,检测外周血清性激素卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。结果:模型组小鼠血清FSH、LH显著升高(P<0.05),E2、P明显降低(P<0.05);给药治疗后,雌激素组、归肾育宫汤大、中、小剂量组FSH、LH明显降低(P<0.05),E2、P明显升高(P<0.05),其中以归肾育宫汤大、中最为明显。结论:归肾育宫汤可以降低卵巢早衰大鼠血清卵泡生成素和黄体刺激素的水平,升高雌二醇和孕酮的水平,通过调节外周血性激素水平,对卵巢早衰起到治疗作用。     

二仙汤对更年期肾阳虚大鼠的影响

目的：探讨二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型的治疗作用。方法：将30只符合自然老化的更年期大鼠模型,随机平均分配为对照组、模型对照组和治疗组,3月龄鼠作为青年组。模型治疗组和治疗组用氢化可的松制造肾阳虚模型成功后,治疗组给予二仙汤灌胃14天。观察二仙汤对大鼠性激素水平的影响。结果：二仙汤能明显减轻肾阳虚症状,体重增加（P〈０．01）,治疗组血中的雌二醇（E2）明显高于模型组（P〈０．05）,促黄体生成素（LH）和卵泡生成素（FSH）低于模型组（P〈０．05）。结论：二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型有治疗作用。     

加味二仙汤治疗卵巢早衰临床疗效及对抗苗勒管激素的影响

卵巢早衰（POF）是指女性40岁以前由于卵巢功能衰竭所致的高促性腺激素性闭经。由于POF导致生育能力丧失及低雌激素状态,成为影响女性生殖健康的不可忽视的因素。2008年7月-2010年10月,笔者采用加味二仙汤治疗POF患者32例,疗效显著,现报道如下。     

补肾活血方对小鼠实验性卵巢早衰防治作用的研究

目的：探讨补肾活血中药复方对实验性的免疫性卵巢早衰（POF）的防治作用。方法：以免疫层析分离的猪卵透明带皮下和两后脚掌多点注射免疫8－10周龄雌性BALB／c小鼠建立POF的动物模型。分别在免疫早期或3次免疫后连续灌服中药复方，分析灌服中药后阴道脱落细胞涂片，外周血雌二醇（E2）浓蔗和血清抗透明带（ZP）抗体水平变化，及受试动物脾淋巴细胞对不同浓度ZP刺激的反应和卵巢滤泡和黄体数改变。结果：预防组和治疗组小鼠体内血清E2匀比免疫组高（P＜0.01,P<0.05），而抗ZP抗体则明显下降。卵巢组织形态学分析显示，治疗组和预防组生长滤泡和黄体数均比免疫组明显增加（P＜0.05,P<0.01）。免疫组脾淋巴细胞呈现抗原特异性的增殖反应，明显高于对照组，而治疗组脾淋巴细胞对抗原的特异性反应降低。结论：补肾活血中药复方主要通过抑制特异性免疫损伤，使卵巢内残存的少数滤泡能得以复苏，恢复部分卵巢功能，而且中药的预防效果优于效果。     

中医药干预卵巢早衰的实验研究概况

卵巢早衰最根本的病机为肾虚精亏,导致“心脑-肾-子宫轴”功能的紊乱,出现一系列生理、心理的异常症状.中医药改善卵巢早衰以及卵巢储备功能下降的相关实验研究,既佐证了其临床疗效的现代科学依据,同时也体现了中医药多靶点、多途径的作用特点.以肾为核心、心脑肾胞宫生殖轴作为研究主要对象,也符合现代中医妇科理论的发展趋势.其作用机制主要通过调整肾-天癸-冲任-胞宫生殖轴,从而改善卵巢功能,为临床治疗提供了思路和方法,但目前研究主要停留在激素及细胞因子的相关研究上,在分子水平作及更深层次的研究,可能是未来研究的重点和方向.     

补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠的影响

目的:探讨补肾活血方对免疫性卵巢早衰(POF)小鼠的治疗作用。方法:以重组猪卵透明带(pZP4)蛋白两后脚掌和皮下多点注射免疫雌性BALB/c小鼠建立POF动物模型。小鼠随机分为正常组、模型组、雌二醇组和补肾活血方高、中、低剂量组(按生药量计分别为15.0,7.5,3.75 g.kg-1),分析ig 20 d后阴道脱落细胞涂片、外周血雌二醇(E2)浓度、血清抗透明带(pZP4)抗体变化及卵巢组织炎形态学观察。结果:补肾活血方高剂量组小鼠阴道涂片显示动情周期基本规则为6～7 d;高剂量组可明显升高小鼠血清E2浓度(P<0.01);高剂量组小鼠的血清抗pZP4抗体滴度显著下降(P<0.05);高剂量组小鼠初级卵泡和次级卵泡的数量显著增加(P<0.05)。结论:补肾活血方能改善卵巢的生殖内分泌功能和卵巢内各期卵泡和黄体的发育状况,并可在一定程度上抑制自身免疫早衰作用。     

补肾调经汤对卵巢早衰患者性激素的影响

目的:观察补肾调经汤治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效及其对性激素的影响。方法:46例POF患者随机分为两组,治疗组23例予补肾调经汤治疗,对照组23例予激素替代治疗,疗程3个月。治疗结束后随访3个月,观察两组患者治疗前、治疗结束时、停药3个月的临床症状积分,性激素水平[卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)]。结果:治疗组、对照组的总有效率分别为91.3%、69.6%(P<0.05);治疗结束时,两组患者血清E2升高(P<0.01),FSH、LH下降(均P<0.01),症状总积分下降(P<0.05或<0.01);停药3个月,对照组血清E2、FSH、LH水平和症状总积分,与治疗组比较差异有显著性(P<0.05或<0.01)。结论:补肾调经汤治疗卵巢早衰的疗较显著,能明显地改善患者的临床症状,且不良反应少,复发率低,可值在临床推广应用。     

二仙汤研究及临床应用进展

二仙汤出自《中医方剂临床手册》,是20世纪50年代张伯讷教授创制的经方,具有温补脾肾、填精养血、调和冲任之效.近几十年来,二仙汤的研究不断进展,应用也更加广泛.本文总结了二仙汤在更年期综合征、卵巢早衰、骨质疏松、更年期高血压病、慢性尿路感染、月经病、皮肤病、风湿病、神经精神疾病及其他各科疾病的临床应用进展.     

穴位埋线治疗卵巢储备功能下降及卵巢早衰概述

目前激素替代是预防DOR和POF应用最广泛的方法,虽其疗效显著,但有一定的副作用及危险性。穴位埋线因其有众多的优点,是激素替代疗法之后又一种安全可靠的预防和治疗方法,对提高女性的生育能力和生活质量有着不可估量的作用。在调节卵巢储备功能下降及卵巢早衰的穴位埋线治疗中,按照经络、脏腑、病位原则选择相应的穴位,辨病与辨证结合,可为中医妇科的穴位埋线临床治疗卵巢储备功能下降及卵巢早衰提供一定的依据。但不同穴位配伍的疗效缺乏大样本的数据比较,尚待进一步研究和探讨。     

二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制

目的：探讨二仙汤含药血清通过AKT途径介导顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的防护作用及分子机制。方法本实验采用大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂造模的方法。通过选取22-24 d的SD大鼠提取 原代卵巢颗粒细胞,进行细胞培养并建立顺铂致卵巢颗粒细胞凋亡模型,将成模卵巢颗粒细胞随机分为：模型组、阳性对照组、二仙汤组,加入相应药理血清连续培养48 h后,用TUNEL法检测各组颗粒细胞凋亡情况;蛋白印迹法检测各组akt、p-akt蛋白的表达情况;RT-PCR检测各组akt基因表达情况。结果：通过TUNEL法对各实验组卵巢颗粒细胞凋亡形态学观察发现：与正常组相比,模型组凋亡情况十分明显。阳性对照组与模型组相比凋亡情况改善;二仙汤组与模型组相比较凋亡情况也得到了缓解。蛋白印迹分析显示：akt、p-akt蛋白表达量总体趋势走向、强度、结果相似。顺铂造模后的各实验组中的akt、p-akt蛋白表达量均减少,模型组akt、p-akt蛋 白表达量最少;和模型组比较,各治疗组均akt、p-akt蛋白表达量表达增多,其中二仙汤组akt、p-akt蛋白表达量 略低于补佳乐组akt、p-akt蛋白表达量。RT-PCR检测akt基因表达情况,与蛋白表达大体一致。结论二仙汤 能明显减轻顺铂引起的卵巢颗粒细胞凋亡,其作用机制与激活AKT信号通路有关。     

逍遥助卵煎治疗卵巢早衰30例

目的观察逍遥助卵煎治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效。方法对30例肝肾不足、气血虚弱的POF患者(治疗组)从肝入手,用逍遥助卵煎益肾养肝、调补气血、活血通经治疗。并与同期雌孕激素贯序疗法(HRT)治疗的30例(对照组)作对照,以3个月为1个疗程,连续治疗1～2个疗程,治疗后作阴道超声、内分泌检查及临床症状评估。结果治疗组总有效率80.0%,对照组总有效率83.4%,两组疗效经统计学处理无显著性意义(P>0.05)。结论逍遥助卵煎有改善卵巢功能的作用,可替代西医激素疗法。