龙血竭对大鼠肺损伤间质过度修复及其TGFβ_1mRNA表达的影响

目的：探讨龙血竭（LXJ）对博莱霉素肺损伤大鼠肺间质过度修复及其TGFβ1mRNA表达的调控作用。方法：60只健康SD大鼠,随机分为生理盐水组（NS）、博莱霉素肺损伤组（BLM）及龙血竭组（LXJ）,每组20只,再分成两亚组,每亚组10只,通过博莱霉素一次性气管内滴入复制肺损伤修复大鼠模型,并在肺损伤修复过程中予龙血竭灌胃干预,分别于14和28天取大鼠肺组织,运用组织芯片,进行HE、胶原纤维染色及免疫组化分别定量肺内炎性细胞数、胶原蛋白、I型胶原,用实时荧光定量RT-PCR技术定量转化生长因子beta（TGFβ1）mR-NA的表达。结果：龙血竭对两时相肺组织的炎症程度和胶原（IOD分别从0.5492±0.2105和0.9578±0.3756降至0.2749±0.1592和0.3181±0.1210）及28天的I型胶原过度沉积（IOD从0.9348±0.3774降至0.5045±0.2796）皆有明显抑制作用（P〈0.05）,对两时相TGFβ1mRNA表达（从0.0219±0.0110和0.0170±0.0157分别降至0.0083±0.0024和0.0062±0.0051）有明显下调的作用（P〈0.05）。结论：龙血竭具有抑制炎症性肺损伤促进修复,并可通过抑制胶原尤其是I型胶原的过度沉积而调控肺损伤肺间质过度修复之作用,后者可能主要与下调肺组织TGFβ1mRNA的表达有关。     

龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1mRNA及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的观察龙血竭对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和I型胶原蛋白表达的影响,探讨其防治肺纤维化的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为模型组、治疗组和正常组各10只。模型组和治疗组大鼠气管内注入博来霉素(5mg/kg)诱导肺纤维化;正常组经气管内注入等容积0.9%氯化钠注射液。从第2d起,治疗组大鼠给予龙血竭180mg/kg灌胃;模型组和正常组以等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。所有大鼠于第29d处死。苏木素-伊红(HE)及胶原纤维(VG)染色观察肺组织病理改变和胶原沉积情况;免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连结(SP)法检测I型胶原蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-CR)检测肺组织TGF-β1mRNA的表达。结果正常组I型胶原蛋白在气管周围弱表达,模型组Ⅰ型胶原蛋白分布于支气管上皮下组织、肺间质及血管周围,且表达较对照组增加(P0.01);治疗组较模型组Ⅰ型胶原蛋白表达减弱(P0.01)。模型组TGF-β1mRNA的表达较正常组明显增高(P0.01),治疗组TGF-β1mRNA的表达较模型组明显降低(P0.01),而与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论龙血竭可能通过抑制大鼠肺组织TGF-β1mRNA的表达,阻止I型胶原蛋白过度沉积,从而有效地减轻肺纤维化大鼠肺组织的纤维化程度。     

老鼠簕乙醇提取物对肝纤维化大鼠COX-2和TGFβ1表达的影响

目的研究老鼠簕对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝组织COX-2和TGFβ1表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分成5组:空白对照组、模型对照组、秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组。除空白对照组外,其余4组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型。秋水仙碱组、老鼠簕乙醇提取物低剂量组和老鼠簕乙醇提取物高剂量组分别于4周后给予相应的药物,空白对照组给予等容量的生理盐水,每天1次。8周后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中COX-2和TGFβ1mRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织COX-2和TGFβ1蛋白质的表达。结果①大鼠出现肝纤维化改变;②RT-PCR结果显示,与空白对照组相比,模型对照组COX-2和TGFβ1mRNA表达增强(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0,2.0 g.kg-1)较模型对照组COX-2和TGFβ1mRNA表达减弱(P<0.05);③免疫组化结果显示,模型对照组大鼠肝组织的COX-2和TGFβ1蛋白表达明显增加(P<0.01);老鼠簕乙醇提取物干预组(1.0,2.0 g.kg-1)大鼠肝组织的COX-2和TGFβ1蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论老鼠簕能够抑制肝纤维化大鼠肝组织COX-2和TGFβ1的表达。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β1表达的影响

目的:观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5(BLMA5),对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果:对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

龙血竭胶囊的大鼠长期毒性研究

本研究观察了龙血竭胶囊连续灌胃30d对大鼠的体重、血液学指标、血清生物化学指标和病理组织学的影响。结果表明:龙血竭胶囊大剂量(8g/kg)、中剂量(4g/kg)、小剂量(2g/kg),所用剂量分别相当于临床拟用剂量的104倍、52倍和26倍,连续灌胃30d和停药2周后均未发现明显毒性反应。病理组织学检查未见药物引起的病理损伤。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺损伤转化生长因子-β1及其受体表达的影响

目的 观察牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺损伤转化生长因子-β1及其受体表达的影响。方法 静脉注射脂多糖内毒素(1．5mg／kg)、腹腔注射D-氨基半乳糖(100mg／kg)造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸干预处理,并用免疫组化方法检测转化生长因子-β1及其受体在肺组织内的表达。结果 牛珀至宝微丸可以使内毒素休克大鼠肺转化生长因子-β1及其受体表达增强,肺损伤减轻。结论 牛珀至宝微丸减轻内毒素休克肺损伤的机理可能与其增强肺组织转化生长因子-β1及其受体表达相关。     

芪术颗粒对大鼠肝纤维化模型TGF—β1、EGF表达的影响

目的观察芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠肝组织TGF-β1、EGF表达的影响.方法人血白蛋白免疫致敏法建立大鼠肝纤维化模型,用芪术颗粒治疗3个月,取肝组织用原位杂交方法检测TGF-β1、EGF的表达信号,MPEAS-500型图像分析仪进行图像分析.结果芪术颗粒治疗组TGF-β1、EGF表达较模型组弱,信号面积比分别为1.85±0.94和2.51±1.03,明显低于模型组的3.56±1.29和3.89±1.26.结论芪术颗粒通过抑制TGF-β1、EGF的基因表达,使胶原蛋白合成减少,从而减轻肝纤维化的程度.     

左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏TGFβ1/Smad1表达的影响

目的:观察左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏TGFβ1/Smad1基因与蛋白表达的影响,并探讨补肾法对去卵巢模型大鼠肾脏TGFβ1/Smad1通路的影响。方法:将90只SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、补佳乐组、左归丸组、右归丸组、共同药组、滋阴药组、补阳药组。除假手术、空白组外均进行双侧卵巢切除。经12周治疗分别以Q-PCR法、Western blot法检测TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1在肾脏中基因和蛋白的表达。结果:与空白组相比,除假手术组外,TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1 mRNA及蛋白表达降低(P0.01);与模型组比较,各用药组TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1 mRNA及蛋白表达升高(P0.01);与补佳乐组比较,各用药组TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1表达低,其中左归丸组表达较高。结论:左、右归丸及其拆方可影响肾脏中TGFβ1/Smad1基因与蛋白的表达,其中以左归丸改变最为显著。     

丹玄口康对口腔黏膜下纤维化大鼠TGFβ1表达的影响

目的：研究丹玄口康对模型大鼠口腔黏膜下纤维化（OSF）组织β1转化生长因子（TGFβ1）表达的影响。方法：将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、丹玄口康组、雷公藤多甙组，每组10只，除正常对照组外其他3组经槟榔提取物（ANE）刺激下制作OSF模型后，模型组不作任何处理；丹玄口康组、雷公藤多甙组分别以丹玄口康和雷公藤多甙连续灌胃8周。采集口腔烦部黏膜进行免疫组化检测。结果：各组口腔黏膜上皮层TGFβ1相对灰度值比较：丹玄口康组、雷公藤多甙组与模型组比较，差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05，P〈0．01）。丹玄口康组与雷公藤多甙组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：丹玄口康能够降低TGFβ1在大鼠OSF组织中的表达，这可能是丹玄口康治疗OSF的机理之一。     

黄芪对放射性肺损伤干预作用及对TGF-β1,IL-1表达影响的研究

目的:观察黄芪对局部中晚期胸部肿瘤放射治疗的肺保护作用及对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、白介素-1(IL-1)表达水平的影响.方法:将局部中晚期胸部肿瘤放射治疗者随机分为治疗组和对照组.治疗组在放射治疗开始起服用黄芪10 m,2次/d,连续6个月.放射治疗前后测定血浆TCF-β_1和IL-1,放射治疗开始15 d起观察临床症状、高分辨率CT和肺弥散功能.结果:治疗组放射治疗前血浆TGF-β_1为(4.45±1.94) μg·L~(-1),放射治疗后为(5.87±2.43)ng·L~(-1);对照组放射治疗前为(4.47±2.01) μg·L-1,放射治疗后为(11.67±5.62) μg·L~(-1),较治疗组明显升高(P＜0.001).治疗组放射治疗前血浆IL-1为(24.32±14.49) ng·L~(-1),放射治疗后为(29.76±19.11)ng·L~(-1);对照组放射治疗前为(25.44±17.18)ng·L~(-1),放射治疗后为(65.37±35.32)ng·L~(-1),明显升高(P＜0.001).放射治疗开始后5个月和10个月治疗组CO弥散量下降情况较对照组差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组和对照组急性放射性肺炎和肺纤维化的发生率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:黄芪能抑制放射治疗后血浆TGF-β_1和IL-1的过度表达,降低放射治疗后弥散功能的恶化.可以用于放射性肺损伤的预防和干预.     

骨碎补对骨折愈合中TGF—β1表达的影响

目的：骨碎补是骨伤科常用的一味中药,为了进一步探讨其促进骨折愈合的机理,设计了该实验以期为临床运用骨碎补提供理论依据。方法：将36只SD大鼠随机分成三组：生理盐水组（A）、骨碎补组（B）、伤科接骨片组（C）。按标准骨折模型方法造模,不作任何外固定,分笼饲养,从手术后第二天开始灌胃给药,骨碎补组每天以骨碎补水煎液分早晚2次灌胃,伤科接骨片组每天给药2次,对照组同时给予等量生理盐水。于术后第7天、14天、21天每组分别处死动物4只,取出骨标本。骨标本制成切片测量骨痂厚度及TGF－β1免疫组化染色。结果：骨碎补组骨痂组织形成丰富,厚度明显优于对照组（P＜0.010;骨碎补组骨痂组织中TGF－β1表达量及阳性定位与伤科接骨片组相同,均明显强于对照组。结论：实验结果表明骨碎补能增加骨痂厚度,提高骨折愈合质量。增加TGF－β1在骨痂组织中的表达,可能是骨碎补促进骨折愈合的的机制之一。     

三七总皂甙对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF—β1的影响

目的：观察三七总皂甙对肝纤维化大鼠胶原合成及TGF－β1表达的影响。方法：用四氯化碳复合因素致大鼠肝纤维化模型,同时给与三七总皂甙治疗,免疫组化观察Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF－β1的合成表达,纤维化程度分级。结果：三七总皂甙能抑制肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF－β1的合成表达,减轻肝纤维化程度。结论：三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,其机理尚待进一步研究。     

龙血竭对小鼠触须表皮修复的作用研究

目的：探讨活血化瘀药龙血竭在小鼠触须表皮修复中的作用。方法：4w龄雄性昆明小鼠,无菌条件下去除双侧触须部表皮,实验对照组、阳性药物对照组,龙血竭内服＋外用组,每日观察创面结痂率,进行卡方检验。术后1d、3d、5d、7d取材,常规病理切片观察。结果：术后2d,三组结痂率差异有统计学意义（P=0.005）,以龙血竭治疗组最高。术后1～3d,各组创面以炎性反应为主,龙血竭内服＋外用组毛细血管通透性增高,炎细胞渗出较多,真皮层中成纤维细胞增生。术后5d,各组真皮层中成纤维细胞及胶原纤维合成和分泌增加;龙血竭内服＋外用组炎细胞消失,可见较多新生毛细血管。术后7d,龙血竭内服＋外用组新生表皮分层明显,真皮成纤维细胞及胶原纤维排列规则,表皮真皮连接紧密,基膜明显。结论：龙血竭在小鼠触须创面愈合早期能促进血痂尽早形成,抗炎作用明显,促进毛细血管增生,促进真皮及表皮细胞增殖。     

通腑汤对急性肺损伤大鼠肺组织中TGF-β1的影响

目的:通过观察通腑汤对急性肺损伤大鼠肺组织中TGF-1β的影响,探讨其作用机制。方法:180只大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、地塞米松组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,30只/组。尾静脉注射LPS复制ALI模型,0.5 h后中药各剂量组灌胃、地塞米松组腹腔注射治疗,于治疗后1,2,6 h,每组每次各10只,处死大鼠。光镜下观察肺组织形态学变化;ELISA法同步检测肺组织中TGF-β1的含量。结果:光镜下见模型组肺组织炎性细胞浸润、水肿、充血、结构破坏,各治疗组较模型组程度减轻;模型组肺组织TGF-β1含量在前6h内随时间的延长而增长;模型组TGF-β1含量高于正常对照组,有统计学意义(P0.05);地塞米松组、中药各剂量组TGF-β1含量均低于模型组,有统计学意义(P0.05);中药低剂量组TGF-β1含量高于地塞米松组,有统计学意义(P0.05);中药中剂量组、中药高剂量组TGF-1β含量与地塞米松组无差异,无统计学意义(P0.05);中药中剂量组、中药高剂量组TGF-β1含量均低于中药低剂量组,有统计学意义(P0.05);中药高剂量组TGF-β1含量与中药中剂量组无差异,无统计学意义(P0.05)。结论:通腑汤可以降低ALI大鼠肺组织中TGF-β1的含量,以中、高剂量组效果较好。     

姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织胶原沉积及转化生长因子β1表达的影响

目的观察姜黄素对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠胶原沉积、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法SD雄性大鼠144只,分为假手术组、模型组、醋酸泼尼松组、姜黄素高剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂量组,每组24只.除假手术组外其余各组大鼠气管内1次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组大鼠气管内1次性滴注等体积的生理盐水.造模后第1天开始给药,持续到处死动物的前1天.姜黄素高、中、低剂量组分别为200、100、50 mg·kg-1,醋酸泼尼松组每天为0.56 mg·kg-1,假手术组,模型组分别灌服等体积的生理盐水.各组动物于7、14、28天随机处死8只,取肺组织进行HE和Mallory染色,同时进行免疫组化显色,结合图像分析来检测各组肺组织中转化生长因子的表达水平.结果模型组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积;姜黄素治疗组胶原沉积明显轻于模型组;假手术组最轻,胶原沉积不明显.免疫组化发现模型组TGF-β1表达最强,姜黄素治疗组较弱,假手术组微弱表达.结论姜黄素可抑制肺纤维化大鼠肺组织的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起重要作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现.     

中药复方对糖尿病大鼠肾脏TGF—β_1 mRNA表达的影响

目的:观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)的影响,探讨其作用机理。方法:实验采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT—PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达。结果:各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论:中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA的表达,从而起到保护肾脏,延缓肾脏病理损害,抑制糖尿病肾病形成的作用。     

针灸分期治疗对骨折家兔TGF-β1mRNA、bFGFmRNA表达的影响

目的:探讨针灸分期治疗在骨折愈合过程中的作用机制。方法:健康雄性新西兰家兔35只,随机分为针灸分期治疗组、药物组、胫骨骨折模型组。采用线锯造成左侧胫骨中下段骨折,然后用钢板内固定。针灸组根据"中医骨折三期治疗"原则,分三期针灸治疗,药物组全程给予愈伤灵胶囊水溶液,模型组给予等量生理盐水灌胃。术后第7、28、56天,用原位杂交技术检测骨折部位骨段中转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果:7天时段,针灸组和阳性药物组TGF-β1mRNA表达明显高于模型组,针灸组较药物组作用明显;bFGFmRNA表达针灸组较其他两组明显增高。28天时段,TGF-β1mRNA表达两治疗组明显高于模型组,两者之间差异亦具显著性;bFGFmRNA表达针灸组明显高于其他两组。56天时段,针灸组TNF-β1mRNA和bFGFmRNA表达明显高于其他两组,其他两组间比较差异不明显。结论:针灸分期治疗能增加骨折组织TGF-β1mRNA、bFGFmRNA表达水平,这可能是其促进骨折愈合的部分作用机制。     

解毒复肾逐瘀方对肾纤维化大鼠CTGF及TGFβ_1表达的影响

目的：研究解毒复肾逐瘀方对肾纤维化的干预作用机制。方法：建立大鼠单侧输尿管结扎术（UUO）肾间质纤维化动物模型,观察给予解毒复肾逐瘀方治疗后肾间质病理变化及肾组织转化生长因子（TGFβ1）及结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。结果：解毒复肾逐瘀方能明显减少大鼠胶原沉积的面积含量。药物治疗组能抑制大鼠的TGFβ1及CTGF蛋白的表达。结论：解毒复肾逐瘀方能减轻肾间质纤维化的损伤,可能与抑制大鼠的TGFβ1及CTGF蛋白表达有关。     

清燥救肺汤加黄芪对放射性肺损伤干预作用及对TGF-β1,IL-1表达的影响

目的 :观察清燥救肺汤加黄芪对局部中晚期胸部肿瘤放射治疗的肺保护作用及对转化生长因子β₁(TGF-β₁)、白介素-1(IL-1)表达水平的影响。 方法 :将局部中晚期胸部肿瘤放射治疗者随机分为治疗组和对照组。治疗组在放射治疗开始起服用清燥救肺汤200 mL,黄芪口服液10 mL,2次/d,连续6个月。放射治疗前后测定血浆TGF-β₁和IL-1,放射治疗开始15 d起观察临床症状、高分辨率CT和肺弥散功能。 结果: 治疗组放射治疗后血浆TGF-β₁和IL-1分别为(5.79±2.52)ng·mL^-1和(30.13±20.21)pg·mL^-1;对照组分别为(11.67±5.62)ng·mL^-1和(65.37±35.32)pg·mL^-1,明显升高(P<0.001)。放射治疗开始后5个月和10个月治疗组CO弥散量下降情况较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组和对照组急性放射性肺炎和肺纤维化的发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 清燥救肺汤加黄芪能抑制放射治疗后血浆TGF-β₁和IL-1的过度表达,降低放射治疗后弥散功能的恶化。可以用于放射性肺损伤的保护和预防。     

二氢杨梅素对实验性肝纤维化大鼠血清和肝组织中TGF—β1表达的影响

目的：观察二氢杨梅素对四氯化碳（CCL．）诱导的肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1（TGF—β1）表达的影响。方法：56只雄性SD大鼠被随机分为正常组、模型组、二氢杨梅素治疗组及复方鳖甲阳性对照组,采用CCL4皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型。于第13周末检测大鼠血清TGF—β1、I、PCⅢ及ClV的水平,免疫组织化学方法检测肝组织TGF-β1表达。结果：与模型组相比,二氢杨梅素治疗组血清TGF—β1、I、PCⅢ、CⅣ水平显著下降（P〈0．05）,肝组织内TGF—β1阳性面积的表达明显下降（P〈0．05）。结论：二氢杨梅素对CCL4诱导的肝纤维化大鼠有较好的保护作用,对TGF—β1表达的影响可能是其作用机制之一。