止咳平喘合剂影响哮喘大鼠嗜酸粒细胞及Eotaxin表达的实验研究

目的:观察中药止咳平喘合剂对哮喘大鼠肺内嗜酸粒细胞(Eosinophil,EOS)及嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达水平的影响,探讨中药止咳平喘合剂治疗哮喘的可能作用机制。方法:用改良的卵白蛋白多点注射致敏与雾化吸入激发法建立大鼠哮喘模型。将60只雄性SD大鼠随机分为6组,每组均10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、强的松组、止咳平喘合剂小剂量组、中剂量组和大剂量组。实验第15天起灌胃给药,根据等效剂量换算比率计算,正常对照组、哮喘模型组分别给予生理盐水10mL/kg,强的松组给予强的松混悬液10mg/kg,止咳平喘合剂小剂量组7.5g/kg,中剂量组15g/kg,大剂量组30g/kg,给药连续5天,每天1次。末次雾化激发后24h处死大鼠留取标本。镜下观察各组哮喘大鼠肺组织病理形态的变化及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、EOS计数的变化;免疫组化染色法检测肺组织Eotaxin蛋白的表达水平。结果:哮喘模型组大鼠BALF中EOS数量明显增高,与其它各组相比,均存在显著性差异(P0.01);止咳平喘合剂组大鼠肺组织气道黏膜及黏膜下层的炎性细胞浸润明显减轻,与哮喘模型组相比均有显著性差异(P0.01);哮喘模型组大鼠肺组织Eotaxin蛋白表达量明显增高,与正常对照组及药物治疗组相比有显著性差异(P0.01),止咳平喘合剂各剂量组之间无显著性差异(P0.05)。结论:止咳平喘合剂可明显减轻哮喘大鼠气道炎症,其机制可能与其减低哮喘大鼠肺组织Eotaxin蛋白的表达相关。     

平喘合剂对哮喘大鼠血浆及BALF中IL-2、IL-4的影响

目的观察平喘合剂对哮喘模型大鼠血浆及肺泡灌洗液 (BALF)中 IL- 2、 IL- 4含量的影响,探讨平喘合剂治疗哮喘的作用机理.方法选择雄性 Wistar大鼠随机分为正常组 (不造模 )、模型组 (造模后予生理盐水 )、博利康尼组 (造模后予博利康尼 )、痰喘丸组 (造模后予咳嗽痰喘丸 )、平喘合剂组 (造模后予平喘合剂 ),比较组间血浆及 BALF中 IL- 2、 IL- 4的含量.结果平喘合剂组血浆及 BALF中 IL- 4与血浆中 IL- 2均低于各造模组,而与正常组接近,其 BALF中 IL- 2与各组均相近.结论平喘合剂可明显改善哮喘模型大鼠血浆中 IL- 2、 IL- 4含量的异常升高,效果优于博利康尼和痰喘丸.     

止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子影响的实验研究

目的：观察中药复方止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响,从而进一步深化探讨名老中医经验方的作用机制。方法：随机将60只SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、止咳平喘合剂大、中、剂小剂量组,每组均为10只,以卵白蛋白（oval albumin,OVA）复制哮喘大鼠模型,采用ELISA方法检测血清中IL-4、IFN-γ含量,取右肺组织行HE染色进行形态学观察。结果：模型组血清中IL-4明显高于空白对照组（P〈0.01）,而IFN-γ明显低于空白对照组（P〈0.01）,存在IL-4/IFN-γ失衡;与模型组相比,阳性对照组、中药大剂量与中剂量组IL-4含量降低（P〈0.05）,而IFN-γ含量均有升高（P〈0.01～0.05）;并且血清IL-4与IFN-γ呈明显负相关（r为-0.974,P〈0.01）。结论：IFN-γ/IL-4的失衡参与哮喘发病过程,止咳平喘合剂可能通过下调IL-4的水平和提高IFN-γ的含量,纠正Th1/Th2细胞因子的失衡,进而减轻气道炎症。     

IL-13与支气管哮喘及中医药干预作用的研究进展

综述了IL-13与支气管哮喘的关系,分别从IL-13的特征、受体、信号通路,IL-13在气道炎症、气道高反应性和气道重塑中的作用及中医药的干预作用。     

降气定喘汤调节哮喘患儿血清IL-12、IL-4与IgE水平的研究

目的 :研究降气定喘汤对哮喘患儿白细胞介素 12 (IL 12 ) ,白细胞介素 4(IL 4)与免疫球蛋白E(IgE)水平的影响 ,探讨中医药治疗哮喘的机理。方法 :随机选择 2 0例哮喘患儿为治疗组 ,用降气定喘汤治疗 ;2 0例正常人为对照组。分别检测治疗组治疗前、后及对照组血清IL 12、IL 4与IgE水平。结果 :治疗组治疗后IL 12水平明显高于治疗前 (P <0 .0 5 ) ,IL 4、IgE水平低于治疗前 (P <0 .0 5及P <0 .0 1)。结论 :降气定喘汤能升高哮喘患儿IL 12水平 ,降低IL 4、IgE水平 ,从而调节机体免疫功能 ,获宣肺化痰、泻肺平喘之功。     

银杏叶提取物对哮喘大鼠STAT6及IL-13表达的影响

目的：研讨银杏叶提取物（Egb）对哮喘大鼠信号转导和转录激活因子6（STAT6）、IL-13表达的影响，探讨其治疗哮喘的机制。方法：28只清洁级大鼠随机分为3组，对照组、模型组和Egb组，以卵白蛋白注射致敏雾化吸入激发法复制哮喘模型。用免疫组织化学法分别检测肺组织中STAT6蛋白表达水平，用流式细胞分析测定STAT6阳性细胞的表达率；用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-13浓度；对BALF进行细胞计数及嗜醵№垃细胞（EOS）分类计数。结果：①BALF中细胞总数和EOS占细胞总数的百分比（EOS％）模型组均显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组均显著降低（P〈0．01）；②BALF中IL-13的浓度模型组显著高于对照组（P〈0．01），Egb组较模型组显著降低（P〈0．01）；③模型组肺组织中STAT6蛋白表达和STAT6阳性细胞的表达率均较对照组明显增强（P〈0．01），Egb组较模型组明显减弱（P〈0．01）。结论：哮喘大鼠肺组织中STAT6蛋白有较强表达；Egb有抑制哮喘大鼠气道炎症的作用，其下调STAT6的表达、使IL-13分泌减少可能为其重要作用机制。     

防喘合剂对哮喘大鼠气道炎症和气道重建的影响

观察防喘合剂对哮喘大鼠气道炎症的影响,探讨防喘合剂的作用机制。方法：选用Wistar大鼠,分作5组,①空白对照组;②模型组;③防喘合剂组;④普米克令舒组;⑤防喘合剂＋普米克令舒组,制作哮喘动物模型,分别观察不同药物对大鼠血清IL-4、INF-r的影响;对中性粒细胞蛋白酶水解酶（NE）的影响;对基质金属蛋白酶（MMP-9）及其抑制剂（TIMP-1）的影响。结果：三组均能降低哮喘大鼠血Ⅱ,4、INF-r含量;降低NE含量;降低TIMP-1含量及调节TIMP-1／MMP-9比值,且防喘合剂＋吸入激素组作用大于单纯防喘合剂组及吸入激素组。结论：防喘合剂能够减轻气道炎症,抑制气道重建,且防喘合剂＋吸入激素效果最佳。     

咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠肺组织中气道炎症的影响。方法:将40只雄性Balb/C小鼠随机分为4组,每组10只。PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组。OVA组应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏。OVA/RSV组和咳喘六味合剂组(KLH组)在应用OVA致敏后用RSV滴鼻,复制急性病毒性哮喘模型。咳喘六味合剂组(KLH组)还用咳喘六味合剂治疗。处死动物,RT-PCR检测肺组织中白细胞介素13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)mRNA的表达;HE染色观察肺病理变化。结果:HE染色显示咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘小鼠气道炎症。与PBS组相比,OVA组IFN-γ降低,IL-13、IL-17A增高(P<0.05,P<0.01);OVA/RSV组IL-13、IL-17A增高(P<0.01),IFN-γ虽降低,但无统计学意义(P>0.05),且IFN-γ、IL-13均较OVA组增高(P<0.05,P<0.01)。较OVA/RSV组相比,KLH组能显著升高IFN-γ(P<0.05,P<0.01);降低IL-13、IL-17A mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎性因子的表达,达到控制哮喘的目的。     

哮喘患者采用普米可令舒雾化吸入治疗前后血清IL-12、IL-13及VEGF水平变化的研究

目的:本研究旨在探讨采用普米可令舒雾化辅助治疗急性发作期哮喘患者的临床疗效以及对血液中白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-13(IL-13)以及血管内皮生长因子(VEGF)水平变化的影响。方法:选取本院2011年10月至2012年8月收治的哮喘患者134例,随机分为两组,对照组为采用常规治疗患者72例,观察组在常规治疗基础上联合使用普米克令舒(雾化吸入,6-10min/次,3次/d)治疗患者62例,疗程均为7d,比较两组患者治疗前后的血清IL-12、IL-13以及VEGF水平变化情况,并测定肺功能。结果:7d疗程结束后,观察组症状明显低于对照组,但血清中IL-12水平则高于对照组、IL-13和VEGF水平明显低于对照组,观察组血清IL-12和VEGF的变化值明显大于对照组,差异均有统计学意义(P0.01),而IL-13无明显区别(P﹥0.05),急性发作期患者血清IL-12与FEV1%呈正相关;IL-13与FEV1%呈负相关;VEGF与FEV1%呈负相关,治疗后则无明显相关。结论:普米可令舒雾化吸入用于辅助治疗急性发作期哮喘患者具有明显的临床效果,并能显著的改变患者体内的炎性环境,因此,可以作为一种安全有效的治疗方法予以推广。     

固本止咳平喘颗粒对咳嗽变异性哮喘大鼠气道神经源性炎症的影响

目的:探讨固本止咳平喘颗粒对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠肺及支气管肺泡灌洗液(BALF)中神经生长因子(NGF)的影响,以揭示其可能的气道神经源性炎症机制。方法:采用烟熏结合卵蛋白(OVA)激发致敏的方法建立CVA大鼠模型,将大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、固本止咳平喘颗粒低、中、高剂量组和地塞米松片组。记录辣椒素诱咳时大鼠的咳嗽潜伏期和次数,酶联免疫吸附法检测BALF中NGF的含量,免疫组化法测定肺组织中NGF的表达。结果:与模型对照组比较,固本止咳平喘颗粒中、高剂量组和地塞米松片组大鼠咳嗽潜伏期显著延长(P 0. 05),咳嗽次数显著减少(P 0. 05或P 0. 01);固本止咳平喘颗粒中、高剂量组和地塞米松片组大鼠BALF中NGF水平明显降低(P 0. 05或P 0. 01);固本止咳平喘颗粒低、中、高剂量组和地塞米松片组大鼠肺组织中NGF表达减弱。结论:固本止咳平喘颗粒能明显降低CVA大鼠咳嗽敏感性,其机制可能与抑制NGF表达,降低气道神经源性炎症反应有关。     

中药止咳平喘方对支原体诱发哮喘患儿Th亚群和IgE的影响

目的:观察中药止咳平喘方对支原体诱发小儿哮喘Th亚群细胞因子和IgE的调节作用。方法:将118例支原体诱发哮喘患儿随机分为中药止咳平喘方治疗组59例和西药对照组59例,分别采用中药止咳平喘方、阿奇霉素治疗,观察两组患儿治疗前后血清中Th亚群(IL-12、IL-4)和IgE的含量变化。结果:中药止咳平喘方治疗组血中IL-12显著高于对照组,IL-4和IgE显著低于对照组(P<0.01)。结论:中药止咳平喘方对支原体诱发小儿哮喘具有较好疗效,其作用机制可能与提高患儿IL-12水平、降低IL-4和IgE水平有关。     

龙脷平喘膏抗哮喘大鼠气道炎症作用及机制

目的:探讨龙脷平喘膏对发作期小儿哮喘气道炎症的影响。方法:48只大鼠按体重均衡随机分为空白对照组、模型组、地塞米松组(1 mg·kg-1)、龙脷平喘膏高、中、低剂量组(74.8,37.4,18.7 g·kg-1),每组8只。采用卵清蛋白(OVA)复制哮喘大鼠模型,连续给药1周,记录大鼠过敏性鼻炎症状,取鼻黏膜和肺组织,观察鼻黏膜及肺组织病理形态变化,并检测肺组织炎症细胞凋亡率和原癌基因Fas(Fas mRNA),B细胞淋巴瘤/白血病2基因(Bcl-2 mRNA)的表达。结果:除空白组外,其他各组在引发过敏性哮喘的同时均诱发了不同程度的过敏性鼻炎症状,且模型组鼻黏膜和肺组织均见嗜酸粒细胞浸润及相似的病理形态学改变;与空白组比较,模型组大鼠搔鼻和喷嚏的次数显著增多(P<0.01);与模型组比较,龙脷平喘膏能明显减少哮喘大鼠搔鼻和喷嚏的次数(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠肺组织中炎症细胞凋亡率显著降低(P<0.01);与模型组比较,龙脷平喘膏高、中剂量组大鼠肺组织中炎症细胞凋亡率明显升高(P<0.05),且肺组织中促炎症细胞凋亡的调控基因Fas mRNA阳性表达率显著升高(P<0.01),抑制炎症细胞凋亡的调控基因Bcl-2 mRNA阳性表达率则显著下降(P<0.01)。结论:龙脷平喘膏能明显抑制哮喘大鼠气道炎症,机制可能与其逆转Fas/Bcl-2失衡,促进炎症细胞凋亡有关。     

川芎平喘合剂治疗支气管哮喘急性发作期患者临床疗效及对炎性因子水平的影响

目的探讨川芎平喘合剂对支气管哮喘急性发作期患者血清炎性因子水平的影响。方法将66例哮喘急性发作期患者随机分为2组。对照组给予西医常规治疗,治疗组在常规治疗基础上给予川芎平喘合剂,每次20 mL,每日3次。疗程均为14 d。观察2组临床疗效及治疗前后肺功能的变化,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平。结果治疗组临床疗效优于对照组,但无明显差异。经治疗,治疗组咳嗽、喘息、胸闷、气短症状积分明显低于对照组（P〈0.05）,血清TNF-α、IL-6水平均较对照组明显下降（P〈0.05）,1秒用力呼气容积（FEV1）、呼气峰值流速（PEF）改善均优于对照组（P〈0.05）。结论川芎平喘合剂具有缓解哮喘急性发作期患者临床症状、改善肺功能的作用,其机制可能与降低体内TNF-α、IL-6过度表达,抑制炎性反应有关。     

桑梅止咳颗粒对咳嗽变异性哮喘大鼠气道炎症反应的作用及机制

目的:观察桑梅止咳颗粒对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠炎症反应的调节作用及机制.方法:6周龄雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组(桑梅止咳颗粒2.48 g·kg-1灌胃);模型组、中药组分别在第1,8天腹腔注射10％卵蛋白(OVA),氢氧化铝混合液+第15天开始1％OVA溶液雾化激发建立CVA模型;第15天各组连续...     

平喘合剂对哮喘模型大鼠血浆及肺泡灌洗液中内皮素-1含量的影响

目的观察平喘合剂对哮喘模型大鼠血浆及肺泡灌洗液(BALF)中内皮素-1(ET-1)含量的影响,探讨平喘合剂抑制哮喘大鼠气道炎症的作用机理。方法选择雄性大鼠随机分组,制作动物模型,用放射免疫方法监测平喘合剂治疗前后血浆及 BALF 中 ET-1的含量变化。结果平喘合剂可明显降低哮喘模型大鼠血浆及 BALF 中 ET-1的含量,效果明显优于博利康尼组和痰喘丸组。结论平喘合剂可明显抑制 ET-1的分泌,降低血浆及 BALF 中 ET-1的含量,提示本方可能通过抑制炎症介质,抑制气道炎症而发挥治疗哮喘的作用。     

平喘颗粒对哮喘大鼠VEGF、bFGF表达及气道重塑的影响

目的观察哮喘大鼠肺组织VEGF、bFGF表达情况,并探讨平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑的影响。方法将60只Wistar大鼠造成哮喘模型,随机分为正常对照组,模型组,地塞米松组及平喘颗粒组。于末次激发后立即处死大鼠,取左肺组织置于4%多聚甲醛固定,以光镜观察肺组织的病理学改变;同时取右肺组织以RT-PCR及Western blot方法分别检测VEGF、bFGF的表达。结果平喘颗粒组与地塞米松组均可有效减少血管及支气管炎性浸润及支气管腔黏液分泌,抑制平滑肌、血管壁及肺泡间隔的增厚、水肿及上皮细胞的脱落;同时降低哮喘大鼠肺组织VEGF、bFGF的表达,与模型组比较差异显著(P <0. 05),且两组间比较无显著差异(P> 0. 05)。结论平喘颗粒可以改善哮喘大鼠的气道重塑,并可抑制VEGF、bFGF的表达,从而保护肺部组织细胞,减轻哮喘发作。     

高效液相色谱法测定止咳平喘胶囊中绿原酸的含量

目的对止咳平喘胶囊中主要化学成分绿原酸进行含量测定。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为YWG C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87);柱温:25℃,检测波长为327 nm,流速为1.0 ml/min。结果方法学考察结果表明,绿原酸的线性范围为0.122-0.980μg;测定方法的平均加样回收率为98.07%,RSD=1.16%(n=5)。结论该方法简便、快速、准确,可用于止咳平喘胶囊的质量控制。     

止咳平喘糖浆中盐酸麻黄碱的HPLC测定

目的采用HPLC法测定止咳平喘糖浆中盐酸麻黄碱的含量。方法采用外标一点法,Diamonsil ODS1 C18柱,乙腈-0．1％磷酸溶液（含0．1％三乙胺）（3：97）为流动相,流速为1．0mL／min,检测波长为205nm。结果盐酸麻黄碱在0．12～0．96μg范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=109759X＋3792．8,r=0．9998,平均加样回收率为98．4％,RSD=0．87％（n=5）。结论本方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,可用于止咳平喘糖浆中盐酸麻黄碱的定量分析。