三氧化二镍诱导人肺成纤维细胞恶性转化的实验研究

在体外用不同浓度的Ni₂O₃多次处理人肺成纤维细胞(HLF),并进行转化细胞的恶性鉴定——刀豆凝集素A(ConA)试验和软琼脂细胞培养试验.发现Ni₂O₃可诱导HLF细胞恶性转化,转化细胞生长速度加快,排列紊乱,失去接触抑制,呈交叉重叠生长,在实验浓度范围内,转化率呈剂量-反应关系.转化细胞可被低浓度ConA凝集,并在软琼脂内生长.提示Ni₂O₃有较强的诱导人肺成纤维细胞恶性转化的能力,具有致癌性.     

三氧化二镍诱导人肮成纤维细胞恶性转化的实验研究

在体外用不同浓度的Ｎｉ２Ｏ３多次处理人肺成纤维细胞（ＨＬＦ）,并进行转化细胞的恶性鉴定－－刀豆凝集素Ａ（ＣｏｎＡ）试验和软琼脂细胞培养试验。发现Ｎｉ２ＩＯ３可诱导ＨＫＬＦ细胞恶性转化,转化细胞生长速度加快排列紊乱,失去接触抑制,呈交叉重叠生长,在实验浓度范围内,并在软琼脂内生长。提示Ｎｉ２Ｏ３有较强的诱导人肺成纤维细胞恶性转化的能力,具有致癌性。     

β-胡萝卜素和维生素C对Ni_2O_3诱导人肺成纤维细胞转化的保护作用

为了探讨三氧化二镍 (Ni2 O3)诱导人肺成纤维 (HL F)细胞恶性转化作用以及β-胡萝卜素和维生素C的保护作用 ,用不同浓度的 Ni2 O3在体外多次处理 HL F细胞 ,利用刀豆凝集素 A(Con A)凝集实验和软琼脂集落形成实验进行转化细胞的恶性鉴定 ;同时添加β-胡萝卜素 (5 .4mg/ L )和维生素 C的食物 (1.8mg/ L ) ,观察对 Ni2 O3转化作用的影响。结果表明 Ni2 O3(0 .5～ 2 .0 mg/ L)可诱导 HL F恶性转化 ,转化细胞生长速度加快 ,排列紊乱 ,失去接触抑制 ,呈交叉重叠生长 ,转化率呈剂量 -效应关系。转化细胞可被低浓度 Con A凝集 ,并在软琼脂内生长。添加 β-胡萝卜素和维生素 C的处理组比单用 Ni2 O3 组的转化率显著下降 (P<0 .0 5 ) ,处理后细胞 Con A凝集反应阴性 ,不能在软琼脂内生长。结论认为 Ni2 O3有较强的诱导 HL F细胞恶性转化的能力 ,具有致癌性。β-胡萝卜素和维生素 C对于镍诱导 HL F恶性转化具有保护作用 ,提示职业接触镍的人群有必要在膳食中增加富含β-胡萝卜素和维生素 C,以提高机体的抗氧化能力 ,从而提高机体的抗肿瘤能力     

β—胡萝卜素和维生素C对Ni2O3诱导人肺成纤维细胞转化的保护作用

为了探讨三氧化二镍（Ｎｉ２Ｏ３）诱导人肺成纤维（ＨＬＦ）细胞恶性转化作用以及β－胡萝卜素和维生素Ｃ的保护作用,用不同浓度的Ｎｉ２Ｏ３在体外多次处理ＨＬＦ细胞,利用刀豆凝集素Ａ（ＣｏｎＡ）凝集实验和软琼脂集落形成实验进行转化细胞的恶性鉴定;同时添加β－胡萝卜素（５．４ｍｇ／Ｌ）和维生素Ｃ的食物（１．８ｍｇ／Ｌ）,观察对Ｎｉ２Ｏ３转化作用的影响。结果表明Ｎｉ２Ｏ３（０．５￣２．０ｍｇ／Ｌ）可诱导ＨＬＦ     

氯化镉对人胚肺成纤维细胞的恶性转化作用

为研究氯化镉致人胚肺成纤维细胞的恶性转化作用,用染色体分析,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验和流式细胞术检测了转化细胞染色畸变,各细胞周期时相细胞的比例和ＤＮＡ合成情况。结果显示,氯化镉在０．００４μｍｏｌ／Ｌ、０．０２μｍｏｌ／Ｌ、０．０４μｍｏｌ／Ｌ３个实验浓度都可使人胚肺成纤维细胞生长排列紊乱。     

镍化合物对人胚肺成纤维细胞DNA的损伤

目的 研究不溶性镍盐(Ni3S2和Ni2O3)和水溶性镍盐(NiSO4)对细胞DNA的损伤状况,为镍致癌机制的研究提供科学依据.方法 使用不同浓度Ni3S2、Ni2O3和NiSO4处理人胚肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF),通过单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测细胞DNA损伤程度.结果 镍处理各组的HLF细胞较阴性对照组细胞DNA损伤程度增高(P＜0.01),彗星尾矩增大(P＜0.01),有一定的剂量-反应趋势.结论 3种镍化合物均可引起细胞DNA损伤,不溶性镍盐的损伤强度大于水溶性的镍盐.DNA损伤是镍化合物致癌的可能机制.     

硒和维生素E缺乏诱导大鼠肝细胞凋亡

目的　研究硒 (Se)和维生素 E(VE)缺乏对大鼠肝细胞的影响。方法　以天然低Se低 VE的克山病病区粮作为饲料进行动物试验 ,与人工半合成低 Se低 VE饲料的实验互相印证 ;用光镜、电镜、流式细胞术 (FCM)、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)、DNA琼脂糖凝胶电泳 5种方法进行肝细胞凋亡检测。结果　无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组光镜下均可见较多肝细胞胞浆着色深 ,核浓缩。主要分布在中央静脉周围。电镜检查天然低 Se低 VE组可见较多肝细胞核体积缩小 ,核染色质呈块状聚集在核膜下。用流式细胞术检测 ,天然低 Se低 VE组较对照组肝细胞凋亡百分率明显增加 ,补 Se和 /或 VE使调亡百分率有所下降 ,以联合补充 Se和 VE凋亡百分率下降最明显。人工半合成饲料低 Se低 VE组凋亡百分率较高 ,补 Se和 /或 VE使凋亡百分率有所下降 ,但均未达到显著差异。无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组均可见较多 TUNEL染色阳性细胞 ,加 Se和 /或 VE可使上述改变的细胞有不同程度减少。DNA琼脂糖凝胶电泳 ,无论天然还是人工半合成饲料实验低 Se低 VE组均可见 DNA梯状图象 ,其余各组未见梯状改变。结论　Se和 VE缺乏可诱导大鼠肝细胞凋亡     

氧自由基诱导细胞调亡及硒与维生素E防护作用

目的：研究超氧阴离子诱导的细胞凋亡及硒、维生素Ｅ（ＶＥ）的影响。方法：以形态学及ＤＮＡ电泳观察黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（Ｘ／ＸＯ）反应体系产生的超氧阴离子自由基（Ｏ＾－２）诱导成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡及硒、ＶＥ的保护作用。结果：Ｏ＾－２的剂量为５ｎｍｏｌ／Ｌ及１０ｎｍｏｌ／Ｌ,作用时间５￣１０小时可诱导ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡,而在细胞培养基中分别加入硒、ＶＥ使其浓度达到１．１５μｍｏｌ／Ｌ及２．３     

镉化物对人胚肺成纤维细胞转化作用的研究

本文应用人胚肺成纤维细胞转化试验,对氯化镉的致癌性进行研究。结果表明:氯化镉在浓度0.004～0.04μM/ml范围之内,可使人胚肺细胞形态发生改变,出现明显的转化灶,细胞与刀豆蛋白A的凝集作用加强,细胞失去接触抑制特性,获得在软琼脂培养基中生长能力及细胞在软琼脂中集落形成率增高,细胞的染色体数目出现变化,增多或减少,及结构的畸变、断裂、断片等。细胞的寿命明显延长。本文通过分析各种指标,较完整的反映了氯化镉使细胞恶性转化的多阶段的转化过程,证实了体外培养的细胞转化和肿瘤的演化,与它在体内的类似物的作用一样,是一个具有多步骤的变化过程。通过实验,初步建立了氯化镉致恶性转化体外培养的实验模型、为进一步研究癌变的分子基础提供条件。     

转化生长因子β1和丝裂原活化激酶通路调控人肺成纤维细胞表型

目的　探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在转化生长因子β1(TGF β1)诱导人肺成纤维细胞表型分化中的作用。方法　以人肺成纤维细胞HLF 0 2细胞系为研究对象,给予10ng/mlTGF β1刺激不同时间;阻断实验以SB2 0 35 80、PD980 5 9分别阻断p38通路和细胞外调控激酶(Erk)通路;采用逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)检测细胞内表型分化标志物α-平滑肌肌动蛋白(αSMA)mRNA的表达;运用Western印迹检测细胞内p38、Erk、c jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化以及αSMA蛋白表达的强度。结果　(1)TGF β1刺激HLF 0 2细胞2 4h组、4 8h组、72h组的αSMAmRNA表达水平分别为:1.87±0 .11、2 .4 9±0 .10、3.0 2±0 .15 ;αSMA蛋白表达水平分别为:3.2 0±0 .14、3.96±0 .2 1、4 .5 7±0 .13。(2 )TGF β1可以激活HLF 0 2细胞内p38和Erk通路,对JNK没有活化作用。(3)SB2 0 35 80、PD980 5 9各自抑制了TGF β1诱导的p38、Erk激酶的磷酸化。(4)SB2 0 35 80抑制了TGF β1诱导的αSMAmRNA和蛋白表达(抑制率分别为30 %和4 0 % ) ;PD980 5 9同样抑制了TGF β1诱导的αSMAmRNA和蛋白表达(抑制率分别为10 %和2 0 % )。结论　TGF β1可诱导HLF 0 2细胞表型的分化,p38、Erk激酶参与了调控TGF β1的促表型分化作用     

烧伤大鼠血浆和肝脏硒的变化及补充硒对维生素E的影响

本研究用Wistar雄性大鼠背部体表面积约20％的三度烧伤为模型。烧伤后,血浆、肝脏硒的浓度降低,与硒有关的谷胱甘肽过氧化物酶的活性减小,同时血浆VE明显降低,而RBC和肝脏VE的含量并没有降低。伤后每天补充2.3μgSe/100gbw的亚硒酸钠,RBC和肝脏VE的含量明显低于正常对照组,血浆VE也较烧伤不补硒组低,同时使血浆总巯基的含量降低更为明显。结果表明,烧伤后补充硒可使VE的消耗增多。     

硒、维生素A、E对人类乳腺癌细胞增殖的影响

本文研究了Se、VA和VE及其联合作用对人类乳腺癌细胞BCaP-37增殖的影响,结果提示Se对该细胞的增殖有双向作用,浓度高于5μM抑制细胞生长,低于该浓度则刺激细胞生长。醋酸维生素A酯浓度在1.0—10.0mg/L范围内对该细胞生长有明显的抑制。维生素A酸对该细胞的生长仅有很弱的抑制作用。VE对细胞也有弱抑制生长的作用。在稍高于生理浓度的水平下,Se(5μm)与VA(2mg/L)和VE(20mg/L)三者联合处理细胞,细胞核酸含量明显降低,提示Se、VA和VE能协同抑制BCaP-37细胞的增殖,而且这种抑制有可逆的趋势。联合使用Se和VA或VE未观察到二者间对细胞生长有协同抑制。上述结果表明联合使用Se、VA和VE对乳腺癌的防治可能是有益的。     

EFFECTS OF VITAMIN E AND SELENIUM ON THE TOXICITY OF PARAQUAT

The toxicity of paraquat, which has been attributed to the activation of oxygen, is strongly modulated by dietary selenium but not by vitamin E.     

VA与VE对辐射诱发大鼠过氧化损伤的保护作用

目的 :探讨辐射后过氧化损伤及VA、VE抗自由基损伤作用 ,为辐射后过氧化损伤的防护提供科学依据。方法 :实验设阴性对照、阳性对照 (辐射 )、VA、VE及VA +VE联合用药 5组。在辐射前每天分别以VA 10mg·kg- 1和VE 30mg·kg- 1给相应组大鼠灌胃。 6d后 ,除阴性对照组外 ,其余大鼠均接受 6Gy　60 Co照射 ,照射后 3d宰杀取血作生化分析。结果 :阳性对照组大鼠出现明显中毒症状。VA、VE和VA +VE组MDA含量分别为 ( 12 8.86± 56.2 7) μmol·gpr- 1、( 110 .84± 33.89) μmol·gpr- 1和 ( 149.94± 32 .82 ) μmol·gpr- 1,显著低于阳性对照组的 ( 2 0 1.2 5±37.0 1) μmol·gpr- 1(P <0 .0 5)。VA、VE和VA +VE组SOD活性分别为 ( 1.35± 0 .79)U·gpr- 1、( 1.66± 0 .61)U·gpr- 1和 ( 1.69± 0 .71)U·gpr- 1,也显著低于阳性对照组的 ( 2 .95± 0 .52 )U·gpr- 1(P <0 .0 5) ;VE组全血CAT活性为 ( 1.4 3± 0 .2 9)U·ml- 1.sec- 1,高于阳性对照组的 ( 1.18± 0 .2 2 )U·ml- 1·sec- 1(P <0 .0 5)。实验组给予VA、VE或VA +VE后 ,血清含量均有所增加。结论 :VA、VE能减弱辐射导致的自由基损伤 ,VA、VE联合用药对抗自由基损伤也有一定作用     

硒、维生素E对心肌胶原蛋白代谢的影响

目的：阐明硒（Ｓｅ）、维生素Ｅ（ＶＥ）与心肌胶原蛋白代谢的关系。方法：以病区粮（低Ｓｅ、低ＶＥ）喂养大鼠,并注射异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）诱发心肌缺血缺氧性坏死,检测心肌中谷胱甘肽氧化酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、丙二醛（ＭＤＡ）和胶原蛋白含量变化。结果：低Ｓｅ低ＶＥ组血浆和心肌ＧＳＨ－ＰＸ、ＣＡＴ活性下降,ＭＤＡ含量上升,与心肌胶原蛋白含量变化有相关性。补Ｓｅ补ＶＥ后,ＧＳＨ－ＰＸ、ＣＡＴ活性上升,ＭＤＡ水平下降,心肌胶原蛋白含量下降。结论：低Ｓｅ低ＶＥ加重ＩＳＯ诱发的心肌损伤,脂质过氧化和自由基与心肌胶原蛋白代谢关系密切。补Ｓｅ补ＶＥ后,能缓解心肌细胞对诱发因素所造成的损伤,对保护心肌细胞和防止心肌纤维化的形成具有一定作用。     

膳食中维生素E对克山病区粮饲养的大鼠硒代谢的影响

用除去维生素E的克山病病区粮配成的基础饲料,利用在该低硒低维生素E的基础饲料中补充α-生育酚和/或硒的饲料饲养大鼠,观察维生素E对硒代谢的影响。结果表明: (1)饲料硒水平相同时,维生素E可使肝组织中硒水平明显升高,对其它组织影响不大。 (2)不论硒缺乏时或是补充硒时,维生素E缺乏组动物的全血、心和肝谷胱甘肽过氧化物酶活力均低于补充维生素E组。心和肝中的差异较为明显。 (3)当相应两组大鼠的硒摄入量无明显差别时,不论是补硒组或是缺硒组,在饲料中补充维生素E均可使尿硒排出明显降低,硒在体内存留率增高。     

老化对肝脏枯否细胞膜磷脂功能的影响及维生素E的保护作用

以内毒素（ＬＰＳ）和血小板激活因子（ＰＡＦ）刺激后枯否细胞（ＫＣ）膜磷酸肌醇转化、细胞内钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）反应及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）含量为指标，探讨了老化对ＫＣ膜磷脂功能的影响及维生素Ｅ（ＶＥ）的保护作用。结果：２４月龄ＫＣＰＧＥ２基础分泌能力和受中、高浓度ＬＰＳ刺激后的ＰＧＥ２分泌能力均明显低于６月龄组；１８和２４月龄组ＫＣ［Ｃａ２＋］ｉ基础水平显著高于６月龄组；１８和２４月龄ＫＣ基础总磷酸肌醇含量明显低于６月龄组，各组ＫＣ受ＬＰＳ刺激后总磷酸肌醇含量增加不明显，受ＰＡＦ刺激后明显增加，但１８和２４月龄ＫＣ的增值明显小于６月龄组。ＶＥ处理组（ＶＥＧ）ＫＣＰＧＥ２基础分泌能力和总磷酸肌醇含量均明显高于非ＶＥ处理组（ＮＶＥＧ），２４月龄ＶＥＧ组ＫＣ受ＰＡＦ刺激后明显高于ＮＶＥＧ。１８和２４月龄ＶＥＧ［Ｃａ２＋］ｉ基础水平明显低于ＮＶＥＧ，活化后其净增值显著高于ＮＶＥＧ。提示，老化ＫＣ膜磷脂功能明显异常，ＶＥ对其具有显著的保护作用。     

硒和维生素E对糖尿病大鼠红细胞[Ca~(2+)]i水平的影响

目的：　观察链脲佐菌素（ＳＴＺ）糖尿病大鼠补充硒（Ｓｅ）和／或维生素Ｅ（ＶＥ）后红细胞内游离钙浓度［Ｃａ２＋ ］ｉ的变化。方法：　用ＳＴＺ制成糖尿病（ＤＭ）大鼠,分为四组：（１）ＤＭ 对照组;（２）Ｓｅ 治疗组;（３）ＶＥ治疗组;（４）Ｓｅ 和ＶＥ治疗组;另有正常对照组,每天以同体积的生理盐水灌胃。实验期为３０ 天,分析血Ｓｅ、ＶＥ及红细胞［Ｃａ２＋ ］ｉ。　结果：　补充Ｓｅ 和／或ＶＥ后,红细胞［Ｃａ２＋ ］ｉ显著下降,与ＤＭ 对照组比较,差异有显著意义（Ｐ＜ ０．０５,Ｐ＜ ０．０１）,以联合用药组降幅较大。血硒水平联合用药组高于其他各组（Ｐ＜ ０．０１）,补Ｓｅ组高于补ＶＥ组和ＤＭ 对照组（Ｐ＜ ０．０１）;血清ＶＥ浓度联合用药组高于ＤＭ 对照组和补Ｓｅ 组（Ｐ＜ ０．０１,Ｐ＜ ０．０５）,而补ＶＥ组血清ＶＥ浓度已恢复至正常水平。　结论：　Ｓｅ和ＶＥ对ＤＭ 大鼠红细胞［Ｃａ２＋ ］ｉ异常升高有明显的抑制作用。     

硒和维生素E对大鼠糖尿病易感性的影响

目的 :　观察硒 ( Se)和维生素 E( VE)对糖尿病 ( DM)易感性的影响。方法 :　应用膳食低 Se复加注射链脲佐菌素 ( STZ)法制成大鼠 DM模型 ,补充一定剂量的 Se和 (或 ) VE,观察对大鼠 DM易感性的影响。结果 :　膳食低 Se、低 VE可明显增加大鼠 DM易感性 ,表现为血清 C肽水平和胰岛 C肽分泌贮备显著降低 ,血糖明显升高 ,并可显著增加 DM大鼠死亡率。在膳食中联合补充 0 .2 mg Se、50 0 mg VE/ kg,明显增加了 DM大鼠血清和胰岛 C肽含量、降低 DM大鼠血糖水平 ,亦使 DM大鼠死亡率显著降低。结论 :　在 DM亚临床状态下 ,联合补充适量 Se和 VE可改善胰岛内分泌细胞代谢偏移及功能紊乱 ,拮抗致病因素的胰岛损伤效应 ,降低 DM易感性。