儿茶素对小鼠造血祖细胞的刺激增殖作用

目的:观察儿茶素对小鼠造血祖细胞增殖作用.方法:通过造血祖细胞培养观察儿茶素对小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用.结果:加入儿茶素工作液后,CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-Meg集落数均明显升高.至100 nag·L-1时,各系造血祖细胞集落数均增加至最高,与未加儿茶素的实验组相比均有统计学差异(P<0.01).结论:儿茶素可明显促进小鼠造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-Meg)的增殖,并可与造血生长因子起协同效应,具有明显的造血促进作用.     

促红细胞生成素对慢性肾衰竭贫血患者骨髓超微结构的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对慢性肾衰竭(CRF)贫血患者骨髓超微结构的影响.方法 对23例CRF贫血患者给予重组人红细胞生成素(rhEPO)100 U/kg,每周3次,并进行常规血液透析,于治疗前及治疗12周后检测血常规,观察骨髓超微结构改变情况.结果 治疗后血红蛋白、血细胞比容、网织红细胞和血小板较治疗前均升高(P＜0.05,P＜0.01);骨髓造血微环境恢复,三系各阶段血细胞超微结构恢复正常.结论 EPO是治疗CRF贫血的决定性生长因子.     

青蒿琥酯对小鼠骨髓造血干/祖细胞分化的抑制与毒性作用

目的:观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对小鼠骨髓造血干/祖细胞分化的影响。方法:取小鼠骨髓干细胞进行体外液体或半固体定向培养并加入不同浓度的AS,光镜下计数半固体培养的红系集落形成单位(CFU-E)与红系爆式集落形成单位(BFU-E)数量,流式细胞术检测液体定向培养的细胞凋亡和线粒体膜电位变化,同时进行DNAladder凝胶电泳实验。结果:AS可显著抑制CFU-E与BFU-E集落的生成(P<0.05)并具有一定的量效关系;DNAladder凝胶电泳结果显示0.01～1.30mmol/L的AS可明显诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞晚期凋亡/死亡率具有统计学意义(P<0.05);线粒体膜电位的下降程度也与AS浓度正相关(r=0.546,P=0.018)。结论:AS对小鼠骨髓造血干/祖细胞的增殖和分化具有明显抑制作用,小剂量AS可诱导小鼠骨髓造血干/祖细胞发生凋亡,大剂量可直接引起细胞坏死。     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响。方法制备并体外培养大鼠骨髓造血干／祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素（EP0）、粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、白细胞介素-3（IL-3）表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率。结果经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM—CSF和IL-3的表达增高。结论昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞（CFU—Mix）、红系祖细胞（CFU—E）、粒-单系造血祖细胞（CFU-GM）的增殖分化。     

细胞因子联合治疗对急性放射病比格狗造血干/祖细胞的影响

目的 探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和重组人白细胞介素11(rhIL-11)联合治疗对重度骨髓型急性放射病(ARS)比格狗干/祖细胞数量和质量的影响.方法 用4.5Gy60Coγ射线照射比格狗建立重度骨髓型ARS模型,随机分为三组:A组5犬,不予任何治疗;B组5犬,予输血、抗感染等对症治疗;C组6犬,在B组基础上加用rhG-CSF和rhIL-11 3周.观察外周血CD34+细胞数和骨髓中CD34+细胞的比例、骨髓涂片骨髓增生程度、骨髓和外周血造血祖细胞集落数及端粒酶活性.结果 与A、B组比较,C组外周血CD34+细胞数照射后早期增高(P<0.05),骨髓CD34+细胞比例各个时间点差异无统计学意义(P>0.05);照射后45d,C组骨髓增生程度、外周血红细胞集落形成单位(CFU-E)、骨髓混合细胞集落形成单位(CFU-Mix)和骨髓端粒酶活性均明显高于B组(P<0.05).结论 联合使用细胞因子可保护部分造血干/祖细胞的增殖能力,保持端粒酶较高的活性,促进CD34+的早期释放,有利于骨髓造血功能较快恢复.     

环孢素在体外对再生障碍性贫血的干预作用

目的:观察环孢素(CsA)在体外对再生障碍性贫血(AA)的粒/巨噬系祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E)的作用,为临床应用提供实验依据.方法:采用RPMI1640琼脂和McCoy's5A甲基纤维素半固体平皿法,观察了CsA在体外对54例AA患者CFU-GM和CFU-E的影响,并以30例正常人作对照.结果:①AA患者的CFU-GM、CFU-E较对照组明显减低(P＜0.01).②CsA能明显促进AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,这种促增殖作用随CsA剂量增加而增加.③重型AA患者CFU-GM和CFU-E对CsA的有效率较慢性AA高.④CFU-GM和CFU-E值中、重度减低的AA患者对CsA的有效率较无CFU-GM和CFU-E生长的AA患者高.结论:CsA在体外可促进部分AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,故可作为治疗AA的一种有效方法.     

黄芪和当归的主要活性成分配伍对骨髓抑制小鼠造血功能的影响

目的探讨黄芪和当归的主要活性成分配伍对骨髓抑制小鼠模型的促造血作用。方法对芪归1∶1配伍提取物测定5种主要活性成分阿魏酸、芒柄花素、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷含量,以确定配伍剂量。小鼠随机分为空白对照组、模型组和各给药组。空白对照组给予溶剂灌胃7 d;模型组同上灌胃,于d 3腹腔注射环磷酰胺,连续3 d;各药物组灌胃给药,同上造模。检测外周血象、血清造血生长因子(HGF)含量、造血祖细胞集落数。结果芪归配伍提取物和活性成分配伍均可明显增加外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板数(Pt)、血红蛋白(HGB)含量和骨髓造血组织面积,明显增加血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促血小板生成素(TPO)、促红细胞生成素(EPO)含量和骨髓粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)、红系集落形成单位(CFU-E)和爆式红系集落形成单位(BFU-E)数,两者作用相近。各成分中,阿魏酸可促进WBC和骨髓造血组织面积的恢复;5种成分均可促进RBC和HGB的恢复;阿魏酸和黄芪甲苷可促进Pt的恢复。5个成分均可升高TPO含量;阿魏酸和毛蕊异黄酮可升高GM-CSF含量;阿魏酸、毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷可升高EPO含量。除黄芪甲苷外,其它4种成分均可使CFU-GM增加;5种活性成分均可增加CFU-MK、CFU-E;仅阿魏酸可增加BFU-E。结论黄芪当归配伍发挥补血作用的主要药效物质是以上5种活性成分,这些活性成分配伍对促进造血可发挥增效作用。     

鸡血藤活性成份对造血祖细胞增殖的调控作用

目的探讨从中药鸡血藤Spatholobus suberectus Dunn中提取的几种单体(SS8、SS9、SS12、SS17)对骨髓抑制小鼠造血祖细胞增殖的影响.方法采用血清药理学方法,通过造血祖细胞培养观察几种单体对骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用.结果中药鸡血藤中各单体的含药血清可刺激骨髓抑制小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的生长,与空白血清对照组相比有显著差异(p＜0.05).结论从中药鸡血藤中提取的几种单体对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有刺激活性,可缓解其造血祖细胞内源性增殖缺陷,其中以SS8的活性最强.     

阿胶有效组分对辐射损伤小鼠造血系统的保护作用研究

目的：研究阿胶有效组分A、B对放射损伤小鼠造血系统的保护作用机制。方法：小鼠3.5Gy ^137Se全身辐射造模,每日给药A（1.0g/kg和2.0g/kg）和B（0.8g/kg和1.6g/kg）,d25处死动物。检测小鼠骨髓和脾造血干/祖细胞集落红系暴增式集落形成单位（BFU-E）、红系集落形成单位（CFU-E）、粒细胞巨噬细胞集落生成单位（CFU-GM）、脾表面结节数量,荧光酶标仪检测骨髓细胞活性氧（ROS）含量,Elisa测定小鼠外周血粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、IL-6、红细胞生成素（EPO）、IFN-γ、β型转化生长因子（TGF-β）和血清及肝组织匀浆内超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）含量。结果：A、B组分能促进射线损伤小鼠外周血白细胞和红细胞的升高,保护骨髓和脾造血干/祖细胞集落BFU-E、CFU-E、CFU-GM,增加脾表面集落形成单位（CFU-S）数量和血清中GM-CSF、IL-6含量,降低骨髓细胞内ROS含量,提高血清内SOD、GSH-Px和肝脏内SOD含量。结论：从体外模拟人胃、肠的消化系统能够分离阿胶有效补血活性成分,这种成分保护辐射损伤小鼠造血系统的机制可能与保护贫血小鼠造血微环境、刺激机体表达相关造血细胞因子和增强机体抗自由基能力有关。     

基因重组干扰素γ体外对骨髓增生异常综合征患者治疗作用的研究

目的方法:用基因重组干扰素γ(IFN-γ)体外对41例骨髓增生异常综合征(MIDS)患者造血祖细胞的作用进行了观察,结果结论:①IFN-γ体外对正常对照组患者的CFU-E和CFU-GM无明显促增殖作用。而对MDS患者CFU-E和CFU-GM有明显促增殖作用。其作用为剂量依赖型,在1~U/ml时作用最小,100~U/ml时作用最强;②IFN-γ对MDS原CFU-E和CFU-GM增殖正常组加入IFN-γ后集落数增加最明显,而对增殖明显减低组集落效无明显增加;③IFN-γ对MDS不同FAB亚型患者CFU-E和CFU-GM作用不同,其中对RAEB-T型患者有效率较高。     

巴西蘑菇多糖对造血干、祖细胞生成的影响

目的:探讨国产巴西蘑菇多糖对造血干、祖细胞生成的影响及其作用机制。方法:应用造血细胞培养技术、流式细胞仪(FACS)、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)观察药物对小鼠骨髓细胞及人脐血单个核细胞的影响。结果:经过巴西蘑菇多糖处理的动物,造血干细胞(CFU-S)、粒-单祖细胞(CFU-GM)、红系祖细胞(CFU-E)和纤维母细胞(CFU-F)各组数值明显上升,与对照组比较,P均<0.01;FACS检测显示,实验组CD33+细胞明显上升,在诱导的d 7达高峰;经RT-PCR检测结果表明,巴西蘑菇多糖诱导人脐血单个核细胞48 h后,粒单细胞克隆刺激因子(GM-CSF)mRNA的表达量是对照组的2.72倍。结论:巴西蘑菇多糖可促进造血干、祖细胞生成并可促进人脐血单个核细胞GM-CSF基因表达。     

脐血造血细胞培养与脐血治疗再生障碍性贫血的疗效

目的 研究观察脐血造血细胞含量、特性,为脐血的临床应用,特别是对成人脐血移植进行基础研究。方法 应用细胞培养技术,在脐血中成功地培养出ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｇ、ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－Ｆ等多种造血祖细胞,并应用脐血输注治疗再生障碍性贫血（ＡＡ）４０例。结果 脐血各系造血祖细胞显高于成人外周血,而且与成人骨髓培养结果近似。脐血输注治疗ＡＡ显优于传统的治疗方法。结论 脐血输注是ＡＡ患的一     

Kinetics of granulocytic and erythroid progenitor cells are affected differently by short-term,low-level benzene exposure

In previous work, we determined that granulocytic (CFU-GM) and erythroid (CFU-E) progenitor cell populations exhibited disparate responses to short-term benzene exposures. We now report on work investigating possible mechanisms for these observed disparate responses. Mice were exposed to either air or 10 ppm benzene for 6 h/d X 5 d. Immediately after the last exposure, mice were injected, i. v., with either saline or hydroxyurea (HU). The dose of HU was sufficient to kill hematopoietic cells in or near S-phase of the cell cycle and sufficient to synchronize the surviving populations of hematopoietic cells. Three days after benzene exposure, CFU-E numbers had declined to 50% of control values while CFU-GM numbers were equal to control values at this time. The benzene exposures were sufficient to double the percentage of CFU-E in S-phase but produced no such increase among CFU-GM. During 3 days of recovery from benzene exposure and HU treatment, the CFU-E population expanded 30-fold while the CFU-GM population expanded less than 3-fold. Following benzene exposure and HU treatment, both progenitor cells produced elevated numbers of their respective progeny. When CFU-E from benzene-exposed mice were cultured with varying concentrations of erythropoietin (EPO), the response at maximal EPO concentration was 66% of the response by control CFU-E. This strongly suggests that the CFU-E populations from benzene-exposed mice had been depleted of cells in or near S-phase. The results indicate that CFU-GM respond to low-level benzene exposure by increasing their rate of differentiation but not their rate of proliferation, while CFU-E respond by increasing both their rates of differentiation and proliferation. We speculate that it is the increase in CFU-E proliferation that renders these cells more susceptible to benzene than their granulocytic counterparts, especially those CFU-E at or near the S-phase of the cell cycle.     

GM-CSF／IL-3融合蛋白对环磷酰胺引起的猕猴骨髓造血功能抑制的影响

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）／白细胞介素3（IL-3）融合蛋白对环磷酰胺（L-TX）引起的造血系统抑制的缓解作用。方法连续2d静脉注射CTX50mg·kg^-1·d^-1后将21只猕猴分为4组,其中3组分别皮下注射GM—CSF／IL-3融合蛋白20、40、80μg·kg^-1·d^-1,连续16d,剩余一组为溶剂对照组。停药后10d抽取猕猴骨髓,做骨髓涂片检查及进行骨髓祖细胞半固体培养。结果GM—CSF／IL-3融合蛋白各剂量组明显促进CTX应用后猕猴骨髓有核细胞增生。GM-CSF／IL-3融合蛋白低、中剂量促进猕猴骨髓粒-巨噬系（CFU—GM）、红系（早期BFU-E、晚期CFU—E）及巨核系（CFU-MK）祖细胞的增殖;高剂量对三系祖细胞的增殖无促进作用。结论GM—CSF／IL-3融合蛋白促进CTX所致猕猴造血功能抑制的恢复。     

重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白单次给药对恒河猴造血细胞的动员作用

目的研究重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白（GW003）对造血细胞的动员作用。方法 7只健康成年恒河猴单次皮下注射GW003 150μg/kg,分别于给药前后不同时间检测外周血细胞数和进行造血细胞集落培养。结果 GW003对健康成年恒河猴造血祖细胞、白细胞、中性粒细胞、未成熟粒细胞及单核细胞均有明显的动员作用,给药后18 h呈现高峰。注射GW003后10 h,外周血粒-巨噬系细胞集落形成单位（CFU-GM）、混合系细胞集落形成单位（CFU-Mix）、巨核系细胞集落形成单位（CFU-MK）数分别增至药前的1.8、1.9、1.4倍,红系爆式形成单位（BFU-E）和红系集落形成单位（CFU-E）数则增至1.7和1.5倍。结论 GW003对正常猴外周血干/祖细胞（PBS/PC）有明显动员作用,有望成为一种新的、高效的造血细胞动员剂。     

地黄寡糖对SAMP8小鼠造血祖细胞增殖的作用

采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学技术, 研究了地黄寡糖对快速老化模型P系小鼠(SAMP8)骨髓造血祖细胞增殖作用的影响. 结果表明地黄寡糖可促进SAMP8小鼠骨髓粒系巨噬系祖细胞, 早期和晚期红系祖细胞的增殖, 其脾细胞条件液也可使造血祖细胞克隆集落数明显增加, 地黄寡糖还可使其基质细胞层上粒系巨噬系祖细胞集落的产率明显增多. 提示地黄寡糖可能通过多种途径激活机体组织, 特别是造血微环境中的某些细胞, 促进其分泌多种造血生长因子而增强造血祖细胞的增殖.     

参附注射液治疗再生障碍性贫血模型小鼠的实验研究

目的观察参附注射液对AA模型小鼠的治疗作用。方法健康雄性昆明种小白鼠60只,随机分为盐水对照组（N）、模型组（M）、参附组（S）和激素组（B）。除对照组外,其它各组采用60Co-γ射线＋环磷酰胺＋氯霉素复合方法复制AA模型。之后分别给予生理盐水和治疗药物注射,连续12天后处死,观察AA小鼠各组小鼠骨髓切片病理变化并计数骨髓有核细胞数。结果 （1）骨髓切片组织学所见：模型组小鼠骨髓增生极度低下,造血细胞明显减少,各治疗组仍显示骨髓增生低下,但可见散在造血灶。（2）骨髓有核细胞测定结果：与对照组比较,模型组骨髓有核细胞明显降低（P〈0.01）,各治疗组较模型组骨髓有核细胞显著增高（P〈0.01）。结论腹腔注射参附可增加骨髓有核细胞数,促进骨髓造血,对AA小鼠具有治疗作用。     

刺梨汁对骨髓抑制小鼠造血功能的调控作用

目的探讨刺梨汁对环磷酰胺合并60Co致骨髓抑制小鼠造血功能的影响,研究其促进血细胞上调的作用机制。方法双抗体夹心法检测外周血常规、骨髓基质中红细胞生成素（EPO）、血小板生成素（TPO）、粒细胞生长因子（GCSF）的量。结果刺梨汁能明显改善骨髓抑制小鼠外周血常规,能有效平衡微环境中TPO的量,改善EPO的表达,对骨髓抑制小鼠骨髓细胞上清中GCSF有明显的正调控作用。结论刺梨汁能提高骨髓抑制小鼠外周血血细胞和骨髓有核细胞计数,可促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞从G0/G1期进入增殖周期,并能有效调节骨髓微环境中TPO、EPO、GCSF的表达,从而促进骨髓抑制小鼠的造血功能,可作为一种治疗贫血的辅助保健药物。