长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用研究

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇（ＰＥＧ）为修饰剂，以活性酯法制备出ＰＥＧ－重组人超氧化物歧化酶（ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ）共价结合物。修饰酶的生物半衰期为１５ｈ，比修饰前延长了９０倍，对酸、硷、热的耐受力明显高于修饰前。用照射小鼠活存率评价了ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ的辐射防护作用。小鼠受８．５Ｇｖｒ射线照射前１ｈ腹腔注射３０万Ｕ／ｋｇＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ，可提高活存率４２％，与未修饰的ｒｈＳＯＤ相比，活存率提高１４％。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠抗氧化酶和免疫细胞的辐射防护作用

目的探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ）的辐射防护作用。方法观察６０Ｃｏγ射线５～７Ｇｙ照射对小鼠体内抗氧化酶和免疫细胞的影响，以及给予ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ后的抗放效应。结果与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ可明显减轻受照小鼠血液和肝细胞浆中总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）的活性下降的程度。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ亦可明显增强受照小鼠脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ的增殖反应和自然杀伤细胞的活性；提高小鼠全脾淋巴细胞、外周血白细胞和相对淋巴细胞计数；以及延长了３０天平均生存时间。不同给药方法中，辐射前后给药组的效果优于辐射前或辐射后给药组。结论抗氧化酶活性的降低和氧自由基作用的增强可能是电离辐射引起机体过氧化损伤，导致组织细胞功能异常的重要原因。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对小鼠抗氧化酶和免疫细胞以及整体均具有辐射防护作用，可能主要由于其直接清除氧自由基的功能，其次通过这种保护功能也促进其他抗氧化酶发挥了一定的协同作用。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶脂质体的制备

应用反相蒸发法制备出重组人铜锌超氧化物歧化酶(rh Cu/Zn SOD)脂质体,其包封率为49.1%,在大鼠体内半衰期为3.45 h,体外模拟胃酸、胃蛋白酶、胰酶耐受力分别为90.3%、86.2%.79.8%;在小鼠体内脾、肝、肺脏中分布最高.     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血粒─巨系祖细胞的辐射防护作用

目的：探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）的辐射防护作用及其机理。方法：通过γ线辐射损伤小鼠的体内和体外实验，观察了ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ和聚乙二醇修饰的ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ（ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）对小鼠骨髓造血粒－巨系祖细胞克隆产生率（ＣＦＵ－ＧＭ）的影响。结果：体内实验，小鼠整体照射，静脉给药，以上两种酶（２５`０～３００ｍｇ／ｋｇ）均能非常显著地提高ＣＦＵ－ＧＭ的数量。其中以照射前后联合给药效果最好。而单纯照射前给药，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ仅在照前１小时给药效果较好；ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ则在照前３小时或照前１小时给药都有较好的效果。体外实验，小鼠离体细胞照射并给药，未见ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对ＣＦＵ－ＧＭ的影响。结论：以上两种酶对小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ有良好的辐射防护作用，其机理可能是通过机体防御系统作用的间接途径实现的。ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的生物半衰期较长，可增加给药时机，因而具有更大的实用价值。     

金属螯合层析介质的研制及其在纯化重组人铜锌超氧化物歧化酶中的应用

以琼脂糖Sepharose 4B为基质,经氯代环氧丙烷活化,与亚氨基二乙酸通过化学交联再与铜螯合,合成了金属铜螯合层析介质,结果显示此介质不仅具有特异性吸附能力,且有一定的刚性,对强碱和热亦有一定的耐受性.用此介质纯化人超氧化物歧化酶(rhSOD),即可得到高纯度的rhSOD产品,简化了纯化工艺,降低了生产成本.     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血干细胞的辐射防护作用

目的：骨髓造血干细胞（ｈｅｍｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）损伤所致的造血抑制是急性骨髓型放射病死亡的重要原因之一，本实验旨在观察人基因工程重组超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）对ＨＳＣ有无辐射防护作用以及化学修饰对ｒｈＳＯＤ抗辐射作用的影响。方法：实验用照射小鼠的外源性脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）形成法。组间比较用ｔ检验。结果：ｒｈＳＯＤ和ＰＥＧ－ＳＯＤ均能明显提高ＣＦＵ－Ｓ形成数，其中ｒｈＳＯＤ在照射前１小时给药效果好，而ＰＥＧ－ＳＯＤ在照射前２～３小时给药作用更为明显。结论：ｒｈＳＯＤ具有对骨髓造血于细胞的辐射防护作用，化学修饰后ＳＯＤ的血浆半衰期延长而使药物作用持续时间延长。     

头孢唑啉的辐射防护作用及其机制的研究

头孢唑啉(先锋霉素V)是临床上常用的抗生素。本文对头孢唑啉的辐射防护作用及其作用机制进行了研究。头孢唑啉能清除OH~.和O~2自由基,照前腹腔给药对小鼠造血组织有保护作用,对小鼠照后30d活存率也有一定的防护效果。     

二硫硫胺的辐射防护作用及其机制的研究

文作者报道了二硫硫胺的辐射防护作用, 并对其作用机制进行了研究。二硫硫胺能使受致死剂量照射小鼠30天活存率提高65%, 剂量坂低系数力1.20。且有效剂量范围较宽, 有效给药时间较长, 对小鼠GM-cFu细胞及其它造血组组指标(脾重、骨髓DNA、cFus)均育显乏保护作用。在体外自由基生成系统中,二硫硫胺能清除OH和O₂^.-,采用电子自旋共振(ESR)技术可以看到有辐射产生的未偶电子从DNA的碱基转移到二硫硫胺的硫原子上,从而保护DNA的结构和功能.二硫硫胺能显著减低受照射小鼠肝自由基的浓度,并促进其恢复至正常水平.     

γ线对小鼠细胞遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶的抗放射作用(论著)

目的：研究γ射线对小鼠遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶（rhSOD）的抗放作用。方法：实验用甲基纤维素缩集法计算淋巴细胞微核率和活体秋水仙素法进行骨髓细胞染色体畸变率分析。结果：（1）4．0Gyγ线能明显增加小鼠淋巴细胞微核细胞率、微核率和骨髓染色体畸变率。（2）rhSOD可减轻射线所致小鼠淋巴细胞微核细胞率、微核率及骨髓细胞染色体畸变率，尤以照射前后给药为佳。结论：rhSOD对小鼠细胞遗传学辐射损伤有明显保护作用。     

高活性心钠素治疗重度充血性心力衰竭及超氧化物岐化酶的研究

 目的 观察高活性心钠素(haANP)治疗充血性心力衰竭(CHF)的疗效及心钠素(ANP)与超氧化物岐化酶(SOD)的关系。方法选择符合CHF诊断标准的连续住院患者110例,随机分为haANP治疗观察组79例,给予haANP 300 μg加入5％葡萄糖250ml中静滴;常规治疗对照31例,疗程均为14d。观察治疗疗效及治疗前后心率、心胸比、血压、左心室舒张末内径(LVDd)、左心室射血分数(LVEF),检测治疗前后SOD和ANP水平。结果观察组总有效率81％,与对照组51.6％比较有显著性差异(P＜0.01),观察组治疗后心率、血压、心胸比、SOD、LVDd均明显下降(p＜0.05、P＜0.01),LVEF增加(P＜0.01)。结论haANP治疗CHF疗效显著,SOD与病情缓解有关,CHF患者血中ANP与SOD之间相关。     

氧自由基在猫创伤性脑水肿中的作用和超氧化物歧化酶防治作用的实验研究

目的：进一步证实氧自由基（ＯＦＲ）在创伤性脑水肿发生中的作用和外源性超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的防治作用。方法：用硬膜外自由落体打击致猫重型颅脑损伤，随机分为外伤组、游离ＳＯＤ（Ｆ－ＳＯＤ）治疗组和脂质体包埋ＳＯＤ（Ｌ－ＳＯＤ）治疗组。观察伤后１、３、６、２４小时动物意识及肢体活动、ＥＥＧ、血清和ＣＳＦ中脂质过氧化物（ＬＰＯ）和ＳＯＤ含量、２４小时后脑含水量、血脑屏障通透性、脑组织脂质过氧化物（ＬＰＯ）和ＳＯＤ含量以及组织形态学改变。结果与结论：ＯＦＲ是脑外伤后继发性脑损伤和脑水肿的重要因素之一；外源性Ｆ－ＳＯＤ和Ｌ－ＳＯＤ均对创伤性脑水肿有防治作用，但后者作用更显著。     

黄芪注射液对大鼠睡眠剥夺后脑组织NO含量和SOD活性的影响

目的　观察黄芪注射液对大鼠完全睡眠剥夺 (TSD)后脑组织一氧化氮 (NO)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响及行为变化 ,探讨黄芪对睡眠剥夺的保护作用。方法　采用小平台水环境法制作大鼠TSD模型 ,观察大鼠经过 3dTSD后额叶和海马NO含量和SOD活性和行为变化 ,并观察黄芪干预对这些指标的影响。结果　与正常对照组比较 ,TSD大鼠额叶和海马NO含量和SOD活性均升高 ,行为改变明显。黄芪干预后大鼠脑内NO含量及SOD活性明显下降 (P <0 .0 1～ 0 .0 5 )并能减轻其行为改变。结论　黄芪注射液具有改善生化代谢作用 ,可减轻睡眠剥夺对机体的损害     

中药茵栀清肝汤对急性病毒性肝炎患者血清C-反应蛋白、超氧化歧化酶及丙二醛的影响

 目的 研究中药茵栀清肝汤对急性病毒性肝炎患者的治疗作用和对C反应蛋白、超氧化歧化酶及丙二醛的影响.方法 80例急性病毒性肝炎患者随机分为对照组、还原型谷胱甘肽组和中药治疗低、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤1g/kg、2g/kg,1/d口服,共15 d.对照组、还原型谷胱甘肽组和中药治疗组均给予护肝治疗.治疗前后留取血清标本,检测肝功能;测定血清CRP、SOD及MDA的含量.结果 中药茵栀清肝汤治疗组患者血清AST、ALT水平较对照组显著降低(P＜0.05),对急性病毒性肝炎患者血清SOD活性有明显的升高作用(P＜0.05),并降低血清CRP、MDA的含量(P＜0.05).上述各项指标在中药茵栀清肝汤高剂量治疗组与还原型谷胱甘肽组之间对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 茵栀清肝汤具有治疗急性病毒性肝炎患者的作用,其机制可能和抗氧化应激反应,维护体内CRP、SOD及MDA平衡有关.     

海水浸泡诱导小鼠肺组织氧自由基的改变及其防护的研究

目的：观察海水浸泡条件下，小鼠肺组织氧自由基的改变及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的防护作用。方法：选用１２０只小鼠，随机分组，检测其ＳＯＤ活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果：除未注射ＳＯＤ的小鼠，在海水浸泡２０分钟组ＳＯＤ活性稍高且无统计学意义外，其余各组ＳＯＤ活性均较相应对照组低，并均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），而ＭＤＡ含量变化则相反。注射ＳＯＤ小鼠浸泡不同时间后，其各时间点ＳＯＤ活性均较未注射ＳＯＤ小鼠者高，而ＭＤＡ含量变化则相反并与注射ＳＯＤ的剂量有关。结论：海水浸泡可诱导小鼠肺组织氧自由基的改变，并有可能引起肺组织损伤，而注射ＳＯＤ对小鼠肺组织氧自由基的改变有防护作用。因此，为加强对海水浸泡伤害的防护，使用ＳＯＤ制剂值得推荐。     

实验性动脉粥样硬化对红细胞变形性、膜脂质及脂质过氧化物的影响

用食饵性高血脂及食饵性高血脂加免疫性动脉内皮损伤的方法建立兔动脉粥样硬化模型,观察到随着动脉粥样硬化形成,红细胞变形性降低,红细胞膜胆固醇及磷脂含量增高,红细胞膜及血清脂质过氧化物含量增高,而红细胞超氧化物歧化酶活力降低.这些损害与动脉粥样硬化病变的发生和发展有着密切的关系.     

多巴胺转运蛋白显像剂18F-FP-β-CIT制备与分布

目的　探讨简易制备和纯化多巴胺转运蛋白 (DAT)显像剂1 8F N (3 氟丙基 ) 2 β 甲酯基 3β (4′ 碘苯基 )去甲基托烷 (1 8F FP β CIT)的方法 ,进行大鼠脑内分布研究。方法　采用一步法标记 ,在氨基聚醚 (Kryptofix 2 2 2 )催化下 ,标记前体化合物N 3 (甲磺酰氧基丙基 ) 2 β 甲酯基 3β (4 碘苯基 )去甲基托烷 (MsOP CIT)直接与K1 8F在乙腈溶液中反应 ,生成1 8F FP β CIT ,用Sep PakSiO2 小柱分离纯化。大鼠给药后于不同时间处死 ,分离脑组织 ,分别称重后测定放射性计数。结果　1 8F FP β CIT总放化产率约为 10 % ,放化纯 >95 % ,纯化无需制备型高效液相色谱。总合成时间为 6 0～ 80min。药物能迅速被脑组织摄取 ,后不断清除 ,5和 180min时全脑摄取量 (%ID)分别为 1.4 9和 0 .17。纹状体放射性摄取大于其他区域 ,其与小脑的比值在 5、30、6 0、12 0和 180min时分别为 1.75、3.38、3.73、3.71和 3.2 0。结论　一步法可简便制得1 8F FP β CIT。     

载药肿瘤微血管栓塞颗粒制备及其抗肿瘤作用初探

目的 制备加载化疗药物的纳米微粒,研究其性质及体外释药特点,探讨体外对人原代肝癌细胞的毒性作用,为用于临床肿瘤微血管介入栓塞提供理论依据.方法 以盐酸吉西他滨-复方甘草酸苷共聚物为药物载体,加载化疗药物多柔比星制备载药纳米微粒.扫描电镜观察微粒形态,纳米粒度电位仪检测微粒粒径分布及电位,高效液相色谱法计算载药率及包封率,透析袋扩散法作体外释放动力学试验,体外考察纳米药物稳定性及释药性能.CCK-8法检测纳米药物在体外对人原代肝癌细胞的毒性作用.结果 本法制备的载药纳米微粒外观呈圆球形,平均粒径(62.83±5.19) nm,平均电位-17.9 mV;载药率、包封率分别为3.16％、66.27％;有良好的缓释特性,对人原代肝癌细胞生长有明显抑制作用.结论 本法制备的载药纳米微粒具有较好的药物缓释性及抗肿瘤效应,是一种具有良好应用前景的抗肿瘤纳米药物.