妍婷颗粒对LPS诱导小鼠脾细胞产生IL-1β的影响

目的研究中药复方妍婷颗粒对脂多糖（LPS）诱导小鼠脾细胞产生白介素-1β（IL-1β）的影响,初步探讨妍婷颗粒对慢性盆腔炎免疫调节的内在机制。方法对经LPS诱导的小鼠脾细胞给予不同浓度妍婷颗粒含药血清进行干预,用ELISA法检测上清液中IL-1β含量,用RT-PCR法检测细胞中IL-1βmRNA的表达。结果①正常小鼠脾细胞合成和分泌少量IL-1β,经LPS诱导后IL-1β分泌量明显升高（P〈0.01）,IL-1βmRNA表达增强。②不同浓度妍婷颗粒干预呈剂量依赖方式降低LPS诱导的小鼠脾细胞IL-1β的分泌量与表达（P〈0.01）。结论妍婷颗粒具有抑制LPS刺激小鼠脾细胞产生IL-1β的作用,据此推测妍婷颗粒抗炎、免疫调节作用机理可能与其抑制脂多糖介导的IL-1β释放有关。     

桃红四物汤含药血清对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞TNF-α、MCP-1和IL-1β表达的影响

目的:研究桃红四物汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导刺激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。方法:SD大鼠灌胃给予桃红四物汤提取液(生药1.75 g·m L-1),每天2次,按10 m L·kg-1连续给药3d后,制备桃红四物汤含药血清。MTT法检测桃红四物汤含药血清(终浓度为5%、10%和15%)预处理对LPS诱导细胞生存率减少的作用;real-time RT-PCR检测TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达情况;Western Blot方法检测MCP-1和NFκB蛋白表达;检测活性氧(ROS)含量,研究桃红四物汤含药血清对HUVEC抗氧化能力的影响。结果:与空白血清对照组比较,经LPS(1μg·m L-1)刺激后细胞ROS含量明显增高而生存率显著降低,同时细胞炎性因子TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达增高;含药血清组可显著提高HUVECs活力、降低ROS含量和TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA表达。结论:桃红四物汤含药血清对LPS诱导的HUVECs损伤有显著地保护作用。     

解毒祛瘀滋阴方冻干粉和含药血清对小鼠单核巨噬细胞的影响

目的探讨解毒祛瘀滋阴方冻干粉与含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症信号通路的影响。方法体外培养RAW264.7细胞,随机分为对照组、LPS组、解毒祛瘀滋阴方含药血清组、冻干粉组、LPS加含药血清组及LPS加冻干粉组。干预24 h后,采用CCK-8法筛选含药血清和冻干粉的最佳浓度并检测二者对细胞活力的影响;采用ELISA法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;采用q RT-PCR法检测核转录因子-κB(NF-κB)、TNF-αm RNA的表达;采用Western blotting法检测NF-κB蛋白表达水平;采用LC-MS检测解毒祛瘀滋阴方含药血清中的有效成分。结果与对照组比较,LPS刺激组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平显著升高(P0.05),含药血清组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平较冻干粉组降低明显(P0.05);与LPS组比较,LPS加含药血清组TNF-α炎性因子水平、NF-κB、TNF-αm RNA表达水平和NF-κB蛋白表达水平降低较LPS加冻干粉组明显(P0.05);解毒祛瘀滋阴方含药血清中检测到芍药苷和阿魏酸。结论解毒祛瘀滋阴方冻干粉和含药血清均具有抑制炎症信号通路的作用。     

二冬膏对LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6及AQP1的影响

目的观察二冬膏对脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及水通道蛋白1(AQP1)的影响,并探讨可能的作用机制。方法以二冬膏低、中、高剂量灌胃大鼠,采集二冬膏含药血清。以空白血清为对照,考察二冬膏含药血清对LPS诱导小鼠肺泡巨噬细胞MH-S的影响。MTT法检测MH-S细胞存活率,一氧化氮(NO)测定试剂盒检测NO的含量,ELISA和RT-PCR法检测TNF-α、IL-6及AQP1的水平,Western blotting法检测MH-S细胞中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)及AQP1的水平。结果二冬膏各剂量组在干预24 h内对MH-S细胞的存活率没有明显差异。与模型组相比,二冬膏含药血清能剂量依赖性地降低NO、TNF-α及IL-6的分泌量,明显抑制TNF-α和IL-6 mRNA的水平(P 0.05或P 0.01),显著促进AQP1 mRNA的表达(P 0.05或P 0.01);能明显下调TLR4、MyD88及NF-κB p65蛋白的水平(P 0.05或P 0.01),上调AQP1蛋白的水平(P 0.01)。结论二冬膏含药血清能够通过上调AQP1,抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,从而抑制炎性因子的表达及释放,发挥抗炎作用。     

小钻木脂素类化合物戈米辛R的体外抗炎机制研究

目的 通过脂多糖(LPS)诱导活化小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7建立炎症模型,探讨小钻木脂素类化合物戈米辛R对炎症细胞增殖及炎症因子分泌的影响,评价其抗炎活性及机制。方法 采用MTT比色法检测经LPS诱导的RAW264.7细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC₅₀);采用ELISA法检测细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子含量;利用RT-PCR法检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IκB-α、NF-κB p65的mRNA表达量;Western blot法检测细胞IκB-α及NF-κB p65蛋白表达量。结果 与LPS模型组比较,戈米辛R可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞增殖;降低细胞分泌TNF-α、IL-1β及IL-6的含量;升高LPS所致降低的IκB-α mRNA的表达量同时降低LPS引起升高的TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65的mRNA表达量;升高IκB-α并降低NF-κB p65的蛋白表达量,显示出良好的剂量依赖性,具有统计学差异(P<0.05)。结论 戈米辛R可通过抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65的mRNA和NF-κB p65蛋白的表达,增加IκB-α mRNA和IκB-α蛋白的表达,减少致炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的释放,从而发挥显著抗炎活性。     

黄连解毒汤含药血清对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症因子影响研究

目的:观察黄连解毒汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响。方法:以大、中、小剂量黄连解毒汤水煎剂灌胃SD大鼠制备含药血清,采用MTT法观察含药血清对细胞增殖的影响,选择各剂量浓度为20%的含药血清体外干预LPS刺激的巨噬细胞;采用Griess法检测NO释放量,采用ELISA法检测细胞上清液中TNF-α及IL-6含量。结果:采用LPS刺激细胞后,引起NO、TNF-α及IL-6因子的高表达,与正常对照组比较差异具有统计学意义(P0.05);采用黄连解毒汤含药血清干预后,可明显抑制NO、TNF-α及IL-6因子的高表达,与模型组比较差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:黄连解毒汤含药血清可抑制LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能是该方防治动脉粥样硬化的重要机制。     

红鱼眼不同提取物含药血清对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的影响

[目的]研究红鱼眼不同极性部位提取物含药血清对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞炎症的影响。[方法]采用噻唑蓝（MTT）法检测红鱼眼不同极性部位提取物含药血清对RAW264.7细胞活力的影响;采用脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞建立炎症模型,采用MTT法检测红鱼眼不同极性部位提取物含药血清对炎症细胞增殖的影响,并用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测细胞上清液中一氧化氮（NO）、白介素1β(1L-1β)、白介素6(1L-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。[结果]在6～12 h培养时间内,除红鱼眼水提取物含药血清外,其余不同极性部位提取物含药血清对RAW264.7细胞活力均无明显影响;与LPS模型组比较,红鱼眼不同极性部位提取物组各培养时间段吸光度（OD）值和细胞存活率明显提高（P<0.01）;LPS刺激细胞后可引起NO、IL-1β、IL-6、TNF-α的高表达（P<0.05或P<0.01）,经红鱼眼不同极性部位提取物含药血清干预后,乙酸乙酯提取物组、石油醚提取物组、水提取物组的NO、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著下降（P<0....     

三角风炉抗炎镇痛及对Raw264.7细胞的体外抗炎活性

目的:研究三角风炉(PDW)体内抗炎镇痛及对脂多糖(LPS)诱导Raw264.7细胞的体外抗炎活性。方法:PDW抗炎作用采用二甲苯致小鼠耳肿胀法评价,其镇痛作用采用热板法和醋酸致小鼠扭体法评价。体外抗炎活性通过ELISA法测定脂多糖(LPS)诱导Raw264.7细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。结果:PDW能有效缓解小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀,明显提高小鼠痛阈值,并显著减少醋酸致小鼠扭体次数。PDW对LPS诱导Raw264.7细胞中TNF-α的产生具有明显抑制作用;结论:PDW具有较好的体内抗炎镇痛作用及对LPS诱导Raw264.7炎性细胞具有体外抗炎活性,为进一步研究PDW治疗痛风性关节炎作用机制提供一定的科学依据。     

吉祥草鲜、干品挥发油对LPS诱导的16-HBE细胞炎症的作用及机制研究

目的:研究吉祥草鲜、干品挥发油对脂多糖(LPS)诱导人支气管上皮细胞(16-HBE)炎症的作用及其机制。方法:MTT法检测各组药物对细胞活力的影响;ELISA法筛选LPS最佳诱导浓度和时间,检测给药12 h后各组上清液中IL-6、TNF-α的分泌量;qPCR法检测各组细胞内IL-6、TNF-α、iNOS mRNA表达;Western blot法分析各组细胞P38MAPK、p-P38MAPK、IκBα、p-IκBα、NF-κBP65、p-NF-κBP65蛋白表达。结果:与空白对照组比较,LPS刺激后上清液中IL-6、TNF-α的分泌量显著升高(P0.001),表明LPS刺激16-HBE产生炎症,确定最佳刺激方案是10 mg/L LPS连续刺激12 h;与模型组比较,实验组IL-6、TNF-α显著降低,细胞内IL-6、TNF-α、iNOS mRNA的表达被抑制,P38、IκBα、P65蛋白的表达显著升高,p-P38、p-IκBα、p-P65蛋白表达显著降低(P0.05～P0.001)。结论:吉祥草鲜、干品挥发油均可通过抑制MAPK和NF-κB信号通路上关键蛋白的磷酸化来阻碍通路的活化,从而下调下游相关炎症因子的表达,发挥抗炎活性。     

三七总甙对病毒性心肌炎小鼠TNF-α的影响

目的:探讨三七总甙对VMC的作用及其对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法:腹腔注射CVB3建立VMC小鼠动物模型.分组给药,观察小鼠心肌炎细胞浸润、心肌坏死的情况及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和心肌TNF-α mRNA表达.结果:三七总甙干预组小鼠心肌的炎细胞浸润和心肌坏死较VMC组明显减轻,三七总甙干预组TNF-α mRNA表达及血清TNF-α水平明显低于VMC组.结论:三七总甙对VMC有治疗作用,减低TNF-α水平可能是其治疗VMC的机制之一.     

两头尖活性组分BU-6E对LPS诱导体内外炎症模型抗炎作用研究

目的:LPS诱导体内外炎症模型,研究两头尖活性组分BU-6E的抗炎作用。方法:体外:脂多糖(LPS)诱导小鼠RAW264.7细胞构建炎症模型,MTT法检测BU-6E对RAW 264.7细胞增殖的影响,Griess法检测LPS诱导的细胞上清中一氧化氮(NO)含量,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌量;体内:BALB/c小鼠灌胃给药7天腹腔注射LPS构建炎症模型,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量。结果:体外:BU-6E在25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml能够显著的抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞增殖水平,可以极显著的抑制LPS诱导的NO的释放,且无明显细胞毒性;BU-6E可减少炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌,且呈现剂量依赖关系;体内:与模型组相比,BU-6E组的TNF-α、IL-1β的分泌呈极显著性减少,IL-6的分泌呈显著性减少。结论:BU-6E可以抑制LPS诱导的NO释放以及炎症因子的分泌,在体外、体内均有一定的抗炎活性。     

五灵胶囊对脂多糖诱导枯否细胞内核转录因子-κB表达的作用

目的:通过体内、体外实验探讨五灵胶囊(WL)对免疫性肝脏炎症反应的作用机制。方法:制备卡介苗(BCG)+免疫佐剂+脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤模型,WL灌胃给药12d,处死小鼠分离血清并制备肝组织蛋白;予大鼠WL 10、6.25g/kg灌胃4d,腹主动脉取血并制备含药血清;另取SD大鼠分离原代肝细胞和原代枯否细胞(KCs);采用Transwell小室下层培养KCs,含药血清-KCs条件培养上清对小室上层肝细胞作用。酶法测定免疫性肝损伤小鼠血清AST、ALT及条件培养上清中AST、ALT和LDH-L活性。取KCs培养成单层并同步化24h,PDTC和WL分别干预KCs 24h,再加入60μg/L的LPS诱导12h,Real-time PCR检测LPS诱导KCs表达MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA水平,Western Blot检测免疫性肝损伤肝组织中和体外培养KCs表达TNFRⅠ、NF-κBs亚蛋白及IκKβ、IκB。结果:WL明显降低免疫性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性并抑制肝组织内活化NF-κB信号通路;含药血清Ⅰ、Ⅱ组明显抑制活化KCs分泌促炎因子损伤肝细胞,WL抑制LPS诱导KCs表达NF-κBs信号通路蛋白,下调MCP-1、IL-1、TNF-αmRNA表达。结论:WL治疗慢性肝病炎症反应的作用机制与下调活化NF-κBs信号通路蛋白,阻滞KCs释放过量促炎因子所致肝细胞损伤相关。     

黄连解毒汤含药血清对脂多糖诱导BV2小胶质细胞神经炎症反应的保护作用

目的探讨黄连解毒汤含药血清对神经炎症反应的保护作用和可能机制,为黄连解毒汤在阿尔茨海默病的防治方面提供依据。方法 LPS诱导BV2小胶质细胞活化建立体外神经炎症模型,用Griess法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测黄连解毒汤含药血清对体外神经炎症模型产生一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制作用;用蛋白质印迹法(Western blotting)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测黄连解毒汤含药血清对LPS诱导BV2小胶质细胞TLR4、COX-2蛋白和mRNA的表达。结果不同浓度黄连解毒汤含药血清(5%、10%、20%)能抑制炎症因子NO和TNF-α的产生,且在实验浓度范围内抑制作用呈浓度依赖性;同时对COX-2 mRNA和蛋白的表达有抑制作用,其作用机制可能与TLR4的表达相关。结论黄连解毒汤含药血清5%～20%浓度范围内可以抑制LPS诱导BV2小胶质细胞活化产生的炎症因子,其发挥药效的分子机制可能与TLR4信号通路有关。     

芍药苷减轻LPS致小鼠急性脑损伤的抗炎机制

目的:探讨芍药苷(Pae)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性炎性脑损伤的保护作用。方法:将雄性Balb/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及芍药苷低、高剂量组,腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。7 d后除正常对照组外,其余各组均腹腔注射LPS造模,6 h后取材。ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β含量;比色法检测脑组织中髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平;RT-PCR法检测脑组织中TNF-α、IL-1β及i NOS的mRNA表达;Western blot法检测脑组织中IκB-α、NF-κB、P-IκB-α蛋白表达水平。结果:芍药苷可降低内毒素致急性脑损伤小鼠血清TNF-α和IL-1β含量,降低脑组织中MPO、i NOS活性及NO含量;降低脑组织中TNF-α、IL-1β和i NOS mRNA表达;可使脑组织中IκB磷酸化蛋白表达减少。结论:芍药苷能减轻LPS诱导的小鼠急性炎症脑损伤,其机制可能与抑制NF-κB的核转位,从而抑制炎症因子的表达有关。     

石菖蒲挥发油微乳对脂多糖诱导大鼠原代神经胶质细胞炎性反应的抑制作用及其机制

目的:研究石菖蒲对脂多糖(LPS)诱导的大鼠原代神经胶质细胞炎性反应的抑制作用,探索其对神经系统保护作用的可能机制。方法:分离提取大鼠原代神经胶质细胞,用LPS刺激2h后分别加入不同浓度的石菖蒲挥发油微乳含药血清,采用硝酸还原酶法(Griess法)检测石菖蒲对一氧化氮的影响,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中IL-1β、IL-8、TNF-α水平,通过实时逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)测定细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, i NOS)m RNA表达。结果:脂多糖(LPS)能够激活神经胶质细胞,不同浓度的石菖蒲含药血清在不影响细胞存活率的情况下,可以显著降低细胞培养上清液中NO、IL-1β、IL-8、TNF-α水平,细胞内i NOS m RNA表达也明显减少(P0.05)。结论:石菖蒲对神经系统的保护机制可能与抑制胶质细胞炎症有关。     

川椒方含药血清对RBL-2H3细胞IL-4、TNF-α的影响

目的探讨川椒方治疗变态反应性结膜炎可能的作用机制。方法实验分为空白组、模型组、阴性对照组、阳性对照组(酪氨酸激酶抑制剂,PP2)、川椒方治疗高、中、低剂量组共7组,观察川椒方含药血清对大鼠嗜碱性白血病细胞(rat basophilic leukemia,RBL-2H3)白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。川椒方高、中、低剂量含药血清组按筛选所得浓度和作用时间每孔分别给予含药血清40μL;PP2组于加抗原前30 min给予终浓度为1μM的PP2 40μL;阴性对照组于加抗原前2h给予10%空白血清40μL,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中IL-4、TNF-α的分泌量,Real-Time PCR检测IL-4、TNF-α mRNA的表达。结果与空白组相比,模型组和阴性对照组肥大细胞脱颗粒明显(P0.01);RBL-2H3细胞分泌IL-4和TNF-α增多(P0.01);IL-4和TNF-α mRNA表达增高(P0.01)。与模型组和阴性对照组比较,川椒方各浓度组和PP2组肥大细胞脱颗粒现象明显抑制(P0.01);RBL-2H3细胞分泌IL-4和TNF-α减少(P0.01);IL-4和TNF-α mRNA表达下降(P0.01),且川椒方抑制肥大细胞脱颗粒作用与浓度呈正相关。结论稳定肥大细胞,抑制其脱颗粒,减少炎症因子释放可能是川椒方治疗变应性结膜炎的作用机制。     

生半夏及其炮制品对小鼠主动脉内皮细胞炎性因子分泌的影响

目的:研究生半夏及其炮制品清、姜、法半夏对小鼠主动脉内皮细胞(MVecs)炎性因子分泌的影响.方法:分别用石油醚、乙酸乙酯、95％乙醇、纯水提取半夏及其炮制品,将其作用于脂多糖(LPS)刺激诱导的小鼠主动脉内皮细胞,设置正常组(不给药也不加LPS刺激)、对照组(不给药,加入10 mg ·L-1LPS)和实验组(均含与对照组相同剂量的LPS,含不同溶剂半夏提取物,剂量分别为0.1,1,10,20 mg·L-1).24 h后酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定培养上清液中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果:与对照组相比,生半夏各提取物组分均能降低炎性因子的分泌,各剂量均有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05).生半夏各组分对细胞分泌TNF-α的抑制作用呈一定量效关系,在20 mg·L-1剂量下IL-6,TNF-α分泌量最低.不同半夏炮制品的各组分(20 mg·L-1剂量组)均能降低TNF-α分泌量;清半夏石油醚组分在20 mg·L-1降低IL-6的作用最强.生、清、姜、法半夏水提液均能降低IL-6,TNF-α的分泌(P＜0.05),其中清半夏作用最强.结论:半夏对小鼠主动脉内皮细胞炎性因子的分泌有一定抑制作用,作用强度与半夏的炮制和提取溶剂有关.     

山蜡梅叶颗粒对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应及变应性鼻炎小鼠炎症的影响北大核心CSCD

目的:探讨山蜡梅叶颗粒对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及卵清蛋白(OVA)诱导小鼠的变应性鼻炎(Allergic Rhinitis, AR)的治疗作用。方法:以LPS与IFN-γ联合刺激RAW264.7细胞诱导炎症模型。采用MTT法比较细胞活力;采用比色法(Griess)比较细胞上清液中一氧化氮含量的变化;采用ELISA法比较细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量的变化。将SPF级BALB/c小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、鼻炎灵片0.5 g/kg组、山蜡梅叶颗粒3.9、7.8、15.6 g/kg组。除正常对照组外,其余各组利用OVA建立小鼠变应性鼻炎模型。造模期间观察小鼠变应性鼻炎行为学指标,给药结束后取材,使用吉姆萨染色测定小鼠全血中嗜酸粒细胞的数目;HE染色比较小鼠鼻黏膜的形态结构差异;ELISA法检测小鼠血清中免疫球蛋白IgE含量及小鼠鼻腔灌洗液中TNF-α及IL-6的含量。结果:在LPS诱导RAW264.7细胞的炎症反应试验中,与空白对照组比较,模型对照组RAW264.7细胞NO含量,炎症因子TNF-α和IL-6含量显著升高(P<0.01);与模型对照组相比,山蜡梅叶颗粒0.25、0.5、1 mg/mL组均能显著抑制NO分泌,降低TNF-α和IL-6的含量(P<0.01)。在OVA诱导的小鼠变应性鼻炎的研究中,与正常对照组比较,模型对照组小鼠行为学评分、嗜酸性粒细胞数、血清中IgE含量、鼻腔灌洗液中TNF-α和IL-6含量明显升高(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,山蜡梅叶颗粒各剂量组给药后小鼠行为学评分、嗜酸性粒细胞数、血清中IgE含量、鼻腔灌洗液中TNF-α和IL-6含量明显降低(P<0.05或P<0.01),明显改善OVA模型小鼠鼻黏膜充血、水肿、炎细胞浸润状态。结论:山蜡梅叶颗粒对变应性鼻炎小鼠的炎症反应起到了明显的抑制作用,且这种作用可能与其抑制鼻炎发生过程中促炎因子的释放有关。     

独活挥发油对N-脂肪酰基乙醇胺水解酶的抑制作用及抗炎作用研究

目的:研究独活挥发油对内源性大麻素水解酶N-脂肪酰基乙醇胺水解酶(N-acylethanolamine-hydrolyzing acid amidase,NAAA)水解活性的影响以及对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型的抗炎作用.方法:采用水蒸气蒸馏法提取独活挥发油,GC-MS检测化学成分;采用LC-MS检测NAAA水解活性;采用LPS诱导RAW264.7细胞建立细胞炎症反应模型;采用LC-MS检测细胞内棕榈酸乙醇胺(N-palmitoylethanolamine,PEA)水平;采用实时定量PCR检测肿瘤坏子因子-α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TNF-α含量;采用Griess法检测一氧化氮(NO)含量.结果:独活挥发油可抑制NAAA水解活性,升高LPS诱导的RAW264.7细胞内PEA水平;独活挥发油可下调LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子TNF-α,iNOS,IL-6 mRNA表达;独活挥发油可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α和NO释放.结论:独活挥发油能够抑制NAAA水解活性,升高细胞内PEA水平,降低炎症因子表达,具有一定的抗炎作用.     

化脂复肝颗粒通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3减轻Kupffer细胞炎症改善非酒精性脂肪性肝病机制研究

目的:探讨化脂复肝颗粒在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中对Kupffer细胞(KCs)TLR4/MyD88/NF-κB/NLRP3信号通路的影响。方法:将分离培养的KCs随机分为空白组、LPS干预组、LPS+空白血清组、LPS+化脂复肝组、高糖+对照组、高糖+LPS干预组、高糖+LPS+空白血清组、高糖+LPS+化脂复肝组,LPS干预浓度为100 ng/ml,高糖干预为于KCs培养基中另加入葡萄糖30 mmol/L。用CCK-8法检测各组KCs增殖情况; 酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组KCs培养基上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β的含量; 反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组KCs中TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β的基因表达情况。结果:CCK-8检测显示,空白及高糖培养对照组KCs细胞不断增殖,长势良好; LPS+化脂复肝组与高糖+LPS+化脂复肝组KCs缓慢增殖,非高糖组KCs均较含高糖组KCs增殖速率更快; 而LPS或高糖+LPS诱导模型组及各加空白血清组KCs于第6小时开始出现凋亡,含高糖组KCs均较非高糖组KCs凋亡速率更快。非高糖各组与含高糖各组中促炎因子TNF-α、IL-1β含量以及炎症相关基因(TLR4、MyD88、NLRP3、Caspase-1、NF-κB/p-65、TNF-α、IL-1β、IL-18)表达水平均呈相同变化趋势,且含高糖各组上述促炎因子及炎症相关基因表达水平均较非高糖组高。以非高糖组为例,LPS诱导模型组和LPS+空白血清组的促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著高于对照组(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著高于对照组(P<0.05),而LPS诱导模型组与LPS+空白血清组间上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05); 与LPS诱导模型组或LPS+空白血清组比较,LPS+化脂复肝组促炎因子TNF-α与IL-1β含量均显著降低(P<0.05),炎症相关基因TLR4、MyD88等的mRNA表达水平也均显著降低(P<0.05)。结论:化脂复肝颗粒含药血清可改善KCs活力,有效减轻KCs炎症反应,减少KCs细胞焦亡的发生,具有显著的抗炎、抗氧化损伤及保肝作用,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65/NLRP3信号通路的激活相关。