Th_2细胞因子在日本血吸虫小鼠肝脏中的变化及其与肝纤维化的比较

为探讨Ｔｈ２细胞因子在感染日本血吸虫小鼠肝脏中的变化及其在肝纤维化中的意义，采用ＡＢＣ免疫组化法，ＶＧ染色及多媒体病理图文定量分析，研究感染后ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１０和肝内胶原纤维的变化。结果发现：小鼠肝脏ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１０随感染时间延长而明显升高，肝内胶原纤维化程度随感染时间延长而逐渐增多和加强，与Ｔｈ２细胞因子表达呈显著正相关。提示小鼠肝脏是感染血吸虫后机体免疫应答场所之一，Ｔｈ２细胞因子在血吸虫肝脏肉芽肿及纤维化形成中起重要介导作用。     

Th2细胞因子在日本血吸虫小鼠肝脏中的变化及其与肝纤维化的比较

为探讨Th2细胞因子在感染日本血吸虫小鼠肝脏中的变化及其在肝纤维化的意义,采用ABC免疫组化法,VG染色及多媒体病理图文定量分析,研究感染后IL-4、IL-5、IL-10和肝内胶原纤维的变化。结果发现：小鼠肝脏IL-4、IL-5、IL-10随感染时间延长而明显升高,肝内胶原纤维化程度随感染时间延长而逐渐增多和加强,与Th2细胞因子表达呈显著正相关。提示小鼠肝脏是感染血吸虫后机体免疫应答场所之一,Th2细胞因子在血吸虫肝脏肉芽肿及纤维化形成中起重要介导作用。     

Th1/Th2在乳腺癌组织中的表达与意义

目的:探讨Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ及Th2类细胞因子IL-4和IL-10在青年和老年乳腺癌组织中的表达模式.方法:采用免疫组化方法检测105例良恶性乳腺组织中IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10的表达,并比较其阳性表达率和程度的差异.结果:青年组与老年组乳腺癌组织中Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ阳性表达率较乳腺纤维瘤组显著降低,Th2类细胞因子IL-4和IL-10阳性表达率较乳腺纤维瘤组升高,差异有统计学意义(P＜0.01).IL-2的表达水平在青年组与老年组随乳腺癌临床分期的增加而降低(P＜0.05),青年组IL-2的表达水平低于老年组,差异有统计学意义(P＜0.01);在青年组和老年组中腋窝淋巴结阳性组IL-4的表达水平均明显高于淋巴结阴性组(P＜0.01).结论:乳腺癌癌组织中呈现Th2型免疫反应优势状态,Th1/Th2平衡向Th2方向漂移.在青年乳腺癌组织中Th1/Th2的比值更低.这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一.IL-2和IL-4联合检测对评价患者机体免疫水平、判断预后具有重要意义.     

IL-12在血吸虫感染小鼠肝脏中的表达及其对肝纤维化的影响

目的探讨日本血吸虫感染小鼠肝脏中白细胞介素-12（IL-12）的表达及其对肝纤维化的影响。方法在小鼠感染血吸虫后的不同时期（6、8、10、12周），分别采用免疫组织化学法观察肝脏IL-12的变化，VG染色及多媒体病理图文定量分析系统检测注射基因重组小鼠IL-12（rIL-12）前、后胶原纤维含量的改变。结果小鼠肝脏IL-12含量随感染时间延长而缓慢下降，胶原纤维含量随感染时间延长逐渐升高，经皮下注射rIL-12后小鼠肝脏IL-12含量随着相应因子补充而显著上升，胶原纤维含量则逐渐降低。结论IL-12能明显抑制血吸虫感染小鼠肝脏胶原纤维合成，延缓肝纤维化发生。     

Th1/Th2细胞在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的了解慢性ＨＢＶ感染者外周血单核细胞（ＰＤＭＣ）中ＣＤ４~＋Ｔ细胞内ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ的表达情况,以测定Ｔｈ０／Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞的百分数,探明Ｔｈ１、Ｔｈ２细胞在慢性ＨＢＶ感染中的作用。方法常规分离ＰＢＭＣ,在ＰＭＡ、ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、莫能菌素的刺激下,采用流式细胞检测（ＦＡＣＳ）对慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＣＤ４~＋Ｔ细胞内ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ表达进行分析。结果正常对照组,２．３％－１８.６％的ＣＤ４~＋Ｔ细胞为Ｔｈ１细胞,０.９％－９．２％为Ｔｈ２细胞;在慢性ＨＢＶ感染者外周血单个ＣＤ４~＋Ｔ细胞中,以Ｔｈ０细胞居多：而Ｔｈ１细胞则随着慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的加剧而明显增多,在炎症活动明显的慢性乙型肝炎患者中,Ｔｈ１细胞百分数明显高于炎症活动呈静止状态的慢性乙型肝炎;Ｔｈ２细胞在慢性ＨＢＶ感染的不同阶段则较为恒定,但明显高于对照组。结论Ｔｈ１细胞与炎症活动呈正相关,Ｔｈ２细胞可能与ＨＢＶ感染的慢性化相关联。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平,探讨SLE患者的发病与Th1/Th2优势活化状态之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定35例SLE患者和15名健康志愿者PBMC培养上清IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ水平。结果活动期SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。活动期SLE患者IL-2水平明显低于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。IFN-γ水平3组间差异无显著性(P>0.05)。结论Th2型细胞因子介导的免疫应答在活动期SLE的发病机制中占主导地位。活动期SLE患者存在分泌型Th1细胞因子的细胞活化减弱。     

瘢痕子宫患者外周血T淋巴细胞Th1/Th2型细胞因子分泌水平检测及意义

目的:检测瘢痕子宫患者外周血T淋巴细胞Th1/Th2型细胞因子分泌水平,探讨瘢痕子宫形成的可能免疫学机制.方法:选择108例瘢痕子宫患者作为瘢痕子宫组,126例非瘢痕子宫患者作为对照组,分别测定并比较两组外周血T淋巴细胞分泌Th1/Th2型细胞因子水平.结果:瘢痕子宫患者组外周血中T淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-12水...     

日本血吸虫病流行区人群特异性IL-4和IL-5的应答特征

目的 观察日本血吸虫病流行区人群特异性ＩＬ－４和ＩＬ－５的应答特征。方法 选择江西省鄱阳湖中南山岛上３个毗邻的自然作为观察试区,根据烘检结果对１４～４１岁人群按年龄组随机抽样,选取烘检结果阴性的６５人,烘检阳性的６４人为研究对象。采用全血培养法,检测培养上清中血吸虫抗原特异性ＩＬ－４和ＩＬ－水平,并检测血甭中特异性ＩｇＥ抗体水平。结果 无且的ＩＬ－４和ＩＬ－５水平显著高于感染组,ＩＬ－４和ＩＬ０－     

哮喘病人树突状细胞产生IL-12的变化及对Th1/Th2平衡的影响

目的 :探讨过敏性哮喘病人和正常人外周血单个核细胞 (PBMC)来源树突状细胞 (dendriticcell ,DC)产生IL 12的差异 ,及其对Th1/Th2平衡的影响。方法 :分别取缓解期哮喘患者 (哮喘组 )和正常人 (对照组 )外周血经Ficoll和不连续密度梯度离心法获取贴壁细胞 ,经GM CSF和IL 4体外培养为不成熟DC(iDC) ,加入LPS刺激使其发育为成熟DC(mDC)。另取脐血同上方法获得非贴壁细胞 ,分别加CD4单抗和CD4 5RA单抗及磁珠分离得到初始T淋巴细胞 (Th0 )。两组mDC分别和Th0共培养 ,通过ELISA法检测mDC分泌的IL 12和T淋巴细胞(TC)分泌的IFN γ和IL 4的含量。结果 :①哮喘组PBMC来源DC产生IL 12P70及其亚单位P4 0均较对照组显著减少 (P均 <0 .0 1)。②DC及其IL 12致Th0分化 ,哮喘组TC释放IL 4较对照组显著增多 (P <0 .0 1) ;相反 ,IFN γ较对照组减少 (P <0 .0 5 )。③哮喘组和对照组IL 12P70和IFN γ之间均呈正相关关系 (分别P <0 .0 1,P<0 .0 5 ) ;两组IL 12P70和IL 4均呈负相关关系 (P均 <0 .0 1)。结论 :由于哮喘病人DC功能缺陷 ,产生IL 12减少导致Th2优势分化 ,从而使Th1/Th2平衡向Th2倾斜 ,合成IL 4增多和IFN γ减少 ,后者是哮喘发生的重要机制之一。     

变应性鼻炎豚鼠模型中Th2/Th17相关细胞因子检测

目的：分析变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）豚鼠模型鼻腔灌洗液白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）及鼻相关淋巴组织中白细胞介素-23（interleukin-23,IL-23）mRNA的表达水平,探讨该模型中是否存在Th2/Th17细胞因子失衡。方法：建立AR豚鼠模型,收集鼻腔灌洗液,采用ELISA法检测灌洗液中IL-17和IL-4,分离鼻相关淋巴组织,通过RT-PCR半定量检测IL-23 mRNA的表达水平,比较模型组和对照组间细胞因子水平差异。结果：AR模型组鼻腔灌洗液IL-17水平为[（4.98±1.54） pg/ml],比对照组[（12.68±3.32） pg/ml]低,差异有统计学意义（t=10.35,P=0.006）。鼻相关淋巴组织中IL-23 mRNA的表达水平与IL-17的表达相似;而鼻腔灌洗液中IL-4的表达水平正好相反,与对照组 [（6.60±1.36） pg/ml]比较,模型组IL-4的表达水平[（31.20±4.25） pg/ml]高,差异有统计学意义（t=17.26,P=0.001）。结论：Th17相关的细胞因子IL-17、IL-23在AR动物模型中表达降低,而Th2细胞因子IL-4的表达水平明显升高,从而推测在AR中可能存在Th2/Th17细胞因子网络失衡,这种Th2/Th17细胞因子网络失衡可能对变应性炎症的发生起到关键的重要。     

瘦素蛋白在小鼠日本血吸虫病肝纤维化组织中的表达及意义

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后不同时期肝脏瘦素蛋白的表达,探讨瘦素在日本血吸虫病肝纤维化发生、发展中的意义.方法 日本血吸虫尾蚴皮肤敷贴法感染小鼠构建日本血吸虫病肝纤维化模型,于感染后不同时间取肝组织标本.HE和VG染色对肝组织进行病理学检查,半定量分析肝纤维化程度;采用免疫组织化学SP法动态观察瘦素及肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况.结果 模型组肝胶原含量随病程发展呈进行性增多,肝纤维化程度随病程发展呈进行性加重;α-SMA阳性细胞于炎症早期在汇管区已有表达,随病程进展进行性增加,α-SMA阳性表达主要位于胶原纤维所在部位;瘦素阳性表达出现的时间、部位和进程类似于α-SMA阳性表达情况.相关分析表明,α-SMA蛋白表达与胶原含量呈正相关(r=0.956,P＜0.01),而与肝纤维化程度也呈正相关(r=0.804,P＜0.01) ;与瘦素蛋白呈正相关(r=0.836,P＜0.01);瘦素蛋白与胶原含量呈正相关(r=0.758,P＜0.01),而与肝纤维化程度也呈正相关(r=0.823,P＜0.01).结论 HSC是日本血吸虫病肝纤维化发生发展过程中的关键细胞,而瘦素在该过程中发挥重要的促肝纤维化作用,可望成为新的治疗靶点.     

Study on IL 4, IL 5 and IL 10 in Liver and Bone Marrow of Mice Infected with Schistosomiasis Japonica

ＡｆｔｅｒａｍｏｕｓｅｉｓｉｎｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈＳｃｈｉｓｔｏ－ｓｏｍｉａｓｉｓＪａｐｏｎｉｃａ,ａｎｉｍｍｕｎｅｒｅａｃｔｉｏｎｏｃ－ｃｕｒｓｉｎｉｔｓｂｏｄｙａｎｄｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅｇｒａｎｕｌｏｍａｄｅｖｅｌｏｐｓｉｎｉｔｓｌｉｖｅｒ．Ｔ...     

Dynamic Observation of Liver Fibrosis in Mice Infected with Schistosoma japonica

Summary： The expression of TNF-α in the liver at different periods post Schistosoma japonica infection and the effect on liver fibrosis after supplementary injection of these cytokines were investigated. The mice infected with schistosome cercariae were divided into 3 groups., normal control group, TNF-α-untreated infection group and TNF-α-treated infection group. ABC immunohistochemistry and pathologic image multimedia quantification system were applied to dynamically detect the activity of TNF-α. The results showed that the levels of TNF-α in the liver in TNF-α-untreated infection group were slowly decreased with prolongation of infection time （from 8th, 11th, 14th to 18th week）, while in the TNF-α-treated infection group, those were increased significantly after intraperitoneal injection of TNF-α at 6th week after infection. At first to 8th week after the final injection of TNF-α, the intrahepatic TNF-α levels in the TNF-α-treated infection group were significantly higher than in the other two groups （P〈0.01）, and the granulomatous inflammation and fibrosis in the liver were also milder in the normal control group. It was concluded that at the early stage of Schistosoma japonica infection mouse liver mainly released Thl cytokine and TNF-α from Thl activated macrophages. Six weeks after infection （post egg deposition）, exogenous supplement with intraperitoneal injection of TNF-α could induce the enhanced expression of Thl cytokines and alleviate the liver granulomatous inflammation and fibrosis.     

晚期血吸虫病与肝脏自身免疫的关系

本文结果显示25例晚期血吸虫病患者中15人抗-LSP阳性(60.0％),其抗-Lsp平均滴度显著高于正常人(P<0.001)。1年后随访证实部分晚血患者之抗-Lsp持续阳性。肝活检确诊为血吸虫病性肝纤维化者9例中,4例抗-Lsp阳性(44.4％);确诊为混合性肝硬化者4例中,3例阳性(75.0％)。进一步证实部分晚期血吸虫病患者体内的确存在针对肝脏的自身免疫反应。     

锁阳通过抑制炎症因子的表达对抗CCL4导致的小鼠肝纤维化

目的 初步探索中药锁阳的粗提取物对抗CCL4诱导的小鼠肝纤维化的效果和可能机制.方法 将C57BL/6J小鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组、锁阳低剂量组和锁阳高剂量组,正常组给予生理盐水,其余4个组给予橄榄油和CCL4混合物,按1∶3比例,4 mL/kg剂量腹腔注射,2次/周,直到第4周,复制肝纤维化模型,从第5周开始每组给予相应的药物至第6周,分别检测小鼠肝脏指数,血清中ALT、AST指标以及炎症因子TGF-β1、TNF-α、IL-1的表达,Masson染色观察小鼠肝脏病理学变化,最后用Image J软件,分析各组中肝纤维化程度.结果 相比正常组,模型组小鼠的肝脏指数增加,说明小鼠肝脏受到严重损伤;相比模型组,用药组小鼠的肝脏指数明显减轻,肝脏血清中AST、ALT的水平以及TGF-β1、TNF-α、IL-1的浓度均比模型组降低(P＜0.05);同时,相比锁阳低剂量组,锁阳高剂量组纤维化降低更明显.结论 中药锁阳粗提取物通过抑制炎症因子TGF-β1、TNF-α、IL-1的表达减弱了CCL4诱导的小鼠肝纤维化.     

The Preliminary Research on the Relationship between TNFand Egg－Induced Granuloma and Hepatic Fibrosis of Schistosomiasis Jap

ＴｈｅＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＲｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＴＮＦａｎｄＥｇｇ－ＩｎｄｕｃｅｄＧｒａｎｕｌｏｍａａｎｄＨｅｐａｔｉｃＦｉｂｒｏｓｉｓｏｆＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓＪａｐｏｎｉｃａＨＥＹｏｎｇｗｅｎ（...     

兔血吸虫病肝细胞的凋亡及其调控

目的：研究血吸虫病兔肝细胞的凋亡及其调控，并探讨凋亡在血吸虫肝病发病机制中的意义。方法：以腹部敷贴法建立家兔血吸虫病模型。以感染尾蚴12周的兔20只为实验组，正常家兔5只为对照组。采用普通病理学，透射电镜，TNF－α、C－Fos和iNOS免疫组化染色及流式细胞术。结果：免疫组化：TNF－α、C－Fos和iNO强阳性反应均位于细胞浆内，阳性细胞呈弥漫性分布，以虫卵和虫卵肉芽肿周围多见，透射电镜可见典型的凋亡细胞及凋亡小体形成，流式细胞术元血吸虫病兔肝细胞凋亡百分数显著高于对照组（P＜0．01）。结论：血吸虫病兔肝细胞坏死外，同时还胡有肝细胞凋亡。TNF－α、C－Fos和iNOS参与血吸虫病时肝细胞凋亡的调控和作反传导信号。     

α干扰素治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化实验研究

目的观察IFN-α是否具有抗日本血吸虫病肝纤维化的作用及疗效.方法以日本血吸虫尾蚴感染IcR小鼠造成肝纤维化模型.10周后顿服吡喹酮杀虫治疗,继以IFN-α皮下注射治疗,并与模型对照组和0.9%氯化钠注射液治疗组比较.肝脏组织切片作苏木素-伊红、苦味酸-酸性品红染色,观察肝脏虫卵肉芽肿平均大小、胶原面积百分比及肝纤维化程度（SSS评分）.结果IFN-α治疗组肝脏虫卵肉芽肿平均大小缩小（P〈0.05）、胶原面积百分比降低（P〈0.05）、SSS评分较模型对照组下降〉2分（P〈0.05）.结论IFN-α治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化有效.