细胞外信号调节激酶在多囊卵巢综合征患者子宫内膜中的活化及意义

目的 通过测定子宫内膜中胰岛素的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路中ERK1/2(表示ERK1和ERK2,下同)的表达及其活化程度,探讨其在多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜增生及癌变形成中的作用及意义,以及影响其表达及活化程度的因素.方法 选择2007年1月-2008年6月天津医科大学总医院行诊断性刮宫的PCOS患者52例(PCOS组),相匹配的非PCOS患者(良性卵巢肿瘤)32例为对照组.测定所有观察对象的空腹血糖及胰岛素水平;所有观察对象均行子宫内膜病理检查,按子宫内膜病理结果将PCOS组患者分为子宫内膜增生及癌变组(19例)和正常子宫内膜组(33例);根据是否存在胰岛素抵抗将PCOS组患者分为胰岛素抵抗组(38例)和非胰岛素抵抗组(14例).蛋白印迹法(western blot)检测子宫内膜中ERK1/2及其活化形式--磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达水平.结果 (1)PCOS组患者子宫内膜中p-ERK1/2蛋白的表达水平[(61±13)%]高于对照组[(44±10)%],两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)子宫内膜增生及癌变组子宫内膜中p-ERK1/2蛋白的表达水平[(70±11)%]高于正常子宫内膜组[(55±10)%],两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);胰岛素抵抗组子宫内膜中p-ERK1/2蛋白的表达水平[(63±13)%]高于非胰岛素抵抗组[(55±7)%],两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)空腹胰岛素水平、胰岛素曲线下面积、体质指数与PCOS组患者子宫内膜中p-ERK蛋白的表达水平相关,相关系数分别为0.447、0.456、0.381(P均＜0.01).结论 PCOS患者子宫内膜存在MAPK/ERK信号通路的过度活化,与子宫内膜增生及癌变的发生有关;胰岛素抵抗及高胰岛素血症有促进ERK活化的作用.     

多囊卵巢综合征患者子宫内膜组织中胰岛素PI3K/Akt信号通路的活化及其意义

目的 通过分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜组织中胰岛素的磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路中Akt的表达及其活化程度,探讨PI3K/Akt信号通路活化在PCOS子宫内膜增生及癌变形成中的作用及意义,并分析影响该信号通路活化程度的因素.方法 选择2007年1月-2008年6月在天津医科大学总医院就诊的PCOS患者52例为PCOS组,非PCOS(输卵管因素不孕或卵巢良性肿瘤)患者32例为对照组;测定所有患者的血清生殖激素水平、空腹血糖及胰岛素水平,并取子宫内膜组织行病理检查;计算体质指数(BMI)、稳态模型评估法计算的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).对PCOS组患者根据病理检查结果分为正常子宫内膜、子宫内膜增生及癌变,根据是否存在胰岛素抵抗分为胰岛素抵抗和非胰岛素抵抗.蛋白印迹法检测子宫内膜组织中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达水平.结果(1)PCOS组患者子宫内膜组织中p-Akt蛋白的表达水平[(46±18)％]高于对照组[(33±9)％],两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)PCOS组子宫内膜增生及癌变患者子宫内膜组织中p-Akt蛋白的表达水平[(56±19)％]高于正常子宫内膜者[(31±12)％],两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);胰岛素抵抗患者子宫内膜组织中p-Akt蛋白的表达水平[(50±19)％]高于非胰岛素抵抗者[(34±10)％],两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)HOMA-IR、BMI与子宫内膜组织中p-Akt蛋白的表达水平呈正相关(r=0.400、0.326,P均＜0.05).结论 PCOS患者子宫内膜存在胰岛素PI3K/Akt信号通路的过度活化,该信号通路过度活化与PCOS子宫内膜增生及癌变有关.胰岛素抵抗、肥胖可能是影响子宫内膜组织中胰岛素PI3K/Akt信号通路过度活化的独立风险因素.     

胰岛素受体α、β及胰岛素受体底物-1在子宫内膜癌的表达及其临床意义

目的 探讨胰岛素受体α（IRα）、β（IRβ）及胰岛素受体底物-1（IRS-1）在子宫内膜癌的表达及其临床意义。方法 用免疫组织化学法检测10例正常子宫内膜：18例子宫内膜增生及57例子宫内膜癌组织中IRα、IRβ及IRS-1蛋白的表达。结果 IRα、IRβ、IRS-1的表达在10正常子宫内膜表达分别为80．00％（8／10）、60．00％（6／10）及70．00％（7／10）；在18例子宫内膜增生组织中分别为77．78％（14／18）、61．11％（11／18）及77．78％（14／18）；在子宫内膜癌组织中分别为47．37％（27／57）、54．39％（31／57）及63．16％（36／57）。IRα的表达在子宫内膜癌组织与正常子宫内膜组及子宫内膜增生比较差异有显著性（P〈0．05），其余差异无统计学意义（P〉0．05）；Ⅰ期子宫内膜癌组织中IRα的阳性表达率明显低于Ⅱ～Ⅳ期者（P〉0．05）；IRβ及IRS-1各组间的阳性表达率与Ⅱ～Ⅳ期者相近（P〉0．05）；IRS-1的阳性表达率Ⅰ期明显低于Ⅱ～Ⅳ期者（P〉0．05）；IRα、β、IRS-1蛋白的表达在子宫内膜癌G1—2与G3差异有显著性（P〈0．05），与肌层浸润深度及淋巴结转移与否差异无显著性（P〉0．05）。结论 IRα及IRS-1的表达与子宫内膜癌的期别有关，提示其表达的改变可能是子宫内膜腺癌发生的早期事件。     

多囊卵巢综合征大鼠脂肪组织中TNF-α的表达及其意义

目的研究由脱氢表雄酮（DHEA）诱导的多囊卵巢综合征（PCOS）SD大鼠动物模型的脂肪组织中TNF—α mRNA及蛋白的表达与其性激素变化及胰岛素抵抗（IR）的关系。方法以DHEA皮下注射21日龄SD雌性大鼠为研究组，观察其卵巢重量、光镜（HE染色）及透视电镜下改变，测定糖耐量、血清胰岛素、E2、T、P、PRL、FSH和LH水平，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法及Western Blot技术检测其脂肪组织中TNF—α mRNA和蛋白的表达。结果实验组卵巢重量显著高于对照组（P〈0．05），实验组卵巢呈多囊样改变而黄体形成比例减少；实验组血清T、E2、空腹血糖和胰岛素水平明显高于对照组（P分别〈0．001、〈0．05、〈0．001和〈0．05），空腹血胰岛素与空腹血糖乘积的倒数（1／FINS×FGC）显著高于对照组（P〈0．05）；PCOS大鼠白色脂肪组织中TNF—α mRNA及蛋白表达均显著高于对照组（P〈0．05）。结论DHEA诱导的P—COS大鼠动物模型与PCOS患者相似，且有IR现象；由白色脂肪组织分泌的TNF—α在PCOS的发生机制中起着部分调节作用，从而加重PCOS患者的胰岛素抵抗。     

多囊卵巢综合征子宫内膜局部胰岛素抵抗的研究

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜是否存在局部胰岛素抵抗(IR)。方法分离28例PCOS患者(PCOS组)和32例不孕症患者(对照组)的子宫内膜上皮和间质细胞并体外培养;采用葡萄糖氧化酶法测定PCOS子宫内膜细胞对葡萄糖的摄取量;应用免疫组化法检测胰岛素(Ins)、胰岛素受体(InsR)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在PCOS患者子宫内膜的表达。结果 PCOS组子宫内膜细胞葡萄糖摄取量与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);加入1×10-7mmol/L胰岛素后,PCOS组葡萄糖摄取量低于对照组(P0.05);PCOS肥胖及IR组葡萄糖摄取量低于非肥胖及非IR组(P0.05)。PCOS组子宫内膜Ins表达与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但InsR及GLUT4表达低于对照组(P0.05);PCOS肥胖和IR组子宫内膜InsR及GLUT4表达低于非肥胖和非IR组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 P-COS患者子宫内膜存在局部IR,肥胖及全身IR加重子宫内膜局部IR。     

凋亡调节基因Bcl-2,Bax在汉族和维族妇女子宫内膜异位症表达的对比研究

目的 检测凋亡调节基因蛋白Bcl-2，Bax在汉族和维吾尔族（维族）妇女子宫内膜异位症（EMs）中的表达，以探讨凋亡调节基因在子宫内膜异位症发病中的作用。方法 2004年11月～2006年1月，新疆医科大学第一附属医院应用免疫组化法，检测凋亡调节基因蛋白Bcl-2、Bax在无FAts妇女的正常子宫内膜与卵巢EMs患者异位、在位内膜中的表达。结果 Bcl-2、Bax主要定位于子宫内膜的腺上皮：①维、汉族对照组子宫内膜增生期Bcl-2的表达高于分泌期（P〈0．05），Bcl-2在EMs患者异位、在位内膜中的表达较无EMs者增强，差异有显著性意义（P〈0．05）；②Bax在维、汉族对照组子宫内膜增生期和分泌期都强表达，差异无显著性（P〉0．05）。在EMs患者，在位及异位内膜中表达比对照组子宫内膜低，差异有显著性（P〈0．05）。结论 卵巢EMs中凋亡调节基因的表达与无EMs者不同，促凋亡基因的表达减弱，抑制凋亡基因的表达增强，有利于异位内膜的种植生存和发展、凋亡基因蛋白Bcl-2与Bax在维族和汉族卵巢EMs的表达差异无显著性（P〉0．06）。     

Polo-样激酶1在子宫内膜异位症患者在位和异位子宫内膜中的表达

目的探讨Polo－样激酶1（PLK1）在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用逆转录（RT—PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blotting）及免疫组织化学的方法检测子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织29例和在位子宫内膜组织20例及正常子宫内膜组织30例中PLK1的表达。结果PLK1蛋白在内异症组增殖期异位（2．19±0．63）和在位子宫内膜组织（1．78±0．59）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（1．21±0．30）上的表达量（P〈0．05）。PLK1蛋白在内异症组分泌期异位（1．15±0．332）和在位子宫内膜组织（1．00±0．33）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（0．82±0．24）上的表达量（P〈0．05）。内异症组增殖期和分泌期异位和在位子宫内膜组织上PLK1的表达量比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论PLK1蛋白的高表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

Survivin蛋白在子宫内膜癌和子宫内膜复杂性增生中的表达及其临床意义

目的 研究凋亡抑制蛋白survivin在子宫内膜癌和子宫内膜复杂性增生中的表达差异以及在子宫内膜癌中表达与内膜癌预后相关因素的关系。方法 应用免疫组化SP法检测41例子宫内膜癌、26例子宫内膜复杂性增，丰和8例正常内膜标本中survivin蛋白的表达情况。结果 survivin蛋白在正常内膜没有表达。在子宫内膜癌中和子守内膜复杂性增生中的阳性表达率分别是85．3％和30．8％，两者的表达有明显的差异（P〈0．001），且子宫内膜癌组阳性细胞的染色强度明显比子宫内膜复杂性增生组强（P〈0．001）。41例子宫内膜癌中，survivin的表达与肿瘤细胞的组织学分级、肌层浸润及临床一病理分期呈正相关（P〈0．01、P〈0．001和P〈0．01）。结论 survivin蛋白与子宫内膜癌的发生有关，升且与子宫内膜癌的不良生物学行为有关，可为临床治疗提供有价值的信息，对估计预后有指导意义。     

糖耐量试验正常的多囊卵巢综合征患者子宫内膜胰岛素及其受体表达的研究

目的 :了解糖耐量正常的多囊卵巢综合征 (PCOS)患者子宫内膜局部胰岛素水平及其受体表达的情况 ,以了解它们在多囊卵巢综合征发病中的作用。方法 :采用免疫组化方法对口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)正常的PCOS患者子宫内膜石蜡标本进行研究。结果 :PCOS的子宫内膜大部分腺体发育均达到增殖中晚期的发育程度 ,其局部胰岛素水平及其受体表达均显著高于增殖早期对照组 (P <0 .0 1) ;其胰岛素水平与增殖中晚期对照组差异无显著性 (P >0 .0 5) ;PCOS组胰岛素受体表达则低于增殖晚期组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;增殖晚期对照组与增殖早中期对照组相比胰岛素及其受体差异有显著性(P <0 .0 1)。结论 :糖耐量试验正常的PCOS患者子宫内膜可能依然存在胰岛素抵抗现象 ,这种子宫内膜的胰岛素抵抗可能影响子宫内膜发育 ,因此 ,可能是PCOS妊娠率低及受孕后流产率高的原因之一。     

细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax在多囊卵巢综合征患者子宫内膜中的表达

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜中细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax的表达及其在PCOS患者子宫内膜病变中的意义。方法应用免疫组织化学SP方法,测定18例PCOS患者子宫内膜和27例月经周期正常、因输卵管不通或男性不育就诊的对照者子宫内膜（10例增殖期、17例分泌期）bcl-2和bax蛋白的表达。结果PCOS患者子宫内膜bcl-2表达较对照者增殖期和分泌期高（P＜0．05和P＜0．01）,但bax表达相似（p＞0．05）。结论PCOS患者子宫内膜bcl-2蛋白表达增高,与bax形成更多的异源二聚体,从而抑制PCOS子宫内膜凋亡,对其子宫内膜的异常增生改变起一定作用。     

糖代谢及IGF-1在18-甲基炔诺酮联合hCG致多囊卵巢大鼠的研究

目的:探讨皮下埋植18-甲基炔诺酮及注射hCG对大鼠糖代谢及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的影响。方法:30只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组皮下埋植18-甲基炔诺酮1mg,3d后皮下注射hCG1.5IU,bid×9d;对照组则仅注射生理盐水,9d后口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素(INS)测定;用免疫组化方法观察IGF-1。结果:实验组服糖后60min和120minINS和胰岛素/血糖(INS/GC)明显高于对照组,P<0.01;IGF-1在下丘脑和卵巢的分布及表达与对照组有差异。结论:18-甲基炔诺酮及注射hCG对大鼠糖代谢有影响,IGF-1可能参与了大鼠多囊卵巢的改变。     

resistin在妊娠期糖尿病患者胎盘组织的表达及意义

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织抵抗素(resistin)的表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的意义。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)检测18例妊娠期糖尿病患者(妊娠期糖尿病组)和18例正常晚期妊娠妇女(正常对照组)胎盘组织resistin mRNA和resistin蛋白的表达,同时检测体重指数(BMI)、空腹血糖水平(FPG)、空腹胰岛素水平(FINS)、血脂水平和胰岛素抵抗指数(HO- MA-IR)。结果:(1)GDM组甘油三酯(TG)、FPG、FINS及HOMA-IR的水平明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);(2)两组胎盘组织中均可检测到resistin mRNA和resistin蛋白表达。GDM组的resistin mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于对照组(P<0.01,P<0.05);(3)GDM组HOMA-IR水平与胎盘组织resistin mRNA表达水平(r=0.621,P<0.05)、resistin蛋白表达水平(r=0.739,P<0.01)及TG(r=0.786,P<0.01)呈正相关;GDM组TG水平与胎盘组织resistin mRNA表达水平(r=0.592,P<0.05)、resistin蛋白表达水平(r=0.546,P<0.05)呈正相关。正常妊娠组则无相关性。结论:胎盘组织分泌的resistin与GDM胰岛素抵抗密切相关,胎盘resistin表达异常可能参与了GDM的发病过程。     

多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗患者脂肪组织胰岛素受体底物2蛋白的表达及酪氨酸磷酸化的研究

目的检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者脂肪组织胰岛素受体底物(IRS)2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化的程度,探讨发生PCOS合并胰岛素抵抗(IR)的机制。方法采用蛋白印迹(Westernblot)法,检测PCOS合并IR患者19例(PCOS合并IR组)、PCOS非IR患者17例(PCOS非IR组)及因单纯子宫肌瘤行子宫切除术的患者20例(对照组)的IRS2蛋白的表达;并采用免疫组化技术,检测IRS2在脂肪组织中的分布;采用免疫沉淀及增强化学发光法,检测IRS2的酪氨酸磷酸化程度。结果(1)PCOS合并IR组、PCOS非IR组及对照组IRS2蛋白表达分别为115±026、113±026及100±025,3组比较,差异无统计学意义(P>005)。(2)PCOS合并IR组、PCOS非IR组及对照组IRS2蛋白酪氨酸磷酸化程度分别为077±016、091±025及100±012,3组比较,差异有统计学意义(P<005);PCOS非IR组与对照组比较,差异无统计学意义(P>005)。结论PCOS合并IR患者脂肪组织的IRS2蛋白酪氨酸磷酸化程度的降低,可能是发生IR的机制之一。     

宫颈鳞癌组织中AQP1和AQP4的表达及意义

目的:探讨水通道蛋白1、4(AQP1、AQP4)在宫颈鳞癌组织的表达及意义。方法:免疫组化染色检测AQP1和AQP4在20例正常宫颈组织、10例CINⅠ级、10例CINⅡ级、8例CINⅢ级组织及45例浸润性宫颈鳞癌组织的分布和表达特点。结果:AQP1主要于血管内皮细胞表达,它在正常宫颈组织、宫颈CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级组织及宫颈浸润性鳞癌组织的阳性表达指数分别为10.14±1.48、10.61±1.23、10.46±0.92、10.64±0.52和11.85±2.74,宫颈鳞癌组织AQP1表达明显高于正常组织(P<0.05),FIGOⅡ期宫颈鳞癌组织中AQP1的表达指数(13.15±2.38)明显高于I期(11.06±2.68)(P<0.05),肿瘤伴淋巴结转移者AQP1表达指数(13.37±2.91)明显高于淋巴结未转移者(11.30±2.50)(P<0.05);AQP4主要于鳞状上皮细胞以及肿瘤细胞表达,它在正常宫颈组织、宫颈CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级组织及宫颈鳞癌组织的阳性表达指数分别为3.26±0.99、3.79±1.22、3.68±1.47、3.92±1.48和4.23±2.03,宫颈鳞癌组织AQP4表达高于正常组织(P<0.05),淋巴结转移肿瘤组织AQP4表达指数(5.32±1.69)高于淋巴结未转移者(3.84±1.02)(P<0.05);AQP1和AQP4于肿瘤组织中表达无相关性(P>0.05)。结论:AQP1、AQP4过表达可能在宫颈癌变及进展过程中起重要作用,并分别通过增加血管内皮细胞和肿瘤细胞对水的通透性,促进肿瘤侵袭和转移。     

青春期多囊卵巢综合征患者临床特征分析

目的探讨青春期多囊卵巢综合征（PCOS）患者的临床特征。方法回顾性分析2003年1月～2006年5月我院收治的青春期PCOS患者58例的临床资料。结果青春期PCOS患者中,超重者占39．7%,肥胖者占31．0％,月经异常、痤疮、多毛和黑棘皮症发生率分别为87．9％、65．5％、56．9％和6．9％,痤疮和多毛评分明显增高（分别为1．60±1．36和2．16±1．98）,胰岛素抵抗发生率为12．7％。青春中期组与晚期组各项指标比较,差异无显著性（P〉0．05）。结论肥胖、高雄激素血症和胰岛素抵抗是青春期PCOS患者的主要临床特征,应作为青春期PCOS的高危因素在临床上引起重视。     

子宫内膜癌发生过程中自噬活性改变的初步探讨

目的:探讨正常子宫内膜、子宫内膜增生以及子宫内膜腺癌中自噬活性的变化。方法:收集2004年1月至2005年3月行子宫切除或诊断性刮宫的组织标本135例,其中正常子宫内膜43例,子宫内膜单纯性增生及复合性增生27例,子宫内膜不典型增生26例,子宫内膜腺癌39例。用免疫组化法检测全部组织中的Cathepsin-D和Rab7的表达。结果:(1)Cathepsin-D表达在正常子宫内膜增生期明显高于分泌期(0.244±0.091 vs 0.141±0.071,P<0.05);Rab7表达呈同一趋势(0.197±0.084 vs 0.114±0.060,P<0.05);(2)子宫内膜单纯性、复合性增生组的Cathepsin-D表达明显高于子宫内膜不典型增生组,子宫内膜腺癌细胞中Cathepsin-D表达则明显减弱(0.561±0.168 vs0.311±0.089 vs 0.055±0.044,P<0.001);Rab7的表达呈现与Cathepsin-D同一趋势(0.508±0.152 vs 0.281±0.076 vs 0.026±0.019,P<0.001)。结论:正常增生期子宫内膜细胞的自噬活性比分泌期子宫内膜细胞明显增强,子宫内膜增生的自噬活性比正常子宫内膜强,而子宫内膜腺癌细胞自噬活性明显减弱,提示自噬活性的改变可能参与了子宫内膜样腺癌的发生。     

单酰甘油脂肪酶在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:研究单酰甘油脂肪酶(MAGL)在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化法检测18例正常子宫内膜、32例单纯性及复杂性增生子宫内膜、12例不典型增生子宫内膜和78例子宫内膜癌组织蜡块标本中MAGL表达,并分析MAGL的表达与临床病理指标之间的关系。对78例子宫内膜癌患者进行术后随访,分析MAGL的表达与预后的关系。结果:正常子宫内膜、单纯性及复杂性增生子宫内膜、不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌组织中MAGL表达水平分别为0.445±0.313、0.878±0.529、1.461±0.573和0.658±0.655,4组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。MAGL表达与患者的手术-病理分期、肌层浸润深度、妊娠次数、绝经延迟及体重指数有关(P0.05),MAGL表达与患者的体重指数呈正相关(r=0.236,P0.01);MAGL的表达与子宫内膜癌的分化程度、宫颈受累情况、组织学类型、淋巴转移、腹腔积液细胞学及患者是否合并高血压或糖尿病无关(P0.05)。与低值组比较,MAGL高值组的预后有较好的趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:MAGL的表达与子宫内膜癌的患病风险及侵袭性密切相关,MAGL可能在子宫内膜癌的发生发展中起到重要作用,有可能成为预防和治疗子宫内膜癌的新靶点。