祛风止痉方对哮喘大鼠转录因子T-bet GATA-3及TNF-α的调节作用

[目的]证实祛风止痉方对哮喘大鼠治疗作用的部分机理是通过对转录因子T-bet、GATA-3及TNF-α的调节起作用的。[方法]60只大鼠随机分组为哮喘模型组、正常对照组及给药组(高中低剂量)建立大鼠哮喘模型,并分别给药。用RT-PCR检测T-bet、GATA-3表达水平,双抗体夹心ELISA法测定TNF-α浓度。[结果]模型组大鼠外周血中转录因子GATA-3高于正常对照组及给药组,比较有统计学意义(P<0.05);低剂量组表达高于高剂量组,比较有统计学意义(P<0.05);高剂量组与正常组比较无统计学意义(P>0.05);中低剂量组比较无统计学意义(P>0.05);中低两组高于正常组,比较有统计学意义(P<0.05);中剂量组与高剂量组比较无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠外周血中转录因子T-bet的表达量低于正常对照组及给药组,其差异具有统计学意义(P<0.05);低剂量组低于高剂量组,比较有统计学意义(P<0.05);中高剂量高于模型组,比较有统计学意义(P<0.05)。血清中TNF-α的表达,模型组高于正常组,比较有统计学意义(P<0.05);高量组低于模型组,比较有统计学意义(P<0.05)。[结论]祛风止痉方可抑制哮喘大鼠外周血中转录因子GATA-3的表达,增加转录因子T-bet的表达,以恢复Th1/Th2平衡,同时可减低TNF-α浓度,从而降低哮喘大鼠气道高反应性,达到治疗支气管哮喘的目的。     

T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究进展

目的了解Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究现状。方法应用现代信息技术,通过互联网等查阅近年来国内外相关资料并进行分析、整理、总结,对Th1/Th2中特异性转录因子T-bet/GATA3的生物学特征、转录因子T-bet/GATA3与哮喘发病机制的相关性、川芎嗪对哮喘的治疗及其与转录因子T-bet/GATA3关系进行综述。结果转录因子T-bet/GATA3在哮喘发病中起到复杂的生物调节作用,动物实验显示,川芎嗪治疗哮喘有效,川芎嗪能促进转录因子T-bet水平的表达,降低转录因子GATA3水平的表达。结论深入研究转录因子T-bet/GATA3、哮喘及川芎嗪之间的相关性,为哮喘的临床分级和治疗提供新的思路。     

穴位贴敷诱发接触性皮炎对支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响

目的:观察穴位贴敷诱发接触性皮炎对预防支气管哮喘复发及血中转录因子T-bet/GATA-3的影响。方法 :选取穴位贴敷治疗的哮喘患者37例,根据贴敷后是否出现接触性皮炎,分为治疗组(出现接触性皮炎)18例和对照组(未出现接触性皮炎)19例。比较2组患者治疗后3个月、6个月与治疗前1年同时期哮喘控制测试(ACT)评分变化情况,并检测2组患者治疗前后血中T-bet、GATA-3mRNA的表达及比值的变化情况。结果 :2组治疗后3个月ACT评分均较治疗前1年同期明显增高(P0.05);治疗组治疗后6个月ACT评分较治疗前1年同期明显增高(P0.05)。2组治疗后T-betmRNA表达均较治疗前明显升高(P0.01,P0.05),且治疗组治疗后T-bet/GATA-3比值较治疗前明显升高(P0.05),组间比较无统计学差异(P0.05)。结论 :采用穴位贴敷治疗支气管哮喘患者,无论是否出现接触性皮炎均能有效预防哮喘的复发,且出现接触性皮炎者临床疗效维持时间更长,其作用机制可能与增加了血中T-betmRNA的表达,调节了辅助性T淋巴细胞的免疫失衡有关。     

基于T-bet/GATA-3表达研究化痰祛瘀法对哮喘小鼠气道炎症及免疫失衡的影响

目的:研究转录因子T-bet和GATA-3在哮喘模型小鼠疾病进展过程中的改变及其意义及其在Th1/Th2失衡中的作用,探讨化痰祛瘀法对支气管哮喘防治作用的机理。方法:通过卵蛋白致敏、激发建立支气管哮喘小鼠模型,于激发后7天和21天分批取材,用RT-PCR法检测肺组织匀浆中T-bet、GATA-3 mRNA表达。结果:激发7天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低,组间无明显差异。与模型组比较:两用药组T-bet均无明显变化,GATA-3均明显降低,T-bet/GATA-3比值均明显升高;组间无明显差异。哮喘激发21天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低。与模型组比较:地塞米松组T-bet无明显差异,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;中药组T-bet明显升高,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;两组间无明显差异。结论:BALB/c小鼠经OVA致敏及雾化激发后,使转录因子T-bet/GATA-3表达失衡,模型小鼠出现气道炎症及气道重建的相关表现,符合中医病机中的"痰瘀互结"。化痰祛瘀法对T-bet/GATA-3表达失衡具有双向纠偏的调节作用。对改善气道慢性炎症及气道重建方面,其疗效与地塞米松相近,但作用环节较对照组更为广泛,且随用药时间延长,有累加效应。     

川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡干预作用的研究

目的通过检测30例哮喘儿童T-betmRNA和/GATA-3mRNA的表达强度及上清液中IFN-γ、IL-4水平,评价T-bet/GATA-3的比率与Th1/Th2失衡的关系及哮喘发病机制,研究川芎嗪对儿童哮喘中转录因子T-bet/GATA-3表达失衡的干预作用。方法抽取30例正常对照组、30例哮喘发作组儿童空腹外周静脉血4 ml,分离出单核细胞,用ELISA法测定上清液IL-4、IFN-γ含量,RT-PCR法检测转录因子T-bet mRNA和GATA-3mRNA表达强度。结果哮喘组儿童IFN-γ/IL-4比值明显低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组IFN-γ/IL-4比值明显高于哮喘(P<0.001),差异有显著性。哮喘组T-bet/GATG-3比值低于正常对照组(P<0.001),川芎嗪干预组T-bet/GATA-3比值高于哮喘组(P<0.001),差异有显著性。结论川芎嗪能通过上调儿童哮喘患者T-bet mRNA的表达强度,降低GA-TA-3mRNA表达水平,从而逆转Th1/Th2功能失衡,对儿童哮喘起到有效防治作用。     

玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的通过建立肺气虚型变应性鼻炎(AR)动物模型,探讨玉屏风散对肺气虚型变应性鼻炎转录因子T-bet/GATA-3表达影响,为益气固表法治疗AR提供基因分子水平的依据。方法采用烟熏法及卵清蛋白为过敏原对大鼠致敏,建立大鼠肺气虚-变应性鼻炎病证复合模型,并将大鼠分为对照组、AR组、AR+肺气虚组、AR+肺气虚治疗组,予相应药液灌胃。采用ELISA检测大鼠血浆中IFN-γ与IL-4的浓度;QRT-PCR检测血浆中GATA-3、T-bet mRNA的表达情况;HE染色观察大鼠鼻黏膜结构与炎症情况。结果 HE染色结果显示,AR组呈慢性炎症表现,黏膜上皮排列紊乱,部分区域坏死脱落;AR+肺气虚治疗组黏膜上皮细胞修复良好。与对照组比较,AR组IL-4浓度和GATA-3 mRNA表达明显升高(P<0.05),T-bet m RNA表达明显降低(P<0.05);与AR组比较,AR+肺气虚治疗组IL-4浓度和GATA-3 m RNA表达明显降低(P<0.05),T-bet m RNA表达明显升高(P<0.05)。结论玉屏风散通过抑制GATA-3,增强T-bet,从而调节Th1/Th...     

针刺对慢性疲劳综合征大鼠血浆T细胞转录因子/GATA结合蛋白3表达的影响

目的:观察针刺对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血浆T细胞转录因子(T-bet)/GATA结合蛋白3(GATA-3)表达的影响,探索针刺治疗CFS的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、针刺组、人参皂甙组,每组12只。采用束缚+冷水游泳的复合应激法制备CFS大鼠模型。针刺组针刺"百会""关元""足三里",人参皂甙组予人参皂甙水溶液灌胃,均1次/d,14d后,观察各组行为学变化,采用RTPCR法检测血浆T-bet/GATA-3基因的表达水平。结果:模型组大鼠悬挂不动时间长于空白对照组(P0.05),力竭游泳时间短于空白对照组(P0.05);与模型组比较,人参皂甙灌胃及针刺治疗后大鼠悬挂不动时间均缩短(P0.05),力竭游泳时间均延长(P0.05);且针刺组较人参皂甙组悬挂不动时间更短,力竭游泳时间更长(均P0.05)。模型组大鼠血浆T-bet基因的表达水平高于空白对照组(P0.05),GATA-3基因表达水平低于空白对照组(P0.05);人参皂甙灌胃及针刺治疗均能降低T-bet基因的表达水平(P0.05),升高GATA-3基因的表达水平(P0.05);针刺组较人参皂甙组T-bet表达水平降低更显著(P0.05)。模型组T-bet/GATA-3比值高于空白对照组(P0.05);人参皂甙灌胃及针刺治疗后T-bet/GATA-3比值较模型组均下降(P0.05)。结论:针刺能降低血浆T-bet表达水平,升高GATA-3表达水平,调节升高的T-bet/GATA-3比值,可能是其治疗CFS的机制之一。     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠Th1/Th2漂移特异性转录因子T-bet和GATA-3的干预作用

目的:观察艾灸对类风湿性关节炎大鼠Th1/Th2漂移特异性转录因子T-bet和GATA-3的干预作用。方法:30只大鼠用弗氏佐剂进行造模,随机分成模型组、艾灸组,西药组三组,10只正常大鼠作为空白对照组,经处理后,观察T-bet和GATA-3的表达。结果:模型组大鼠的脾脏细胞中T-bet表达较正常组明显增高,差异存在着显著性意义(P0.01),艾灸组和西药组T-bet表达升高,但差异无显著性意义(P0.05);模型组大鼠的脾脏细胞中GATA-3表达较正常组降低,差异存在着显著性意义(P0.05);艾灸和西药组中脾脏细胞中GATA-3表达较正常组降低,但差异无显著性意义(P0.05)。结论:艾灸可能通过抑制RA大鼠T细胞向Th1细胞分化,降低T-bet转录,促进GATA3转录,调整Thl/Th2功能失衡达到治疗目的。     

平喘方及其拆方对支气管哮喘小鼠肺组织转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的：观察平喘方及其拆方对支气管哮喘模型小鼠转录因子T—bet、GATA－3表达的影响,研究平喘方及其拆方防治支气管哮喘的作用机理。方法：通过对BALB／C小鼠用卵蛋白等腹腔注射致敏、雾化吸入激发,建立支气管哮喘动物模型。将120只清洁级雄性BALB／C小鼠,随机分为6组：对照组、模型组、平喘方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组。各组分别于雾化激发哮喘后7d、21d分两批处死、取样、检测,动态观察。采用RT—PCR（Real Time PCR）法检测小鼠肺组织T—bet、GATA-3 mRNA的表达。结果：哮喘激发7d,拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．05）;平喘方组和拆方2、3组GATA-3降低（P〈0．05）;拆方3组T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．05）。哮喘激发21d,平喘方及拆方1、2、3组T—bet升高（P〈0．01）,GATA-3降低（P〈0．01）,T—bet／GATA-3比值升高（P〈0．01）;其中平喘方组、拆方3组T—bet表达高于拆方1、2组（P〈0．05）,GATA-3低于拆方1、2组（P〈0．01）,T—bet／GATA-3的比值高于拆方1、2组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：平喘方及拆方各组均能不同程度地调节支气管哮喘小鼠Th1／Th2上游因子T—bet／GATA-3 mRNA的表达,对Th1／Th2细胞的失衡有纠正作用,拆方3组疗效接近平喘方组。     

温肾补阳法对变应性鼻炎患者转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的:研究变应性鼻炎患者转录因子T-bet/GATA-3的表达及温肾补阳法对其作用。方法:选择符合诊断标准(中医肾阳虚型;西医属常年性变应性鼻炎)的患者91例,治疗组41例,对照组50例,另选择正常健康的受试者20例作为空白对照组。治疗组采用金匱肾气丸合苍耳子散为主方加减治疗;对照组采用氯雷他定治疗,疗程4周。本实验采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测变应性鼻炎患者外周血淋巴细胞培养上清液中白细胞介素4(IL-4)和r干扰素(INF-r)浓度,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM)测定淋巴细胞中T-bet、GATA-3mRNA表达水平。结果:温肾补阳组患者治疗后同治疗前相比,INF-r、T-bet水平明显提高(P0.05),IL-4、GATA-3水平明显下降(P0.05),同正常对照组相比无明显差别(P0.05)。而氯雷他定治疗前后无明显改善。结论:温肾补阳法可通过调节T-bet/GATA-3表达,纠正失衡的Th1/Th2细胞因子网络,从而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

转录因子GATA-3/T-bet与哮喘关系及中医药治疗的研究进展

哮喘是一种临床常见的慢性呼吸系统疾病,近年来其发病率呈不断上升趋势。随着对哮喘不断地深入研究,大量实验表明转录因子GATA-3/T-bet表达的失衡可影响Th0的分化和Th1、Th2相关细胞因子表达,因此GATA-3/T-bet与哮喘的慢性气道炎症、气道高反应性以及气道重塑有着紧密的联系。文章通过整理、归纳GATA-3/Tbet的生物学特征、GATA-3/T-bet与哮喘的关系,以及中医药在治疗哮喘时对GATA-3/T-bet的调控作用,探讨中医药治疗哮喘可能是通过调节转录因子GATA-3/T-bet平衡来实现的,从而为中医药治疗哮喘提供了新的思路。     

银屑灵熏剂蒸汽治疗对寻常型银屑病外周血单个核细胞表达T-bet、GATA-3蛋白水平的影响

目的 探讨银屑灵熏剂蒸汽治疗寻常型银屑病的临床疗效及对外周血单个核细胞（PBMC）表达T-bet及GATA-3蛋白水平的影响。方法 对30例寻常型银屑病患者行银屑灵熏剂蒸汽治疗,观察PASI评分下降率并使用Western blot法检测患者及25名健康对照者PBMC中T bet和GATA 3蛋白水平的变化,观察PASI评分与T-bet和GATA-3蛋白水平相关性。结果30例患者治愈12例,显效9例,有效8例,无效1例。治愈率为40.0%,有效率为96.7%。寻常型银屑病患者PBMC表达T-bet蛋白水平（1.7917±0.3840）较对照组（0.8860±0.1486）升高（P＜0.01）。GATA 3蛋白水平（0.8777±0.3114）较对照组（1.2384±0.1783）降低（P＜0.01）。经银屑灵熏剂治疗后,T-bet蛋白表达降为1.3410±0.3642,而GATA-3蛋白升高为1.0883±0.2435,治疗前后改变均有统计学意义（P＜0.01）。其中PASI评分与T-bet蛋白表达水平呈正相关（r=0.7448,P＜0.01）,与GATA-3蛋白表达水平呈负相关（r=－0.8291,P＜0.01）。结论 银屑灵熏剂蒸汽治疗银屑病有效,其可能机制是通过调节寻常型银屑病患者PBMC中转录因子T-bet/GATA-3蛋白的平衡表达,纠正寻常型银屑病患者Th1/Th2细胞亚群失衡的免疫异常,有效治疗银屑病。     

自体血穴位注射对哮喘大鼠肺组织GATA 3和T-bet蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察自体血穴位注射对哮喘大鼠免疫学机制的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组(8只)、模型组(10只)、生理盐水穴位注射组(10只)、自体血穴位注射组(10只)和地塞米松腹腔注射组(10只)。后4组通过腹腔注射鸡卵蛋白(OVA)加氢氧化铝混合溶液每周1次致敏,2周后每天OVA超声雾化激发哮喘。自体血组穴位注射自体血(0.4mL/穴),"肺俞"穴和"肾俞"穴轮流取穴,隔天1次,共6次。免疫组化半定量法测肺中GATA 3和T-bet蛋白,RT-PCR法测其mRNA的表达。结果:模型组GATA 3、GATA 3mRNA表达和GATA 3mRNA/T-bet mRNA的比值(G/T比)均明显高于正常组(P<0.01),T-bet mRNA表达明显低于正常组(P<0.01)。自体血组GATA 3、GATA 3mRNA的表达及G/T比均明显低于模型组(P<0.01),T-bet及其mRNA的表达均明显高于模型组(P<0.01)。盐水穴位注射对哮喘模型无明显调节效果。地塞米松对GATA 3的作用与自体血相当,但对T-bet的调节不明显。结论:自体血穴位注射可以良性调节辅助性T细胞所分泌细胞因子的失衡,其作用与地塞米松腹腔注射相当。     

中医药对支气管哮喘白介素影响的研究进展

现代医学证实白细胞介素与支气管哮喘密切相关。白细胞介素参与了支气管哮喘的发生、发展过程，它被作为研究支气管哮喘的重心和治疗的靶点被重视，是现今支气管哮喘研究的热点之一。近年来我国中医药工作者以白细胞介素为切入点研究了中医药作用于支气管哮喘时白细胞介素的变化，取得了很多成果。文章从单昧药的研究、古方的研究、外治法的研究等四个方面综述了中医药治疗支气管哮喘的与白细胞介素相关的临床和实验研究进展。     

调肝理肺汤治疗支气管哮喘急性发作期的临床研究

目的：观察调肝理肺汤治疗支气管哮喘的临床疗效及治疗前后主要症状、体征、肺功能、血气分析等的变化。方法：将支气管哮喘急性发作期60例轻、中度患，随机分为调肝理肺汤治疗组和氨茶碱对照组各30例。结果，调肝理肺汤组总有效率、控显率分别为90．00％和63．33％；氨茶碱组总有效率、控显率分别为86．67％和66．67％。研究表明，调肝理肺汤不仅具有抑制哮喘速发相反应的作用，而且还能够抗气道炎症，降低气道高反应性，抑制哮喘迟发相反应的作用。     

黄芪当归配伍对气道变应性炎症大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响

目的:通过研究黄芪当归配伍对气道变应性炎症模型大鼠鼻黏膜及肺组织GATA-3、T-bet表达的影响,探讨黄芪当归配伍治疗气道变应性炎症的作用机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)喷雾的方法致敏造成大鼠气道变应性炎症模型,分别用黄芪、当归、黄芪当归配伍灌胃给药治疗。用免疫组化法测定鼻黏膜中及肺组织中GATA-3、T-bet的表达。结果:模型组鼻黏膜及肺组织GATA-3表达增加,而T-bet表达降低。当归组可降低肺组织GATA-3表达,增加鼻黏膜T-bet的表达;黄芪组可降低肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜及肺组织T-bet表达;芪归组可降低鼻黏膜及肺组织GATA-3表达,升高鼻黏膜和肺组织T-bet表达。各给药组均可降低鼻黏膜及肺组织中GATA-3/T-bet比值。结论:黄芪当归配伍可能通过对GATA-3/T-bet的影响,调节气道变应性炎症中Th1/Th2细胞因子平衡,从而对气道变应性炎症有抑制作用。     

中西医结合治疗小儿支气管哮喘临床研究

目的:观察中西医结合治疗支气管哮喘的疗效。方法:将两年来诊治的143例哮喘患儿随机分为治疗组和对照组,治疗组采用中西医结合治疗,对照组仅采用西药治疗。观察治疗前后患儿临床症状、体征以及外周血嗜酸性粒细胞(EOS)数。结果:两组近期临床疗效比较无显著性差异(P>0.05);在EOS方面,治疗组治疗后与治疗前比较有显著性差异(P<0.01),而对照组治疗前后比较无显著性差异(P>0.05);两组远期临床疗效比较,临床治愈率有显著性差异(P<0.05),总有效率有极显著性差异(P<0.01)。结论:中西医结合治疗哮喘可明显缓解哮喘发作频率,延长其缓解期,中医药具有抗炎或协同抗炎作用。